多效唑对水稻种胚愈伤组织诱导和分化的影响

本文报道多效唑对水稻种胚愈伤组织诱导和分化的影响。试验结果表明。多效唑对水稻种胚愈伤组织的诱导以及诱导种胚愈伤组织时种子芽的生长均有抑制作用；低浓度（１─５ｐｐｍ）的多效唑处理多数能提高绿苗分化率，且诱导期进行低浓度多效唑处理的绿苗分化率高于分化期处理；再生绿苗的高度多数随多效唑浓度的提高而降低。本研究初步显示出多效唑可对水稻组织培养进行有效的化学调控。     

K3,C17培养基在小麦花药培养上的应用初探

１９９１～１９９４年通过对冬，春小麦花药培养统计资料的分析，结果表明，Ｋ３培养基比Ｃ１７培养基效果好，尤其在春小麦花药培养上，出愈率和绿苗分化率均比冬小麦花药高，Ｋ３培养基与Ｃ１７培养基相比较，在冬小麦花药培养上Ｋ３培养基的出愈率和绿苗分化率分别比Ｃ１７培养基高的２．０１％和５．８７％；在春小麦花药培养上，Ｃ１７培养基在出愈率方面效果较好，比Ｋ３培养基高出３．６９％。     

TDZ在小麦花药培养中的作用

为了进一步提高小麦花药培养效率,以8个小麦杂交F1代为供试材料,通过在培养基中添加不同浓度的噻重氮苯基脲(thidiazuron,TDZ)探讨其对小麦花药培养的作用。结果表明,TDZ的作用与添加剂量及小麦基因型密切相关。在诱导培养基中添加TDZ对基因型中麦875/郑豫麦043具有负向调控作用,但对兰考198/黄明118、郑麦7698/西农979以及天禾7号/0836H-3则具有正向促进作用。TDZ的最佳添加剂量为0.05mg·L-1,可显著提高3个基因型的胚性愈伤组织诱导率和绿苗产率,其中兰考198/黄明118胚性愈伤组织诱导率和绿苗产率最高,分别达到25.1%和8.7%。同样,在分化培养基中添加一定剂量的TDZ,对4个基因型的愈伤组织分化均表现正向促进作用,TDZ的适宜浓度范围为0.5~1.0mg·L-1,以添加0.5mg·L-1的处理表现最优,能够显著提高绿苗分化率和绿苗/白苗比率;基因型兰考198/黄明118的绿苗分化率和绿苗/白苗比率最高,分别达50%和1.87。研究还表明,在诱导培养基或分化培养基中添加TDZ还能够促进绿苗增殖,提高单倍体自然加倍效率。本研究结果将有助于小麦花药培养技术的优化,进而提高花培育种效率。     

亚麻体细胞无性系的建立及其植株再生

以亚麻无菌苗（７－１０天培养）切取的茎尖和下胚轴作为外植株，分别接种于Ｎ６、Ｂ５基础培养基，均附加ＩＡＡ４ｍｇ／Ｌ、ＫＴ２ｍｇ／Ｌ和ＬＨ２００ｍｇ／Ｌ，经过四个星期的离体培养，获得具备不定苗发生能力的愈伤组织，诱导率平均达９４．２％。然后把它们转移至继代培养基中进行再分化培养，培养得到绿苗及胚性愈伤组织，分化频率平均达６．３倍。切取下的绿苗植于改良后的Ｂ５培养基上进行生根培养，生根率达９０％以上。     

苯乙酸促进水稻花药愈伤组织的再分化和直接成苗

 研究了苯乙酸（phenylacetic acid，PAA）应用于水稻花药培养的效果。以 2,4-D 为对照，发现PAA不影响愈伤组织诱导率，但显著提高了愈伤组织分化率（p<0. 05），从而显著提高了植株再生率（p<0. 05）。其促进效果与品种、培养基无机盐成分有关，对籼稻品种效果较好。PAA还能有效地促进花药愈伤组织不经转移到分化培养基上而直接在诱导培养基上分化成苗。直接再生的绿苗大多具有旺盛的不定根，可直接移栽到土壤中去。当PAA浓度为10 mg/L 时，特青、02428和亚优2号的直接植株再生率分别达0. 56%, 1. 64%和2. 69%。提高PAA浓度可进一步提高直接植株再生率。利用基于PAA的一步成苗培养法已构建成了3个水稻杂种花培后代加倍单倍体（DH）群体。     

燕麦新品种燕科一号组织培养特性及再生体系研究

为建立燕麦遗传转化的高效植株再生体系，选用裸燕麦新品种燕科一号的幼穗进行组织培养特性和再生体系研究。结果表明，在6种诱导培养基上愈伤组织状态和诱导率差异不大；在进一步继代培养过程中愈伤组织出现明显差异，其中培养基Y2和J结合培养效果好；愈伤组织分化产生绿色芽点和绿苗，二者分化率呈显著正相关；绿苗分化适宜的激素配比是6-BA0．5mg／L＋KT0．4mg／L＋NAA0．4mg／L，有84．90％的愈伤组织分化成苗，其中KT的作用较6-BA、NAA强；在1／2MS培养基上再生苗容易生根，生根率达到89．64％，移栽成活率91．05％；幼穗取样以0．5～1．0cm最为理想。     

亚麻体细胞无性系的建立及其植株再生

以亚麻无菌苗（7—10天培养）切取的茎尖和下胚轴作为外植株，分别接种于N6、B5基础培养基，均附加IAA4mg／L、KT2mg／L和LH200mg／L，经过四个星期的离体培养，获得具备不定苗发生能力的愈伤组织，诱导率平均达94．2％。然后把它们转移至继代培养基中进行再分化培养，培养得到绿苗及胚性意伤组织，分化频率平均达6．3倍。切取下的绿苗植于改良后的B5培养基上进行生极培养，生根率达90％以上。对成活的204株再生植株进行三个世代的连续观察，获得雄性不育体、感病、矮杆等广泛的性状变异。     

提高水稻成熟种胚体细胞培养力

实验结果认为,水稻成熟胚是一种“竞争性”外植体。高浓度的脱落酸（ABA）能有效地抑制胚芽和胚根的生长,而对水稻盾片愈伤组织的生长影响较小,从而促进盾片愈伤组织的同步健壮生长。这些愈伤组织致密,呈乳白色且分化频率高。调节分化培养基的浓度可减少愈伤组织变褐老化,有效地提高愈伤组织绿苗分化率。在诱导培养期间,较高的2,4－D浓度（大于1 mg/L）和6－BA会抑制种胚体细胞愈伤组织的诱导,其中籼稻比粳稻敏感。在诱导培养基中附加2,4－D 0.5 mg/L,BA 0.5 mg/L,ABA 5 mg/L,B_1 (5－10 mg/L)对成熟籼稻种胚培养是较合适的。     

短光低温不育水稻宜D S成熟胚培养的研究

对短光低温不育水稻宜D S成熟胚在组织培养中的愈伤组织诱导和分化进行了研究,结果表明:愈伤组织诱导率与绿苗分化率之间无对应关系;诱导培养基的成分对转分化后的愈伤组织有后效作用,2,4-D与6-BA和NAA搭配使用比单独使用2,4-D诱导的愈伤组织更易于分化;同时还发现,不同诱导培养基诱导的愈伤组织在转分化后对分化培养基的要求不同.     

提高野栽稻杂交后代花药培养率的研究

取普通野生稻与普通栽培稻杂交组合共１０个，研究了不同组合、不同世代、培养基配比及培养时变温处理等与花药培养效率的关系。结果表明：杂交组合间有差异，普通野生稻与粳型杂交其后代花培易成绿苗；Ｆ１比Ｆ２、Ｆ３愈伤组织诱导率和分化率均高；培养基以改良Ｎ６培养基最好；变温处理可提高愈伤组织诱导率和绿苗分化率。     

水稻不同外植体培养效果及其相关性分析

 以23个水稻品种（组合）或品系 (基因型)为材料，对不同外植体（花药、幼穗、幼胚和成熟胚）进行愈伤组织诱导和绿苗分化，结果表明，4种外植体的培养效果存在基因型差异，不同外植体的培养效果差异明显。花药与幼穗、成熟胚间的愈伤组织诱导率呈显著正相关，幼穗与幼胚的愈伤组织诱导率也呈显著正相关；绿苗分化率之间则不存在相关性；4种外植体的愈伤组织诱导率和绿苗分化率之间无相关性。     

洁净DNA转化获得2mG2-epsps基因单拷贝整合的抗草甘膦水稻

洁净DNA转化是基因枪介导外源基因表达框导入植物的转化技术,能从根本上消除载体框架序列对转基因植株的不利影响。2mG2-epsps基因是具有重要育种价值的草甘膦除草剂抗性基因。以日本晴为材料,研究了草甘膦对水稻愈伤组织生长及分化的影响,采用洁净DNA转化技术将2mG2-epsps基因表达框导入水稻。结果表明:1)草甘膦对水稻愈伤组织的生长及分化有明显的抑制作用,当草甘膦浓度为2mmol/L时,愈伤组织绿苗分化率为18.97%,较对照71.67%显著降低。2)基因枪介导2mG2-epsps基因表达框转化水稻时,经草甘膦筛选获得抗性愈伤后,在植株再生培养基中去除筛选剂利于抗性愈伤的分化,转化率为17.20%。经Southern杂交分析,2mG2-epsps基因表达框均以单拷贝整合到受体基因组。52.17%(12/23)转基因株系可耐受12~50mmol/L的草甘膦。     

K_3、C_(17)培养基在小麦花药培养上的应用初探

1991～1994年通过对冬、春小麦花药培养统计资料的分析,结果表明,K_3培养基比C_(17)培养基效果好,尤其在春小麦花药培养上,出愈率和绿苗分化率均比冬小麦花药高.K_3培养基与C_(17)培养基相比较,在冬小麦花药培养上,K_3培养基的出愈率和绿苗分化率分别比C_(17)培养基高出2.01%和5.87%;在春小麦花药培养上,C_(17)培养基在出愈率方面效果较好,比K_3培养基高出3.69%.     

水稻花药培养在育种中的应用成就与展望

通过近几年水稻花药培养在常规杂交育种及杂交稻育种中的广泛应用,尤其在与抗病、抗虫等转基因及其它育种技术相结合中展现的成果,说明了该技术大大提高了育种效率。但是目前水稻花药培养技术还存在一定的缺陷,比如出愈率、绿苗分化率都不够高,影响后代的基因型的充分表达,因此有待于在应用中进一步的完善。水稻花药培养是水稻育种在微观领域与宏观领域的纽带。水稻花药培养在育种中的应用,加速了各种基因材料的获得,也加速了其它生物技术在育种中的成果转化。     

西北地区特色大麦品种成熟胚离体培养的初步研究

为筛选组织培养特性优良的大麦品种并建立高效的再生体系,选用西北地区主栽品种甘啤3号、甘啤4号、甘啤6号及德国引进品种玛俐、博乐共5个大麦品种,分别研究了基因型、培养基成分、种子处理方式等因素对大麦成熟胚组织培养的影响.结果表明,不同大麦品种的出愈率、绿点率和绿苗率均存在极显著差异,其中博乐的综合效应最好.脱分化培养基A3、分化培养基C2是适合进行再生体系构建的培养基.胚刮碎与纵切处理的愈伤组织诱导率显著高于横切.甘啤3号、甘啤4号、博乐的愈伤组织诱导频率和分化绿苗率均较高,是适合进行遗传转化的受体材料.     

提高粳稻体细胞培养绿苗频率的研究

本试验结果证明:(1)通过异地、异季种植和温度预处理等可以使那些难以分化的粳稻材料有效地提高愈伤组织诱导率和绿苗分化率。(2)在 N_6培养基中,降低生长素的浓度,添加水解乳蛋白和水解核酸也可提高愈伤组织的绿苗分化率,但其效果远不及前者。     

甜菜组织培养与植株再生体系的建立

本研究以甜菜品种"甘糖7号"叶柄为外植体,通过诱导愈伤组织、愈伤组织分化不定芽、芽生根和移栽等步骤建立一套甜菜组织培养与植株再生体系。结果表明,诱导甜菜叶柄愈伤组织的最佳培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,诱导率达88.2%;诱导愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+4 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,分化率仅为9.4%;生根培养基为MS+0.1 mg/L NAA,生根率达33.3%。甜菜再生苗移栽至蛭石中,保温保湿7~10 d后,成活率可达90%以上。本研究结果将对糖料作物甜菜抗逆遗传改良及其基因工程育种具有推动作用。     

利用水稻糯与非糯(近)等基因系探讨WX基因对成熟胚培养力的影响

 采用6对糯与非糯(近)等基因系（3籼3粳）研究了基因对成熟胚培养力的影响。糯与非糯(近)等基因系之间愈伤组织诱导率和生长速率存在极显著差异，并且这种差异高于籼粳类型造成的差异；糯与非糯(近)等基因系的绿苗分化率与上述两种性状呈相反趋势，差异也达到显著水平。直链淀粉的含量与愈伤组织诱导率、生长速率、绿苗分化率的相关均未达到显著水平。表明wx 基因不仅控制直链淀粉含量，而且还具有提 提高愈伤组织诱导率和生长速率、降低绿苗分化率的多效作用。     

紫罗兰愈伤组织诱导及植株再生的研究

以紫罗兰幼苗子叶、子叶柄、下胚轴作外植体接种MS附加不同激素的培养基诱导愈伤组织，并进一步诱导分化出芽及再生植株。子叶和下胚轴外植体在MS＋0.1mg/LNAA培养基上愈伤组织发生率达100％，下胚轴愈伤组织转移MS 0.1mg/L 6-BA培养基上易诱导分化出小苗，分化频率达67％，再生小苗在1／2MSA＋0.2mg/L IBA培养基上生根率达86％。     

亚麻花药培养研究初报

为了配合纤维用亚麻常规育种、加速亚麻育种速度,以适应亚麻生产发展的需要,我们于1976—1978年进行了纤维用亚麻花药培养试验,初步得出MS培养基是诱导亚麻花药愈伤组织较好的一种培养基。 1977年从花药中诱导出第1棵绿苗。