葛根药用成分异黄酮的HPLC指纹图谱分析

采用高效液相色谱法对葛属植物野葛和粉葛块根的主要药用成分异黄酮化合物的指纹图谱进行了研究.结果表明,以乙腈-0.5%乙酸为流动相,采用梯度洗脱的方法,葛根异黄酮化合物的各种组分可得到良好的分离;通过对10批次野葛药材HPLC图谱的检测,共确定了15个色谱峰作为野葛的共有指纹峰,根据中药指纹图谱技术的基本原则和方法,建立了野葛的HPLC指纹图谱;与不同产地野葛的HPLC图谱的比较,供试样品的指纹图谱基本一致;而与粉葛样品的HPLC图谱存在较大的差异;表明得到的色谱图可以作为野葛药材专属性的指纹图谱,为葛根的药材鉴别和质量控制提供了实验依据.     

黄花石斛HPLC指纹图谱研究

为提供黄花石斛药材质量标准的依据,采用HPLC法建立黄花石斛药材指纹图谱。色谱条件为Spheri-5-RP-18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速1.0 mL／min,检测波长260 nm。采用中华人民共和国药典委员会出版的中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(版本：2004A)进行数据分析,最终建立了黄花石斛的HPLC指纹图谱,并标定了14个共有指纹峰;方法学考察结果符合指纹图谱技术要求,可用于建立黄花石斛药材的指纹图谱。     

坤宝丸HPLC指纹图谱的建立

目的建立坤宝丸HPLC指纹图谱,为坤宝丸质量控制及临床应用提供参考。方法坤宝丸乙醇(95%)提取物的分析采用Diamonsil Plus C_(18)色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;体积流量1.0mL/min;柱温35℃;检测波长254nm。结果建立坤宝丸HPLC指纹图谱,确定了16个共有峰,并指认了其中2个色谱峰,15批坤宝丸样品的相似度为0.972~0.989,表明其相似度良好。结论该方法简单、方便、准确,为坤宝丸的整体质量评价提供科学依据。     

福建绿衣枳实生药醇提取物的反相HPLC指纹图谱

用RP-HPLC法获得不同绿衣枳实生药的HPLC色谱图,并确定其共有峰,用夹角余弦、相关系数、欧氏距离等不同数理统计方法进行分析。建立福建绿衣枳实生药以33个共有峰为指纹特征信息的对照指纹图谱和质量鉴定分析方法。该方法准确可靠、简便、重现性好,可用于评价不同绿衣枳实生药内在质量。     

指纹图谱结合化学计量学对不同生长年限林下山参与园参的鉴别

本研究建立林下山参HPLC指纹图谱分析方法 ,引入化学计量学方法 ,对生长年限的鉴定和与园参的鉴别提供依据。首先基于HPLC方法建立26批林下山参和8批园参样品指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价软件》(2012A版)计算相似度,运用聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)对样品进行模式识别。建立的指纹图谱共标定33个共有峰,指认了其中16个;运用HCA和OPLS-DA分析可对林下山参与园参进行鉴别、林下山参生长年限范围进行判定,共筛选出13个质量标志物,可对林下山参与园参差异进行综合评判,分别是人参皂苷Rb1及其同分异构体、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb2等。综上,本研究建立的方法准确可靠,为林下山参与园参的鉴别、林下山参生长年限提供了参考依据。     

软枣猕猴桃UPLC指纹图谱研究

目的建立软枣猕猴桃超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱分析方法,为满药软枣猕猴桃质量评价提供依据。方法选用C_(18)柱SVEA A132V1 C_(18)(50mm×2.1mm,1.7μm),以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱,流速0.3ml/min,检测波长210nm,洗脱时间30min。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”,建立指纹图谱并进行相似度评价。结果建立了软枣猕猴桃特征指纹图谱,标定共有峰9个,13批软枣猕猴桃其相似度均≥0.85,不同批次指纹图谱相似度较好。结论该UPLC指纹图谱简便、稳定,具有可靠性,可为进一步研究制订软枣猕猴桃的质量标准提供依据。     

普洱茶挥发性成分指纹图谱研究

采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱（HS-SPME/GC-MS）技术对普洱茶挥发性成分的指纹图谱进行了研究。结果表明,该技术可使普洱茶的挥发性成分得到良好的分离;通过对17个样品的GC图谱的分析,共确定了26个色谱峰为普洱茶挥发性成分的特征指纹峰,建立了普洱茶挥发性成分的GC-MS指纹图谱,并对指纹图谱进行了相似度分析。该方法重复性好,挥发性成分中各成分分离较好,因此所建立的指纹图谱可作为普洱茶香气品质鉴定和评价的参考依据之一。     

淡豆豉中多指标成分的含量测定方法研究

建立淡豆豉中多指标成分含量测定方法,采用HPLC法同时测定淡豆豉中大豆苷元和染料木素含量,UV法测定总异黄酮含量。色谱条件:Agilent HC-C18色谱柱(250×4.6 mm,5.0μm);甲醇-0.1%冰醋酸(50∶50)为流动相;流速1 mL.min-1;检测波长261 nm;柱温30℃;进样量10μL。紫外分光光度计采用261 nm波长测定淡豆豉提取液的吸光度值。结果表明:大豆苷元和染料木素色谱峰的分离度良好,淡豆豉中大豆苷元、染料木素的保留时间分别为9.79和14.87 min,峰面积积分值与进样量呈良好的线性(r>0.9999),平均回收率分别为98.90%和100.53%。总异黄酮含量测定线性范围为1.44～7.20μg.mL-1,平均回收率为102.26%。该法简便易行,能够用于评价淡豆豉质量。     

指纹图谱结合一测多评法评价艾纳香药材质量

目的建立艾纳香药材指纹图谱,并采用一测多评法(QAMS)对其中7种黄酮类成分的含量进行测定,为艾纳香药材质量评价提供依据。方法根据指纹图谱和一测多评(QAMS)模式要求,采用依利特C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);以乙腈-0.2%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱;柱温30℃;检测波长为271 nm;体积流量0.8 mL/min,建立艾纳香药材指纹图谱,并采用相似度分析、主成分分析及聚类分析法对指纹图谱进行评价。以艾纳香甲素为内参物,建立其余6种黄酮成分(金丝桃苷,槲皮素,3-甲氧基槲皮素,怪柳黄素,艾纳香素,鼠李素)的相对校正因子,比较分析一测多评法与外标法含量测定结果的差异性。结果12批药材的相似度均大于0.96,确定了 17个共有峰,对7个共有峰进行了指认,聚类分析结果与药材的产地分布情况基本一致;7种黄酮类成分含量结果外标法和一测多评法之间无显著性差异。结论指纹图谱结合一测多评法可以有效用于艾纳香药材的质量评价。     

藤茶总黄酮提取物HPLC指纹图谱的研究

目的:建立藤茶总黄酮提取物的HPLC指纹图谱,更有效地监控其质量。方法:采用梯度洗脱法,对藤茶总黄酮提取物进行HPLC测定,流动相为乙腈-10%冰醋酸梯度洗脱,检测波长为270 nm,记录时间为30 min。采用中南大学指纹图谱相似度评价系统软件进行比较计算。结果:运用梯度洗脱能分离藤茶总黄酮提取物的各种成分,通过相似度评价比较,藤茶总黄酮提取物的指纹图谱相似度均大于0.90。结论:此法可作为藤茶总黄酮提取物的指纹图谱,有助于藤茶总黄酮提取物的质量控制。     

淡豆豉中异黄酮提取工艺的优化研究

采用单因素和正交试验相结合的方法,以淡豆豉总异黄酮和染料木素的提取量为评价指标,优选淡豆豉中异黄酮的提取工艺.结果表明淡豆豉中提取异黄酮的最佳工艺为:淡豆豉药材8倍量70%乙醇回流提取3次,每次2h.     

淡豆豉提取物对2型糖尿病大鼠主动脉iNOS,eNOS mRNA表达的影响

为观察淡豆豉提取物对NO/NOS系统的影响,探讨其对2型糖尿病大鼠大血管保护作用的机制。采用高糖高脂饲料喂养加小剂量链尿佐菌素腹腔注射的方法复制2型糖尿病大鼠模型,给药56 d后检测大鼠空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FIN),计算胰岛素敏感指数(ISI),放免法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及一氧化氮(NO)水平,RT-PCR法检测主动脉内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达。结果显示:淡豆豉提取物能显著降低T2DM大鼠FBG、FIN、TNF-α、NO水平,显著提高ISI,显著降低iNOS mRNA表达,对eNOS mRNA表达则无明显影响。淡豆豉提取物可影响2型糖尿病大鼠NO/NOS系统,并可能通过此途径对2型糖尿病大鼠大血管产生保护作用。     

发酵处理对大豆中总异黄酮含量的影响

以大豆及其发酵制品--淡豆豉为试验对象,总黄酮含量为指标,染料木素为对照品,利用染料木素与氢氧化钠产生反应,在271 nm波长处有最大吸收峰,采用紫外分光光度法测定豆豉中总异黄酮的含量.大豆与淡豆豉中总异黄酮的含量分别为4.784 mg/g、9.884 mg/g,结果表明发酵处理使淡豆豉中总异黄酮相对含量增加.     

淡豆豉炮制工艺中加入人参对大豆异黄酮含量的影响

通过比较在传统的淡豆豉(黑豆、黄豆)发酵工艺中加入人参后大豆异黄酮的含量变化,考察人参在淡豆豉发酵过程中对大豆异黄酮含量的影响。以大豆苷、染料木苷和染料木素为测定指标,采用高效液相色谱法进行含量测定。色谱柱为Agilent C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-水-冰醋酸(40∶60∶0.5);流速0.5 mL.min-1;检测波长260 nm。结果以黄豆为原料发酵的淡豆豉,加入人参后大豆苷和染料木素的含量显著升高,染料木苷显著降低;以黑豆为原料发酵的淡豆豉,加入人参后大豆苷的含量显著降低,染料木苷和染料木素的含量显著升高。因此,淡豆豉传统发酵工艺中加入人参后,大豆异黄酮含量变化因原料不同而异。     

豆豉对早期动脉粥样硬化大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡的影响

观察豆豉对早期动脉粥样硬化大鼠主动脉平滑肌细胞凋亡及相关凋亡基因突变型p53和Fas蛋白表达的调节作用,以探讨其机制.采用高脂饲料喂养法建立大鼠早期动脉粥样硬化模型,同时连续10周灌胃给予豆豉提取物进行干预.末次给药后处死动物,光镜下观察血管平滑肌细胞的形态,透射电镜观察超微结构,采用流式细胞术检测细胞凋亡率以及凋亡相关基因突变型p53和Fas蛋白的表达.模型对照组主动脉平滑肌细胞的凋亡率及增值指数(FI)明显高于正常对照组(P＜0.05),053蛋白表达上调;豆豉干预组(20 g生药·kg-1,dO g生药·kg-1)大鼠主动脉平滑肌细胞的凋亡率明显高于模型对照组(P＜0.05),增殖指数明显低于模型对照组(P＜0.05),Fas蛋白表达上调(P＜0.05),p53蛋白表达下调(P＜0.05),光镜及透射电镜可见主动脉损伤明显较模型对照组改善.豆豉可调节早期动脉粥样硬化大鼠血管平滑肌细胞凋亡与增殖的平衡,其机制可能与调节突变型p53和Fas蛋白的表达有关.     

康艾注射液中间产品人参提取液中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法及高效液相指纹图谱研究

目的建立应用高效液相色谱法同时测定康艾注射液中间产品人参提取液中有效成分人参皂苷Re、Rg1含量的方法与人参提取液的指纹图谱。方法色谱柱为岛津VP-ODS(4.6150 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%磷酸溶液(20∶80);流速:1 mL/min;柱温:30℃;检测波长:203 nm;结果a.人参皂苷Rg1在0.0207~0.6608μg范围内呈良好线性关系,r=0.9998;平均回收率为99.80%,RSD为2.02%;b.人参皂苷Re在0.0204~0.6120μg范围内呈良好线性关系,r=0.9992;平均回收率为102.66%,RSD为1.06%。建立了人参提取液的HPLC指纹图谱,指定了7个共有峰,8批样品相似度均在0.85以上。结论该方法简单、准确并且专属性强。     

HPLC指纹图谱技术在景迈茶区晒青毛茶鉴别中的应用研究

以80个不同年份的景迈、芒景春季晒青毛茶为材料,通过HPLC指纹图谱技术分别构建了景迈与芒景春季晒青毛茶的标准色谱图。在景迈春茶标准色谱图中有22个特征峰,芒景春茶标准色谱图中有24个特征峰,有18个共有峰,其中景迈春茶与芒景春茶仅在表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)与表儿茶素没食子酸酯(ECG)含量上存在一定差异。在景迈春茶、芒景春茶的聚类分析中,由于普洱茶陈化的不确定性和两地晒青毛茶的相似性,在不同年份晒青毛茶聚类分析中存在一定误差,在20个茶样中有1个茶样未被成功聚类。在景迈茶区与其他茶区晒青毛茶聚类分析中,能将景迈茶区春茶(包括景迈春茶与芒景春茶)成功聚类,并与其他茶区区别开来。通过相似度分析,景迈、芒景茶样与标准色谱相似度较高,分别为98.9%和99.2%,其他茶区春季晒青毛茶与标准色谱相似度较差,在95%以下。由此可知,HPLC指纹图谱技术可用于景迈茶区相同年份相同季节晒青毛茶的鉴别,为普洱茶不同茶区晒青毛茶的鉴别提供了较为科学的方法。