胶体金免疫层析技术在兽药残留检测中的应用及发展前景

胶体金免疫层析技术作为一种新型免疫学快速诊断和检测技术,不仅具有敏感、特异、便捷、快速等特点,而且适合基层和现场使用。目前,该技术已广泛应用于兽药残留方面。文章就胶体金免疫层析法的原理、兽药残留的危害及免疫胶体金技术在畜禽产品兽药残留检测中的应用及其存在的问题和发展前景作以阐述。     

胶体金免疫层析技术在水产品快速检测中的应用

胶体金免疫层析技术是集胶体金标记技术、免疫检测技术和层析分析技术于一体的免疫检测技术。该技术具有快速方便、灵敏度高、特异性强、无需辅助试剂和仪器、肉眼可观察结果、结果可长期保存等特点,已广泛应用于生物学的各个领域。主要阐述了胶体金免疫层析技术的基本原理、特点及分类,并简要介绍了该方法在水产品药物残留检测中的应用及其发展前景。     

拟除虫菊酯类农药残留快速检测技术研究进展

文章阐述了拟除虫菊酯类农药在农副产品生产中的应用以及该类农药在食品中的残留现状,对拟除虫菊酯类农药残留常规检测分析方法和免疫分析方法进行了论述,指出这些分析方法在处理大量样品以及在高效、经济和快速检测方面仍存在缺陷,并对酶联免疫技术和免疫胶体金层析技术的快速检测研究进行了讨论。     

胶体金免疫层析技术及其在畜禽疫病诊断中的应用

胶体金免疫层析技术是一种新型的固相免疫标记检测技术,具有快速简便、特异性强、成本低、结果判断直观等优点,被广泛应用于动物疫病诊断。该文对胶体金免疫层析技术的原理、特点、分类以及在动物疫病诊断中的应用进行综述。     

胶体金免疫层析技术在食品安全现场快速检测中的应用

胶体金免疫层析技术具有操作简单、价格低廉、特异性和灵敏度较高、肉眼易判断、检测时间短等特点,非常适合用于食品安全现场快速检测。本文从动物源性食品及植物源性食品两方面,对利用胶体金免疫层析技术进行食品安全基层监管以及食品企业原料现场快速检测应用研究进行了综述,并对胶体金免疫层析技术应用发展进行了展望。     

胶体金免疫层析技术在水产品药残快速检测中的应用

近年来发展成熟的胶体金免疫层析快速检测技术,能从养殖到销售的各个环节对水产品中的药残进行监管。阐述了胶体金免疫层析技术的原理、优点以及在水产品药残检测中的应用,以供参考。     

β-内酰胺类和四环素类多残留二联试纸条质量验证试验

[目的]为了更加快速、方便地检测牛奶中的抗生素残留,验证牛奶质量,保证检测结果的有效性。[方法]对β-内酰胺类和四环素类多残留二联试纸条进行质量验证试验,主要验证了检测限、假阳性率、假阴性率3个质量参数。[结果]二联试纸条检测阈值与检测限一致,没有假阴性结果出现,假阳性率也在国家规定范围内。[结论]验证的β-内酰胺类和四环素类多残留二联试纸条可用于牛奶中12种β-内酰胺类抗生素和4种四环素类抗生素的检测。     

胶体金免疫层析技术及其在动物疫病诊断中的应用

胶体金免疫层析技术作为一种新型的检测技术已经开始在动物疾病诊断中加以应用,笔者对该技术的工作原理、应用情况进行了综述。     

用生物膜干涉技术快速检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留

[目的]采用生物膜干涉技术建立快速检测牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的方法.[方法]首先通过疏水作用力在APS光线生物传感器探头末端固定氨苄青霉素-BSA偶联物,结合40 nm纳米金标记的β-内酰胺类抗生素受体,建立了检测牛乳中β-内酰胺类抗生素的方法.[结果]生物膜干涉技术检测牛乳中的β-内酰胺类抗生素的灵敏度比胶体金免疫层析试纸条的灵敏度高1倍.该技术还具有良好的特异性,与浓度为1 000 ng/ml的黄曲霉毒素M1、庆大霉素、卡那霉素、链霉素、泰乐菌素、氯霉素、三聚氰胺无交叉反应.[结论]研究表明,金标记BLI检测β-内酰胺类抗生素的定量范围较小,并不适用于实际生产中的定量检测,但却是一种简便、快捷的定性检测方法,可用于牛乳中β-内酰胺类抗生素残留的快速检测.     

一种新型快速的牛奶抗生素检测系统

随着抗生素在畜牧业中的广泛应用．牛奶中抗生素残留成为日益突出的问题。牛奶中若含有抗生素．对长期饮用者来说无疑等于长期服用小剂量的抗生素．而对于抗生素有过敏体质的人服用残留抗生素的牛奶后会发生过敏反应,如皮疹、过敏性休克等．即使是正常体质的饮用者也会由于服用残留抗生素的牛奶而破坏肠道内的菌群平衡．引发胃肠疾病和生理紊乱,降低人体免疫功能。因此,牛奶中抗生素的残留严重危害人体的身体健康和生命安全．世界各国纷纷建立相关检测标准和检测方法．严把牛奶产品安全质量关。适于现场快速检测牛奶中抗生素的方法在各级质量监督、乳品企业、牧场、奶站等部门受到普遍欢迎．     

“瘦肉精”的危害、检测技术和监管

介绍了＂瘦肉精＂的相关概念及其危害,并从感官辨别和实验室检测两方面描述＂瘦肉精＂的残留检测方法,重点阐述了胶体金免疫层析技术、酶联免疫吸附技术、高效液相色谱法和气相色谱-质谱联用法4种常用＂瘦肉精＂检测方法的基本原理、检测步骤和技术特点,最后汇综了监管建议。     

生物膜干涉技术快速定性检测牛乳中喹诺酮类药物残留

[目的]基于生物膜干涉技术建立一种快速检测牛乳中喹诺酮类抗生素残留的方法。[方法]通过疏水作用力在APS光线生物传感器探头末端固定环丙沙星-BSA偶联物,结合纳米金-喹诺酮类抗生素单克隆抗体偶联物,建立了检测牛乳中喹诺酮类抗生素的方法。[结果]所建立的检测方法具有良好的灵敏度,比免疫层析法至少高出1倍。该检测方法还具有良好的特异性．与浓度1000ng／ml的黄曲霉毒素M1、青霉素G、头孢噻呋、庆大霉素、卡那霉素、链霉素、泰乐菌素、氯霉素、三聚氰胺无交叉反应。该方法还具有良好的重复性,不同基质牛乳检测对检测结果无显著影响。分别采用免疫层析试纸条和建立的金标记BLI检测方法检测43份牛乳（原奶）样品中的喹诺酮类抗生素残留,二者检测结果一致。[结论]生物膜干涉技术检测牛乳中的喹诺酮类抗生素为一种简便、快捷的检测方法,可以用于牛乳中喹诺酮类抗生素残留的快速定性检测。     

水产品中恩诺沙星残留胶体金免疫层析技术的研究

[目的]制备一种特异、快速、便捷的检测虾及鱼肉中恩诺沙星残留的胶体金免疫层析试纸条。[方法]用柠檬酸三钠还原法制备的胶体金标记恩诺沙星多克隆抗体,喷于试纸的金标垫。将ENR-OVA(恩诺沙星和卵清白蛋白的偶联物)和纯化的羊抗兔IgG分别喷于试纸的T(检测线)处和C(质控线)处,通过挑选试纸条材料和调试工艺参数,并最终组装成试纸条。[结果]制备的试纸条检测体系方法的检出限为0.9 ng/ml。试纸条对虾及鱼肉中的恩诺沙星残留的检出限分别为5和10 ng/g。[结论]制备的恩诺沙星胶体金检测试纸适用于现场实际样品恩诺沙星残留水平检测,具有良好的应用前景。     

猪瘟胶体金快速诊断试纸条的研制

采用柠檬酸钠还原法制备胶体颗粒,用猪瘟(CSF)抗体标记纯化,并包被在玻璃纤维膜上,另外将纯化的CSF抗体和羊抗鼠抗体包被在硝酸纤维膜上,组装成CSF快速检测条,对猪瘟病毒进行检测.结果表明:使用所研制的CSF快速检测条检测收集的70份待检样品,共检出猪瘟阳性病例26例,而经病毒分离鉴定阳性病例有28例,阳性符合率达92.8%;将5份阳性猪瘟病毒稀释后用试纸条和ELISA方法进行敏感性实验,结果表明,诊断试纸条的敏感性较高,用试纸条对鸽新城疫病毒、鸡减蛋综合症病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒进行检测,无交叉反应.     

五氯酚钠胶体金快速检测试纸条的研制

[目的]研制五氯酚钠胶体金快速检测试纸条。[方法]利用胶体金免疫层析技术,研制一种快速检测猪肉、鸡肉、鱼、虾、水质中五氯酚钠的试纸条。[结果]经测试,该试纸条对猪肉、鸡肉、鱼、虾的检测限为1μg/kg,对水质的检测限为2μg/kg,检测时间为15 min,假阳性率和假阴性率均为0。[结论]该方法准确、可靠,使用简便,适合大量样品的现场检测。     

同时检测牛奶中喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法研究

【目的】喹诺酮类药物和庆大霉素均为高效、广谱抗菌药物,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有显著的抗菌效果,是中国畜牧业和水产业中常用的两类兽药。由于这两类药物在动物源性食品中的残留可能导致对人类健康的危害,因此,为了保护消费者的健康,研究和制定动物源性食品中同时检测这两类药物的残留检测方法对完善中国的食品安全监测体系具有重要意义。【方法】建立了同时检测牛奶中13种喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并对喹诺酮类和庆大霉素单克隆抗体按比例进行混合标记。同时,采用方阵法系统研究了胶体金标记这两类抗体时的pH值和抗体用量对灵敏度的影响,并对这两类药物抗原的包被条件进行选择确定。在此基础上研发出可同时检测牛奶中13种喹诺酮类药物和庆大霉素的胶体金快速检测试纸条,试纸条采用直接竞争法原理。【结果】该方法可同时检测恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氟甲喹、培氟沙星、氧氟沙星、依诺沙星、噁喹酸、麻保沙星、氟罗沙星、奥比沙星、达氟沙星和洛美沙星这13种喹诺酮类药物和庆大霉素,对其他喹诺酮类药物如：沙拉沙星、二氟沙星、司帕沙星、帕珠沙星等无交叉反应,同时对其他氨基糖苷类药物如：链霉素、新霉素、卡那霉素等也无交叉反应。该试纸条对牛奶中这13种喹诺酮类药物和庆大霉素的检测限均为20 ng·mL^-1,完全满足国家对这两类药物的残留限量要求。牛奶样本直接检测,无需处理,整个检测过程5 min内完成。【结论】采用该方法和HPLC-MS/MS对60份牛奶盲样进行比对试验,阳性样品全部检出,同时筛选方法未出现假阳性和假阴性现象,二者的测定结果基本相符,表明该方法准确可靠,适用于现场大批量样本的快速检测和筛选。实际操作过程中,可以采用胶体金免疫层析对样品进行现场快速初筛;筛选的疑似阳性样品,可以采用HPLC-MS/MS方法对样品中QNS和GEN的含量进一步确认。     

水产品中孔雀石绿·结晶紫及其代谢物残留快速检测试纸条的研制

[目的]研究开发用于现场检测水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留的快速检测试纸条。[方法]采用胶体金免疫层析技术,通过利用不同的样品垫及反应模式进行试验,研制出适合于现场检测水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢物残留的快速检测试纸条。[结果]该试纸条对孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫、隐性结晶紫的检测限均为2μg/L,检测所需时间约10 min。[结论]该试纸条操作简便、快速、检测灵敏度高,试验结果一目了然,可作为孔雀石绿、结晶紫及其代谢物在水产品中残留检测的有效筛查手段。     

胶体金免疫层析法快速检测水产品中四环素类药物残留

为建立用于快速检测水产样品中四环素类药物残留含量的胶体金免疫层析检测试剂,采用免疫竞争法,将抗四环素单克隆抗体-胶体金复合物包被在胶体金结合垫上,并将人工合成的四环素抗原包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线(T线),其残留药物与待测样品中四环素竞争结合胶体金标记的四环素单克隆抗体,最终能以颜色直观显示检测结果。检测水产品试样时,试剂灵敏度最低值可达100 ng/mL,仅需5~10min,与金霉素、土霉素、强力霉素等四环素族抗生素有很强的交叉反应,故可同时检测四环素族中几种主要抗生素,而与沙丁胺醇、莱克多巴胺等其他兽药无交叉反应。试验证明检测试剂具有较高的灵敏度及特异性,操作便捷,稳定可靠,可作为四环素残留现场监控的有效筛检手段。