贡菊不同花期3种活性物质含量及相关基因表达

研究贡菊花蕾期、露白期、初花期和盛花期中木樨草苷、绿原酸和异绿原酸含量及其相关CmFNS1、CmC3H、CmHQT基因相对表达量的变化,为确定贡菊最佳采收时期提供理论依据。结果表明,绿原酸、木樨草苷和异绿原酸的含量都在露白期迅速下降,初花期上升,盛花期逐渐下降,其中在初花期含量最高,分别为0.43%、0.27%和0.33%。利用实时荧光定量PCR检测CmFNS1、CmC3H、CmHQT基因的相对表达量发现,这些基因表达量变化呈现出横向"S"形,并在初花期达到最高值,与木樨草苷、绿原酸、异绿原酸含量的变化趋势相似,进一步表明贡菊在初花期木樨草苷、绿原酸、异绿原酸含量最高。     

菊花ClERF1基因的克隆与表达分析

以甘菊叶片为试验材料,采用RT-PCR和Tail-PCR以及生物信息学的方法,研究了甘菊ClERF1及其启动子序列特征、表达模式,以及甘菊ClERF1在低温胁迫下的响应。以期为进一步研究甘菊ClERF1功能提供参考依据。结果表明:ClERF1基因序列全长1 242 bp,最大开放阅读框(ORF)618 bp,可编码206个氨基酸。经理化性质分析,ClERF1分子量23 631.35 Da,理论等电点5.19,不稳定系数53.84,脂肪指数62.04,平均亲水性-0.786,亚细胞定位在细胞核内。系统进化树表明,ClERF1与拟南芥At3g23240亲缘关系最近,属于ERF亚家族。qRT-PCR分析表明ClERF1在叶片中表达最高,其次在茎段中。该研究克隆了ClERF1启动子序列1 534 bp,主要包括低温反应和乙烯响应元件、生长素和茉莉酸甲酯反应元件等。甘菊低温处理幼苗ClERF1表达量显著高于未低温处理的幼苗,其中5℃时ClERF1相对表达量最高。     

地被菊'映洁红菲'再生及遗传转化体系的建立

以地被菊'映洁红菲'试管苗叶片为试材,采用组织培养法,研究了6-苄基腺嘌呤、萘乙酸激素浓度、蔗糖浓度、MS浓度、NO3-和NH+的浓度比、羧苄青霉素浓度及潮霉素浓度对不定芽分化的影响,以期建立'映洁红菲'高效的再生体系,为地被菊转基因体系奠定基础.结果 表明:在6-BA和NAA浓度分别为2.0、0.6 mg·L-1,蔗糖浓度为30 g·L-1,NO3-:NH4+为30∶30,基本培养基3/4MS中,'映洁红菲'叶片中愈伤组织诱导和不定芽分化率达到最高,平均每个叶盘分化3.22个不定芽,诱导率75.67％.在生根培养基中加入浓度为0.75 mg·L-1 IBA时,根系生长最好.'映洁红菲'遗传转化时,羧苄青霉素浓度为250mg· L-1,潮霉素浓度为2.0 mg·L-1,适合作为选择压.     

地被菊CmGATA8基因及启动子克隆与表达分析

地被菊花色艳丽、花型整齐、花香清新淡雅,但在东北地区很多地被菊品种不能越冬。本试验以地被菊‘YINGJIE’为材料,克隆CmGATA8,全长为1152 bp,最大开放阅读框(ORF)951 bp,编码317个氨基酸,包含一个GATA结构域;CmGATA8分子量为34.75 ku,等电点为6.07,不稳定系数为59.32,平均亲水性为-0.408,脂肪指数为67.85,CmGATA8定位在细胞核内;进化树分析表明,地被菊CmGATA8为GATA家族Ⅰ亚家族;采用染色体步移方法,克隆了CmGATA8启动子序列1588 bp,启动序列中包括7个光响应元件,1个低温响应元件(LTR),1个ABA响应元件(ABRE)等;地被菊低温处理后,CmGATA8、Cm COR、CmCBF和CmICE相对表达量显著增加。本研究结果表明地被菊CmGATA8响应低温胁迫。     

菊花“红粉”ד延红”杂交种组培快繁技术

以菊花杂交品种"红粉"×"延红"杂交种子为外植体,研究外植体消毒时间、生长调节剂浓度以及基本培养基浓度对其增殖和生根的影响,旨在建立组培快繁体系。结果表明:0.1%HgCl_2消毒8 min,种子发芽率最高为78.3%。在MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.4 mg/L的培养基中,试管苗增殖及生长最佳,株高为9 cm,节数为7.7个。在生根培养中,基本培养基浓度为3/4 MS,当添加IBA 1.0 mg/L时,根生长最佳,根长和根数分别为3.5 cm和15.6条,地上部生长良好,株高和干重均好于其它培养基。将生根的幼苗移栽到栽培基质中(腐殖土∶珍珠岩=3∶1),成活率达95%以上。