高质量丝栗栲基因组DNA的提取方法

为了促进丝栗栲分子生物学的研究,采用尿素法、柠檬酸钠法、改良CTAB法和SDS法4种方法提取丝栗栲叶片基因组DNA,并对提取效果进行了比较和分析。结果表明,改良CTAB法较适合丝栗栲基因组DNA提取,其提取的DNA产率高,凝胶检测条带整齐清晰,杂质少、无明显降解,OD260/OD280比值在1.8左右;而尿素法难以提取基因组DNA,SDS法提取的DNA得率较低,柠檬酸钠法有蛋白质、多糖等杂质污染均不太适用丝栗栲基因组DNA提取。采用改良CTAB法提取得到丝栗栲幼叶、老叶、嫩芽和幼茎基因组DNA,产率分别为177.3、167.1、242.0和156.7μg/g。酶切分析也证明,改良CTAB法提取的不同组织DNA适用于进行后续分子生物学研究。     

两种方法提取杏基因组DNA的比较

以改良CTAB法和改良SDS法提取辽杏等6个杏品种的基因组DNA。经检测,结果表明:两种方法均可提取到较高质量的杏基因组DNA,可用于SSR-PCR扩增,满足后续分子生物学研究需要。改良CTAB法提取的各品种DNA产率和纯度具有更高的稳定性,因此,更适用于杏基因组DNA的提取。     

柳树DNA提取改良方法研究

高质量的DNA是进行林木分子生物学研究的基础与关键。该研究利用改良的CTAB法提取垂柳基因组DNA,并与常规CTAB法、CTAB-硅珠裂解法、SDS法和试剂盒法进行了比较。琼脂糖凝胶电泳检测显示,改良CTAB法提取的DNA浓度和纯度较高,质量优于其他4种提取方法。同时利用改良CTAB法提取了柳树16个自然种及杂交种基因组DNA,并经SSR-PCR扩增反应验证,表明改良CTAB法可作为一种柳树基因组DNA提取的通用方法。     

旱冬瓜叶片基因组DNA提取方法试验

高质量的DNA是进行林木分子生物学研究的基础,本研究利用CTAB法提取旱冬瓜基因组DNA,结果表明CTAB法提取的DNA质量和得率较好,能满足实验分析的需要。     

马尾松针叶DNA提取方法研究

采用3种不同的方法（CTAB法、SDS法和试剂盒法）提取马尾松幼嫩针叶基因组DNA,并分别从取样材料类型、样品的保存、提取液中PVP含量、取样质量、抽提过程中提取程序的改进等方面进行提取马尾松基因组DNA效果的凝胶电泳比较．结果表明：CTAB法适合于在马尾松群体分子生物学研究中基因组DNA的提取：采用低温冷藏法保存的春季抽梢针叶0．2g,在CTAB的提取液中加入2％的PVP,常规CTAB法提取程序中添加等体积的混合液（V酚：V氯仿：V异戊醇=25：24：1）并在此前加入1／10体积的10×CTAB,可以有效地提高马尾松基因组DNA的提取质量,获得显带平直、纯度较高的马尾松基因组DNA,OD260／OD280值在1．8左右．这为马尾松群体分子生物学的研究提供了一个经济、简便而有效的DNA提取方法．     

连翘叶片总DNA提取方法的比较

以连翘[Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl]的新鲜叶片为材料,分别采用CTAB法、高盐低pH法和SDS法3种不同方法提取其总DNA,用琼脂糖凝胶电泳检测获得的DNA的质量,以期从中找出提取连翘总DNA的最适方法。结果表明对于连翘的新鲜叶片,无论从产率上还是质量上,CTAB法都明显优于其他两种方法。     

樟树不同组织总RNA提取方法比较及RT-PCR检测

采用Invitrogen Total RNA Purification Kit直接提取法,Trizol试剂盒法和本实验室改良的CTAB法,分别提取樟树不同组织(根、茎、叶和花)的总RNA,并对提取效果进行了检测和比较分析。结果表明:(1)采用本实验室改良的CTAB法提取的RNA完整性好,无杂质污染且得率高,稳定性好,可满足半定量RT-PCR等试验需要;而Invitrogen Total RNA Purification Kit直接提取法和Trizol试剂盒法提取的樟树不同组织总RNA,结果均不理想,存在RNA 28S rRNA谱带模糊不清、有DNA污染、降解严重和得率低等问题,这两种方法均不适用于樟树不同组织RNA的提取。(2)樟树不同组织总RNA提取的得率不同,其中叶片的总RNA得率最高,达到782.34 mg/kg;茎的得率最低,为514.33 mg/kg。(3)以Actin作为内参基因,对樟树根、茎、叶和花中的Fad2基因片段进行半定量RT-PCR检测,结果表明,Fad2基因片段在樟树叶片中的表达量相对较高,而在花中的表达量较低。     

平菇DNA不同提取方法比较

以野外采集的平菇为样本,经菌丝培养后,用FDEB法、FDEB-CTAB法、改良CTAB法和改良SDS法提取DNA,并进行琼脂糖凝胶电泳检测、紫外分光光度计分析和标准差及标准误分析,结果表明:FDEB法提取的平菇DNA产率最高,但存在较严重RNA的污染,标准差和标准误比较大,稳定性差;改良CTAB法综合效果不错,提取稳定性高;改良SDS法提取的平菇DNA的纯度最好,标准差和标准误最低,提取效果稳定性最好,但产量相对较低;FDEB-CTAB法提取平菇DNA,去多糖的效果很好,标准差和标准误适中,但产量较低。综合以上结果,改良CTAB法提取蘑菇DNA综合效果最好。     

金柑叶片和果实总DNA提取方法比较

为了研究不同提取方法对金柑总DNA提取质量的影响,以融安金柑等3个金柑品种的叶片和果实为材料,采用SDS提取法、CTAB提取法、试剂盒法提取金柑总DNA,并对所提取DNA的总浓度、A_(260/280)、A_(260/230)、凝胶电泳结果、SCo T扩增产物进行比较分析。结果表明:CTAB提取法和试剂盒提取法能较好地去除金柑叶片和果实中的蛋白质、RNA、多酚、多糖、单宁、色素等大分子物质以及盐类等小分子杂质。提取的总DNA浓度最高达178 ng/μL,A_(260/280)在1.82~1.94之间,A_(260/230)在1.89~2.04之间。SDS提取法、CTAB提取法和试剂盒提取法所提取的金柑叶片和果实总DNA的扩增效果图谱清晰,多态性高。3种提取方法中,CTAB提取法所提取总DNA浓度较高,纯度最好,可用于后续相关研究。     

两种方法提取凯特杏DNA的研究

采用CTAB法和SDS法，分别从杏的幼叶、嫩芽中提取DNA，通过计算产率，测定OD260和OD280的比值认为，CTAB比SDS法提取的DNA数量和纯度都高，而且两种方法都表明幼嫩材料中提取的DNA数量比成熟叶片高出2倍之多，纯度也较高。     

Using flower strips to promote green lacewings to control cabbage insect pests

Habitat management improves biological control by increasing the abundance and fitness of natural enemies through the provision of floral resources along field edges or between crops. Among the natural enemies reliant on flower resources, green lacewings often stand out due to their abundance, predation capacity and polyphagy. We evaluated the impact of tailored flower strips on the enhancement of natural enemies, especially green lacewings, in three organic cabbage (Brassica oleracea) farms in Southern Sweden. Insects were sampled from the flower strips, and cabbage pests and predators were visually recorded in the crop. In a laboratory assay, the pollen feeding preferences of Chrysoperla carnea (Stephens, 1836) were evaluated in a dual-choice test. The pollen consumed by the Chrysopidae was extracted from laboratory and field specimens, then quantified and identified. Flower strips were found to attract predators and parasitoids, whose abundance increased as flowers bloomed. Cabbage plants next to the flower strips showed lower pest infestation as compared to cabbage plant control, although no significant differences were observed in the number of predators. Chrysopidae used flower strips as feeding, reproduction and shelter sites and mainly consumed pollen from Phacelia tanacetifolia Benth. Under laboratory conditions, C. carnea showed a preference for P. tanacetifolia and Coriandrum sativum L. pollen over Borago officinalis L. and Fagopyrum esculentum Moench. We show that tailored flower strips could be an efficient tool for enhancing beneficial arthropods and should be considered in integrated pest management for cabbage crops.

     

Comparison of methods for protein extraction from pine needles

Extraction of proteins from pine needles for proteomic analysis has long been a challenge for scientists. We compared three different protein extraction methods including sucrose, Tris-HCl and trichloroacetic acid （TCA）/acetone （TCA method） to determine their efficiency in separating pine needle proteins by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis （SDS-PAGE） and two-dimensional PAGE （2D-PAGE）. Proteins were then separated by SDS-PAGE. Among three methods the method using sucrose extraction buffer showed the highest efficiency and highest quality in separating proteins. In addition, clearer and more stable strips were detected by SDS-PAGE using sucrose extraction buffer. When the proteins extracted using sucrose extraction buffer were separated by 2D-PAGE, more than 300 protein spots, with isoelectric points （PI） ranging from 4.0 to 7,0 and molecular weights （MW） from 6.5 to 97.4 kD, were observed. This confirmed that the method with sucrose extraction buffer was an efficient and reliable method for extracting proteins from pine needles.     

漾濞核桃叶片基因组DNA的两种提取方法效果比较

以漾濞核桃不同生长期的叶片为材料，采用高盐低pH法和改良CTAB法作提取其基因组DNA的效果比较实验。通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计和RAPD扩增对所提取的DNA样品进行检测，比较所得DNA的产量、质量，认为从漾濞核桃不同发育时期叶片中获得DNA的提取效果不同。4种叶样以冬芽和新叶的效果为好，老叶最差；用两种提取方法从叶片中得到的DNA产量和质量有所不同，高盐低pH法提取的DNA纯度高，但是产量较低；而改良CTAB法则相反，产量高，纯度低。     

微波预处理加速阔叶树材干燥的技术分析

微波用于阔叶树木材预处理,可缩短木材的干燥时间;降低木材干燥降等损失、增加高质量木材出材率,为大截面木材干燥提供了可能性;减少了贮存场地及占用资金,降低了木材运输费用。澳大利亚的应用研究结果表明,微波处理费用只占低质量木材价格的4.1%～4.9%,或高质量木材价格的2.3%～2.8%。     

一种适合AFLP分析的油茶DNA提取方法

以油茶的成熟叶片为材料提取DNA,40个样品用改良的提取纯化方法成功提取出适用于AFLP分析的高质量DNA,OD260/OD280在1.7-2.0之间,可以用于AFLP反应。该方法打破了仅能用幼嫩叶片作为提取材料的限制,具有更广泛的适用性和重要的实用性。     

香榧花芽分化与核酸的关系研究初报

香榧花芽分化与核酸的关系研究初报苏梦云周国璋关键词香榧花芽分化核酸香榧（ＴｏｒｅｙａｇｒａｎｄｉｓＦｏｒｔ．ｅｘＬｉｎｄｌ．）是我国著名的珍稀干果,雌雄异株,一般在４月中下旬开花授粉。由于香榧童期较长（大约需２０ａ左右才开花）,如何促进提早开花结实已...     

刺五加AFLP分子标记技术体系的建立

用改良的的试剂盒法提取刺五加叶片的基因组DNA,可以获得高质量的刺五加基因组DNA,DNA降解较少、污染低、电泳条带清晰,可以用于PCR扩增反应,可以被内切酶EcoRⅠ和MseI彻底消化。通过优化酶切反应、引物连接、预扩增、选择扩增,建立了优化的刺五加AFLP分析技术体系,从64对引物中筛选到5对高效扩增引物,并利用这5对引物在6个刺五加种源中获得了89个多态性AFLP分子标记。建立了利用红外荧光检测技术和Li-Cor4300DNA分析系统,进行刺五加AFLP分析的分子标记技术。     

核桃总DNA提取方法研究

研究了适于核桃基因组DNA的提取方法,并对DNA初步进行了质量检测,结果表明此方法可有效去除次生物质对DNA的干扰,可用于随机引物RAPD扩增和随后的各种遗传学分析.     

杜鹃红山茶花芽分化及其代谢产物的变化

以杜鹃红山茶为材料,采用石蜡切片法观察花芽分化过程,研究该过程与外部形态的相关性及其代谢产物的变化。结果表明:杜鹃红山茶花芽分化于5—9月间持续不断进行,该时段内能观察到处于不同分化阶段的花芽;其过程可分为生理分化期、花原基分化期、萼片原基分化期、花瓣原基分化期、雄蕊原基分化期、雌蕊原基分化期。杜鹃红山茶花芽分化过程与其外部形态特征之间有着相对稳定的关系,可以通过花芽形态特征来对其进行判别。花芽分化期可溶性蛋白质含量先升高后降低,可溶性糖含量及可溶性糖/可溶性蛋白质先降低后升高;RNA、总核酸含量及RNA/DNA的变化趋势一致,均随花芽分化逐渐升高,在花瓣原基分化期达到最高,雄蕊、雌蕊原基分化期降低,而DNA含量在整个过程中一直处于较低水平且变化平缓。