菊花ClERF1基因的克隆与表达分析

以甘菊叶片为试验材料,采用RT-PCR和Tail-PCR以及生物信息学的方法,研究了甘菊ClERF1及其启动子序列特征、表达模式,以及甘菊ClERF1在低温胁迫下的响应。以期为进一步研究甘菊ClERF1功能提供参考依据。结果表明:ClERF1基因序列全长1 242 bp,最大开放阅读框(ORF)618 bp,可编码206个氨基酸。经理化性质分析,ClERF1分子量23 631.35 Da,理论等电点5.19,不稳定系数53.84,脂肪指数62.04,平均亲水性-0.786,亚细胞定位在细胞核内。系统进化树表明,ClERF1与拟南芥At3g23240亲缘关系最近,属于ERF亚家族。qRT-PCR分析表明ClERF1在叶片中表达最高,其次在茎段中。该研究克隆了ClERF1启动子序列1 534 bp,主要包括低温反应和乙烯响应元件、生长素和茉莉酸甲酯反应元件等。甘菊低温处理幼苗ClERF1表达量显著高于未低温处理的幼苗,其中5℃时ClERF1相对表达量最高。     

地被菊'映洁红菲'再生及遗传转化体系的建立

以地被菊'映洁红菲'试管苗叶片为试材,采用组织培养法,研究了6-苄基腺嘌呤、萘乙酸激素浓度、蔗糖浓度、MS浓度、NO3-和NH+的浓度比、羧苄青霉素浓度及潮霉素浓度对不定芽分化的影响,以期建立'映洁红菲'高效的再生体系,为地被菊转基因体系奠定基础.结果 表明:在6-BA和NAA浓度分别为2.0、0.6 mg·L-1,蔗糖浓度为30 g·L-1,NO3-:NH4+为30∶30,基本培养基3/4MS中,'映洁红菲'叶片中愈伤组织诱导和不定芽分化率达到最高,平均每个叶盘分化3.22个不定芽,诱导率75.67％.在生根培养基中加入浓度为0.75 mg·L-1 IBA时,根系生长最好.'映洁红菲'遗传转化时,羧苄青霉素浓度为250mg· L-1,潮霉素浓度为2.0 mg·L-1,适合作为选择压.     

野山杏总黄酮对LPS诱导鸡肝炎的影响

【目的】研究野山杏总黄酮对LPS诱导鸡肝炎的影响。【方法】给予鸡腹腔注射5 mg/kg LPS制备急性肝损伤(ALI)模型,以生理盐水为空白对照组,吲哚美辛为阳性对照组和野山杏总黄酮低(50 mg/kg)、中(100 mg/kg)、高(200 mg/kg)剂量组为试验组,测定鸡体温、体重的变化和血液学参数及血液生化指标,观察鸡肝脏病理,分析野山杏总黄酮对鸡肝炎的影响。【结果】野山杏总黄酮各剂量组可不同程度降低LPS导致的体温升高;缓解了炎症造成的体重减轻;显著或极显著(P<0.05,P<0.01)逆转LPS导致的炎性细胞增加,其中野山杏总黄酮各剂量组对白细胞数的减少具有剂量依赖性,对淋巴细胞、粒细胞及中间细胞不呈现剂量依赖性;野山杏总黄酮各剂量组均可抑制炎症条件下ALT、AST的水平;中高剂量组能明显改善LPS引起的鸡肝组织病理损伤。【结论】野山杏总黄酮各剂量组均能恢复炎症导致的体温升高,对鸡体重有促进作用,能减少炎性细胞的数量,抑制ALT、AST含量升高,改善LPS致鸡肝炎的病理损伤,具有一定的抗肝炎作用。