6个柚品种在桂西南的引种表现

为筛选出适合桂西南种植的柚品种,引进琯溪蜜柚、东试早柚、水晶蜜柚、马来西亚蜜柚、沙田柚和红七柚等6个柚品种进行栽培观察。结果表明,琯溪蜜柚和东试早柚果实品质好、成熟早、适应性强,可以作为优质早熟品种推广种植;水晶蜜柚产量高,可以作为高产品种推广种植;其余3个品种产量较低、果实品质较差,不适宜推广种植。     

以雄性不育胞质杂种‘华柚2号’为母本创制柚有性群体

【目的】以具有胞质雄性不育特性的‘华柚2号’为母本与有核柚品种有性杂交,以期转移其不育胞质进而实现二倍体水平的无核柚改良。【方法】以‘华柚2号’为母本‘,沙田柚’和‘鸡尾’葡萄柚为父本分别配置杂交组合,并对其子代遗传来源和单/多胚性早期鉴定。【结果】分别从‘沙田柚’和‘鸡尾’葡萄柚为父本的杂交组合获得实生苗1 018和687株;用3对多态性SSR标记对实生苗的遗传鉴定表明均为父母本有性后代。以单/多胚性分子标记进行的早期胚性鉴定表明‘,沙田柚’为父本的有性后代均为单胚性;而‘鸡尾’葡萄柚为父本的后代,单胚与多胚性比例为2.86∶1。【结论】以‘华柚2号’为母本创制的有性后代为无核柚改良以及柑橘雄性不育恢复基因定位和克隆奠定了种质基础。     

浙江红肉柚类胡萝卜素合成酶基因片段的SNP分析

【目的】对浙江红肉柚类资源进行遗传多样性分析,为其搜集保护和合理利用提供理论依据。【方法】采用RTPCR技术从11份浙江红肉柚类资源中克隆6个类胡萝卜素合成主链上的关键酶基因片段,分析所得基因片段中的SNP位点,对浙江红肉柚类资源的遗传多样性进行精确研究。【结果】在11份供试材料中克隆到的八氢番茄红素合成酶(PSY)、八氢番茄红素脱氢酶(PDS)、ζ-胡萝卜素脱氢酶(ZDS)、番茄红素β环化酶(LBCY)、番茄红素ε环化酶(LECY)、β-胡萝卜素羟化酶(BCH)的基因片段长度分别为348、521、426、429、403、459 bp,其中PSY、ZDS、LBCY、LECY、BCH的基因序列在供试材料中分别有2、12、2、1、1个单核苷酸位点发生变异,多态性频率分别为1 SNP/174 bp、1 SNP/43.3 bp、1 SNP/213 bp、1 SNP/403 bp和1 SNP/459 bp,而PDS基因序列在11份供试材料中高度保守,无核苷酸位点变异。利用Mega软件NJ聚类法对6个基因片段的核苷酸序列进行遗传多样性分析显示,11个样品聚为3大类群。‘官南红柚’‘文成红心柚’‘处红柚’‘木兰柚’亲缘关系较近,归于第一类;‘古磉柚’‘永嘉红心柚’‘青田红柚’归于第二类;‘红肉蜜柚’‘麻步文旦’‘四季柚’和‘红心四季柚’归于第三类。【结论】浙江红肉柚类资源果肉中类胡萝卜素合成主链上的关键酶基因在编码区除PDS外均存在SNP变异,其中ZDS的单核苷酸多态性频率较高,PSY、LBCY、LECY和BCH 4个基因片段的SNP变异位点较少,说明类胡萝卜素生物合成基因在柚品种间总体较为保守,但这些变异可能是导致果肉红色深浅程度的变因。根据6个基因片段核苷酸序列的遗传多样性分析,‘官南红柚’、‘文成红心柚’、‘处红柚’和‘木兰柚’,‘古磉柚’‘永嘉红心柚’和‘青田红柚’,‘红肉蜜柚’‘麻步文旦’‘四季柚’和‘红心四季柚’,分别归于亲缘关系较近的同一类群。     

桃自交亲和性的分子机制及遗传特性研究

 以油桃（Prunus persicavar.necturina）‘中油5号’及其自交后代为试材,利用花柱S-RNase基因和花粉SFB基因的特异性引物进行PCR扩增,对扩增片段进行回收、克隆、测序和Blast分析,确定了‘中油5号’的自交不亲和基因型为S₁S_2(m)。序列分析结果显示,‘中油5号’桃S₁-RNase和S_2(m)-RNase与多个其他李属S-RNase基因氨基酸和核苷酸序列间都具有极高的相似性,SFB₁和SFB₂基因与多个其他李属SFB基因氨基酸和核苷酸序列间也都具有极高的相似性。进一步对‘中油5号’自交后代个体的S基因型进行检测,发现后代群体中存在3种S基因型,分别为S₁S₁、S₁S_2(m)和S_2(m)S_2(m),且分离比为8︰13︰7,与预期的比例1︰2︰1差异不显著（χ² = 0.214 < χ²_0.05,2 = 5.991）,说明S-RNase基因和SFB基因都遵循两因素的孟德尔遗传规律进行连锁分离。此外,基因型为S₁S₁和S_2(m)S_2(m)的纯合体的存在,表明桃花粉SFB₁和SFB₂基因均不能被自身花柱S-RNase所识别,这是由于SFB₁和SFB₂基因翻译提前终止所造成的,从而使‘中油5号’表现出自交亲和性。     

基于重测序的‘金兰柚’基因组InDel标记的开发及应用

基于重测序进行金兰柚全基因组InDel标记开发。利用二代测序技术对‘金兰柚’进行全基因组重测序,运用BWA软件将测序得到的片段与参考基因组序列进行比对,利用严格的参数筛选杂合InDel,结合Primer 3.0设计扩增引物,进行PCR扩增并利用琼脂糖凝胶电泳验证,以重测序材料‘金兰柚’和47份柚品种检测其有效性。在全基因组范围内共筛选出81对扩增条带清晰的引物。筛选出的多态性标记涵盖了整个‘金兰柚’基因组,平均每条染色体上9个。选取的24对InDel标记可以将48份柚品种有效区分,最少使用2对引物就可将‘金兰柚’与其他47份柚品种完全区分。利用UPGMA构建48份柚品种的聚类树状图,在遗传相似系数为0.611的阈值处可将48个柚品种分为3大类群。本研究中的InDel标记带型简单易读,适宜柚DNA指纹图谱构建和品种鉴定,可为柚名优品种保护、原产地溯源管理等提供科学依据。     

63份柚类资源S基因型鉴定

以‘晚白柚’等63份柚类资源为材料基础,通过RNA-seq和序列特征分析发掘新的S-RNase,并结合前期已有的9个S-RNase基因信息,设计21对特异性引物,扩增鉴定63份柚类资源的S基因型。结果发掘到12个新的S-RNase,按顺序分别命名为S₁₀-RNase～S₂₁-RNase。特异扩增结果显示：鉴定的63份材料中,有59份材料得到完整的S基因型,4份仅鉴定到1个S-RNase基因,其中S₂-RNase扩增频率最高,达34.92%(22/63),S₄-RNase和S₆-RNase在63份材料中均未扩增出。结果还显示许多品种具有相同的S基因型。     

以东试早柚为母本创制柑橘三倍体种质资源

【目的】三倍体植物由于减数分离紊乱，难以形成可育的雌雄配子，属于天然的不育类型，配置以2x×4x多个杂交组合，旨在创制柑橘三倍体种质，丰富柑橘无核材料。【方法】以单胚性二倍体品种东试早柚为母本与四倍体柑橘材料ZP（纸皮，四倍体甜橙）、PT（四倍体葡萄柚）、NH（四倍体，诺瓦橘柚+HB柚体细胞杂种）为父本进行倍性杂交，授粉后85 d和100 d采摘幼果并对未成熟种子实施幼胚离体挽救培养，获得再生植株后用流式细胞仪和InDel标记对其倍性及遗传来源进行鉴定。【结果】从3个倍性杂交组合的168株再生植株中，通过倍性检测获得三倍体幼苗128株且均为双亲杂交后代，其中东试早柚×ZP共计60株、东试早柚×PT共计60株、东试早柚×NH共计8株。【结论】通过倍性杂交高效创制三倍体柑橘新种质，为柑橘早熟无核育种及相关基础研究提供了珍贵的育种材料。     

红心柚和美国枸橼杂种后代对柑橘溃疡病的抗性评价

为了探究枸橼对柑橘溃疡病(Xanthomonas citri subsp.citri,Xcc)的抗性遗传规律,以感溃疡病品种红心柚为母本,与抗溃疡病种质美国枸橼进行杂交,获得了F₁代杂种,并以F₁自交后获得了F₂代。对F₁杂种进行活体叶片注射接种鉴定,对所有F₂代253株进行离体叶片注射接种鉴定,随后对其中的225株F₂活体叶片进行注射接种鉴定,并对部分F₂代活体叶片接种后进行溃疡病菌定量分析。鉴定结果表明,红心柚和美国枸橼杂交获得的75个F₁全部为感病,没有抗感性状分离。对253株F₂植株离体叶片鉴定结果显示,76株表现为抗病,177株表现为感病。对225株F₂植株活体叶片鉴定结果显示,72株为感病,症状与感病品种‘冰糖橙’类似;118株为较感病,发病程度较‘冰糖橙’轻,与感病亲本红心柚的病症相似;10株为较抗病,抗性接近于抗病亲本美国枸橼;4株为抗病,抗性与抗病种质...     

柚新品种——‘真龙柚’

<正>1选育经过‘真龙柚’是四川省泸州市经济作物站、合江县甜橙办和合江县经济作物站等单位于20世纪80年代开展泸州市良种柚提纯选优工作中,在合江县发现的‘沙田柚’优良芽变单株,该单株自花结实,果肉绿白色、肉质细嫩化渣、清甜多汁、无核,与普通的沙田柚(果     

20个中国李品种自交不亲和S-RNase基因型的鉴定

利用蔷薇科S-RNase通用引物Pru-C2/PruCE-R以及12对特异性引物,对贵州省栽培的20个中国李(Prunus salicina Lindl.)品种叶片DNA进行PCR扩增,鉴定其S基因型。结果表明：采用S-RNase通用引物,仅11个李品种扩增出2个条带;采用12对S-RNase特异性引物,既扩增出与通用引物一样的结果,又鉴定出2个品种的S基因型。共鉴定了13个中国李品种完整的S基因型：红心李S_hS₁₀,姜黄李S₁₀S₂₀,南方李S_iS₉,柰李S_hS_f,槜李S_hS₇,幸运S_bS_c,芙蓉李S_bS_i,大红袍S_dS₂₀,前卫红S_eS_h,玫瑰皇后、澳得罗达、黑宝石和秋姬李S_b     

基于SSR标记的浙江地方柚类种质资源遗传关系分析

【目的】对浙江地方柚类种质资源进行遗传多样性分析,为其搜集保护和合理利用提供参考。【方法】利用23对SSR引物进行遗传多样性分析并构建种质鉴定图。【结果】23对引物共检测到91个等位变异位点,变异范围为2~7,平均每对SSR引物可检测到4.0个等位位点;23个SSR位点的观察杂合度、期望杂合度和多态性信息含量分别为0.51、0.54和0.47。UPGMA聚类结果显示:18份供试材料在遗传相似性系数为0.71时分成A1~A3、B1、C1和D1共6个组群,其中A1组包括‘四季柚’‘红肉四季柚’和‘佛香柚’等7份种质,A2组包括‘永嘉红心柚2号’‘青田红心柚’和‘木兰柚’3份果肉颜色为粉红色的种质,A3组包括‘处红柚’‘永嘉红心柚1号’‘古磉柚’和‘官南红柚’4份果肉颜色为红色的种质,‘官南土柚’和‘文成红心柚’自成B1和C1组,‘常山胡柚’和‘槾文柑’2个杂种柚类型聚为D1组。【结论】浙江地方柚类种质资源有丰富的遗传多样性,基于AG14、CAG01、CMS-16和CMS-26 4对引物组合构建浙江地方柚类资源的种质鉴定图,可将18份柚类种质进行区分。     

不同保鲜处理对‘阳光玫瑰’葡萄采后贮藏的影响

以‘阳光玫瑰’葡萄为试材,采用透气保鲜袋、焦亚硫酸钠(Na₂S₂O₅)、1-甲基环丙烯(1-MCP)和透气保鲜袋+Na₂S₂O₅+1-MCP保鲜方法,以不使用保鲜袋和保鲜剂为对照,研究了4种保鲜处理对‘阳光玫瑰’葡萄采后贮藏品质的影响,以期为‘阳光玫瑰’葡萄采后贮藏提供参考依据。结果表明：‘阳光玫瑰’葡萄在低温0～1℃,相对湿度90%～95%环境中贮藏100 d后,透气保鲜袋+Na₂S₂O₅+1-MCP处理组的效果最佳,该处理组的腐烂率、失重率和落果率分别比对照组低8.64%、14.99%和6.40%,果实叶绿素含量比对照高5.89%;可溶性固形物含量和固酸比分别比对照高23.63%和25.17%;丙二醛(MDA)含量比对照组低10.66%。因此透气保鲜袋+Na₂S₂O₅+1-MCP处理能有效保持果实内外在品质,适用于‘阳光玫...     

基于SLAF-seq技术的不同类型越橘遗传变异和群体结构研究

【目的】利用越橘属栽培品种及野生资源在全基因组范围内筛选差异SNP分子标记，分析其遗传变异，了解不同类型群体间的遗传变异、基因交流、群体结构，为越橘种质创新提供遗传背景依据。【方法】以越橘属9个种的62份种质资源为材料，利用特异性位点扩增片段测序技术(SLAF-seq)获得的基因组SNP标记比对到品种Draper参考基因组上，进行供试材料遗传研究。【结果】测序获得169.87 Mb reads数据，平均Q₃₀值94.99%，包含172 513个多态性SLAF标签，筛选到高质量SNP标记4 133 595个，均匀分布在越橘12条染色体上。基于SNP标记的系统进化树准确反映了供试野生、北高丛和南高丛类群遗传差异以及品种间系谱遗传关系，反映出野生类型与栽培品种遗传差异显著，供试野生种具有独立的遗传背景且种间无基因交流发生，但野生种到栽培种存在单向的基因流；栽培品种类群存在明显的亚群结构，亚群间存在普遍的基因交流；半高丛品种北陆和南高丛品种军号与北高丛类型紧密聚类，矮丛品种美登、半高丛品种北村、黑珍珠遗传背景倾向于野生种。【结论】栽培品种近亲杂交和骨干亲本高频率使用导致品...     

几个柚品种在潼南县的表现

潼南县农业局 1993— 1997年间 ,先后从安岳、长寿、蓬溪等地引进了漳州柚、沙田柚、五布柚、通贤柚和晚白柚等 5个品种 ,在龙形镇和宝龙镇集中种植 ,比较研究了几个品种的树体生长情况和果实主要经济性状 ,现总结报道如下。1　材料与方法　　试材是漳州柚、沙田柚、五布柚、通贤柚和晚白柚等 5个品种的酸柚砧嫁接苗 ,以垫江白柚为对照。主要测量树体的干高、干粗 (地面以上 10cm处的树干直径 )、树高、冠高、冠径、1年生枝梢长度和粗度(枝梢基部直径 )、叶面积 (随机采取 30片老叶测量 )等。并观察记载主枝数量、1/3树冠老叶数、1/2树冠花…     

观赏海棠品种群的花期物候特征研究

 以82个观赏海棠品种为研究对象,进行了始花期（S₁）—盛花期（S₂）—末花期（S₃）3个阶段的花期物候观测,系统地研究了品种群的花期物候特征,旨在为海棠专类园建设及海棠花期物候性状特异种质挖掘与定向育种提供参考。结果表明：根据始花期的候区分布,可将82个品种划分为最早（VE）、早（E）、中（M）、晚（L）和极晚（EL）5大花期时序品种群;最早与最晚开花品种的始花期间隔22 d。根据S₁ ~ S₃花期持续时间长短,以3 d为级差,可将82个品种划分为超短（VS）、短（S）、中等（M）、长（L）和超长（VL）5大花期长短类群;82个品种平均花期长度为（11.4 ± 2.8）d。基于花期物候频率统计,构建了始花期（S₁）、盛花期（S₂）和末花期（S₃）的品种频度指数动态分布函数（CFI）,其动态函数的直线斜率存在显著差异（k₁ = 6.312 < k₂ = 6.821 < k₃ = 9.1557）,反应了3个花期阶段物候节奏由慢而快的变化趋势。还构建了观赏多度指数函数（CDI）,为品种群花期整体观赏性评价提供了新的参考依据;基于CDI,将品种群的群体观赏期划分为6个阶段,即启动期（P₀）、指数快速上升期（P₁）、指数高位稳定期（P₂）、指数快速下降期（P₃）、窗口期（P₄）和指数低位持续期（P₅）;P₁ ~ P₃期间CDI值 ≥ 13.6%,时间长达21 d;P₂时段的CDI值高达75.3% ~ 80.3%,时间达3 d。基于82个观赏海棠品种S₁ ~ S₃的花期长度（L）和开花期间每日最高气温均值（T）的二维源数据,以T = 23 ℃和T = 27 ℃为分界点,拟合了L与T之间的分段耦合函数,不同温度区间耦合度（R²）差异显著：52个品种分布于A区（T = 19.2 ~ 22.9 ℃）,21个品种分布于B区（T = 23.0 ~ 26.9 ℃）,9个品种分布于C区（T = 27.0 ~ 32.0 ℃）;这反应了花期长短的相对性,当T ≤ 23 ℃时,花期长短的主导因子为遗传因素,T ≥ 27 ℃时,花期长短的主导因子为日最高气温,T = 23.0 ~ 26.9 ℃时,花期长短由遗传因素和日最高气温共同主导。     

利用SNP分子标记分析鉴定不同形态的化橘红(Citrus grandis var.tomentosa)单株

【目的】在对比化橘红不同品种形态特征的基础上,利用SNP(Single nucleotide polymorphism)分子标记分析其遗传差异,以期获得能准确鉴定化橘红不同品种的有效方法。【方法】依据叶片及果实茸毛特征,从不同果园采集9个代表性的化橘红单株,分别对果实及叶片进行测定。采用14个SNP位点,结合高分辨率熔解曲线分型(High resolution melting analysis,HRMA)技术对供试材料进行遗传多样性分析。【结果】同一采样地‘光青’单株8和9,仅叶片宽度存在显著差异,果实及叶片的其他特性差异不明显;同一采样地单株样4(‘正毛’)与样7(‘副毛’)的叶形指数及果形指数差异不显著,但叶片及果实的其他特性差异显著;同一果园不同品种的单株叶片及果实部分特性差异不显著。不同果园的同一品种单株,因栽培条件及管理等方面的差异,叶片及果实的部分特征存在显著差异。采用14个SNP位点可将9个化橘红样本有效区分,平均PIC(Polymorphism information content)值为0.29,所有SNP位点的平均自交系数为-0.09。【结论】仅凭形态特征很难区分化橘红不同品种的单株,而采用14个SNP位点能有效鉴定化橘红不同品种的单株。     

七个良种柚的初步评价

柚味甘酸、性寒,具有理气化痰、润肺清肠、补血健脾等功效。并因其耐贮性好素有“水果罐头”之称,是我国南方一大特色水果。重庆地区柚品种资源极为丰富,是柚最适宜区之一,20世纪80年代以来,又先后从省外引进了一批柚良种。本文对我所引进的7个柚品种的生物学特性和主要经济性状进行了观察记载与分析,以期为柚引种栽培提供参考。1材料与方法参试品种为引自中国农业科学院柑桔研究所的东风早、曼塞隆、琯溪蜜柚、通贤柚、强德勒红心柚、真龙沙田柚和龙都早香柚。1999年定植于重庆市果树研究所试验园内,海拔260m,土壤pH7.2,酸柚砧,株行距3m×…     

‘奥嗄二十世纪’梨自交亲和性分子机制及遗传特性研究

 ‘奥嗄二十世纪’是自交不亲和性梨品种'二十世纪'的自交亲和性花柱突变体,花粉自交不亲和性功能正常,其自交亲和性突变的分子机制及遗传特性目前仍有争议。本研究通过田间自花及相互授粉以及基因组、mRNA转录和蛋白质水平比较,分析‘奥嗄二十世纪’、‘二十世纪’及其后代S-RNase基因的存在与否、表达特性及其在后代中的遗传。结果显示,‘奥嗄二十世纪’花柱S₂-RNase基因的核苷酸序列和表达特性与其原始品种‘二十世纪’的完全一样;而S4-RNase基因信号比其原始品种‘二十世纪’的弱,而且也在花柱中正常表达(包括转录和翻译水平),但表达量低;然而在其自交亲和后代基因组中检测不到S₄-RNase基因。本研究表明,‘奥嗄二十世纪’基因组中存在花柱S₄-RNase基因,但不能遗传给后代。     

不同苹果品种花粉生理活性物质对自交不亲和的影响

以自花结实的苹果品种‘早红香’和异花结实的苹果品种‘斗南’、‘富士’、‘金冠’花粉为试验材料,对其花粉SOD、POD、CAT活性、MDAI、AA氧化酶、R-Nase、蛋白质含量及4种内源激素含量进行了研究。结果表明:自交亲和苹果品种‘早红香’花粉POD活性、MDA含量I、AA氧化酶活性及R-Nase活性均极显著高于3个自交不亲和品种,自交亲和苹果品种‘早红香’花粉蛋白质含量和GA3含量最高,分别为2 663.541μg/g和177 743.734μg/g。     

观赏海棠品种群开花进程中色素组分动态特征研究

 以58个观赏海棠（Malus sp.）品种为研究对象,对大蕾期（S₁）、盛开期（S₂）、末花期（S₃）花瓣的色素组分进行了测定,研究了海棠品种群之间色素组分关系及动态规律,为挖掘高花青素含量及高稳定性的海棠特异种质和进行花色改良育种提供参考。基于UV-2450紫外—可见分光光度计的实际含量测定和基于Unispec-SC光谱分析仪的反射光谱指标测定,分别构建了花青素、类胡萝卜素和叶绿素3大类色素组分含量与反射光谱指标之间的耦合函数：y_Anth = 0.014x + 0.0012（R² = 0.9974）;y_Car = 0.0038x^0.3772（R² = 0.9902）;y_Chl =–0.1007x² + 0.3221x–0.2169（R² = 0.8179）。采用Origin7.0软件构建了观赏海棠品种群3大类色素组分含量和权重的三维动态图,结果表明：花青素为海棠花瓣中的主导色素,类胡萝卜素和叶绿素为次要色素;在开花进程中,海棠品种群花瓣中的花青素、类胡萝卜素和叶绿素含量整体呈大幅度降低趋势,但色素组分权重却保持着相对稳定性,尽管花青素的权重呈现小幅下降趋势,而类胡萝卜素和叶绿素的权重却呈现小幅上升趋势。基于花青素含量和权重的聚类分析表明：在遗传距离2.936处,58个海棠品种可划分为5个类群,即白色系（A）、粉色系（B）、浅紫红色系（C）、紫红色系（D）和深紫红色系（E）,其中C、D、E色系构成泛紫红色系。各色系/子色系类群之间具有明显不同的色素组分动态特征。尽管粉色系之B₂子色系在大蕾期具有较高的花青素含量[（0.090 ± 0.038）mg · g^-1],但由于色素稳定性差,在S₁–S₂–S₃开花进程中,花青素含量分别下降了83.2%和93.3%,其“红艳”观赏期仅限于盛花期之前;粉色系之B₁子色系的花青素含量及稳定性皆显著高于B₂子色系,在S₁、S₂和S₃阶段,B₁子色系的花青素含量分别为B₂子色系的1.7、3.3和3.2倍,显著提高了色彩观赏性。与粉色系相比,泛紫红色系具有更高的花青素含量及稳定性,整个花期皆保持紫红色,显著延长了该类群的“红艳”观赏期,在S₁、S₂和S₃阶段,D、E两个色系的花青素含量分别为粉色系均值的1.8 ~ 2.0倍、3.9 ~ 6.5倍和8.1 ~ 10.0倍,甚至在S₃阶段仍达到B色系在S₁阶段的花青素含量水平;C色系的花青素含量及稳定性皆逊色于D、E色系,但仍显著优于B色系,即使在S₃阶段,C色系的花青素含量仍达到B色系在S₁阶段的43.2%和S₂阶段的152.5%。