运用分子标记技术鉴定亚麻花药培养中小孢子起源的植株

采用内部简单序列重复(ISSR)和随机扩增多态性DNA标记(RAPD)方法鉴定亚麻花药培养中得到的植株是否起源于小孢子.F1供试植株双亲间的多态性片段已被鉴别出来,它们在花药苗中的分离模式被用来分析这些植物的起源和确定由同一愈伤组织分化出的花药苗的同源性.运用一种ISSR引物(UBC889)和两种RAPD引物(UBC556和561)进行鉴定,16个植株中,有12个明显来自于小孢子.来自于相同愈伤组织的植株在5个多态性位点有着相同的PCR模式,因此认为这些植株极有可能来自于相同的小孢子.因此,建议用形成根的愈伤组织的数量来描述亚麻花药培养的效率.     

通过亚麻（Linum Usitatissimum L．）花药培养获得再生植株

利用花药培养获得单倍体是一种有效的亚麻育种方法，采用不同的亚麻品种进行了花药培养技术的研究。本试验进行了不同大小花蕾小孢子发育的细胞学研究，同时进行了低温预处理、暗培养以及不同营养成分的培养基对愈伤组织形成影响的研究，本试验在达拉绕克市(俄罗斯)和波兹南市(波兰)进行。从本试验看出，小孢子的发育阶段与花蕾大小有关，同时与品种及栽培环境有关。对花蕾进行低温预处理不能增加愈伤组织的形成，花药培养的第一个月在黑暗条件下进行可增加愈伤组织形成的频率，花药愈伤组织诱导培养基是LMA-1和Sh-2。     

通过亚麻(Linum Usitatissimum L.)花药培养获得再生植株

利用花药培养获得单倍体是一种有效的亚麻育种方法,采用不同的亚麻品种进行了花药培养技术的研究.本试验进行了不同大小花蕾小孢子发育的细胞学研究,同时进行了低温预处理、暗培养以及不同营养成分的培养基对愈伤组织形成影响的研究,本试验在达拉绕克市(俄罗斯)和波兹南市(波兰)进行.从本试验看出,小孢子的发育阶段与花蕾大小有关,同时与品种及栽培环境有关.对花蕾进行低温预处理不能增加愈伤组织的形成,花药培养的第一个月在黑暗条件下进行可增加愈伤组织形成的频率,花药愈伤组织诱导培养基是LMA-1和Sh-2.     

水稻爪籼杂种的花药培养研究

对９个爪×籼Ｆ１杂种进行大规模花药培养，形成愈伤组织的花药的频率平均为１８．７％。小孢子衍生的愈伤组织产生绿苗的平均频率为８．７％。白化株占成苗愈伤组织的６１％。愈伤组织的绿株和白化株再生能力出现于花药培养的第４～８周之间；在第６周以后，白化株与绿株的比率没有增加．转移的愈伤组织成亩能力缓慢下降。自发的双单倍体占４个杂种再生绿苗的４６％。但在一杂种产生的１３２株双单倍体中发现了高频率的部分不育再生植株。     

能源甘蔗亲本分子标记初步研究

应用ISSR和RAPD标记对6个能源甘蔗亲本构建的分离群体进行甘蔗亲本的分子遗传初步分析,结果显示,在供试亲本间扩增出的多态性引物中,RAPD扩增的PPB值为43.80%,平均PIC值为0.755;ISSR的PPB为46.30%,平均PIC为0.677,说明ISSR比RAPD的多态性检测水平略低,但重复性优于RAPD,利用其中的ISSR引物UBC845对5个半同胞群体的分析结果呈1∶1分离。     

亚麻花药培养高频率的植株再生

本文主要研究亚麻花药培养的诱导培养基组成成份的效果，目的是提高愈伤组织的诱导：和植株再生的效率。花药接种于改良的MS培养基上(培养基添加了五种不同配比的植物激素)。培养基中含有2mg／L2．4-D和1mg／LBAP比相同成分培养基中含有1mg／LNAA和2mg/L6-BA(CK)，愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率有显著提高。在五个处理的盐酸硫胺素的实验中，改良的MS培养基含有10mg／L盐酸硫胺素比含有2．4mg/L盐酸硫胺素愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率显著提高。在麦芽糖的五个处理中以培养基中含有6％或9％的麦芽糖，总的植株再生频率最高。蔗糖的浓度主要影响愈伤组织再生苗的百分率，总的植株再生效率、花粉植株的频率以及花粉植株染色体自然加倍的频率。本研究获得的单倍体品系已被应用于育种程序中。     

γ射线辐射亚麻花药的研究初报

利用γ射线辐照接种后的亚麻花药，通过花药培养获得突变体。初步研究了不同剂量的γ射线对亚麻花药愈伤组织诱导率及绿苗分化率的影响，探讨了亚麻花药辐射诱变的适宜辐射剂量及突变体当代的遗传表现。     

亚麻花药培养研究初报

为了配合纤维用亚麻常规育种、加速亚麻育种速度,以适应亚麻生产发展的需要,我们于1976—1978年进行了纤维用亚麻花药培养试验,初步得出MS培养基是诱导亚麻花药愈伤组织较好的一种培养基。 1977年从花药中诱导出第1棵绿苗。     

亚麻花药培养高频率的植株再生

本文主要研究亚麻花药培养的诱导培养基组成成份的效果,目的是提高愈伤组织的诱导和植株再生的效率.花药接种于改良的MS培养基上(培养基添加了五种不同配比的植物激素).培养基中含有2mg/L2.4-D和1mg/LBAP比相同成分培养基中含有1mg/LNAA和2mg/L6-BA(CK),愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率有显著提高.在五个处理的盐酸硫胺素的实验中,改良的MS培养基含有10mg/L盐酸硫胺素比含有2.4mg/L盐酸硫胺素愈伤组织再生苗的百分率及总的植株再生频率显著提高.在麦芽糖的五个处理中以培养基中含有6%或9%的麦芽糖,总的植株再生频率最高.蔗糖的浓度主要影响愈伤组织再生苗的百分率,总的植株再生效率、花粉植株的频率以及花粉植株染色体自然加倍的频率.本研究获得的单倍体品系已被应用于育种程序中.     

γ射线辐射亚麻花药的研究初报

利用γ射线辐照接种后的亚麻花药,通过花药培养获得突变体.初步研究了不同剂量的γ射线对亚麻花药愈伤组织诱导率及绿苗分化率的影响,探讨了亚麻花药辐射诱变的适宜辐射剂量及突变体当代的遗传表现.     

高粱花药和花序培养诱导愈伤组织及再生植株

小麦、水稻、玉米及木本植物的花药培养诱导花粉植株已经取得了成功,而高粱的花粉或花药培养诱导单倍体的方法、培养基及程序还不完善,基因型和培养基对高粱再生植株的影响也没有报道。Rose 等(1985)用栽培品种(Advance)从1000多个花药形成的愈伤组织中仅得到4株不知倍数的白化苗。利用高粱体细胞组织或器官,如未成熟的胚、芽尖和叶圆片来诱导愈伤组织和再生植株已经成功,但     

第一例栽培种花生花药培养单倍体植株的创制

以栽培种花生为材料,开展花生单倍体培养的前沿性探索,包括离体花药诱导形成愈伤组织、愈伤组织分化形成幼芽、再生苗培养、再生植株倍性鉴定和嫁接移植等研究。通过比较外植体灭菌时间、诱导培养基、分化培养基、再生培养基和再生植株创制培养条件等试验,筛选出适合花生花药培养的方法：1% NaClO消毒灭菌9 min,愈伤组织的诱导培养采用B5N1、B3N1培养基,再分化培养采用B5N1-2培养基,再生苗培养采用SG培养基。本研究获得1株花药培养的再生植株,编号为15B8-8。荧光原位杂交技术（FISH）鉴定结果表明,该植株具有20条染色体,其中9条为A染色体、11条为B染色体,是第一例来自栽培种花生花药培养的单倍体植株;研究还表明,汕油52花生品种具有较强的花药培养力,有潜力作为花生花药培养的“桥梁品种”。     

小麦花药培养特性的数量遗传分析

为探讨小麦花药培养特性的遗传特点和规律,分别以高花药培养特性和低花药培养特性的小麦材料为母本和父本,采用主基因 多基因遗传模型,对两个组合不同世代小麦材料的花药出愈率、愈伤组织绿苗分化率、花药绿苗率三个花培性状进行了遗传分析.结果表明,花药出愈率在组合Ⅰ检测到一对主基因,组合Ⅱ中检测到两对主基因.愈伤组织绿苗分化率和花药绿苗率均检测到两对主基因.主基因的加性效应(d)为增效,显性效应(h)除组合Ⅱ的愈伤组织绿苗分化率外均为减效.互作效应在组合Ⅰ中,愈伤组织绿苗分化率的jab(第一对主基因的d与第二对主基因的h间的互作效应)和花药绿苗率的jba(第一对主基因的h与第二对主基因的d间的互作效应)较小.在组合Ⅱ中,花药出愈率的jba较小;愈伤组织绿苗分化率的l(显性互作效应)较大;花药绿苗率的各效应值比较平均.多基因效应中,对于组合Ⅰ的花药绿苗率和组合Ⅱ的花药出愈率,d和h均为增效,且h大于d;组合Ⅱ中愈伤组织绿苗分化率的d和h均为减效,且d大于h.不同组合F2代花药出愈率的主基因遗传率存在明显差异,组合Ⅰ为55.01%,组合Ⅱ为84.54%,其余两花培性状主基因遗传率差异较小,均在90%以上.研究认为,3个性状受主基因和多基因共同影响,且主基因起决定作用,花药出愈率可以作为衡量小麦花药培养特性的重要指标之一.     

亚麻花药培养研究初报

为了配合纤维用亚麻常规育种、加速亚麻育种速度，以适应亚麻生产发展的需要，我们于1976-1978年进行了纤维用亚麻花药培养试验，初步得出MS培养基是诱导亚麻花药愈伤组织较好的一种培养基。     

应用分子标记探讨多胚亚麻的分类地位

为了探讨一种多胚亚麻种质的分类地位,应用RAPD(随机扩增多态性)与ISSR(简单序列重复区间扩增多态性)分子标记相结合的方法对包括多胚亚麻在内的24个亚麻栽培种质进行了分类和亲缘关系分析.结果从70条RAPD引物和21条ISSR引物中筛选出对亚麻有效引物10条.利用NTSYSpc2.10e软件计算24个亚麻品种问的遗传相似系数(GS)和遗传距离(GD),在Gs=0.73处,将24份材料明显分为4个类群:多胚品系1-6Ha-3单独聚到第二类群,1-6Ha-3与其他23个材料间遗传相似系数分布在0.6522～0.7739之间,其中与原2005-21、98-338遗传距离最近,为0.2261;而与黑亚10号、原2006-13、黑亚11号的遗传距离最大,为0.3478.     

利用RAPD、ISSR分子标记分析野牡丹属亲缘关系

采用ISSR和RAPD分子标记技术对9个种44份野牡丹属种质资源进行了亲缘关系分析。结果表明:11条ISSR引物共扩增出91条谱带,其中多态性条带90条,多态性条带的比率为98.9%;16条RAPD引物共扩增出113条谱带,其中101条多态性条带,多态性比率为89.38%。2种分子标记相比较,ISSR分子标记检测出的多态性比率更高。44份野牡丹属种质明显聚为2组,种质资源遗传相似系数在0.61~0.88,平均相似系数0.75。基于不同引物的条带组合构建了供试的44份野牡丹属种质资源的ISSR和RAPD指纹图谱,采用这2种指纹图谱可对供试的所有野牡丹属种质资源进行鉴定。     

红麻花药老愈伤组织的再诱导

1979年，我们在研究红麻花药培养过程中，将经过30多代继代培养，历时100-140周的红麻花药愈伤组织，通过再诱导、再分化，终于获得花粉苗230多株。尔后，将未分化成苗的愈伤组织又进行第二次再诱导、再分化，亦同样获得了花粉苗。恢复和提高花药愈伤组织的再生能力，在红麻单倍体育种中将具有重要的作用。     

北方粳稻花药培养技术模式探讨

几年来，着重从接种材料类型、花粉发育时期、低温预处理、去分和分化培养及其成分以及它们对花粉植株秧苗素质的影响等方面进行了系统的研究。进一步明确了北方粳稻花药２技术的几个关键性环节，使粳稻花药培养效率大大提高。研究结果表明：各种类型的粳稻接种后都能成功地诱导出愈伤组织和长成植株。但杂合程度高的材料诱导频率明显高于纯合品种；接种花药小孢子发育时期以单中、晚期诱导效率最好；整株取下进行５￣７℃低温预处理     

亚麻花药培养研究的进展

亚麻花药在附加１ｍｇ／Ｌ２．４＿Ｄ、０．５ｍｇ／１ＫＴ的Ａ培养基上，愈伤组织的诱导率可达４６．２％，低温预处理亚麻花药一显著提高愈伤组织的产质量。亚麻花药双层培养的效果明显的好于固体培养。     

亚麻花药培养研究的进展

亚麻花药在附加１ｍｇ／Ｌ２．４－Ｄ、０．５ｍｇ／ｌＫＴ的Ａ增减基上，愈伤组织的诱导率可达４６．２％，低温预处理亚麻花药，显著提高愈伤组织的产质量。亚麻花药双怪培养的效果明显的好于固体培养。