氧化苦参碱对台湾乳白蚁纤维素酶活性的抑制作用

【目的】研究植物源成分氧化苦参碱对台湾乳白蚁纤维素酶活性的抑制作用,为探讨氧化苦参碱在白蚁预防与控制方面的应用提供依据。【方法】在室内条件下[温度(26±1)℃,相对湿度65%±5%,黑暗无光照),供试台湾乳白蚁经饥饿处理2天后,用1%氧化苦参碱溶液处理滤纸后饲喂,分别于饲喂6 h、12 h、1天、3天、5天、7天收集台湾乳白蚁消化道,采用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,还原糖法测定比较白蚁消化道的滤纸酶活性(FPA)及内切β-1,4-葡聚糖酶(EG)、β-葡萄糖苷酶(BG)和纤维二糖水解酶(CBH)的比活力,并于7天后观测记录供试白蚁的质量变化与死亡率。【结果】在测定分析的时间内,除6 h处理组FPA和CBH活性与对照差异不显著外,1%氧化苦参碱对台湾乳白蚁FPA及EG、BG、CBH的活性均有显著抑制作用。1%氧化苦参碱对台湾乳白蚁纤维素酶活抑制率整体表现为FPAFG≥BGCBH,纤维素酶活性抑制率随处理时间的延长而增强,但是5天EG抑制率、3天BG抑制率、12 h CBH抑制率有所降低。台湾乳白蚁经氧化苦参碱处理7天后,活动水平明显减弱,工蚁质量处理组显著低于对照组,白蚁死亡率处理组显著高于对照组。【结论】本研究明确了1%氧化苦参碱对台湾乳白蚁FPA及EG、BG、CBH的活性均具有明显的抑制作用,表明纤维素酶活性的抑制作用是氧化苦参碱杀虫活性的机制之一。氧化苦参碱对台湾乳白蚁具有慢性致死活性,利用氧化苦参碱对台湾乳白蚁纤维素消化的抑制作用,研发台湾乳白蚁消化抑制剂应用于白蚁的防治是一种值得探索的方法。     

黄胸散白蚁纤维素酶的研究

对黄胸散白蚁体内纤维素酶所做的研究结果表明，37℃时，C1酶与pNPC底物反应的最佳时间为1h，Cx酶与CMC-Na和β-葡糖苷酶与Salicin反应的最佳时间均为0．25h。黄胸散白蚁工蚁头部纤维素酶主要是Cx酶和β-葡糖苷酶。肠道组织中，3种纤维素酶主要分布于前肠和后肠组织。Cx酶在前肠的酶量占肠道组织该酶总量的52．9％；C1和β-葡糖苷酶绝大部分在后肠，在该部位所含酶量分别占整个肠道组织酶总量的83．3％和80．2％。说明3种纤维素酶的活性在不同组织中有较大差异。     

青钱柳叶提取物对Caco-2细胞二糖酶活性的抑制作用

采用Caco-2细胞模型,分析了青钱柳Cyclocarya paliurus叶水提物、醇提后的水提物、95%醇提物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物5种不同提取物对Caco-2细胞活力的影响及对Caco-2细胞上麦芽糖酶、蔗糖酶、乳糖酶3种二糖酶活性的抑制作用。结果表明,5种不同提取物中除95%醇提物对Caco-2细胞活力产生一定影响外,其余4种提取物对Caco-2细胞基本无毒性,在200 mg·L^-1浓度提取物范围内培养24～72 h后细胞仍能保持较高活力;对3种二糖酶活性抑制作用效果最好的为醇提后的水提物,尤其是对蔗糖酶和乳糖酶的抑制作用更为明显,最高的抑制率分别达到76.35%和60.13%,其次为乙酸乙酯萃取物,对乳糖酶的抑制率最高达54.41%。从青钱柳叶不同方法提取物的制备流程说明多糖类或中等极性的黄酮甙类有可能是青钱柳叶中抑制二糖酶活性的主要组成成分。     

山核桃外果皮中的抑菌活性成分

用不同溶剂对山核桃外果皮甲醇浸膏进行萃取分离,得石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、正丁醇相,以番茄早疫病菌、苹果腐烂病菌、小麦赤霉病菌、水稻纹枯病菌、黄瓜菌核病菌等5种病菌进行抑菌活性试验.结果表明:正丁醇相抑菌活性最强,氯仿相和石油醚相次之,乙酸乙酯相最弱.对氯仿相进行初步分离,得到7个单体化合物:乔松酮,黄卡瓦胡椒素,5-羟基-4',7-二甲氧基黄酮,5-羟基-2-甲氧基-1,4-萘醌,5-羟基-6,7-二甲氧基黄烷酮,乔松素,β-谷甾醇,均为首次从山核桃中分离得到,它们对玉米大斑病菌和水稻稻瘟病菌孢子萌发均有不同程度的抑制作用.     

无刺枸骨果实化学成分及其抗氧化和抑菌活性研究

[目的 ]探究无刺枸骨果实的化学成分及功能,为种质资源的开发利用提供基础。[方法 ]利用正丁醇、乙酸乙酯和石油醚等萃取剂对无刺枸骨果实成分进行萃取,并采用2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和滤纸片抑菌法测定其萃取物的抗氧化与抑菌活性;结合气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对正丁醇萃取物的化学组分进行鉴定。[结果 ]无刺枸骨果实甲醇粗提取物的正丁醇、乙酸乙酯和石油醚萃取物对ABTS和DPPH自由基均有明显的清除作用,且清除率与萃取物浓度间呈线性正相关。抑菌试验结果表明:正丁醇提取物对于所有菌株均具有极显著的抑菌作用,且是3种萃取剂中抑菌作用最强的;而乙酸乙酯萃取物对于枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和变形杆菌也具有极显著抑菌作用;石油醚萃取物对枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌和变形杆菌抑制作用显著。结合GC-MS与UPLC-QTOF/MS技术,本文首次证实无刺枸骨果实含有抗氧化与抑菌活性的药用成分——绿原酸。[结论 ]本研究首次采用多种萃取剂对无刺枸骨果实成分进行萃取和鉴定,并通过试验证明其萃取物具有显著的抗氧化和抑菌活性,该结果为无刺枸骨果实资源的开发利用提供了数据支持。     

海南鹿角藤提取物对黄瓜的化感作用研究

通过种子萌发、幼苗生长和生理生化指标的测定,研究海南鹿角藤(Chonemorpha splendens)提取物对黄瓜(Cucumis sativus)的化感作用。结果表明氯仿萃取物对黄瓜种子萌发和幼苗生长的抑制作用最强,对黄瓜幼苗的茎和鲜重抑制活性较好,EC_(50)值分别为0.1286 mg/m L、0.1354 mg/m L,且黄瓜根、茎和鲜重的生长抑制作用随氯仿萃取物浓度的增大而增强。但黄瓜体内的叶绿素含量、可溶性蛋白质含量、根系活力和SOD酶活性随氯仿萃取物浓度的增大而降低。相反,POD酶活性和MDA的含量随氯仿萃取物浓度的增大而升高。由此表明,海南鹿角藤提取物对黄瓜具有明显的化感作用,该结果为选择鹿角藤的后茬作物具有指导意义。     

滇白珠种子抗炎化学成分的研究

采用小鼠耳肿胀法对滇白珠种子75%乙醇提取物的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取物和水溶部分的抗炎效果进行测试。结果表明乙酸乙酯萃取物能显著减轻二甲苯致炎小鼠的耳廓肿胀度。采用色谱技术分离抗炎效果较好的乙酸乙酯萃取物的化学成分,得到8个化合物。通过NMR、IR、MS等波谱法鉴定,8个化合物为:大黄素甲醚(1)、6-乙基-5-羟基-2,7-二甲氧基-1,4-萘醌(2)、杨梅素(3)、对苯二酚(4)、香草酸(5)、β-胡萝卜苷(6)、β-谷甾醇(7)和丁二酸(8)。以上所有化合物都为首次从滇白珠种子中分离得到。     

地肤不同部位提取物对山楂叶螨活性的研究

研究地肤不同部位提取物对山楂叶螨的生物活性.结果表明:地肤子氯仿提取物的杀螨活性最高,浓度为2 mg·mL-1对山楂叶螨的卵和雌成螨24 h后的校正死亡率分别达到63.37%和70.02%,明显高于根、茎和叶提取物.进一步萃取、柱层析分离发现:萃取物中氯仿相的活性明显大于水相、石油醚相和甲醇相,对氯仿萃取物的柱层析分离最终得到流分11个,其中以第2流分杀螨效果最好,浓度为1 mg·mL-1时,24 h对卵和雌成螨的校正死亡率分别达68.01%和87.10%.     

核桃青皮提取物对朱砂叶螨的毒力及相关酶活性的测定

研究核桃青皮不同溶剂提取物对朱砂叶螨的毒力作用与相关酶活性的影响,结果表明:核桃青皮石油醚提取物的杀螨活性较高,浓度为1 mg·mL-1时,对朱砂叶螨雌成螨24 h后的死亡率可达到83.44%,明显高于氯仿、甲醇提取物(P<0.05).通过对核桃青皮石油醚提取物进一步萃取、柱层析分离,发现萃取物中石油醚相的杀螨活性明显大于甲醇相,浓度为1mg·mL-1时,对朱砂叶螨雌成螨24 h后的死亡率可达到84.39%(P<0.05).对石油醚萃取物的柱层析分离最终得到19个流分.其中以第6、7、13、17流分杀螨效果较好,死亡率均达到印%以上,且经高压液相检测得第6流分纯度可达90%以上,对其毒力作用进行浓度梯度检测,发现浓度为10 mg·mL-1时,提取率与死亡率分别为6.34%,98.455%.采用比色法测定第6流分对朱砂叶螨乙酰胆碱酯酶(AchE)与Na ,K -ATPase活性的影响,表明浓度为10 mg·mL-1,AchE与Na ,K -ATPase的活性低于对照,8 h后分别为对照的0.47与0.62倍.     

桉叶抗氧化物的提取与抗氧化性质研究

以广林9号桉叶粉为材料,通过单因素和正交实验,确定最佳提取条件为50％乙醇、料液比1：20、50℃提取1h;抗氧化稳定性研究表明：光照、空气和温度对提取物抗氧化活性均有较大的影响,而pH值对其影响较小;对酚类物质的含量进行测定,表明提取物中酚类物质的含量与抗氧化效果成正相关;以有机溶剂对上述提取物进行萃取,抗氧化效果为正丁醇萃取物〉乙酸乙酯萃取物〉水萃取物〉石油醚萃取物;然后比较了不同浓度乙醇作为洗脱剂对正丁醇萃取物分离的影响,以50％和70％乙醇洗脱成分活性最强。     

大戟狼毒不同部位提取物对朱砂叶螨的触杀活性

研究大戟狼毒不同部位不同溶剂提取物对朱砂叶螨的生物活性。结果表明:大戟狼毒根石油醚提取物杀螨活性高于根的其他溶剂和茎、叶不同溶剂提取物。该提取物对朱砂叶螨雌成螨有较高的触杀活性,质量浓度为1mg·mL-1时,24h后雌成螨的校正死亡率达到52.73%,对卵的效果相对较差,质量浓度为4mg·mL-1时卵的校正死亡率为55.21%。进一步对大戟狼毒根石油醚提取物进行萃取分离及生物活性跟踪测定发现:萃取物中石油醚相的活性明显大于氯仿相和甲醇相;对石油醚萃取物的柱层析分离最终得到16个流分,其中以第11个流分杀螨效果最好,质量浓度为1mg·mL-1时,24h后雌成螨的校正死亡率达到86.67%,质量浓度为4mg·mL-1时卵的校正死亡率为66.33%。     

黑翅土白蚁和黑胸散白蚁乙酰胆碱酯酶对6种杀虫剂敏感性比较研究

黑翅土白蚁和黑胸散白蚁是2种重要的害虫。为了明确这2种白蚁对有机磷和氨基甲酸酯类药剂敏感性差异的机理,本文利用分光光度法对比了6种药剂对这2种白蚁乙酰胆碱酯酶(ACh E)不同时间的抑制作用,结果表明在药剂浓度为1×10-6mol/L时,灭多威、马拉硫磷和氧化乐果3种药剂对黑胸散白蚁ACh E的抑制作用高于黑翅土白蚁,丙溴磷对黑翅土白蚁ACh E的抑制作用高于黑胸散白蚁。此研究明确了黑翅土白蚁和黑胸散白蚁对有机磷和氨基甲酸酯类药剂敏感性存在差异的机理,为2种白蚁的防治提供了理论依据。     

板栗雄花序萃取物抗氧化及抑菌效果

【目的】研究板栗雄花序不同萃取物的抗氧化及抑菌效果,为其进一步开发与利用提供基础。【方法】用不同极性溶剂对板栗雄花序乙醇浸膏进行萃取分离,得到石油醚萃取物、二氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物4个部分;并采用1,1－二苯基－2－三硝基苯肼( DPPH·)自由基清除和硫代巴比妥酸法测定醇提物及不同萃取物的抗氧化能力,以滤纸片琼脂扩散法和共培养测定抗菌活性。利用高效液相色谱法( HPLC)和核磁共振波谱法(NMR)鉴定出板栗雄花序中的鞣花酸(EA),并对其进行初步定量与结构分析。【结果】1)通过系统提取法得到板栗雄花序醇提物提取率为16.6%,其他4种萃取物提取率在2.6%～26.2%,其中乙酸乙酯萃取物提取率最高。2)板栗雄花序醇提物及不同萃取物对 DPPH·自由基、卵黄脂质过氧化物都有一定的清除能力,其中乙酸乙酯萃取浓度为0.01 mg·mL －1时,对 DPPH·清除率达到94.4%,对卵黄脂质过氧化物的清除率为95.69%,与同浓度的抗坏血酸(Vc)和2,6－二叔丁基－4－甲基苯酚(BHT)清除率相当。3)板栗雄花序醇提物对12种细菌都有一定程度的抑制效果,在不同萃取物中乙酸乙酯萃取物抑菌效果最好,对大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.98 mg· mL －1,最低杀菌浓度为1.96 mg·mL －1。板栗雄花序样品中有游离鞣花酸,含量为2.267 mg·g －1。【结论】板栗雄花序中含有较多抗氧化和抑菌的活性物质,其醇提物及不同极性萃取物的抗氧化能力存在较大差异,乙酸乙酯萃取物抗氧化活性较高,对清除 DPPH·自由基和脂质过氧化物都有较好的效果。各个萃取物对 G +菌和 G －菌都有一定作用,其中乙酸乙酯萃取相的抑菌活性最好。     

柿叶化学成分及其抑菌活性研究

对柿叶的化学成分进行了定性分析和抗菌活性的研究.通过系统预试,初步确定柿叶中含有生物碱、皂苷、氨基酸、多肽、有机酸、酚类和鞣质、糖类、甾体、总黄酮、强心苷、蒽醌、挥发油等物质.抑制活性试验结果显示:乙醇提取物和乙酸乙酯萃取物对供试的6种细菌有较强的抑制作用;水相对供试的5种真菌有较强的抑制作用,而且对细菌有较小抑制作用;石油醚相对真菌和细菌几乎无抑制作用;正丁醇萃取物对细菌有不同程度的抑制作用,而对真菌无抑制作用.用不同质量浓度的乙酸乙酯提取物进行抑菌活性试验,结果显示:质量浓度越高,其抑菌能力越强,而且,在不同质量浓度下,对测试的6个细菌的抑制活性的大小顺序不一致.     

热处理木材提取物微胶囊防腐剂对杨木耐腐性影响研究

在不同pH值的反应条件下,通过正硅酸四乙酯的水解缩合得到二氧化硅;运用溶胶凝胶法制备几种热处理木材提取物/二氧化硅微胶囊,并采用真空-加压浸渍改性杨木。通过流失试验和耐腐试验,研究微胶囊对改性杨木耐腐性的影响;通过酶活性试验探究了微胶囊的抑菌机理。结果表明：热处理木材提取物/二氧化硅微胶囊木材防腐剂可以提高木材的抗流失性和耐腐性;微胶囊抑菌成分主要通过影响白腐菌中木质素酶（锰过氧化物酶、漆酶）、纤维素酶（外切纤维素酶、β-葡萄糖苷酶）、半纤维素酶活性达到阻碍白腐菌生长的目的;微胶囊仅对褐腐菌中纤维素酶（内切纤维素酶）活性有抑制作用。     

日本落叶松人工林枯落物土壤酶活性

【目的】深入了解不同发育阶段日本落叶松人工林不同分解程度枯落物的土壤酶活性,为促进枯落物分解、加速养分循环、缓解地力衰退提供理论依据。【方法】以不同发育阶段日本落叶松人工林不同分解程度的地表枯落物为研究对象,在2013年5月中旬、8月初及10月中旬分别取样,测定与枯落物分解相关的8种土壤酶的活性变化及其与 pH值、含水量的相关性。【结果】除漆酶外,不同发育阶段林分枯落物层土壤酶活性基本呈现未分解层＞半分解层＞全分解层;不同层中起主要作用的土壤酶不同,在未分解层中主要为淀粉酶和酸性磷酸酶,半分解层中主要为漆酶和内切纤维素酶,而全分解层中主要为漆酶、内切纤维素酶和β－葡萄糖苷酶,表明淀粉酶、酸性磷酸酶在分解初期发挥主要作用,漆酶与纤维素分解酶在分解的中、后期发挥主要作用;幼龄林阶段与成熟林阶段枯落物土壤酶活性总体表现较高,近熟林较低;在幼龄林阶段内切纤维素酶和β－葡萄糖苷酶、淀粉酶、转化酶和几丁质酶活性都较高;成熟林阶段2种磷酸酶活性与几丁质酶活性最高,淀粉酶、转化酶与β－葡萄糖苷酶活性也较高;近熟林阶段淀粉酶、转化酶、酸性磷酸酶、内切纤维素酶和β－葡萄糖苷酶以及几丁质酶活性都较低;而中龄林阶段淀粉酶、内切纤维素酶和β－葡萄糖苷酶活性比幼龄林阶段酶活性低,但高于近熟林阶段酶活性;不同发育阶段林分枯落物层酶活性的变化趋势与林下植被发育状况一致,而与枯落物的贮积量变化趋势相反;对土壤酶活性的季节动态分析表明,大多数的酶在5月份活性最高,而不是温度较高的8月份;对土壤酶活性与含水量、pH值的相关性分析表明,在不同分解程度的枯落物中,半分解层土壤酶活性受含水量、pH值影响较大,在不同发育阶段林分中,近熟林、成熟林阶段枯落物层酶活性更易受含水量、pH 值影响,在季节动态中,8月份土壤酶活性更易受含水量、pH值的影响。【结论】不同发育阶段林分及不同分解程度的枯落物层起主要作用的酶不同;林下植被在日本落叶松人工林枯落物分解中起着重要作用,在营林中应通过间伐、疏伐来促进林下植被发育,或引入适合的林下植物;近熟林阶段日本落叶松人工林林分郁闭度大,对近熟热林阶段日本落叶松人工林进行土壤肥力管理时,应采取密度调控等切实可行的措施缓解地力衰退。     

鹿角藤提取物的抑菌活性

采用生长速率法测定鹿角藤甲醇粗提物、石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇4种溶剂萃取物及氯仿萃取物的层析组分对6种靶标菌的抑菌活性。结果表明,在质量浓度5 mg·m L-1条件下,4种萃取物中,氯仿萃取物的抑菌活性最好,尤其是对香蕉炭疽菌及芒果炭疽菌,其抑制率达82.48%、71.57%;氯仿萃取物的进一步层析组分中,E组分的抑菌活性最好,且具有广谱抑菌活性,在质量浓度0.5 mg·m L-1条件下,组分E对香蕉炭疽菌的抑制率达74.12%,具有进一步研究开发的潜质。     

几种桉叶提取物的抗菌活性研究

研究了大叶桉、柠檬桉、尤曼桉(A、B)叶乙醇提取物和大叶桉、尤曼桉B叶提取物浓缩浸膏的石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取组分对金黄葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黄瓜枯萎病菌的抗菌活性和以及这几种桉叶提取物的最低抑菌浓度。结果表明4种桉叶提取物对4种供试菌均有抑制作用,对金黄葡萄球菌、枯草芽孢杆菌抑制作用强,对黄瓜枯萎病菌作用弱。大叶桉、尤曼桉B提取物的抗菌活性强,这两种桉叶的乙酸乙酯和正丁醇萃取组分对4种供试菌抑菌作用最明显。     

白三叶草黄酮含量及其抑菌活性研究

测定了白三叶草提取物的石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相和水相的黄酮含量,并以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌5种细菌及可可葡萄座腔菌、尖孢镰刀菌、腐皮镰刀菌、多主棒孢霉和尖孢炭疽菌5种真菌为供试菌,采用抑菌圈法和抑制菌丝生长速率法测定了其抑菌活性。结果表明:石油醚相的黄酮含量为12.98 mg/g(12.98%),氯仿相的黄酮含量为13.89 mg/g(13.89%),乙酸乙酯相的黄酮含量为7.4 mg/g(7.4%),水相的黄酮含量为1.5 mg/g(1.5%);石油醚相对5种细菌无明显的抑制作用,氯仿相对普通变形杆菌和铜绿假单胞菌有抑制作用,其最低抑菌浓度(MIC)分别为2 mg/m L和8 mg/m L;乙酸乙酯相对枯草芽孢杆菌、普通变形杆菌和铜绿假单胞菌的有抑制作用,其最低抑菌浓度(MIC)分别为4,4和8mg/m L,仅水相对5种供试菌株有不同程度的抑制作用。氯仿相和乙酸乙酯相对5种真菌均具有抑制作用,氯仿相对5种供试真菌的抑制作用没有明显差异,其EC50分别为3.54、6.42、8.45、3.63和5.90 mg/m L;乙酸乙酯相对多主棒孢霉的抑制抑制作用最强,EC50为2.51 mg/m L,对尖孢镰刀菌的抑制作用最弱,EC50为165.43mg/m L,石油醚相和水相对5种真菌均无抑制作用。     

野龙竹竹叶黄酮含量及其抗氧化活性测定实验

以芦丁为对照样品,用NaNO2-Al(NO3)3比色法在510 nm处测定野龙竹80％乙醇提取物的石油醚相、氯仿相、乙酸乙酯相、水相4部分的黄酮含量,建立了芦丁标准曲线的回归方程:A=10.735C+0.0109 (R2=0.999 5),并用DPPH·对氯仿相和乙酸乙酯相的抗氧化活性进行了测定.实验结果表明,野龙竹竹叶的石油醚相黄酮含量为6.95％,氯仿相的黄酮含量为11.72％,乙酸乙酯相的黄酮含量为12.72％,水相的黄酮含量为5.35％.抗氧化实验显示,氯仿相清除DPPH·的IC50值为0.15 mg/mL,乙酸乙酯相清除DPPH·的IC50值为0.09 mg/mL,野龙竹醇提物的氯仿相和乙酸乙酯相黄酮含量较高,乙酸乙酯相具有较强的抗氧化作用.