不同甜瓜品种再生体系的比较研究

以不同基因型的甜瓜品种为材料,研究了不同激素组合,Ag NO3质量浓度以及基因型对甜瓜再生的影响。结果表明,不定芽诱导中最适宜的激素组合为MS+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1ABA(脱落酸),在此培养基上薄皮甜瓜‘IVF501’和‘IVF509’的不定芽诱导率分别为88.00%、79.60%,厚皮甜瓜‘IVF525’和‘IVF604’的不定芽诱导率分别为76.50%、74.75%。不同质量浓度的Ag NO3对甜瓜不定芽分化的影响有差异,1.0 mg·L-1Ag NO3有抑制愈伤组织分化的作用,能有效减少玻璃化的发生,当质量浓度为2.0 mg·L-1时,虽然明显地抑制了愈伤组织分化,但同时降低了不定芽分化率。薄皮甜瓜‘IVF501’与厚皮甜瓜‘IVF525’具有较高的不定芽诱导率,将诱导的不定芽转入伸长培养基中(MS+6-BA 0.05 mg·L-1),分化的不定芽能够伸长长大,在生根培养基中(MS+IAA 0.4 mg·L-1)容易生根。薄皮甜瓜获得完整再生植株需50~60 d,厚皮甜瓜获得完整再生植株需60~75 d。     

薄皮甜瓜离体再生体系的优化

通过器官发生途径诱导形成不定芽,建立薄皮甜瓜‘IVF05’植株再生体系,探讨不同外植体及不同的激素组合对不定芽再生的影响。结果表明,子叶近胚轴端外植体的不定芽再生率为90.00%,子叶节的再生率为85.00%,子叶远胚轴端外植体的再生率为31.43%,下胚轴的再生率为0,子叶近胚轴端是‘IVF05’不定芽分化的理想的外植体。不定芽诱导中最适宜的培养基为MS+ABA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,在此培养基上产生的愈伤较少,能正常分化的不定芽较多,不定芽的生长较快。在MS+6-BA 0.05 mg·L-1的不定芽伸长培养基上,分化的不定芽能够伸长长大。在MS+IAA 0.2 mg·L-1的生根培养基上无根苗容易生根。从外植体培养到获得完整再生植株需50⁶0 d。     

新疆甜瓜“伽师”再生体系的建立

以厚皮甜瓜"伽师"为试材,研究了6-苄氨基嘌呤(6-BA)、硝酸银(AgNO3)对诱导不定芽的影响,建立以子叶为外植体的快速高效再生体系。选取5d的"伽师"无菌苗子叶,在添加了不同浓度6-BA的MSB培养基中诱导不定芽;并且探讨了在最适6-BA浓度的培养基中添加不同浓度AgNO3对诱导不定芽的影响。结果表明:甜瓜子叶外植体接种在MSB+1.5mg·L~(-1) 6-BA诱导分化培养基上,诱导率可达75%;添加不同浓度AgNO3诱导不定芽,以MSB+1.5mg·L~(-1)6-BA+2.0mg·L~(-1) AgNO3最适,诱导率可达65%,产生单芽较多,缩短了再生周期。丛生芽或单生不定芽转至MSB+0.1mg·L~(-1) 6-BA+0.1mg·L~(-1) GA3的培养基中伸长,不定芽均可伸长且生长状况良好;再将单芽转至MSB+0.01mg·L~(-1) NAA培养基进行生根。     

平邑甜茶叶片不定芽再生及NO的效应

以平邑甜茶继代组培苗叶片为材料,研究了一氧化氮(NO)供体--硝普钠(SNP)、6-BA、NAA、2,4-D、ZT和光暗条件对平邑甜茶叶片不定芽再生的影响.结果表明,6-BA、ZT、NAA和暗培养均有利于叶片不定芽的分化;在含有生长素和细胞分裂素的MS培养基中,加入6.0和12.0 mg·L-1的SNP可极显著诱导叶片不定芽的分化;以MS 6.0 mg·L-1 BA 0.5 mg·L-1 NAA 0.2 mg·L-1 ZT 6.0 mg·L-1 SNP为培养基,暗培养15 d,叶片不定芽分化效果最好,再生率达67.8%.     

''''翠妃''''苦瓜子叶不定芽诱导研究

以'翠妃'苦瓜的子叶作为外植体,研究了子叶苗龄、子叶的部位、暗培养、硝酸银浓度等影响子叶不定芽诱导的主要因素.结果表明:以9 d左右的苗龄诱导不定芽效果最好,适合不定芽诱导培养基是MS BA 1.0 mg·L-1 NAA 0.2 mg·L-1;子叶不同部位不定芽的再生率差异显著,在子叶基端外植体临近下胚轴的部位诱导效果最好,不定芽诱导率为54.21%;暗培养对子叶不定芽诱导有显著的促进效果,暗培养7 d可将不定芽再生率提高到77.44%;AgNO3对不定芽再生有明显的抑制作用,当浓度达到6 mg·L-1以上时,子叶块上就没有不定芽再生,只长有少量的根;不定芽在MS BA 0.5 mg·L-1 NAA0.1 mg·L-1上增值效果较好,增值倍数为5.40.     

西瓜高效再生体系的建立

以优质小果型西瓜品种西173和小麒麟为材料,系统研究了以子叶为外植体的西瓜组培高效再生体系。结果表明:2个西瓜品种在不定芽和愈伤组织诱导上存在着较大差异,在MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1的分化培养基上,西173不定芽诱导率最高达到92.6%,在MS+6-BA2.0mg·L-1+IAA0.2mg·L-1培养基上小麒麟不定芽诱导率最高达到89.7%;诱导出的不定芽丛伸长以MS+KT0.2mg·L-1培养基最佳;2个西瓜品种不定芽在MS+IBA0.2mg·L-1培养基上均获得了较好的生根效果。组培苗移栽后保持高温、高湿是移栽成活的重要条件。西瓜高效再生体系的建立为应用基因工程技术改良西瓜品质和提高其抗逆、抗病性奠定了基础。     

西瓜未受精胚珠的离体培养

以‘西农9号’和‘蜜桂’为供试材料进行了西瓜未受精胚珠的离体培养,研究了供体植株的黑暗热激处理、基因型、不同取样时间、2,4-D浓度和不同激素浓度组合等因素对其芽点诱导率的影响。结果表明:西瓜未受精离体培养以33℃的条件下黑暗热激4 d时效果最佳;CPPU处理3 d的胚珠诱导率最高;‘西农9号’在2.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA的条件下芽点率最高为13.3%,‘蜜桂’在3.5 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.2/0.5 mg·L-1NAA,3.0 mg·L-12,4-D+1.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA的条件下芽点诱导率最高均为6.7%。     

‘黄水蜜’桃实生苗茎段再生体系的建立

【目的】建立‘黄水蜜’桃实生苗茎段高效稳定的再生体系。【方法】以‘黄水蜜’桃实生苗茎段为外植体,探讨了不同植物生长调节剂质量浓度组合对不定芽诱导过程中愈伤组织形成率和不定芽形成率的影响,并采用两步生根法研究不同植物生长调节剂种类对不定根诱导的影响。【结果】适合‘黄水蜜’桃实生苗茎段切口处愈伤组织再生的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+Ag NO30.5 mg·L-1,不定芽再生的最佳培养基为MS+6-BA 3.0mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ag NO30.5 mg·L-1,其愈伤组织形成率和不定芽再生率分别为85%和47%;获得的不定芽先后经WPM+ZT 2.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+Ag NO30.5 mg·L-1和MS+NAA 0.5 mg·L-1+GA30.5 mg·L-1+Ag NO30.5mg·L-1两步生根法培养后,不定根再生率为50%,平均根数量为5.00。【结论】初步建立了‘黄水蜜’桃实生苗茎段再生体系,为桃遗传转化研究奠定基础。     

翠菊‘花束绯红’叶片的植株再生体系建立

以翠菊‘花束绯红’无菌苗为材料,研究了植物生长调节剂浓度及组合、光照条件、不同附加物对叶片及其愈伤组织再生植株的影响。结果表明:(1)在光照培养条件下,诱导翠菊叶片不定芽形成的最适培养基为MS+6-BA3.0mg·L-1+IBA1.0mg·L-1,诱导率为56.7%,平均不定芽数为3.3;(2)黑暗培养不利于叶片不定芽的分化,但促进叶片愈伤组织的形成;(3)培养基中分别添加脯氨酸、水解酪蛋白和NH4NO3等均能明显促进愈伤组织不定芽的诱导,最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+脯氨酸300mg·L-1,诱导率为82.8%,平均不定芽数为4.5;(4)不定芽移到幼苗生根培养基(1/2MS+IBA0.1mg·L-1)上,生根率为89.1%,移栽后成活率达89.3%。     

西瓜子叶离体再生体系的建立

为建立高效西瓜子叶离体再生培养体系,以小果型西瓜品种香秀为试验材料,选取无菌培养4～5 d的子叶为外植体,研究了外源激素6-BA、NAA、IAA和IBA对西瓜子叶离体再生的影响.结果表明,诱导不定芽的最佳培养基配比是MS+2.25 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA,诱导率为90.56％;不定芽伸长的最...     

微型月季腋芽诱导及增殖培养基配方的优化

以微型月季1年生健壮枝条为材料,在(25±2)℃,24~30μmol·m2·s-1,每天光照10 h条件下,采用2因素随机区组设计方法研究6-BA、NAA对微型月季腋芽诱导的影响,采用正交试验设计方法研究6-BA、NAA、KT、蔗糖配比对微型月季不定芽增殖的影响,提出高度(长度)指数概念,并用以评价不定芽增殖效果,优化不定芽增殖配方。结果表明:①MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1有利于腋芽的诱导,腋芽诱导率90%,平均芽数1.61个,芽长0.45 cm;②蔗糖和KT是影响微型月季不定芽增殖的主要因子,增殖率随蔗糖浓度的升高而增加,随KT浓度的增加而降低;③MS+6-BA 1.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+蔗糖40 g·L-1不定芽增殖率最高(3.45)。④MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+KT 0.25 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1有利于不定芽长高,高度指数54.45,侧枝长度指数73.28。     

甜瓜“黄旦子”再生体系的建立

以甜瓜品种"黄旦子"的子叶为试材,采用组织培养的方法,研究了子叶日龄、不同浓度6-BA、IAA和头孢霉素对不定芽的影响。结果表明:子叶日龄对其不定芽的诱导具有较大影响,最佳诱导时间为子叶光照下培养2d,不定芽诱导率达80%;MS+6-BA 1.2mg·L~(-1)为最佳诱导培养基,诱导率达67%。此外,500mg·L~(-1)头孢霉素可作为脱菌和抑菌过程的最佳浓度,最佳卡那霉素浓度为25mg·L~(-1)。     

珠美海棠叶片离体培养与植株再生

将珠美海棠试管苗叶片接种于附加NAA0.3 mg·L-1和不同体积分数的6-BA(1.0～6.0 mg·L-1)的MS培养基中进行离体培养,结果表明,6-BA为1.0～3.0 mg·L-1的处理芽再生率为6.7%～31.8%,而根的再生率为26.7%～28.3%.6-BA为4.5和6.0 mg·L-1处理芽再生率分别高...     

华东葡萄白河-35-1器官离体再生体系建立的研究

以华东葡萄株系白河-35-1(Vitis pseudoreticulata clone Baihe-35-1)的茎段和叶片为材料,通过器官发生途径研究了不同激素及浓度处理组合对华东葡萄白河-35-1无菌苗茎段和叶片诱导不定芽的影响。结果表明,通过调整不同的激素浓度组合和选择不同的外植体可以成功诱导出不定芽。较低的激素浓度组合有利于外植体不定芽的再生。所选用的外植体中,茎段比叶片更易诱导出不定芽。诱导出不定芽的最适激素组合为TDZ1mg·L-1+NAA0.05mg·L-1,其中茎段不定芽诱导率为12.8%,叶片不定芽的诱导率为3.3%。将不定芽置于MS基本培养基+0.2mg·L-1IBA培养基上培养,获得了完整植株。     

三倍体薄皮甜瓜未成熟胚子叶诱导不定芽的研究

以三倍体薄皮甜瓜授粉后30d未成熟胚为试材,采用组织培养的胚培养方法,对三倍体薄皮甜瓜芽的再生进行了研究。结果表明:当TDZ浓度为0.04mg/L时,未成熟胚接种第5天出芽率就达到最大值,出芽整齐一致。在M5激素配比组合(6-BA 1.0mg/L,IAA 0.04mg/L)培养基中,平均再生芽数最高,芽的质量最好。在S2(6-BA 0.05mg/L)培养基中,芽伸长量最多,生长状态最好。     

霞多丽葡萄茎段丛生不定芽的诱导

以葡萄品种(Vitis vinifera)霞多丽(Chardonny)为材料,研究了外植体类型、不同培养基、不同激素及其质量浓度组合、暗处理时间对霞多丽丛生不定芽诱导的影响。结果表明,在所试的3类外植体中,仅从茎段诱导出不定芽。在所试的MS、NN1969及B53种培养基上,平均不定芽数差异不明显。当BA和IBA不同质量浓度组合时,霞多丽茎段均能诱导出不定芽,而且不同处理间不定芽诱导率差异显著,但每个外植体上诱导的平均不定芽数差异不明显,为0～2.5个。BA和IBA组合诱导的不定芽以单个芽为主。BA和NAA不同质量浓度组合对茎段不定芽诱导率和丛生不定芽数均有显著影响,当BA质量浓度为3.0mg·L-1、NAA为0.1mg·L-1时,不定芽诱导率和平均不定芽数达到最高,分别为9.7%和10.1个。由BA和NAA组合诱导的不定芽均为丛生不定芽,单个茎段诱导丛生不定芽数最高可达27个。将不定芽置于1/2MS+IAA0.2mg·L-1培养基上诱导生根,获得了完整的再生植株。     

薄皮甜瓜高效再生体系的建立

对"G24"和"甘甜一号"薄皮甜瓜材料5～7d苗龄的子叶、下胚轴、根尖、真叶以及不同6-BA浓度下不定芽诱导情况进行了研究,建立了高效稳定的再生体系并对生根以及移栽等条件进行了初步研究。结果表明:2份薄皮甜瓜材料在不定芽的诱导方面差异不大,"G24"不定芽的发生频率达到97.2%,"甘甜一号"为91.6%;最适宜作为甜瓜组织培养的外植体材料为子叶近胚轴端,其不定芽诱导率可达95%以上;不定芽诱导中最适6-BA浓度为1.0mg/L。     

扶芳藤再生体系的建立

对扶芳藤的再生进行了研究。预培养时间较短的下胚轴对植物生长调节剂浓度反应敏感,以较老的下胚轴在MS 6-BA 1.3-1.7 mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1或IBA 0.1 mg·L-1培养基上分化效果最好。无芽茎段在MS 6-BA 1.5 mg·L-1 IBA 0.1 mg·L-1和MS 6-BA 1.3 mg·L-1 NAA 0.1 mg·L-1培养基上分化效果好,不定芽生长旺盛。     

西瓜未授粉子房的离体培养

为了探讨西瓜未授粉子房诱导率的影响因素,以‘早春红玉’、‘西农9号’和‘小绿皇’为供试材料进行西瓜未授粉子房的离体培养,研究供体植株的黑暗热激处理、基因型、不同取样时间、2,4-D浓度和不同激素浓度组合等因素对其芽点诱导率的影响。结果表明:西瓜未授粉子房离体培养以33℃的条件下黑暗热激4 d效果最佳;以开花前1 d的子房诱导率最高为17.2%;3个品种中仅‘早春红玉’获得了再生植株,且在激素组合为4.0 mg·L-12,4-D+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1NAA时芽点率最高为15.0%;根据再生植株的根尖染色体数目,初步鉴定再生植株中有单倍体植株,还有二倍体和四倍体植株。     

地被菊'映洁红菲'再生及遗传转化体系的建立

以地被菊'映洁红菲'试管苗叶片为试材,采用组织培养法,研究了6-苄基腺嘌呤、萘乙酸激素浓度、蔗糖浓度、MS浓度、NO3-和NH+的浓度比、羧苄青霉素浓度及潮霉素浓度对不定芽分化的影响,以期建立'映洁红菲'高效的再生体系,为地被菊转基因体系奠定基础.结果 表明:在6-BA和NAA浓度分别为2.0、0.6 mg·L-1,蔗糖浓度为30 g·L-1,NO3-:NH4+为30∶30,基本培养基3/4MS中,'映洁红菲'叶片中愈伤组织诱导和不定芽分化率达到最高,平均每个叶盘分化3.22个不定芽,诱导率75.67％.在生根培养基中加入浓度为0.75 mg·L-1 IBA时,根系生长最好.'映洁红菲'遗传转化时,羧苄青霉素浓度为250mg· L-1,潮霉素浓度为2.0 mg·L-1,适合作为选择压.