固相酶法分离大豆胰蛋白酶抑制剂研究

以硅胶-壳聚糖为载体,通过戊二醛偶联胰蛋白酶,制备固定化酶,分离纯化大豆中胰蛋白酶抑制剂.对戊二醛浓度、反应温度、酶浓度等影响固定化酶制备的因素进行了研究.戊二醛的浓度为2.0%,反应温度为20℃,胰蛋白酶与载体比为15∶ 1 000时,分离纯化的大豆胰蛋白酶抑制剂活性最高,达1872.51 U·mg-1,比粗品高46.22倍.结果表明通过该法能够获得较高活性大豆胰蛋白酶抑制剂,为大豆胰蛋白酶抑制剂的开发利用提供了依据.     

微波和超声两种技术提取大豆低聚糖的效果

以大豆品种合丰23为材料,用高效液相色谱(HPLC)检测微波和超声两种技术提取的大豆低聚糖(水苏糖、绵子糖和蔗糖)的效果,旨在筛选和建立大豆低聚糖的最佳检测方法,为大豆低聚糖的含量检测提供依据.用水苏糖、绵子糖和蔗糖的标准品对12种流动相和3种检测温度进行比较分析,筛选出高效液相色谱(HPLC)的最佳检测条件(乙腈:水=60:40,温度35℃).微波法提取大豆低聚糖,采用正交试验,选取4因素3水平按正交表L9(34)进行试验,结果表明:佳提取条件为70%乙醇溶液,1:10溶解,高火,2 min.超声法提取大豆低聚糖,选取4因素4水平按正交表L16(44)进行试验,选出最佳条件,在此基础上选择4个料液比例进行单因素试验,结果表明:超声法的最佳提取条件为75%乙醇溶液,1:10溶解,40 KHz,60℃,超声1.5 h.在最佳提取条件下,微波技术和超声技术提取低聚糖的总糖浓度分别为11.48%和7.70%,表明微波技术比超声技术提取大豆低聚糖的效率高、效果好,且节省有机溶剂、方法简单.建立了基于微波提取的HPLC法对大豆低聚糖含量的高效检测方法,为开展大豆种质资源筛选和大豆育种提供了技术支撑.     

纳豆菌固定化材料优化的研究

为获得固定化纳豆菌材料,以海藻酸钠(SA)和聚乙烯醇(PVA)为包埋材料,采用固定化细胞技术对纳豆菌生产纳豆激酶进行了研究.结果表明:在PVA中加入SA进行细胞包埋可获得渗透性能好强度高的固定化细胞.通过正交试验进一步确定,当PVA的浓度为9%、SA的浓度为1%、硼酸的浓度为5%、CaCl2的浓度为6%时,固定化细胞的强度最好,采用摇床培养可连续发酵使用6次,活性也很高,产生的纳豆激酶酶活溶纤圈直径积达87.69 mm2·15μL-1.     

大豆脂氧酶的热失活动力学与其二级结构的圆二色谱表现

应用大豆脂氧酶的变温圆二色谱图研究了大豆脂氧酶(LOX)的热失活与二级结构变化过程.结果表明:在50一65℃条件下,10 min内,LOX的酶活随热处理时间延长而下降,其热失活过程遵循一级动力学,活化能Ea值为217 kJ.mol-1.在相同的热处理条件下,LOX中二级结构a-螺旋和β-折叠的相对含量均在20%左右浮动...     

β—葡萄糖苷酶固定化及其性质的研究

β-葡萄糖苷酶(EC3,2,1,21),又称β-D-葡萄糖苷葡萄糖水解酶,它能够水解结合于末端非还原性的β-D-葡萄糖键,同时释放出β-D-葡萄糖和相应的配基.在饮料工业中,特别是能够水解释放茶叶饮料中糖苷类香气成分(芳樟醇、香叶醇等),有着重要的应用价值.β-葡萄糖苷酶市场价格昂贵,且使用寿命和储存期短,因而在实际应用过程中使用受到限制,笔者选用壳聚糖作为β-葡萄糖苷酶的固定化载体,对固定化酶性质进行研究.     

大豆小分子多肽制备工艺和质量标准的研究

采用酶法水解脱脂豆饼粕制备具有生物活性的大豆小分子多肽,确定了先以粗胰酶预酶解5%豆饼粕蛋白,再以中性微生物蛋白酶进一步水解提取大豆小分子多肽的工艺流程.粗胰酶酶解最佳条件:添加量为9 000 U·g-1,酶解温度55℃,pH 8.5,时间6 h.中性微生物蛋白酶水解粗胰酶乳最佳条件为:加酶量8 500 U·g-1,pH 7.5,温度45℃,时间2 h.在此条件下,肽得率可达到73.98%.同时还构建了大豆小分子活性多肽的质量检测标准.     

碱性蛋白酶对大豆浓缩蛋白起泡性的影响

制取低成本、高蛋白含量的大豆浓缩蛋白时,乙醇产生变性作用,从而降低了大豆浓缩蛋白的功能特性,因此本研究采用碱性蛋白酶对醇法大豆浓缩蛋白进行改性.通过对酶浓度、底物浓度、改性时间与改性温度的单因素实验,针对起泡性进行研究,然后进行正交实验,最终得出碱性蛋白酶提高醇法大豆浓缩蛋白起泡性最佳工艺条件:酶用量(E/S)为6%、底物浓度为(W/V)8%、酶解时间为2h、酶解温度为50℃,在此条件下测得的起泡能力为113.3%,起泡稳定性为56.7%,分别提高到酶改性前的2.5、3.6倍.     

响应面优化超声辅助提取大豆异黄酮联产分离蛋白和低聚糖

设计了一条绿色高效地提取纯化大豆异黄酮,并联产制备大豆分离蛋白和低聚糖的工艺。首先通过单因素实验和响应面(RSM)优化,确定了超声辅助提取大豆异黄酮的工艺条件:超声功率250 W,70%乙醇,提取温度70℃,提取时间120 min,大豆异黄酮提取量为2 104.25μg.g-1,提取率85.34%;并通过三步简单的分离纯化从豆粉中得到1 838.00μg.g-1、纯度为62.09%的异黄酮,最终收率74.54%;最后以提取异黄酮后的剩余豆渣为原料,联产制备了大豆分离蛋白(216.25 mg.g-1)和低聚糖(73.75 mg.g-1),全过程无废液废渣排出。     

不同耐性大豆品种阿特拉津处理后的防御酶反应

为阐明大豆对除草剂阿特拉津的耐性机制,利用250 mg·L-1(田间使用浓度)阿特拉津处理大豆,在处理后不同时间分别测定大豆根系与叶片中过氧化物酶、多酚氧化酶和苯丙氨酸解氨酶活性的变化.结果表明:大豆在接受阿特拉津处理后,3种酶的活性高于未经过阿特拉津处理的大豆.阿特拉津处理后大豆根系的酶活明显高于叶片的活性,而且大豆...     

利用固定化纤维素酶酶解夏季绿茶工艺的研究

以壳聚糖作为载体,戊二醛为交联剂制备固定化纤维素酶,对夏季绿茶进行酶解。通过正交实验得到优化工艺：在1.0g茶叶中,以茶水比1︰20,加入1.0g固定化纤维素酶,55℃下恒温浸提50min。与传统高温水提法所得茶汤相比,以此工艺条件浸提所得茶汤中茶多酚、氨基酸、咖啡碱含量有所提高,酚氨比有所下降,连续提取7批次茶叶,固定化纤维素酶的相对酶活力仍保持80%以上。     

大豆ISSR-PCR反应体系的优化

以黑龙江省大豆为材料,利用正交试验设计,对大豆ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(Mg2+、引物、dNTPs、模板DNA量、Taq酶量)在4个水平上进行体系优化.结果确定了大豆ISSR-PCR反应的最佳体系(25 μL)为:Mg2+浓度1.85 mmol·L-1、dNTPs浓度1.2 mmol·L-1、引物浓度1.2 μmol·L-1、模板DNA60 ng、Taq酶量0.7 U.利用该最佳体系,选取引物855对25份材料进行扩增,以验证该体系的稳定性.建立了适于大豆的ISSR-PCR反应体系,为利用ISSR标记技术开展黑龙江省大豆遗传多样性分析提供了依据.     

微生物降解褐煤产生的黄腐酸对大豆种子萌发及主要抗氧化酶活性的影响

研究了微生物降解褐煤产生的黄腐酸(FA)对大豆萌发过程中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的影响,以期揭示FA促进种子萌发的机理.结果表明:适宜浓度FA可以提高大豆萌发率,显著增加种子POD、CAT及SOD的活性.FA浓度为100 mg·kg-1时,CAT、SOD活性分别提高32.15%、24.5%;FA浓度为200 mg·kg-1时,大豆萌发率比对照提高34.6%,并且POD活性增加19.92%.而高浓度的黄腐酸对大豆萌发及抗氧化酶活性产生抑制作用.FA表现出类似生长调节剂的性质,适宜浓度的黄腐酸能提高大豆种子的萌发率,显著提高其抗氧化酶的活性,对种子萌发起到促进作用.     

纳米银对大豆菌核病核盘菌的抑制作用研究

利用生长速率抑制法、显微观察和生物化学方法研究了纳米银离子对大豆菌核病核盘菌的抑菌效果及初步机理.结果表明:纳米银水剂对大豆菌核病核盘菌具有较好的抑制能力,在30mg·L-1浓度下可达到100%的抑制效果,其对大豆菌核病核盘菌的有效中浓度(EC50)为13.91mg·L-1;菌丝在纳米银有效中浓度下的生长受到很强抑制;经纳米银处理的核盘菌菌体中过氧化氢酶、总超氧化物歧化酶、超微量ATP酶的活力均发生相应变化,处理2h或12 h后,呈现增加趋势,但处理24 h后,则均表现为下降.因而纳米银对大豆菌核病菌的生长具有一定的抑制效果.     

蛋白酶对大豆蛋白和花生蛋白溶解性的影响

为了改善醇法大豆浓缩蛋白和花生粕的溶解性,利用Alcalase碱性蛋白酶和Validase FPconcentrate蛋白酶对它们进行限制性水解。结果表明,利用Alcalase碱性蛋白酶水解醇法大豆浓缩蛋白的最佳水解条件为:温度50℃、pH 8.0、水解时间3 h,底物浓度为10%,酶浓度为0.5%(占底物),在此水解条件下醇法大豆浓缩蛋白的氮溶解性指数(NSI)由4.37%提高到60.34%,水解度为6.37%。利用Validase FP concentrate蛋白酶对花生粕进行水解时的最佳水解条件为:温度50℃、pH 7.0、水解时间4 h,底物浓度10%,酶浓度1%(占底物),在此水解条件下花生粕的氮溶解性指数(NSI)由42.40%提高到87.54%,水解度为12.90%。     

树脂及活性碳吸附技术回收大豆乳清中的异黄酮和低聚糖

对用树脂及活性碳吸附方法回收大豆乳清废水中的大豆异黄酮和低聚糖进行了研究。测定了树脂及活性碳吸附饱和曲线，研究了异黄酮和低聚糖的洗脱条件，建立了该法处理大豆乳清废水回收大豆异黄酮和精制大豆低聚糖的工艺。结果表明：处理1t废水，约可回收40%的大豆异黄酮130g，精制大豆低聚糖浆9kg，并将乳清废水的COD和BOD分别由13600和7800降至960和340。本法处理乳清废水可创造良好的经济效益。     

木瓜蛋白酶水解大豆浓缩蛋白实验研究

采用木瓜蛋白酶对大豆浓缩蛋白进行酶水解改性,通过氮溶解指数(NSI)的测定确定水解的有效性。实验表明,木瓜蛋白酶对大豆浓缩蛋白产生了有限水解,对大豆浓缩蛋白的功能特性有一定影响。通过L9(34)实验确定了最佳水解条件是:酶浓度为7000u/g、温度为65℃、pH为6·5、反应时间为2h、底物浓度为5·5%。     

真菌寡聚糖对大豆生长及植保素产生的影响

利用热解法从DLl805真菌壁上提取寡聚糖(DLO),用浸种法处理大豆种子,处理时间为4 h,自然条件下播种于盛有灭菌蛭石的塑料筐内,观察DLO对大豆生长的影响.结果显示:用浓度为1、5、50 mg·L-1的寡聚糖处理大豆种子,生长9 d后,处理植株生长普遍好于对照植株,并且随处理浓度的增大诱导生长的效果越好,浓度为50 mg.L-1的效果最为显著,与对照相比,茎粗增加5%以上,株高增加17%以上,鲜重增加15%以上,干重增加5%以上,茎干重增加2.8%以上.DLO能诱导大豆植保素的产生,在5个处理浓度中随浓度的加大诱导效果也逐渐增强,100 mg·L-1的时候OD(A 286)达到1.103.因此,DL1805菌壁降解寡聚糖能较好地诱导大豆的生长,并且还能诱导植保素的产生提高大豆的抗病能力.     

固定化脂肪酶催化合成生物柴油的研究

研究了固定化脂肪酶（LBK-H100）催化大豆油与甲醇合成生物柴油的反应。考察反应条件如醇油比、反应温度、反应次数对酯化率的影响。结果表明，固定化酶催化大豆油醇解反应最适醇油比为3:1，甲醇分3次加入，可避免酶在甲醇溶液中失活，在反应温度35℃条件下，酯化率可以达到90%以上；固定化酶重复使用15次(连续反应30d)，仍具有一定的催化活性。     

酶法制备大豆寡肽的研究

以Promatex为工具酶对大豆分离蛋白进行水解,制备大豆寡肽.分别讨论了热处理温度和时间对DH值的影响,确定了热处理条件为90℃、10min.Promatex的水解条件为:pH值为7.0,酶用量为0.53ml,酶添加量为E/S:10.6%,温度50℃,水解6hr.制取的大豆肽的DH为28.23%,PCL在2-4之间为寡肽.     

独角莲不同提取液对大豆蚜虫的生物活性及活性浓度的筛选

基于均匀设计法研究了独角莲球根茎的不同提取液对大豆蚜虫的触杀和拒食作用.结果表明:乙醇浸提液对大豆蚜虫具有较高的触杀活性.水蒸汽蒸馏液对大豆蚜虫具有较强的拒食活性.乙醇浸提液对大豆蚜虫48h的致死中浓度(LC50)为8.71 mg·mL-1,水蒸汽蒸馏液对大豆蚜虫24、48 h的拒食中浓度(AC50)分别为8.66、7.93 mg·mL-1.乙醚浸提液对大豆蚜虫的触杀和拒食作用不显著.60 h的同时触杀和拒食活性浓度筛选的结果表明,乙醇浸提液24.1545 mg·mL-1和水蒸汽蒸馏液23.014 nag·mL-1联合使用对大豆蚜虫同时触杀和拒食活性最好,死亡率达100%.