猪流行性腹泻病毒抗体间接ELISA检测方法的建立与应用

【目的】建立2种猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体间接ELISA检测方法.【方法】分别以GD-1株PEDV灭活全病毒和原核表达的COE融合蛋白作为包被抗原,确定最佳ELISA条件,检验其重复性、特异性等,并进行临床应用.【结果和结论】确定了2种ELISA方法的最佳条件,重复性试验显示变异系数分别小于4.60%和5.30%,特异性试验检测口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清均为阴性,并具有良好的稳定性和较长的保存期.临床样品检测结果显示,223份血清样品总阳性率分别为97.3%(217/223)和98.6%(220/223),2种方法检测的阳性率相近,具有良好的检出率和很高的符合率,为PEDV的抗体检测及流行病学调查提供了一种技术手段.     

二乙烯亚胺对水貂肠炎细小病毒灭活效果的研究

为研究二乙烯亚胺(BEI)对水貂肠炎细小病毒的灭活效果,采用BEI终浓度为0.003mol/L、0.002mol/L、0.001mol/L、0.0005mol/L,灭活温度为30℃,灭活时间为24h、48h、72h条件下,对水貂肠炎细小病毒进行灭活试验。通过F81细胞传代观察细胞病变和血凝试验检测灭活效果;用水貂检验BEI灭活水貂肠炎细小病毒所制疫苗的安全性,通过检测接种水貂的血凝抑制抗体,评价BEI灭活细小病毒所制疫苗的免疫效果,同时与甲醛灭活的疫苗进行免疫效果比较。结果表明,BEI终浓度0.002mol/L、30℃24h是灭活水貂肠炎细小病毒的适宜参数,BEI灭活工艺制备的水貂肠炎细小病毒灭活疫苗具有良好的安全性,BEI灭活工艺与甲醛灭活工艺的免疫抗体水平差异不显著(P0.05)。本研究为水貂肠炎细小病毒灭活工艺的研究提供了理论依据。     

伪狂犬活/灭活病毒接种小鼠诱导免疫效力及差异因子比较

[目的]本研究旨在比较活/灭活病毒进入体内后对免疫系统活化的差异，为免疫增强剂的筛选和评价建立高效动物模型。[方法]本试验利用伪狂犬病毒(PRV)Bartha-K61株建立小鼠伪狂犬人工感染模型，筛选活/灭活病毒接种小鼠后免疫相关差异因子。将PRV Bartha-K61活毒以不同剂量、不同方式感染小鼠，通过计算小鼠存活率确定最佳感染剂量与感染方式；将筛选的最佳剂量的伪狂犬病毒活毒与相同剂量下灭活病毒按照前述筛选的最佳感染方式接种小鼠，利用ELISA试剂盒检测免疫7 d后小鼠血清中TNF-α、IL-1β、IFN-β和IL-6水平；利用PRV gB ELISA检测免疫7 d后小鼠血清PRV特异性gB抗体水平；利用灭活PRV作为特异性抗原进行淋巴细胞增殖试验并计算各组淋巴细胞刺激指数(SI)。[结果]在保证小鼠存活的前提下，6～8周龄小鼠的PRV的安全感染剂量为5×10⁴ TCID50;同等剂量下，相比于肌肉和腹腔注射，皮下注射为最安全的感染方式；同等剂量的活毒和灭活病毒接种小鼠后，与灭活病毒组相比，活病毒感染7 d后小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IFN-β水平显著...     

猪链球菌病单价与多价灭活苗的免疫效果

分别用猪链球菌C、D、E血清群菌株制成两种单价灭活苗S1(C群菌株苗)、S2(D群菌株苗);一种二价灭活苗S3(C、D群菌株苗)和一种三价灭活苗S4(C、D、E群菌株苗)。四种灭活苗经免疫家兔和断奶仔猪后,比较血清抗体水平,四种疫苗的各群抗体水平均能规律性地转阳,其抗体水平间无明显差异。四种疫苗分别免疫小鼠2周后采用强毒进行攻击,它们对相应的血清群强毒株的攻击均能保护,且保护数无明显差异,结果显示多价灭活苗能够保护相应的致病血清群强毒株的攻击,其保护效果与单价灭活苗无差异。     

动物抗血清制品的安全性探讨及相关技术概述

对动物抗血清制品的安全性进行探讨,着重对抗血清中病原体的处理、病毒灭活效果的评价和病毒灭活对抗血清的影响等方面进行阐述.     

从死亡丹顶鹤分离到的一株病毒的初步鉴定 Ⅰ.病毒理化特性的研究

从死亡丹顶鹤分离到的一株病毒在鹅胚原代成纤维细胞和鸭胚原代成纤维细胞上产生明显的细胞病变。病毒在细胞上的复制受到DNA合成抑制剂(5—溴尿嘧啶2'—脱氧核苷)抑制,感染细胞经吖啶橙染色,细胞核内出现黄绿色荧光。病毒对乙醚、氯仿、胰酶及热处理敏感,pH3.0能使之完全灭活,1mol/LMg++对病毒没有热稳定怍用。病毒粒子在CsCl里的浮密度为1.31g/ml,对多种动物及人O型血红细胞无凝集作用。根据该病毒的理化特性判断属疱疹病毒。作者将此暂称为丹顶鹤疱疹病毒(Grus japonensis herpesvirus——GJHV)。     

禽流感的防治措施

1.预防:采用多株新城疫系列灭活苗或禽流感灭活苗进行免疫. 2.一旦发生可疑禽流感时,及早确诊,对所分离的禽流感病毒的血清亚型、毒力和致病性进行鉴定,按照动物卫生法和农业部的要求,严格执行防疫措施. 3.引进禽类及其产品时要选自无禽流感的养鸡场.     

新城疫病毒灭活苗免疫佐剂HVJ-E的研究

将SPF鸡分为4组,分别注射PBS、仙台病毒囊膜(HVJ-E)、新城疫病毒(NDV)灭活苗(KV)和HVJ-E+KV,于免疫后7、14和21d采血,测定血清中IFN-β、IFN-γ及抗NDV抗体的水平;免疫后21d以NDV强毒进行攻毒,攻毒后2、4、7和10d采集口咽腔、泄殖腔棉拭子分离病毒,以探讨HVJ-E作为NDV灭活苗佐剂的效果。结果表明:HVJ-E能显著提高NDV灭活苗的抗体产生水平并促进干扰素的分泌(P0.05),添加HVJ-E佐剂的灭活苗的保护率为100%,排毒率为0%,显著提高免疫鸡的保护率。证明HVJ-E具有很好的免疫佐剂特性。     

鹅的推荐免疫程序

<正>一、种鹅的免疫程序1.1～3日龄。抗雏鹅新型病毒性肠炎病毒—小鹅瘟二联高免血清0.5毫升(或抗体1～1.5毫升)皮下注射。2.7日龄。副粘病毒灭活苗皮下注射0.25毫升(无此病流行地区可免除)。3.4周龄。鹅巴氏杆菌蜂     

鸡肾型传染性支气管炎的诊断与防治

甘鸡场鸡发生以呼吸道及肾病变为主的疾病经流行病学调查、病理剖检、病毒分离、电镜观察生物学特性及理化特性试验，血清中和试验，动物回归等确诊为肾型传染性支气管炎。采用分离毒鸡组织灭活苗结合Ａｕｓｔ－Ｔ株灭活油乳苗有效地防治了该病。