绶草组织培养及再生体系建立的研究

以野生绶草为试验材料,选取其花序轴、幼叶、肉质根为外植体,建立组培及再生体系。研究结果表明:花序轴为绶草组培最佳外植体材料,诱导率达到85%。最适诱导培养基为MS+3.0%蔗糖+0.75%琼脂+6-BA 1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;最适增殖培养基为MS+3.0%蔗糖+0.75%琼脂+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+椰汁100 g/L;最适生根培养基为1/2 MS+2.0%蔗糖+0.5%琼脂+IBA 0.4 mg/L+NAA 0.4mg/L+活性炭0.5 g/L。     

铁皮石斛茎段类原球茎的诱导及植株再生

以铁皮石斛幼嫩的带节茎段为外植体,通过研究植物生长调节剂对类原球茎诱导、增殖和分化的影响,筛选出适宜铁皮石斛类原球茎植株高效再生的条件。结果表明:类原球茎诱导的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L+土豆泥60 g/L+活性炭0.5 g/L+蔗糖25 g/L+琼脂6.5 g/L,茎段接种45 d后,类原球茎诱导率为97.78%;类原球茎增殖和分化的最适培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L,培养30 d,增殖倍数为7.94,培养至60 d,丛生芽诱导率为97.33%;再生苗在MS+NAA 0.5 mg/L培养基中培养30 d,生根率达到100%。     

牛大力组织培养技术研究

本试验通过组织培养手段,以牛大力种子为材料,对外植体诱导及无菌组织培养进行了尝试,以期获得牛大力外植体诱导、增殖和生根的适宜培养基和培养条件。结果表明,消毒方式为75%酒精消毒30 s+0.1%氯化汞消毒15 min,外植体诱导培养基为改良1/2 MS+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.15 mg/L+益培灵0.20 g/L,增殖培养基为改良MS+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L+6-BA 0.6 mg/L+NAA0.20 mg/L+益培灵0.10 g/L,生根培养基为改良1/2 MS+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L+IBA 1.5 mg/L+ABT 1 1.5 mg/L+益培灵0.05 g/L,较适宜牛大力组织培养。     

美国红栌的组织培养与快速繁殖技术研究

以美国红栌叶片为外植体材料,筛选各个培养阶段的最适培养基配方,结果表明:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L对叶片诱导愈伤组织效果最好;MS+6-BA 1.0 mg/L为分化培养基的适宜配方;1/2 MS+IBA 1.0mg/L+蔗糖15 mg/L+琼脂5 g/L生根效果良好;采用平茬复壮技术可以达到越冬的良好效果.     

墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种组培快繁技术

以墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种原球茎为试材,探索不同培养基配方对其增殖、分化及生根的影响。结果表明,原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)1.0 mg/L+萘乙酸(NAA)1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L,增殖率可达317.77%;原球茎使用培养基1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L培养时的分化率为54.96%,分化效果相对最好;培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L有利于不定芽的增殖,增殖率为227.5%;1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L+活性炭1.0 g/L为最适生根培养基,生根率达81.00%,且苗体生长健壮。     

柠条组织培养体系的建立

为了建立柠条的组织培养体系,用KF/MS加激素培养法,选择不同的消毒剂,对柠条茎段愈伤组织诱导,并进行芽分化、芽的继代增殖和生根培养。结果表明,次氯酸钠的消毒效果最好,最适浓度为2%,且浸泡外植体的最佳时间为8 min;诱导芽分化的基本培养基以KF+6-BA 0.8 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L为宜,继代增殖最适培养基配方为KF+6-BA 1.2 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂7 g/L,适合生根的最佳培养基为1/2 MS+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L+活性炭0.5 g/L。     

金边虎尾兰组织培养的研究

以金边虎尾兰(Sansevieria trifasciata var.laurenttii)肉质叶片作为外植体材料,进行组织培养研究。结果发现,金边虎尾兰叶龄与叶片部位对愈伤组织的诱导有影响,其中采用一年生叶片中部的组织诱导率最高;诱导叶片愈伤组织最适培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导芽分化最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖;诱导试管苗生根最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L NAA+0.7%琼脂+4%蔗糖。     

虾脊兰原球茎诱导及植株高效再生体系研究

以野生虾脊兰(Calanthe discolor)未成熟蒴果为材料,MS为基本培养基,探讨不同光照度、热激和不同培养基配方对虾脊兰种子萌发、原球茎发生及植株再生的影响。结果表明,未完全成熟的种子在1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯+1.0 g/L活性炭培养基中萌芽率最佳;在1 500 lx光照度条件下培养时种子萌发速率较快。通过黑暗条件下35℃热激5 d有利于已萌动种子脱分化形成原球茎。使用MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖培养基诱导原球茎形成胚性愈伤组织效果最好。MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯培养基分化形成植株分化率最高,1/2MS+0.2 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+0.1 g/L活性炭培养基则为最佳生根培养基,生根率100%,植株根系发达,长势健壮。该研究建立了虾脊兰无菌快繁体系,为保护野生虾脊兰资源和种苗人工繁育提供了有效技术途径,也为其遗传转化研究奠定基础。     

香荚蒾组织培养快繁技术研究

用香荚蒾带芽茎段作外植体,对香荚蒾组织培养快繁技术进行研究,以提高香荚蒾繁殖速度和成活率。结果表明,香荚蒾最适初代培养基为1/2 MS+6-BA 2 mg/L+IBA 0.05 mg/L+活性炭1 g/L,最适增殖培养基为1/2 MS+6-BA2 mg/L+IBA 0.1 mg/L+活性炭1 g/L,最适生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg/L+活性炭1 g/L。     

马铃薯茎段愈伤组织培养体系的优化

以克新12号、克新13号、东农303和早大白4种马铃薯试管苗茎段为材料,研究各品种的组织培养体系。结果发现,克新13号和克新12号的最适愈伤组织诱导培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D。用上述最适诱导培养基培养,各品种的愈伤诱导率分别为100%,100%,100%和90%。克新13号愈伤组织分化的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+4.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;克新12号和早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA+1.5 mg/L GA3。用上述最适诱导培养基培养,各品种的分化率分别为80%,90%,100%,76.7%。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

大花萱草组织培养研究

采取大花萱草茎尖为外植体接种在不同培养基上,研究了不同浓度的NAA和6-BA对于外植体生长的影响,并探索了最适于产生愈伤组织和生根的培养基配方。结果表明,有利于外植体产生愈伤组织的培养基配方是MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+30g糖+8g琼脂;适合愈伤组织诱导生芽培养基配方是MS+6-BA1.0mg·L-1+30g糖+8g琼脂;适合幼苗生根的培养基配方是1/2MS+NAA0.5mg·L-1+30g糖+8g琼脂。     

大花萱草“东方不败”的组织培养技术研究

以大花萱草"东方不败"的子房为外植体进行了组织培养的研究,结果表明,"东方不败"子房愈伤组织诱导分化的最佳培养基为MS+4 mg/L6-BA,不定芽分化率可达38.2%;在6-BA质量浓度为3 mg/L,IBA为0.5 mg/L时,繁殖系数可达6.4;适宜的生根培养基为1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+IBA 0.2 mg/L+蔗糖(或白糖)20 g/L+琼脂粉6.5 g/L,每株试管苗生根数可达4～5条。组培过渡苗栽培基质为粗河沙,条件控制温度为24～28℃,相对湿度为85%～90%,并逐渐增加光照,移栽成活率可达92%。     

蝴蝶兰无菌播种及快繁技术研究

以蝴蝶兰无菌种子为材料,对蝴蝶兰种子消毒和萌发、原球茎诱导、增殖和分化培养、芽生根培养基、壮苗培养基配方进行研究。结果表明,种子经次氯酸钠和洗衣粉消毒,有利于促进种子萌发和原球茎的形成;最适合种子萌发的培养基为MS＋香蕉泥100g/L＋马铃薯50g/L＋NAA 0.5mg/L;原球茎的形成及增殖培养以MS＋6-BA 2.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋香蕉泥100g/L为佳,分化培养基为MS＋6-BA 0.1mg/L＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥80g/L＋蔗糖20g/L＋活性炭2.0g/L＋卡拉胶7.0g/L。小苗生根培养基为MS＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥100g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L,生根率达98%以上;壮苗培养基为MS＋香蕉泥80g/L＋马铃薯汁50g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L。经过适当驯化处理,将壮苗移栽到疏松的水草或苔藓基质中,注意温度、湿度及光照管理,成活率可达90%以上。     

东北扁核木组培快繁研究

[目的]筛选东北扁核木组织培养最适宜的初代、继代和生根培养基。[方法]以东北扁核木的单芽茎段为外植体,采用MS或1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、IBA、NAA和GA3,探讨不同培养基对东北扁核木芽诱导、增殖和生根效果的影响。[结果]IBA浓度对东北扁核木初代培养的启动率影响显著,6-BA浓度和GA3浓度的影响不显著,因素主次顺序依次为IBA浓度、GA3浓度、6-BA浓度;6-BA浓度对其继代培养的增殖系数影响显著,IBA浓度和NAA浓度的影响不显著,因素主次顺序依次为6-BA浓度、IBA浓度、NAA浓度;IBA浓度对其生根培养的生根指数影响显著,NAA浓度的影响不显著,因素主次顺序依次为IBA浓度、NAA浓度。[结论]东北扁核木组织培养最适宜的初代、继代和生根培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA和1/2 MS+2.0 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA。     

不同激素水平对石斛兰组织培养的影响

选用石斛兰茎尖和根尖为外植体,以不同的激素浓度组合的MS培养基,研究植物激素对石斛兰组织培养中原球茎的诱导、增殖、生根的影响.结果表明,茎尖能够诱导出原球茎,而根尖几乎不能.最适宜的石斛兰原球茎诱导培养基是MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 2.0 mg/L,其原球茎出愈率达85%;适宜原球茎分化的培养基是Ms+6-BA 4 mg/L+NAA 1 mgL,其分化率达90%;最适宜石斛兰诱导根的培养基应为1/2MS+2.0～3.0 mg/L IBA,生根率达100%.     

海南三七根茎芽基部的组培快繁

以海南三七根茎芽基部为外植体,对根茎芽基部进行初代诱导、继代增殖、生根壮苗培养,并对其组培苗移栽基质进行筛选,建立海南三七根茎芽基部的组培快繁技术体系。结果表明:根茎芽基部最佳诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L+3%蔗糖+卡拉胶粉10.0 g/L+10%椰汁;继代增殖比较合适的培养基为MS+6-BA 3.0~8.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L+3%蔗糖+卡拉胶粉10.0 g/L+10%椰汁;生根最佳的培养基为MS+NAA 0.10 mg/L+3%蔗糖+卡拉胶粉10.0 g/L+10%香蕉泥+活性碳1.0 g/L;组培苗移栽合适的基质为进口泥炭、红壤和腐叶土的混合基质或纯进口泥炭。     

不同产地金线莲组培快繁试验

以不同产地金线莲幼嫩茎段为外植体诱导丛生芽,通过不同培养基配方的筛选,建立不同产地金线莲组培快繁体系。结果表明,不同产地金线莲最佳初代培养基分别是,福建永安产地为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT,台湾南投产地为MS ＋3.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT,广西玉林产地为MS＋4.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA＋1.0 mg/L KT;最佳继代培养基分别是,福建永安产地为MS＋2.0 mg/L 6-BA ＋0.2 mg/L NAA,台湾南投产地为MS＋3.0 mg/L 6-BA ＋0.3 mg/L NAA,广西玉林产地为MS ＋2.0 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L NAA;在壮苗培养阶段,使用外源添加物蛋白胨后,不同产地金线莲外植体苗的生长状况在不同程度上得到了改善,最佳生根培养基分别是,福建永安产地为1/2MS ＋1.5 mg/L NAA ＋0.5 mg/L IBA＋2.0 mg/L ABT1,台湾南投产地为1/2MS ＋0.5 mg/L NAA＋0.5 mg/L IBA,广西玉林产地为1/2MS ＋0.5 mg/L NAA＋1.0 mg/L IBA＋1.0 mg/L ABT1,同时添加1.5 g/L Ac;炼苗移栽基质V （蛭石）∶V（泥炭土）＝1∶1,移栽生根率均达90％以上。     

观赏凤梨远缘杂种离体再生体系研究

[目的]建立一套观赏凤梨远缘杂种离体再生培养体系,为优质新种质的工厂化生产提供参考.[方法]以观赏凤梨V‘ Christiane’×G.dissitisflora远缘杂交种子为材料,研究不同激素组合和基因型对种子愈伤组织的诱导、芽分化和无菌苗生根的影响.[结果]在添加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.2 mg/L的MS培养基上,株系Cd-40的增殖倍数最高,为20.43,其次为Cd-15、Cd-46.与MS培养基相比,在添加不同浓度NAA和6-BA的1/2MS培养基中,Cd-15愈伤组织增殖倍数为6.5~8.5.在含6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L的MS培养基上,Cd-8、Cd-15、Cd-40的平均芽分化率和平均芽分化数均最高,分别为98.49%和18.4个/块.在E4培养基中,Cd-15、Cd-40的愈伤组织分化率和分化芽均达最高值.Cd-40无菌苗在含NAA 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L+ 6-BA 0.25 mg/L的1/2MS培养基上生根效果最好,生根率高达99.0%,平均根数为2.41条/株.[结论]在添加生长素NAA的培养基中提高6-BA的浓度有利于芽的分化,NAA是观赏凤梨无菌苗生根效果较好的激素.     

红叶石楠离体快繁技术体系的建立与优化

以红叶石楠茎尖为外植体,探讨不同植物激素6-BA、IBA、NAA的浓度对试管苗增殖以及植株再生的影响,建立了一套红叶石楠离体培养技术体系。试验结果表明:红叶石楠初代培养采用MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基、茎尖继代培养采用MS+6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.1 mg/L的培养基为宜,通过正交试验确定,植株增高选用MS+6-BA1.0+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基效果较好,生根培养选用1/2MS+IBA1.0～1.5 mg/L培养基,生根率、移栽成活率可达100%。