水稻不同外植体培养效果及其相关性分析

 以23个水稻品种（组合）或品系 (基因型)为材料，对不同外植体（花药、幼穗、幼胚和成熟胚）进行愈伤组织诱导和绿苗分化，结果表明，4种外植体的培养效果存在基因型差异，不同外植体的培养效果差异明显。花药与幼穗、成熟胚间的愈伤组织诱导率呈显著正相关，幼穗与幼胚的愈伤组织诱导率也呈显著正相关；绿苗分化率之间则不存在相关性；4种外植体的愈伤组织诱导率和绿苗分化率之间无相关性。     

提高水稻花培育种效率研究

通过对7个杂交组合F1代的花药培养,探讨了花培材料不同低温处理、不同诱导分化培养基激素配比、不同添加物以及培养条件对花药培养效率的影响,结果表明:低温预处理可提高花培的诱愈率,以8℃、8 d处理效果最好;改良N6培养基+YD2处理为粳稻、偏粳材料愈伤组织诱导最佳培养基,MS培养基+FH4处理为粳稻、偏粳材料愈伤组织分化的最佳培养基;多效唑(MET)对绿苗分化具有很大的促进作用;水解乳蛋白(LH)等有机附加物对多数材料的愈伤组织诱导和分化都有一定的作用;光、温培养条件对愈伤组织诱导分化有影响。     

蔗糖、激素及基因型对小麦花药培养的影响

为进一步提高小麦的花药培养效率，以6个普通小麦杂交组合的F1群体为材料，研究了小麦花药离体培养中不同蔗糖浓度和不同激素组合以及基因型对小麦花药培养特性的影响。结果表明，蔗糖浓度对小麦花药愈伤组织的诱导有显著影响，最适蔗糖浓度为100g／L；不同激素组合对小麦花药愈伤组织的再分化频率也有影响，3个基因型均以W14附加1.5mg／LKT＋0．5mg／L IAA激素组合的绿苗分化率最高（分别为59．09％、48％和57．14％），显著高于W14附加1.5mg／LKT及1.5mg／LKT＋0．1mg／L NAA的绿苗分化率。研究还表明，不同基因型小麦花药组织的脱分化特性和再分化特性不同；同一基因型小麦花药愈伤组织的诱导和再分化之间存在显著的正相关。     

短光低温不育水稻宜D S成熟胚培养的研究

对短光低温不育水稻宜D S成熟胚在组织培养中的愈伤组织诱导和分化进行了研究,结果表明:愈伤组织诱导率与绿苗分化率之间无对应关系;诱导培养基的成分对转分化后的愈伤组织有后效作用,2,4-D与6-BA和NAA搭配使用比单独使用2,4-D诱导的愈伤组织更易于分化;同时还发现,不同诱导培养基诱导的愈伤组织在转分化后对分化培养基的要求不同.     

多效唑对水稻种胚愈伤组织诱导和分化的影响

本文报道多效唑对水稻种胚愈伤组织诱导和分化的影响。试验结果表明。多效唑对水稻种胚愈伤组织的诱导以及诱导种胚愈伤组织时种子芽的生长均有抑制作用；低浓度（１─５ｐｐｍ）的多效唑处理多数能提高绿苗分化率，且诱导期进行低浓度多效唑处理的绿苗分化率高于分化期处理；再生绿苗的高度多数随多效唑浓度的提高而降低。本研究初步显示出多效唑可对水稻组织培养进行有效的化学调控。     

麦芽糖提高水稻花药培养效率的研究

 研究了浓度均为150 mmol/L的9种碳源(含组合)对3个籼稻品种花药的愈伤组织诱导率的影响，发现麦芽糖为碳源的培养基效果最佳。进一步以7个籼稻2个粳稻和4个杂交组合为材料，系统比较了150 mmol/L的麦芽糖与蔗糖作为诱导培养基的碳源对花药培养的影响，结果表明，以麦芽糖为碳源的培养基上，平均愈伤组织诱导率和随后的绿苗分化率分别为54.81%与9.70%，而在相应的蔗糖培养基上只有11.85%和3.30%，差异极显著。讨论了提高籼稻花培效率的簧略，井建议采用统一的方法计算愈伤组织诱导率．     

燕麦新品种燕科一号组织培养特性及再生体系研究

为建立燕麦遗传转化的高效植株再生体系，选用裸燕麦新品种燕科一号的幼穗进行组织培养特性和再生体系研究。结果表明，在6种诱导培养基上愈伤组织状态和诱导率差异不大；在进一步继代培养过程中愈伤组织出现明显差异，其中培养基Y2和J结合培养效果好；愈伤组织分化产生绿色芽点和绿苗，二者分化率呈显著正相关；绿苗分化适宜的激素配比是6-BA0．5mg／L＋KT0．4mg／L＋NAA0．4mg／L，有84．90％的愈伤组织分化成苗，其中KT的作用较6-BA、NAA强；在1／2MS培养基上再生苗容易生根，生根率达到89．64％，移栽成活率91．05％；幼穗取样以0．5～1．0cm最为理想。     

TDZ在小麦花药培养中的作用

为了进一步提高小麦花药培养效率,以8个小麦杂交F1代为供试材料,通过在培养基中添加不同浓度的噻重氮苯基脲(thidiazuron,TDZ)探讨其对小麦花药培养的作用。结果表明,TDZ的作用与添加剂量及小麦基因型密切相关。在诱导培养基中添加TDZ对基因型中麦875/郑豫麦043具有负向调控作用,但对兰考198/黄明118、郑麦7698/西农979以及天禾7号/0836H-3则具有正向促进作用。TDZ的最佳添加剂量为0.05mg·L-1,可显著提高3个基因型的胚性愈伤组织诱导率和绿苗产率,其中兰考198/黄明118胚性愈伤组织诱导率和绿苗产率最高,分别达到25.1%和8.7%。同样,在分化培养基中添加一定剂量的TDZ,对4个基因型的愈伤组织分化均表现正向促进作用,TDZ的适宜浓度范围为0.5~1.0mg·L-1,以添加0.5mg·L-1的处理表现最优,能够显著提高绿苗分化率和绿苗/白苗比率;基因型兰考198/黄明118的绿苗分化率和绿苗/白苗比率最高,分别达50%和1.87。研究还表明,在诱导培养基或分化培养基中添加TDZ还能够促进绿苗增殖,提高单倍体自然加倍效率。本研究结果将有助于小麦花药培养技术的优化,进而提高花培育种效率。     

不同生态型普通野生稻花药培养力的研究

对我国匍匐、倾斜和直立型普通野生稻进行了花药培养力的研究。供试的37份普通野生稻其花药培养力存在明显差异,愈伤诱导率变幅0～9.1%,绿苗率变幅0～32.1%,其中有31份材料可得到花培绿苗,占83.8%％。花药培养力的高低顺序为：栽培籼稻＞栽培稻／野生稻杂种＞直立型普通野生稻＞倾斜型普通野生稻＞匍匐型普遍野生稻。不同培养基对不同生态型普遍野生稻具有不同的花培效率。改良N6一号培养基具有显著提高花培效率的作用,适合各型普通野生稻的花药培养。     

西北地区特色大麦品种成熟胚离体培养的初步研究

为筛选组织培养特性优良的大麦品种并建立高效的再生体系,选用西北地区主栽品种甘啤3号、甘啤4号、甘啤6号及德国引进品种玛俐、博乐共5个大麦品种,分别研究了基因型、培养基成分、种子处理方式等因素对大麦成熟胚组织培养的影响.结果表明,不同大麦品种的出愈率、绿点率和绿苗率均存在极显著差异,其中博乐的综合效应最好.脱分化培养基A3、分化培养基C2是适合进行再生体系构建的培养基.胚刮碎与纵切处理的愈伤组织诱导率显著高于横切.甘啤3号、甘啤4号、博乐的愈伤组织诱导频率和分化绿苗率均较高,是适合进行遗传转化的受体材料.     

野生稻原生质体培养与植株再生

三个野生稻（O. rufipogon,O. glumaepatula 和O. latifolia）成熟胚,经愈伤组织诱导和悬浮细胞培养,分离原生质体,利用简化原生质体培养基（SPCM）,结合琼脂糖包埋,并附加看护细胞培养液,这三个野生稻原生质体均得到了成功培养,其中两个（O. rufipogon和O. glumaepatula ）分化了绿色植株。看护细胞液在野生稻原生质体培养中,可促进细胞分裂,提早细胞分裂始期,细胞分裂频率（3.2％）和植板率（19.0%）分别比未加看护细胞液的培养方法高出13.3%和6.2%。看护细胞液可大大减少野生稻愈伤组织在液体中培养始期的死亡率,提高建立其悬浮细胞的成功率。原生质体克隆在适当的后培养基上进行培养,可以显著改良其结构,明显促进绿苗分化。尤其是L3培养基诱导原生质体克隆形成胚性愈伤组织或类似胚状体结构的频率达32.1%,显著高于MS和N6培养基,从而导致较高绿苗分化频率。     

提高玉米胚性细胞系诱导再生植株的研究

本实验以玉米G35×31、Tf幼胚培养的胚性细胞系为材料，用8114、MS和MN6、MB四种培养基诱导胚性细胞系再生绿苗，结果以MB培养基诱导率最高，为93.3%；在以不同激素配比的培养基进行愈伤组织的生根培养，KT1.0mg/L(单位下同)+6BA0.5+NAA0.5+IBA 2的激素组合诱导生根效果最好，而其他三种激素组合未出现分化生根现象。     

不同基本培养基和外植体对剑麻愈伤组织诱导及分化的影响

研究4种基本培养基和3种剑麻外植体对愈伤组织诱导及分化的影响。结果表明，SH基本培养基对剑麻愈伤组织的诱导和分化效果最好，出愈率为100％，愈伤量大，分化率为21.1％；用于剑麻愈伤组织诱导的最佳外植体是剑麻叶片，其出愈率最高，愈伤量最大。在整个诱导和分化过程中，剑麻对N的需求不大，而低铵盐含量对愈伤组织的诱导和分化有利；在含有较高浓度的盐酸硫胺素（VB1）的培养基中，愈伤组织的诱导率、愈伤量和分化率都有显著提高；Cu、Mo、Co等微量元素和有机成分肌醇，对剑麻愈伤组织的诱导并非必需，但对愈伤组织的分化可能是极有利的。     

提高粳稻体细胞培养绿苗频率的研究

本试验结果证明:(1)通过异地、异季种植和温度预处理等可以使那些难以分化的粳稻材料有效地提高愈伤组织诱导率和绿苗分化率。(2)在 N_6培养基中,降低生长素的浓度,添加水解乳蛋白和水解核酸也可提高愈伤组织的绿苗分化率,但其效果远不及前者。     

小麦花药培养特性的数量遗传分析

为探讨小麦花药培养特性的遗传特点和规律,分别以高花药培养特性和低花药培养特性的小麦材料为母本和父本,采用主基因 多基因遗传模型,对两个组合不同世代小麦材料的花药出愈率、愈伤组织绿苗分化率、花药绿苗率三个花培性状进行了遗传分析.结果表明,花药出愈率在组合Ⅰ检测到一对主基因,组合Ⅱ中检测到两对主基因.愈伤组织绿苗分化率和花药绿苗率均检测到两对主基因.主基因的加性效应(d)为增效,显性效应(h)除组合Ⅱ的愈伤组织绿苗分化率外均为减效.互作效应在组合Ⅰ中,愈伤组织绿苗分化率的jab(第一对主基因的d与第二对主基因的h间的互作效应)和花药绿苗率的jba(第一对主基因的h与第二对主基因的d间的互作效应)较小.在组合Ⅱ中,花药出愈率的jba较小;愈伤组织绿苗分化率的l(显性互作效应)较大;花药绿苗率的各效应值比较平均.多基因效应中,对于组合Ⅰ的花药绿苗率和组合Ⅱ的花药出愈率,d和h均为增效,且h大于d;组合Ⅱ中愈伤组织绿苗分化率的d和h均为减效,且d大于h.不同组合F2代花药出愈率的主基因遗传率存在明显差异,组合Ⅰ为55.01%,组合Ⅱ为84.54%,其余两花培性状主基因遗传率差异较小,均在90%以上.研究认为,3个性状受主基因和多基因共同影响,且主基因起决定作用,花药出愈率可以作为衡量小麦花药培养特性的重要指标之一.     

菠萝杂交苗的组织培养

用有性杂交的菠萝种子为材科,使用组织培养的手段诱导愈伤组织并进行分化培养。在适宜的分化培养基上可以获得大量杂交苗。在培养中发现不同组合的植物激素产生愈伤组织的能力,诱导苗木的频率有明显的差异。试管苗经土培后80％成活。     

玉米自交系愈伤组织诱导及植株再生研究

以玉米自交系7922、H99、P2、Mo17、吉846、吉63等的幼胚为外植体诱导愈伤组织，研究了不同培养基、不同激素种类和浓度及不同碳源的种类和浓度对愈伤组织诱导的影响。结果表明：NB培养基的胚性愈伤组织诱导率最高；对于不同基因型玉米自交系2,4-D浓度为2 mg/L时胚性愈伤组织诱导率均最高；在以20 g/L蔗糖和20 g/L葡萄糖及30 g/L蔗糖和10 g/L葡萄糖作碳源的诱导培养基上愈伤组织诱导率最高，但不能长期继代使用。对不同激素组合对玉米愈伤组织再生分化的影响进行了探讨。     

利用水稻糯与非糯(近)等基因系探讨WX基因对成熟胚培养力的影响

 采用6对糯与非糯(近)等基因系（3籼3粳）研究了基因对成熟胚培养力的影响。糯与非糯(近)等基因系之间愈伤组织诱导率和生长速率存在极显著差异，并且这种差异高于籼粳类型造成的差异；糯与非糯(近)等基因系的绿苗分化率与上述两种性状呈相反趋势，差异也达到显著水平。直链淀粉的含量与愈伤组织诱导率、生长速率、绿苗分化率的相关均未达到显著水平。表明wx 基因不仅控制直链淀粉含量，而且还具有提 提高愈伤组织诱导率和生长速率、降低绿苗分化率的多效作用。     

滁州白头翁组织培养及再生体系的建立

为建立白头翁再生体系,以白头翁主根的切段和试管苗叶片为外植体,比较2种外植体离体培养差异,探讨不同植物生长调节剂对不定芽和愈伤组织诱导、愈伤增殖和再分化及芽苗生根的影响。结果表明:叶片可以通过愈伤组织再分化和直接产生不定芽2种途径建立再生体系,而根只诱导出了愈伤组织,增殖培养中逐渐褐化死亡;在含6-BA培养基上,叶块死亡,而根只诱导出少量愈伤组织;叶片诱导不定芽的培养基为MS+TDZ 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L;愈伤组织增殖的培养基为MS+TDZ 0.2 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;再分化时,需要转接到TDZ和NAA组合的培养基上,其中处理组合TDZ 0.3 mg/L+NAA0.1 mg/L的再分化率达100%;生根培养基为1/2MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖20 g/L。不同外植体离体培养存在差异,叶片较根易培养;TDZ对白头翁叶片培养效果较好,2,4-D对愈伤组织的诱导能力较强,而NAA适合于不定芽分化,NAA与IBA组合使用生根效果较好。     

不同基因型对寒地粳稻成熟胚愈伤组织诱导及绿苗分化的影响

水稻成熟胚培养是基因工程和细胞工程等研究的基础。以30个不同基因型的寒地粳稻成熟胚为材料,研究了其在相同条件下的培养特性,分析了不同粳稻间愈伤组织诱导率和绿苗分化率的差异以及与培养力之间的关系。结果表明:诱导率最高为83.5%,最低为1.3%。分化率最高为64.0%,最低为0。不同基因型间诱导率及绿苗分化率差异明显;培养力与诱导率呈显著正相关,与绿苗分化率呈极显著正相关,诱导率和绿苗分化率之间无绝对相关性;培养力聚类分析表明,供试基因型被聚为不同的类群,第三类群中有5个基因型来自相同亲本组合。