2种抗生素对甜瓜子叶外植体不定芽分化的影响

探讨了卡那霉素和羧苄青霉素对黄河蜜甜瓜子叶不定芽分化的影响。结果表明,25mg/L卡那霉素对不定芽分化开始产生抑制,75mg/L时完全抑制不定芽的分化;羧苄青霉素在低于或等于400mg/L时无抑制作用,500mg/L时开始对不定芽分化产生抑制作用;卡那霉素与羧苄青霉素同时使用无互相作用的效应产生,对不定芽分化并无增效或减效作用,与卡那霉素单独使用效果相似。     

抗生素对''''考密斯''''梨叶片不定梢诱导的影响

研究了氨苄青霉素（Amp）、羧苄青霉素（Carb）、头孢霉素（Cef）、卡那霉素（Kin）和新霉素（Nm）对‘考密斯’叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响。结果表明，Cef对‘考密斯’叶片分化影响较小，当浓度达500mg／L时，出愈率和不定梢再生率分别为93．33％的51．48％，与对照差异不显著；恕np浓度在50-100mg／L时，对‘考密斯’叶片再生无显著影响，只有当Amp浓度高于100mg／L时，‘考密斯’的不定梢再生率才受到显著抑制；‘考密斯’对Carb的发应较为敏感，其浓度为50mg／L时，出愈率和不定梢再生率已降低到85．56％和25。00％，与对照差异极显著，浓度为200mg／L时，完全抑制了‘考密斯‘的不定梢再生；Km浓度为10mg／L时，已完全抑制了不定梢的再生，当Km浓度增加到60mg／L时，‘考密斯’叶片全部白化死亡；Nm浓度为10mg／L时，极显著的抑制了‘考密斯’叶片再生，当浓度达40mg／L时，已无不定梢发生。     

转化用抗生素对青花菜离体再生的影响

为确定农杆菌转化青花菜时所用抗生素的适宜浓度,在分化与生根培养基中分别添加不同浓度的卡那霉素(Km)、500 mg/L的羧苄青霉素(Cb)与头孢霉素(Cef),探讨了对青花菜离体再生的影响.结果表明:青花菜外植体对Km比较敏感,表现在分化阶段10 mg/L Km能抑制带柄子叶与下胚轴分化不定芽,在生根阶段15 mg/L Km能完全抑制根的生出.在脱菌抗生素的使用上,分化阶段宜用Cb,并逐步降低浓度,生根阶段宜用低浓度的Cef.     

抗生素对非洲紫罗兰不定芽再生的影响

以非洲紫罗兰无菌幼叶为试材,分别研究了3种抑菌抗生素(头孢霉素、头孢氨苄、羧苄青霉素)和3种筛选抗生素(硫酸卡那霉素、硫酸新霉素、G418)对非洲紫罗兰离体叶片不定芽再生的影响。结果表明:羧苄青霉素和头孢霉素是非洲紫罗兰遗传转化过程中适宜的抑菌抗生素,其适宜浓度均为300mg/L,而头孢氨苄对非洲紫罗兰离体叶片的毒害作用较大,不适宜作为其转化过程中的抑菌抗生素;硫酸卡那霉素和G418对非洲紫罗兰不定芽再生有较强的抑制作用,可以作为筛选抗生素,其适宜的筛选浓度分别为50mg/L和5mg/L,而硫酸新霉素不适宜作为非洲紫罗兰遗传转化的筛选抗生素。     

韭菜组织培养高频植株再生体系的研究

 通过对韭菜组织培养过程中激素配比、外植体、基因型、苗龄及生根条件的研究, 建立了一次性诱导成芽的高频植株再生体系。适于愈伤组织和不定芽分化的最佳培养基为MS + NAA 1 mg/ L+ BA mg / L, 在此分化培养基上91-1、91-8、保定红根、寿光马蔺韭和兰州小韭根尖培养的芽分化频率分别为78. 7%、83. 7%、81. 9%、76. 7 %和73. 3 %, 平均出芽数分别为40. 1 、46. 7 、36. 3 、35. 4 和44. 5 个,苗龄为7~ 10 d 的根尖最适于组织培养。随苗龄增加, 芽的分化频率呈下降趋势。无任何激素的MS0 培养基最适于不定芽的生根, 生根率达100%, 平均根数14. 5 条。卡那霉素( Km) 对植株再生有很强的抑制作用, 在Km 为20 mg/ L 时就完全抑制愈伤组织和不定芽的发生; 羧苄青霉素( Carb) 和噻孢霉素( Cef) 也抑制韭菜根尖培养的植株再生, Cef 的抑制作用更加显著, Carb 500 mg/ L 或Cef 300 mg/ L 完全抑制不定芽的再生; Timentin 对愈伤组织和芽的分化影响不大, 抑制性主要表现在出芽数随浓度升高而降低。当Timentin 浓度为500 mg/ L 时, 平均出芽数仍可达到23. 8 个, 为对照的49. 4% 。     

抗生素对中华猕猴桃外植体再生的影响

【目的】为确定中华猕猴桃遗传转化中适宜的抗生素种类和浓度,【方法】以中华猕猴桃‘伏牛95-2’叶片为外植体,研究了抗生素对外植体再生的影响。【结果】抗生素敏感性测定发现,当卡那霉素质量浓度为20 mg.L-1时,愈伤组织及不定芽分化率均为0,因此,20 mg.L-1卡那霉素为适宜的筛选浓度;头孢霉素和羧苄青霉素对中华猕猴桃‘伏牛95-2’叶片分化均有抑制作用,但头孢霉素对叶片分化的抑制作用比羧苄青霉素小,结合抑菌试验,将浓度400 mg.L-1头孢霉素确定为适宜于中华猕猴桃‘伏牛95-2’叶片遗传转化的抑菌抗生素。【结论】卡那霉素20 mg.L-1和头孢霉素400 mg.L-1为中华猕猴桃‘伏牛95-2’遗传转化适宜的抗生素及质量浓度。     

几种抗生素对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响

研究了氨苄青霉素(Amp)、羧苄青霉素(Carb)、头孢霉素(Cef)和卡那霉素(Km)对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响。结果表明,Amp对巴梨叶片分化影响较小,当浓度达500mg/L时,其出愈率和不定梢再生率分别为96.48%和56.17%,与对照差异不显著;Cef浓度在50-300mg/L时对巴梨和身不知叶片再生均无显著影响,只有当Cef浓度高于400mg/L时,巴梨的不定梢再生率才受到显著抑制;巴梨和身不知叶片对Carb的反应不相同,低浓度(≤200mg/L)的Carb对巴梨的出愈率和不定梢再生率影响较小,却显著抑制身不知的不定梢再生率,高浓度(≥300mg/L)的Carb不仅极显著抑制巴梨和身不知的出愈率,而且完全抑制了2者的不定梢再生;Km浓度大于10mg/L时,明显抑制愈伤组织的生长,且随着浓度的增加,死亡率逐渐增大,当Km浓度达100mg/L时,巴梨和身不知叶片死亡率达100%和96.30%。     

抗生素对甜瓜植株再生的影响

在建立以农杆菌介导的表达ACC脱氨酶基因的甜瓜遗传转化体系过程中，进行了抗生素影响甜瓜植株再生试验。结果表明：卡那霉素对甜瓜愈伤组织、不定芽分化及生根均有明显的抑制作用，75mg/L的卡那霉素可作为今后甜瓜遗传转化筛选转化体和非转化体的临界浓度；200－400mg/L浓度范围内的氨苄青霉素能够很好地抑制农杆菌过度生长造成的污染，但对甜瓜植株再生的影响较小。     

辣椒子叶和下胚轴的离体培养及高效再生体系的建立

采用三个辣椒品种的子叶和下胚轴，分别离体培养在附加不同激素及化合物的MB5培养基上，对苗龄、基因型、不同外植体和激素组合等对外植体不定芽诱导分化和芽伸长的影响进行研究。结果表明，苗龄对外植体不定芽分化的方式有直接影响；子叶的不定芽分化率高于下胚轴；B5维生素有利于芽的生长和芽伸长率提高。通过比较，筛选出了辣椒子叶和下胚轴离体再生的较好芽分化培养基为MB5＋6--BA5mg／L＋IAA0．5mg／L＋AgNO3 4mg／L＋蔗糖30g／L＋卡拉胶7g／L；芽伸长培养基为MB5＋6-BA3mg／L＋IAA1mg／L＋GA3 2mg／L＋蔗糖30g／L＋卡拉胶7g／L；生根培养基为1／zMS＋IAA0．2mg／L＋NAA0．1mg／L。     

地被菊'映洁红菲'再生及遗传转化体系的建立

以地被菊'映洁红菲'试管苗叶片为试材,采用组织培养法,研究了6-苄基腺嘌呤、萘乙酸激素浓度、蔗糖浓度、MS浓度、NO3-和NH+的浓度比、羧苄青霉素浓度及潮霉素浓度对不定芽分化的影响,以期建立'映洁红菲'高效的再生体系,为地被菊转基因体系奠定基础.结果 表明:在6-BA和NAA浓度分别为2.0、0.6 mg·L-1,蔗糖浓度为30 g·L-1,NO3-:NH4+为30∶30,基本培养基3/4MS中,'映洁红菲'叶片中愈伤组织诱导和不定芽分化率达到最高,平均每个叶盘分化3.22个不定芽,诱导率75.67％.在生根培养基中加入浓度为0.75 mg·L-1 IBA时,根系生长最好.'映洁红菲'遗传转化时,羧苄青霉素浓度为250mg· L-1,潮霉素浓度为2.0 mg·L-1,适合作为选择压.     

番茄06P28子叶受体系统建立的研究

以番茄06P28为试材,对其子叶分化培养基及该材料对潮霉素和羧苄青霉素的天然耐性进行了研究.结果表明:适宜的分化培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L IAA 0.2 mg/L,潮霉素的筛选浓度和羧苄青霉素的抑菌浓度分别以10mg/L、35mg/L为宜.     

丽格海棠高效再生体系的建立及对抗生素敏感性研究

以丽格海棠叶片和叶柄为外植体,通过离体培养分化成苗以及对卡那霉素和头孢霉素的敏感性实验,建立了农杆菌介导的稳定、高效的基因转化受体系统.结果表明:丽格海棠的最适生芽培养基为MS 6-BA0.5 rag/L NAA0.05 mg/L KT0.1 mg/L,不定芽的最适生根培养基为1/2MS IBA0.2 mg/L NAA0.15mg/L;75 mg/L卡那霉素可以完全抑制叶柄的生芽,100 mg/L卡那霉素可以完全抑制叶片的生芽,75 mg/L卡那霉素完全抑制不定芽的生根,头孢霉素浓度小于等于250 mg/L时对生芽和生根的影响不大.     

抗生素对甜瓜植株再生的影响

在建立以农杆菌介导的表达ACC脱氨酶基因的甜瓜遗传转化体系过程中,进行了抗生素影响甜瓜植株再生试验。结果表明:卡那霉素对甜瓜愈伤组织、不定芽分化及生根均有明显的抑制作用,75 mg/L的卡那霉素百可作为今后甜瓜遗传转化筛选转化体和非转化体的临界浓度;200~400mg/L浓度范围内的氨苄青霉素能够很好地抑制农杆菌过度生长造成的污染,但对甜瓜植株再生的影响较小。     

葡萄器官离体再生和遗传转化体系的建立

以‘森田尼无核’为试材,研究了生长调节物质、外植体类型、抑菌素等主要因素对葡萄离体不定芽再生和转化效率的影响,建立和优化了葡萄的再生和转化体系。结果表明：相对于BA和KT,细胞分裂素TDZ无论单独使用还是与生长素配合使用均可使葡萄不定芽再生频率达到最高;在MS + TDZ 2.0 mg·L^-1 、MS + TDZ 4.0 mg·L^-1 或MS + TDZ 4.0 mg·L^-1 + IAA0.1 mg·L^-1培养基上均可以较好地诱导森田尼无核葡萄再生不定芽,再生频率分别为37.4%,40.2%和50.0%;叶盘、茎段和叶柄都可以诱导再生不定芽,在同一种培养上再生频率有差异,但差异不大;采用根癌农杆菌介导的叶盘法转化葡萄时,卡那霉素抗性筛选浓度为20 mg·L^-1;抑菌抗生素使用头胞霉素适宜浓度为400 mg·L^-1,而使用羧苄青霉素时以300 mg·L^-1最佳;获得转化芽45个,部分株系用PCR和Southern 杂交证实,外源基因已整合在葡萄基因组DNA上。     

龙牙蕉组织培养技术

龙牙蕉吸芽茎尖经MS＋6-BA5．0mg／L＋AD20mg／L培养基诱导出不定芽后，在MS＋BA4mg／L＋NAA0．1mg／L培养基上继代培养对不定芽的分化较好，平均分化倍数为2．6倍以上，无根小苗在1／2MS＋NAA0．5mg／L＋AC1g／L培养基上进行生根培养，1周后长出新根。组培小苗移栽假植成活率94％，大田栽培表现正常。     

甜蛋白基因MBLII 对莴苣的遗传转化

 以4 日龄莴苣(Lactua sativa L.) 无菌苗子叶为外植体, 通过根癌农杆菌介导,成功地进行了马槟榔甜蛋白基因MBLII 对莴苣的遗传转化。抗生素浓度和子叶外植体与农杆菌的共培养时间是影响转化的重要因素。附加卡那霉素( Kan) 50 mg/ L 的诱芽培养基MS I(MS+ NAA 0. 1 mg/ L+ 6􀀁BA 0. 1 mg/ L+ 羧卞青霉素500 mg/ L) 最适于侵染后子叶外植体的诱芽培养。在外植体与农杆菌共培养0~ 7 d 的范围内, 以共培养3 d 最佳( 生芽率58. 3%, 白化率29%) 。1~ 2 cm 再生芽移入诱根培养基MS II (MS+ NAA 0. 05 mg/ L+ Kan 50 mg/ L+ 羧苄青霉素300 mg/ L) 中, 诱根率可达100%。获得的抗性植株经组织化学及PCR 特异扩增鉴定和统计, 7. 6%阳性。Southern blot 结果证明MBL II 基因已整合到莴苣基因组中。     

羧苄青霉素对几种浆果分化及生长的影响研究

研究了羧苄青霉素对蓝莓、树莓及蔓越莓3种浆果不同外植体的再生、生长的影响及对农杆菌的抑制作用。结果表明:在分化阶段蓝莓与树莓羧苄青霉素浓度应在200~300 mg/kg,而且继代时间应在7 d,而蔓越莓可以采用400 mg/kg,继代时间可在7~14 d;在生根阶段3种植物羧苄青霉素浓度应在200 mg/kg以下。     

激素配比对辣椒叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的影响

以雄性不育系辣椒“071”的第9～11节叶片为外植体,研究了不同浓度激素配比对辣椒叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的影响.结果表明:6-BA与NAA配合使用对愈伤组织的诱导效果较好,但不能促进不定芽的发生,其中6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L诱导愈伤组织速度快,诱导率为100％,愈伤组织良好.NAA浓度在0.05、0.1 mg/L,6-BA浓度在0.2～5.0 mg/L之间时,6-BA的浓度越高,愈伤组织越易发生褐化现象;6-BA和IAA配合使用,愈伤组织的分化率达50％左右,并促进不定芽的发生,其中6-BA 5.0 mg/L+IAA 0.5mg/L配比时,叶片不定芽生成诱导率较高为35.29％.N-苯基-N'-1,2,3-噻二唑-5-脲(TDZ)浓度为0.05、0.1 mg/L时,单独使用或与NAA、IAA配合使用,都无不定芽出现.     

甜瓜再生体系的建立

以葫芦科的甜瓜为试验对象,探讨不同基因型、不同激素浓度配比及抗生素胁迫对其不定芽萌发的影响,以期建立甜瓜再生培养体系,为甜瓜遗传转化奠定基础。结果表明,甜瓜在初代培养时,不定芽发生的培养基为MS+1.0 mg·L-16-BA,甜瓜再生率最高,达到92.5%;甜瓜在继代培养中,0.3 mg·L-16-BA的处理最适宜不定芽的伸长生长,0.7 mg·L-16-BA的处理甜瓜不定芽增殖系数最高达到2.33;当Kan(卡那霉素)质量浓度大于20 mg·L-1时,外植体基本全部褐化,无法分化出绿芽。Amp(氨苄青霉素)在一定质量浓度下对不定芽发生的影响差异性不显著。     

辣椒三系子叶愈伤组织诱导及植株再生

以辣椒雄性不育系、保持系、恢复系子叶为外植体,研究了6-BA、IAA浓度组合及AgNO3对子叶离体再生培养的影响。结果表明:三系之间在愈伤诱导和不定芽分化上均表现一定的差异,不仅最适的愈伤诱导和不定芽分化培养基不同,且分化出不定芽的数量也表现出较大差异,R-1分化出的不定芽数目明显多于A-1、B-1;AgNO3对愈伤组织诱导没有明显的作用,但3mg/L的AgNO3可提高不定芽的分化率;6-BA/IAA比值为10时与比值为4时相比更有利于不定芽的分化;1/2MS+IAA 0.2mg/L+NAA 0.1mg/L是辣椒三系最优的生根培养基配方。