三褶虾脊兰无菌播种快繁技术研究

【目的】建立三褶虾脊兰（Calanthe triplicata）无菌播种快繁技术体系。【方法】以三褶虾脊兰种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株途径,探讨不同组合（0.5 mg/L 6-BA、0.1 mg/L NAA 和 1.0 g/L AC）、附加物［椰汁（CM）、土豆泥、香蕉泥］及基本培养基（花宝1号、1/2花宝1号、MS和1/2MS）对三褶虾脊兰种子萌发、原球茎诱导、增殖、分化、生根的效果,筛选适宜的培养基。【结果】成熟种子在1/2花宝1号+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+200 mL/L CM+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基中培养150 d左右可形成原球茎,萌发率超过80%以上;诱导原球茎在1/2MS+100 mL/L CM+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上的增殖效果最好,增殖率为4.5;原球茎接种于花宝1号+0.1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+1.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上分化培养40 d后,再转入花宝1号+0.1 mg/L NAA+100.0 g/L土豆泥+2.0 g/L AC+20.0 g/L蔗糖培养基上培养40 d,可诱导形成完整植株。在花宝1号培养基中添加NAA和土豆泥或香蕉泥,原球茎生根率均达100.0%,但土豆泥的成本最低。【结论】建立了比较完善的三褶虾脊兰无菌播种和快繁技术体系,为其种质资源保护、种苗繁育以及产业开发提供技术支持。     

铁皮石斛高效快速繁殖体系研究

为了建立铁皮石斛(Dendrobium officinale)种子高效快速繁殖体系,以铁皮石斛种子为外植体,在萌发培养基上萌发为原球茎,原球茎经悬浮培养增殖,再接种于分化培养基分化、生根长成完整植株。结果显示,原球茎增殖最佳培养基为1/2 MS培养基+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+0.33 g/L(NH4)2SO4+0.525 g/L KNO3+30 g/L蔗糖;原球茎分化最佳培养基为N6+0.1 mg/L 6-BA+0.4 mg/L NAA+100 g/L土豆汁+25 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;幼苗生根最佳培养基为1/2 MS+0.3 mg/L NAA+50 g/L土豆汁+30 g/L蔗糖+6.5 g/L琼脂+1 g/L活性炭;悬浮培养与固体培养相结合的技术优于固体组织培养技术,其具有生长周期短、节省空间、节约成本,促进原球茎增殖、提高分化率,促进生根的特点,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供基础。     

名贵畲药盘龙参种子快繁技术研究

以盘龙参蒴果为外植体,进行组织培养快繁试验,采用对比试验研究不同基本培养基、激素浓度的配比、天然添加物对盘龙参种子萌发、原球茎增殖、分化的影响,从中筛选出离体条件下适宜种子萌发、种苗快繁的培养基配方。结果表明,外植体最佳消毒方案是采用75%乙醇浸泡30 s结合0.1%Hg Cl2浸泡20 min。最适合的种子萌发诱导培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁15%;原球茎在1/2MS+NAA 0.5mg/L+6-BA 1.0mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁15%的增殖效果最好,增殖率为380%;最适合盘龙参原球茎分化的培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+琼脂4.0 g/L+蔗糖3%+马铃薯汁20%。     

墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种组培快繁技术

以墨兰绿墨素与大花蕙兰世界和平杂交种原球茎为试材,探索不同培养基配方对其增殖、分化及生根的影响。结果表明,原球茎增殖的最佳培养基配方为1/2MS+6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)1.0 mg/L+萘乙酸(NAA)1.0 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L,增殖率可达317.77%;原球茎使用培养基1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L培养时的分化率为54.96%,分化效果相对最好;培养基1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖3%+琼脂6.5 g/L+香蕉80 g/L+活性炭0.5 g/L有利于不定芽的增殖,增殖率为227.5%;1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L+活性炭1.0 g/L为最适生根培养基,生根率达81.00%,且苗体生长健壮。     

中国兰原球茎诱导及组培快繁技术研究

本研究以中国兰为试验材料建立中国兰组培快繁体系，对无菌体系建立、原球茎诱导、原球茎增殖、形成完整植株、驯化移栽等进行了系统研究。结果表明，最佳的消毒处理组合为10%漂白粉上清液浸泡15 min、70%乙醇浸泡30 s、0.1%氯化汞溶液浸泡3 min；原球茎最佳诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖25.0 g/L+琼脂7.0 g/L，其诱导率为100%；原球茎最佳增殖培养基为1/2MS+6-BA 0.25 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖15.0 g/L，其增殖系数为15.3；最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg/L+蔗糖15.0 g/L+琼脂10.0 g/L+活性炭5.0 g/L，生根率达100%，生根数5.42；采用移栽驯化基质体积配比为沙子∶草碳土（或腐殖土）是1∶1，组培苗移栽成活率达93.33%。     

纹瓣兰无菌播种快繁技术研究

以纹瓣兰[Cymbidium aloifolium (L. ) Sw]的种子为外植体,采用种子→原球茎→完整植株的途径进行繁殖.结果表明:种子在MS+6-BA 0. 2 mg/L+AC 1.0 g/L+蔗糖30 g/L培养基培养30 d左右,可形成原球茎;原球茎在1/2MS+6-BA 4 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L的培养基上增殖效果最好;原球茎接种于1/2MS+6-BA 0.1 mg/L +NAA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L培养基上培养4周后,再转入1/2MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L+AC 2.0 g/L+香蕉泥80 g/L的培养基上培养30 d,可诱导形成完整的植株.     

国兰“绿蕙红舌”的组织培养技术

采用不同培养基对国兰"绿蕙红舌"的种子进行组织培养试验研究,综合分析不同培养基配方在国兰"绿蕙红舌"组织培养过程中对种子萌发与原球茎诱导、原球茎继代增值、原球茎分化及生根壮苗的影响。结果表明,种子萌发与原球茎诱导最适宜培养基为MS+BA 0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+水解酪蛋白100 mg·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;原球茎继代增值最适培养基为KC+BA0.5 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1+活性碳2g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;原球茎分化最适培养基为KC+BA1.0 mg·L-1L+NAA 0.2mg·L-1+活性碳2 g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1;生根壮苗最适培养基为1/2 MS+NAA 0.5mg·L-1+活性碳2 g·L-1+马铃薯汁200 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂4 g·L-1。以上培养基pH均为5.1～5.4。     

蝴蝶兰无菌播种及快繁技术研究

以蝴蝶兰无菌种子为材料,对蝴蝶兰种子消毒和萌发、原球茎诱导、增殖和分化培养、芽生根培养基、壮苗培养基配方进行研究。结果表明,种子经次氯酸钠和洗衣粉消毒,有利于促进种子萌发和原球茎的形成;最适合种子萌发的培养基为MS＋香蕉泥100g/L＋马铃薯50g/L＋NAA 0.5mg/L;原球茎的形成及增殖培养以MS＋6-BA 2.0mg/L＋NAA0.1mg/L＋香蕉泥100g/L为佳,分化培养基为MS＋6-BA 0.1mg/L＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥80g/L＋蔗糖20g/L＋活性炭2.0g/L＋卡拉胶7.0g/L。小苗生根培养基为MS＋NAA 0.1mg/L＋香蕉泥100g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L,生根率达98%以上;壮苗培养基为MS＋香蕉泥80g/L＋马铃薯汁50g/L＋蔗糖20g/L＋卡拉胶7.0g/L＋活性炭2.0g/L。经过适当驯化处理,将壮苗移栽到疏松的水草或苔藓基质中,注意温度、湿度及光照管理,成活率可达90%以上。     

大花蕙兰高频再生体系优化研究

为研究大花蕙兰(Cymbidium hybridum)的高频快繁再生体系,以大花蕙兰无菌原球茎、分化苗为材料,应用正交试验进行不同激素和添加物的优化筛选。结果表明院在1/2 MS+0.3 mg/L KT+0.5 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1 g/L活性炭的培养基上大花蕙兰的原球茎增殖效果最好,新增原球茎呈深绿色、形状饱满,增殖倍数达11倍;在1/2 MS+0.1 mg/L6-BA+0.4 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1g/L活性炭的培养基上茎叶分化效果最好,分化丛生芽数量最多、颜色深绿色、生长健壮,分化倍数达6.1倍;在1/2 MS+0.2 mg/L GA3+1.0mg/L NAA+0.2 mg/L IBA+25 g/L蔗糖+7 g/L琼脂+1 g/L活性炭的培养基上生根效果最好,生根数最多,平均生根数达4条,根系生长强健。     

灰岩金线莲种子萌发与组培快繁技术研究

【目的】利用灰岩金线莲种子无菌播种进行组培苗生产,为其工厂化组培育苗提供参考。【方法】采用灰岩金线莲种子为外植体,以MS或1/2MS为基本培养基,探讨不同激素组合对外植体进行无菌播种、原球茎增殖、丛生芽分化及生根壮苗的影响。【结果】采用0.1%升汞处理灰岩金线莲蒴果20 min,灭菌率可达100%,且种子萌发不受影响。在种子萌发培养基中添加香蕉泥有利于种子萌发,最适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;在原球茎增殖培养中,低浓度的6-BA和NAA有利于灰岩金线莲原球茎增殖,最适合原球茎增殖的培养基为1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥;丛生芽分化的最适培养为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭,原球茎分化丛生芽较多,生长势最佳;最适合灰岩金线莲生根壮苗的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.0 mg/L NAA+60 g/L香蕉泥+0.1%活性炭。【结论】利用灰岩金线莲种子进行无菌播种,通过原球茎增殖和分化,可获得大量优质组培苗,是实现工厂化育苗的理想途径。     

不同激素对怀山药不同外植体分化的影响

研究了6-BA、NAA和IBA对怀山药不同外植体分化和植株再生的影响。结果表明:以节为外植体,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5mg/L 6-BA+1.00 mg/L NAA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖培养基为最优组合,其分化率达100%;最适根块分化培养基是,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.4 mg/L IBA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖;最适无菌茎段分化培养基是,改良的MS+100 g/L香蕉+0.5 mg/L 6-BA+0.50 mg/L NAA+0.8 mg/L IBA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖;最适无菌叶柄分化培养基是,改良MS+100 g/L香蕉+1.5 mg/L 6-BA+0.25 mg/L NAA+0.5%琼脂+0.5%活性炭+3%蔗糖。     

新疆阿拉尔地区铁皮石斛组培快繁技术初探

通过试验研究,初步建立起以铁皮石斛种子做外植体的组培快繁体系。铁皮石斛种子萌发适宜的培养基配方为MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭0.05%+琼脂0.50%;原球茎增殖分化培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+香蕉泥8.00%+琼脂0.50%,生根培养基为1/MS+NAA 0.2 mg/L+香蕉泥8.00%+活性炭0.05%+琼脂0.5%,生根率达100.00%。     

春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术研究

为探索春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术提供参考,以♀大花蕙兰‘冰瀑’×♂春兰‘新春梅’杂交所结果荚为试验材料,分别进行基本培养基、GA₃、琼脂、AC 4因素3水平的杂交种子无菌萌发试验,基本培养基、6-BA、NAA 3因素3水平的杂交种原球茎增殖试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的杂交种原球茎分化试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的壮苗生根培养试验,筛选适宜的培养基。结果表明：1)适宜杂交种子无菌萌发的培养基为MS+GA₃0.50 mg/L+琼脂4.5 g/L+蔗糖20 g/L+AC0.50 g/L+蛋白胨1 g/L,平均萌发启动时间为50 d,平均萌发率为88.7%。2)适宜杂交种原球茎增殖的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂4.0 g/L+蛋白胨1.0 g/L,增殖系数达12.5。3)适宜杂交种原球茎分化的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/...     

不同激素浓度配比对竹叶石斛种子快繁的影响

以竹叶石斛(Dendrobium hancockii Rolfe)的成熟种子为实验材料,以1/2MS为基本培养基,研究了不同浓度激素配比对竹叶石斛的原球茎增殖分化和生根壮苗培养的影响,以期建立竹叶石斛的种子快繁技术,结果表明:竹叶石斛成熟种子在1/2MS萌发培养基中,45 d即可出现大量原球茎,种子萌发率高达95%;在原球茎分化阶段,最佳培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,p H 5.8,50 d左右即可分化成小植株;在生根壮苗培养阶段,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.7 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,p H 5.8,45 d左右组培苗长到3 cm以上,根的条数为2条以上,叶2片以上。利用组织培养技术进行竹叶石斛种子快速繁殖,以1/2MS为基本培养,从种子萌发到无菌苗生根并达到炼苗移栽要求所需的时间在150 d以内,这大大加快了竹叶石斛种子繁殖速度,为竹叶石斛的快速生产提供了便利。     

不同激素浓度配比对竹叶石斛种子快繁的影响

以竹叶石斛(Dendrobium hancockii Rolfe)的成熟种子为实验材料,以1/2MS为基本培养基,研究了不同浓度激素配比对竹叶石斛的原球茎增殖分化和生根壮苗培养的影响,以期建立竹叶石斛的种子快繁技术,结果表明:竹叶石斛成熟种子在1/2MS萌发培养基中,45 d即可出现大量原球茎,种子萌发率高达95%;在原球茎分化阶段,最佳培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,p H 5.8,50 d左右即可分化成小植株;在生根壮苗培养阶段,最佳生根培养基为1/2MS+NAA 0.7 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,p H 5.8,45 d左右组培苗长到3 cm以上,根的条数为2条以上,叶2片以上。利用组织培养技术进行竹叶石斛种子快速繁殖,以1/2MS为基本培养,从种子萌发到无菌苗生根并达到炼苗移栽要求所需的时间在150 d以内,这大大加快了竹叶石斛种子繁殖速度,为竹叶石斛的快速生产提供了便利。     

大岩桐的组织培养

为探索大岩桐快速繁殖方法,以大岩桐嫩芽为试验材料,研究附加不同浓度6-BA的MS培养基对大岩桐愈伤组织形成及芽分化的影响。结果表明:大岩桐最适宜的愈伤组织诱导培养基为MS+6-BA0.3 mg/L+NAA 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L;最适宜的芽分化培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L,芽分化率达88%;添加活性炭抑制了大岩桐植株的增殖和生长。     

野生鼓槌石斛的有性扩繁方法

[目的]采集野生鼓槌石斛的成熟蒴果,利用组培无菌快繁技术获得大量野生鼓槌石斛种苗。[方法]将野生鼓槌石斛成熟蒴果消毒灭菌,并将其种子播种于MS培养基上获得大量原球茎,然后分别转接到不同的培养基上,最后在不同阶段的培养基上筛选出适合野生鼓槌石斛分化和生长的培养基。[结果]将野生鼓槌种子在MS培养基上培养,种子萌发率达95%以上;最利于原球茎分化的培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+土豆泥4%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,成苗率高、出苗整齐;最适幼苗生长培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,小苗粗壮、叶片浓绿;最适生根壮苗培养基为3/4MS+NAA 0.8 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+香蕉汁7%+土豆泥2%+AC 0.5 g/L+蔗糖30 g/L+琼脂5 g/L,瓶苗生根多而粗壮,叶片浓绿生长整齐。[结论]该研究为野生鼓槌石斛资源的收集与保存提供了参考。     

梳唇石斛快速繁殖技术

通过组织培养方法研究梳唇石斛快速育苗技术,利用不同培养基诱导种子直接萌发形成原球茎,并进一步分化获得再生植株。结果表明,种子萌发原球茎诱导的最佳培养基:1/2MS NAA 0.2 mg/L;最佳原球茎增殖培养基:1/2MS 6-BA 0.5 mg/L;最佳生根培养基:1/2MS 香蕉泥100 g/L NAA 0.5 mg/L。     

云南独蒜兰×陈氏独蒜兰种子萌发与幼苗生长研究

以云南独蒜兰(Pleione yunnanensis)×陈氏独蒜兰(P.chunii)授粉120 d成熟未开裂蒴果的种子作为试验材料,研究不同浓度6-BA、NAA和花宝2号对其种子萌发及幼苗生长的影响。结果表明:种子萌发的适宜培养基为3 g/L花宝2号+0.5 mg/L 6-BA+1 mg/L NAA+20 g/L蔗糖+50 g/L马铃薯+50 g/L香蕉+2 g/L蛋白胨+2 g/L活性炭+7 g/L琼脂,萌发率(94.45%)显著高于其他处理组,且萌发后植株生长速度最快;NAA对该杂交种无菌萌发具有明显的促进作用,而细胞分裂素6-BA则在一定程度上抑制其萌发。针对假鳞茎膨大和植株高度2个指标,幼苗生长的适宜培养基为1 g/L花宝2号+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+25 g/L蔗糖+1 g/L蛋白胨+1 g/L活性炭+7 g/L琼脂,在所研究的3个因素中花宝2号对该杂交种假鳞茎膨大作用最大,NAA对植株高度促进作用最大。     

铁皮石斛茎段类原球茎的诱导及植株再生

以铁皮石斛幼嫩的带节茎段为外植体,通过研究植物生长调节剂对类原球茎诱导、增殖和分化的影响,筛选出适宜铁皮石斛类原球茎植株高效再生的条件。结果表明:类原球茎诱导的最适培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 1.0 mg/L+土豆泥60 g/L+活性炭0.5 g/L+蔗糖25 g/L+琼脂6.5 g/L,茎段接种45 d后,类原球茎诱导率为97.78%;类原球茎增殖和分化的最适培养基为MS+6-BA 2.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L,培养30 d,增殖倍数为7.94,培养至60 d,丛生芽诱导率为97.33%;再生苗在MS+NAA 0.5 mg/L培养基中培养30 d,生根率达到100%。