三褶虾脊兰无菌播种陕繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplieata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0．5mg／L6-BA、0．1mg／LNAA和1．0g／LAC）、附加物[椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥]及基本培养基（花宝1号、1／2花宝1号、MS和1／2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1／2花宝1号＋0．5mg／L 6-BA＋0．1mg／L NAA＋200ml/L CM＋1．0g／L AC＋20．0g／L蔗糖培养基中培养150d左右可形成原球茎,萌发率超过80％以上;诱导原球茎在1／2MS＋100mL／LCM＋2．0mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4．5;原球茎接种于花宝1号＋0．1mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋1．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上分化培养40d后,再转入花宝1号＋0．1mg／LNAA＋100．0g／L土豆泥＋2．0g／LAC＋20．0g／L蔗糖培养基上培养40d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100．0％,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的王褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导与增殖影响的研究

[目的]大花蕙兰快速繁殖体系的建立。[方法]以茎尖和带有侧芽的茎段作为外植体,研究不同培养基对大花蕙兰原球茎诱导和增殖的影响。[结果]结果表明,大花蕙兰茎尖的原球茎诱导率高于侧芽,原球茎诱导的培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋1．0％芦荟汁;原球茎增殖培养基为1／2MS＋2．0mg／L6-BA＋0．2mg／LNAA＋150g／L香蕉泥＋1．0％芦荟汁;“井”字形切割（底部不分开）是原球茎增殖较为理想的切割方式。[结论]该研究结果可为建立大花蕙兰大规模工厂化育苗体系提供依据。     

春石斛的组织培养和快速繁殖研究

试验结果表明:春石斛不定芽诱导、增殖的最佳培养基为1/2MS+6-BA1 mg/L+NAA 1 mg/L+香蕉泥100 g/L;原球茎诱导的培养基以1/2MS+NAA最佳;不加任何生长调节剂的1/2MS培养基最适宜原球茎的增殖;原球茎分化的最适基本培养基为1/2MS;最适宜的壮苗生根培养基为1/2MS+NAA2 mg/L+香蕉泥100 g/L。     

铁皮石斛人工杂交育种快繁技术

通过人工授粉获得铁皮石斛蒴果,再以蒴果种子为材料进行组培快繁试验,结果表明：人工杂交育种结实率达83％。经种子萌发诱导培养、原球茎增殖培养和壮苗生根培养等试验的结果表明：种子萌发最佳培养基为1／2MS＋蛋白胨2g／L,发芽率达到95％;原球茎增殖最佳培养基为1／2MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．5mg／L＋15...     

欧洲花楸茎段植株再生繁育技术

建立了欧洲花揪的快繁再生体系。结果表明,诱导不定芽的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L＋蔗糖30．0g／L＋琼脂8．0e／L;适宜不定芽增殖的培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．2mg／L＋蔗糖30．0r／L＋琼脂8．0g/L;最佳生根培养基为1／2MS＋NAA0．3mg／L＋蔗糖10．0g／L＋琼脂8．0g／L。     

树兰未成熟种子离体快繁技术

以树兰未成熟种子为外植体,研究了原球茎的诱导、增殖、萌芽及生根培养等几个关键步骤的配方。结果表明：树兰种子播种在MS＋BA0．5mg·L^-1。＋NAA0．25mg·L^-1＋蔗糖25g·L^-1培养基上,7～10d后开始有绿点产生,25d左右就可看见原球茎团;1／2MS＋6-BA1．5mg·L^-1＋NAA0．25mg·L^-1＋蔗糖20g·L^-1＋CH2．0g·L^-1的培养基对原球茎增殖的效果最佳,增殖倍数超过9倍;将原球茎转入1／2MS＋NAA0．1mg·L^-1＋6-BA0．2mg·L^-1＋蔗糖25g·L^-1的培养基上,原球茎的出芽率超过90％;将芽接种在1／2MS＋NAA0．5mg·L^-1＋BAO．1mg·L^-1＋香蕉泥70g·L^-1＋蔗糖25g·L^-1的生根培养基中,生根率达94％：以水苔作为移栽基质较理想,移栽成活率可达92．5％,且植株生长健壮。     

基于组培快繁技术的白及种子萌发和幼苗形态观察

为掌握白及实生苗培育过程中的生长发育特点，采用种子组培快繁技术育苗，并对该过程进行动态观察。在1／2MS＋1．0 mg／L NAA培养基中进行种子萌发及丛生芽诱导，7 d后种子膨大成为淡黄色球状体，21 d后种子突破种皮开始萌发，30 d后开始形成原球茎，40 d后原球茎进一步膨大、颜色逐渐转绿，部分诱导出愈伤组织，2个月后原球茎基部出现绒毛状，愈伤组织分化大量丛生芽。丛生芽在1／2MS＋1．0 mg／L NAA＋2．0 g／L活性炭＋1．0 mg／L GA3培养基中进行生根诱导培养，约40 d即可培养出3～5条幼根，此后白及幼苗快速生长，即可进行炼苗移栽。     

梳唇石斛快速繁殖技术

通过组织培养方法研究梳唇石斛快速育苗技术,利用不同培养基诱导种子直接萌发形成原球茎,并进一步分化获得再生植株。结果表明,种子萌发原球茎诱导的最佳培养基:1/2MS NAA 0.2 mg/L;最佳原球茎增殖培养基:1/2MS 6-BA 0.5 mg/L;最佳生根培养基:1/2MS 香蕉泥100 g/L NAA 0.5 mg/L。     

蝴蝶兰无菌播种及快繁技术研究

以蝴蝶兰无菌种子为材料,对蝴蝶兰种子消毒和萌发、原球茎诱导、增殖和分化培养、芽生根培养基、壮苗培养基配方进行研究。结果表明,种子经次氯酸钠和洗衣粉消毒,有利于促进种子萌发和原球茎的形成;最适合种子萌发的培养基为MS＋香蕉泥100g/L＋马铃薯50g/L＋NAA 0.5mg/L;原球茎的形成及增殖培养以MS＋6-BA 2.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋香蕉泥100g/L为佳,分化培养基为MS＋6-BA 0.1mg/L＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥80g/L＋蔗糖20g/L＋活性炭2.0g/L＋卡拉胶7.0g/L。小苗生根培养基为MS＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥100g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L,生根率达98%以上;壮苗培养基为MS＋香蕉泥80g/L＋马铃薯汁50g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L。经过适当驯化处理,将壮苗移栽到疏松的水草或苔藓基质中,注意温度、湿度及光照管理,成活率可达90%以上。     

鼠尾草种子无菌培养及快繁技术研究

对鼠尾草种子进行了无菌培养，并研究其快繁技术。结果表明：鼠尾草的组培快繁中，播种芽苗最佳脱分化诱导培养基为MS＋6～BA2．0mg／L＋NAA0．1mg／L；最佳再分化培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L；最佳生根培养基为I／2MS＋NAA0．1mg／L；最佳炼苗基质为基质＋珍珠岩（8：2）。     

铁皮石斛类原球茎增殖和分化的研究

通过单因素浓度试验和正交试验研究了5种金属离子、不同激素组合及不同天然附加物对铁皮石斛类原球茎增殖、分化的影响。试验结果表明,5种金属离子对类原球茎增殖影响的主次顺序为Mg2+(Fe2+(Ca2+(Mn2+(Zn2+,类原球茎增殖的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+10%马铃薯汁+3%蔗糖(含Mg2+1.0 mmol/L、Ca2+2.0 mmol/L、Fe2+0.1mmol/L、Mn2+0.1mmol/L和Zn2+0.03 mmol/L)。培养基1/2MS+NAA 0.5mg/L+20%马铃薯汁+蔗糖20g/L+琼脂0.8g/L最适于铁皮石斛类原球茎的分化。     

超声波辅助诱导春石斛原球茎途径再生体系的建立

春石斛是目前国际流行的高档盆花,研究春石斛品系材料No.H118和No.33原球茎再生体系的建立.首先通过原植株的茎尖或腋芽外植体诱导得到无菌苗;将无菌苗茎基无叶芽茎段,经40 kHz超声波预处理10 min,接于1/2 MS+6-BA 0.2 mg/L固体培养基可诱导得到原球茎,系列筛选试验表明,采用液体MS+6-BA 0.2 mg/L两供试材料均得到最高的原球茎增殖率,分别为4.57倍/月和4.31倍/月,添加150 mL/L的椰汁诱导效率显著高于添加蛋白胨和香蕉泥;采用1/2 MS+6-BA 1.0 mg/L+NAb.0.2 mg/L固体培养基,芽增殖率最高,不同的春石斛品种或材料原球茎诱导成功率存在显著性差异.     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

不同培养基组分对带叶兜兰离体培养效果的影响

【目的】探讨适宜带叶兜兰(Paphiopedilumhirsutissimum)离体培养的培养基组分,为规模化生产带叶兜兰组培苗提供技术支持。【方法】以带叶兜兰组培苗为外植体,筛选适合其丛生芽诱导、增殖和壮苗生长的基本培养基、附加物种类和生长激素组合。【结果】初步筛选出较适宜带叶兜兰丛生芽诱导的培养基为1/2MS+3.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA+80.0 g/L香蕉汁+2.0 g/L活性炭,其诱导率较高,为36.1%,且丛生芽诱导出芽较多;丛生芽增殖培养基为1/2MS+0.1 mg/L TDZ+3.0 mg/L 2,4-D+80.0 g/L香蕉汁+2.0 g/L活性炭,其增殖系数为2.02,芽生长较快;壮苗生长最适宜培养基为1.0 g/L花宝1号+1.0 g/L花宝2号+MS培养基的有机、微量成分+1.0 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭+80.0 g/L香蕉汁+1.5 g/L蛋白胨,其幼苗生长较好,生物量大,生根率达75.5%。【结论】在1/2MS+3.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+2.0 g/L活性炭培养基中添加香蕉汁较适宜带叶兜兰丛生芽诱导和增殖培养;在1/2MS+80.0 g/L香蕉汁培养基中添加0.1 mg/L TDZ+3.0 mg/L 2,4-D对带叶兜兰的增殖效果较佳;花宝改良培养基适宜带叶兜兰壮苗培养,结合添加NAA和活性炭培养效果更佳,但活性炭浓度不宜过高。     

不同添加物及浓度对铁皮石斛组织培养的影响 x

以无菌播种取得的铁皮石斛无菌苗作为试验材料,研究1/2 MS 培养基中添加不同浓度的添加物对铁皮 石斛的增殖、生根的影响。结果表明;马铃薯汁和木瓜乳有利于诱导芽的增殖,其中又以1/2 MS+NAA 0.2 mg/L +蔗糖 30 g/L+马铃薯200 g/L 培养基最有利于诱导芽的增殖;香蕉乳有利于诱导生根,其中又以1/2 MS +NAA 0.5 mg/L+蔗 糖30 g/L +香蕉100 g/L 培养基最有利于诱导芽生根。     

蝴蝶兰再生体系优化的研究

探讨了蝴蝶兰的组织培养技术和方法。试验表明:用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好,最适培养基为:MS+6-BA10mg/L+NAA1mg/L+CW20%+蔗糖20g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适增殖培养基为:MS+6-BA2mg/L+NAA1mg/L+CW20%+蔗糖20g/L+琼脂7g/L(pH值5.4);最适生根长苗培养基为:1/2MS+NAA1mg/L+苹果酸30g/L+香蕉泥100g/L+活性炭1g/L+蔗糖15g/L+琼脂7g/L(pH值5.4)。     

铁皮石斛圆球茎增殖影响因素的研究

[目的]探讨培养基的不同组成对铁皮石斛圆球茎增殖的效果及影响,为提高其组培种苗的商业化生产效率提供技术参考。[方法]以无菌播种获得的铁皮石斛圆球茎为材料,对影响铁皮石斛圆球茎增殖的几种因素进行了研究。[结果]铁皮石斛圆球茎在1/2MS培养基中增殖效果较好;在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L培养基中加入BA 2.0 mg/L可促进铁皮石斛圆球茎增殖;培养基中加入天然物质有利于铁皮石斛圆球茎的增殖生长,以加入椰子汁100 ml/L为最佳。[结论]铁皮石斛圆球茎在1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L＋BA 2.0mg/L＋椰子汁100 ml/L培养基上增殖效果最佳,增殖系数达到4.8。     

珍稀濒危药材铁皮石斛组培快繁关键技术研究

目的研究珍稀濒危药材铁皮石斛组织培养快速繁殖技术。方法以铁皮石斛茎段为试材,比较植物激素浓度配比、人工光源、炼苗驯化方法等对铁皮石斛组培快繁的影响,摸索出一套可进行组培快繁工厂化生产的技术体系,优选出铁皮石斛组培快繁的最适条件。结果 (1)组培各阶段最佳培养基:原球茎诱导:MS+BA 2.5 mg/L+IBA0.2 mg/L;原球茎分化:MS+BA1.5 mg/L+NAA1.2 mg/L+5%香蕉汁;壮苗生根:MS+NAA 0.15 mg/L+5%香蕉汁、MS+NAA 0.20 mg/L+7.5%香蕉汁、MS+NAA 0.25 mg/L+10%香蕉汁(分阶段补加);(2)人工光源:组培特定光谱节能灯;(3)炼苗方法:水培驯化炼苗。结论通过上述技术的应用,缩短了种苗组培育苗周期,解决了从组培苗到大量栽培的技术,该方法简便易用,且降低了生产成本。     

文心兰茎尖诱导原球茎的影响因子研究

以文心兰无菌幼苗茎尖为试材,研究了基本培养基、植物生长调节剂、碳源、培养基pH值及茎尖放置方式对原球茎诱导的影响。结果表明:1/2MS为原球茎诱导的适宜培养基,0.1 mg/L TDZ最适合原球茎诱导且无不定芽分化、诱导率达80%,30 g/L蔗糖是原球茎诱导的适宜碳源,培养基pH值为5.2时原球茎诱导效果最佳,茎尖竖直放置比水平放置更有利于原球茎诱导。     

不同激素对怀山药不同外植体分化的影响

研究了6-BA、NAA和IBA对怀山药不同外植体分化和植株再生的影响。结果表明:以节为外植体,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5mg/L 6-BA+1.00 mg/L NAA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖培养基为最优组合,其分化率达100%;最适根块分化培养基是,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.4 mg/L IBA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖;最适无菌茎段分化培养基是,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5 mg/L 6-BA+0.50 mg/L NAA+0.8 mg/L IBA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖;最适无菌叶柄分化培养基是,改良MS+100 g/L香蕉+1.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖。