野牡丹花粉生活力与贮藏特性研究

以野牡丹(Melastoma candidum)花粉为材料,利用扫描电镜观察其形态结构,筛选花粉活力测定的最佳方法,探讨光照及不同贮藏条件对花粉萌发的影响.结果表明:野牡丹异型雄蕊花粉的形态无显著差异,花粉粒赤道观为长椭圆形,极面观为三裂圆形,极轴P为33.04(±1.37)μm,赤道轴E为15.05(±0.88)μm;与TTC染色法相比,离体培养基法测定花粉生活力更可靠;紫红色雄蕊和黄色雄蕊上的花粉生活力无显著差异,但二者萌发最适培养基存在差异,适合紫红色雄蕊的最佳萌发培养基为蔗糖50 mg/L+硼酸5 mg/L+CaCl25 mg/L,适合黄色雄蕊的培养基为蔗糖50 mg/L+硼酸10 mg/L+CaCl2 20 mg/L;光照对花粉萌发无显著影响;不同低温条件贮藏过程中花粉均出现短暂休眠现象,贮藏温度以-7℃和-23C优于-4℃,贮藏60 d时仍保持较高花粉活力.     

黄花槐花粉生活力测定研究

以黄花槐花粉为试材,利用I2-KI染色法、TTC(氯化三苯基四氮唑)染色法、培养基萌发试验法对花粉生活力进行测定,并研究了不同浓度的Ca2+对花粉萌发和花粉管伸长的影响。结果表明,I2-KI染色法、TTC染色法均不适合测定黄花槐花粉生活力;不同浓度的蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,蔗糖20mg/L+硼酸2.0mg/L培养基花粉的萌发达30.2%;适当浓度的Ca2+能促进花粉萌发和花粉管的伸长,当Ca2+浓度为1.6×10-4mg/L时,花粉的萌发率最高,花粉管伸长最快。     

离体萌发法测定垂丝海棠花粉生活力的研究

应用离体萌发法对垂丝海棠的花粉生活力进行测定,同时研究了不同浓度的钙对花粉萌发和花粉管生长的影响。研究结果表明,垂丝海棠花粉萌发和花粉管生长的最佳培养基是:0.8 g琼脂+15 mg/L蔗糖+2.0 mg/L硼酸;低浓度的钙对花粉萌发和花粉管的生长有促进作用,高浓度的钙对花粉萌发和花粉管的生长有抑制作用;培养基中的Ca(NO3)2浓度为1.6×10-5mg/L时最适合垂丝海棠花粉萌发和花粉管的生长。     

富宁林檎花粉离体和原位萌发观察

【目的】研究富宁林檎花粉离体和原位萌发特性,为杂交育种奠定基础,提供理论依据。【方法】采用凹玻片培养法对富宁林檎花粉的离体萌发条件和萌发情况进行观察,用苯胺蓝染色和荧光显微镜观察花粉原位萌发。【结果】富宁林檎花粉离体萌发最佳培养基是15%蔗糖+0. 01%硼酸,最适温度为25℃,花粉萌发率最高,为65. 82%;有无光照对花粉萌发没有影响;花粉萌发率单一的15%蔗糖要显著高于0. 01%硼酸,分别为56. 01%和26. 41%。原位萌发时,自花授粉后2 h,柱头上有少量花粉粒附着,4 h开始萌发;授粉后4～8 h,大量花粉粒在柱头上附着并萌发,10 h时花粉管进入柱头;授粉后1 d,花粉管生长至柱头1/5～2/5处,并有胼胝质沉淀出现;授粉后2 d,花粉管生长至柱头1/2处;授粉后3～10 d,花粉管生长出现中部膨大、顶端变细、缠绕扭曲和回折生长等不亲和现象,并且花粉管生长始终停留在花柱1/2处。异花授粉后2 h就有大量花粉附着在柱头上,8 h后花粉管进入柱头,10 d后花粉管到达花柱基部并进入胚中;花粉管在生长过程中有胼胝质沉淀出现。【结论】富宁林檎花粉离体萌发率高、活性强。富宁林檎存在自交不亲和现象,主要原因是自交花粉管在花柱中部生长异常,致使花粉管不能到达胚珠以完成受精。     

紫穗槐花粉生活力测定方法的比较

利用I2-KI染色法、TTC染色法、培养基萌发试验法对紫穗槐花粉生活力进行测定,并分析不同Ca2 、蔗糖和硼酸浓度对花粉萌发和花粉管伸长的影响,结果表明,I2-KI染色法、TTC染色法均不适用于测定紫穗槐花粉生活力;不同浓度的蔗糖和硼酸对花粉的萌发有促进作用,浓度分别为20mg/L、2.0mg/L时花粉萌发率达到最大值,分别为17.6%和19.8%;适当Ca2 浓度能促进花粉萌发和花粉管的伸长,Ca2 浓度为1.6×10-6mg/L时,花粉的萌发率最高,花粉管伸长最快。     

大红火龙果花粉离体萌发条件的优化及其活力测定方法筛选

为大红火龙果人工授粉及其丰产栽培、杂交育种及果实品质改良提供参考,采用单因素试验,研究不同培养基组分对花粉萌发的影响,并运用离体萌发法测定花粉萌发率;比较TTC染色法、醋酸洋红染色法、亚历山大红染色法和I_2-KI染色法测定大红火龙果的花粉活力,筛选准确测定大红火龙果花粉活力的最佳方法。结果表明:大红火龙果花粉离体萌发最佳培养基组分为Ca(NO_3)_2·4H_2O 0.3g/L+MgSO_4·7H_2O 1.2g/L+KNO_3 0.1g/L+15%蔗糖+700mg/L硼酸+1%琼脂,pH为6.7,此条件下花粉萌发率高,为(43.9±6.27)%,且利于花粉管伸长。醋酸洋红法测定的大红火龙果花粉活力为(37.67±4.18)%,与离体萌发法测定的萌发率无显著差异,为花粉活力的最佳测定方法。     

西府海棠花粉生活力测定

[目的]研究分析了不同染色方法和离体萌发法对西府海棠花粉生活力的影响,以期为选出影响西府海棠花粉生活力的最佳方法提供理论依据。[方法]以西府海棠花粉为试材,利用碘-碘化钾染色法、醋酸洋红染色法、离体萌发法和TTC（氯化三苯基四氮唑）染色法对花粉生活力进行测定,并研究了不同浓度的钙对花粉萌发和花粉管生长的影响。[结果]适合西府海棠花粉萌发和花粉管生长的最佳培养基是：0.8 g琼脂＋15.0 mg/L蔗糖＋2.0 mg/L硼酸;低浓度的钙对花粉萌发和花粉管的生长有促进作用,高浓度的钙对花粉萌发和花粉管的生长有抑制作用,培养基中Ca（NO3）2浓度为1.6×10-5mg/L时最适合西府海棠花粉萌发和花粉管的生长。[结论]3种染色方法均不适合测定西府海棠花粉生活力。     

垂丝海棠花粉生活力测定的研究

对垂丝海棠花粉的生活力进行了测定,研究了不同培养基和不同浓度Ca2 对花粉萌发和花粉管生长的影响.结果表明,垂丝海棠花粉萌发的最佳培养基是琼脂0.8 g 蔗糖15 mg/L 硼酸2.0 mg/L;低浓度Ca2 促进了花粉萌发和花粉管的生长,高浓度Ca2 抑制了花粉萌发和花粉管的生长,培养基中Ca2 浓度为1.6×10-5 mg/L时最适合垂丝海棠花粉萌发和花粉管的生长.     

授粉方法对克服菊科近缘属杂交受精前障碍的影响

【目的】为克服菊科近缘属杂交受精前障碍,探究不同授粉方法对菊花柱头上异缘花粉附着及萌发的影响.【方法】以太行菊属长裂太行菊和地被菊‘赛牡丹’为材料,以常规授粉为对照,采用不同液体介质(蔗糖、蔗糖+Ca~(2+)、蔗糖+硼酸)混入花粉和不同浓度NaCl处理柱头,授粉后24 h内用荧光显微观察柱头上花粉附着、萌发及花粉管生长情况.【结果】授粉后8 h,100 mg/L蔗糖花粉的附着数、萌发数最大,分别为对照的4.08倍、1.09倍;授粉后2 h,0.1 mg/L Ca~(2+)处理附着及萌发的花粉最多,分别为8.1、3.6粒;授粉后1 h,0.025 mg/L硼酸处理花粉的萌发数显著多于其他处理,不同浓度硼酸处理后的花粉附着量均低于对照;8%NaCl处理柱头0.5 h,授粉后24 h,花粉附着数及萌发数分别为32粒、2.4粒,显著多于其他处理,且花粉管生长正常.【结论】0.025 mg/L硼酸对花粉萌发表现出一定的促进作用.100 mg/L蔗糖、0.1 mg/LCa~(2+)、8%NaCl处理柱头均可显著促进长裂太行菊柱头上异缘花粉附着、萌发及花粉管生长,有利于克服太行菊属和菊属杂交受精前障碍.     

大花紫薇开花及花粉特性研究

[目的]研究大花紫薇的开花习性及花粉萌发特性。[方法]观测了大花紫薇花朵的开放过程和花粉管的萌发过程,并采用离体萌发法测定花粉生活力。[结果]大花紫薇在清晨4:30花朵萼片开裂,7:00花瓣全部展平,花药开裂,这时柱头上分泌大量粘液,为人工授粉的最佳时间;硼酸和蔗糖对大花紫薇花粉的离体萌发影响显著,萌发率最高的组合为蔗糖150g/L+硼酸20 mg/L+CaCl_2 10mg/L;荧光显微镜观察发现,大花紫薇开花后4 h大量花粉粒萌发,花后6 h大量花粉管进入花柱内约1/4处,花后12 h花粉管集中成束前进,约到达花柱1/2处,花后24 h大量花粉管集中成束进入子房,进而完成受精产生种子。[结论]该研究为进一步利用大花紫薇开展育种工作提供了依据。     

阿月浑子与黄连木远缘杂交不亲和原因分析

【目的】探明阿月浑子与黄连木远缘杂交是否存在授粉障碍。【方法】以阿月浑子和黄连木杂交组合为材料,以阿月浑子自交组合为对照,利用扫描电镜技术观察父本花粉的形态特征,采用离体萌发试验对父本花粉萌发率和活力进行测定,采用压片法对不同授粉组合的花粉管生长动态进行荧光显微观察。【结果】阿月浑子T-491花粉极面观可见4个萌发孔,外壁具稀疏刺状颗粒;黄连木花粉极面观萌发孔仅见2个,外壁有较密刺状颗粒分布;黄连木花粉极轴长和赤轴长分别为53.84 μm和44.85 μm,均大于阿月浑子T-491雄株花粉。用于授粉的父本黄连木和阿月浑子T-491的花粉萌发率分别为77.3%和84.38%,花粉活力分别为82.4%和89.14%。杂交组合黄连木花粉授粉4 h后开始少量萌发,授粉12 h后花粉管进入花柱,授粉48 h后花粉管进入子房,授粉72 h后到达胚囊。自交组合阿月浑子T-491花粉授粉2 h后即开始大量萌发,6 h后花粉管进入花柱,12 h后花粉管到达花柱基部,24 h后花粉管进入子房;与自交组合相比,杂交组合的黄连木花粉萌发和花粉管生长速度相对滞后,并伴有花粉管弯曲、膨大变粗、花柱中有大量不规则胼胝质沉积等现象。阿月浑子T-491授粉的自交组合坐果率为57%,而黄连木授粉的杂交组合坐果率为26%,杂交组合表现出较低的结实性。【结论】阿月浑子和黄连木远缘杂交的授粉过程存在一定障碍,可能是导致杂交坐果率低的原因之一。     

大红火龙果花粉离体萌发条件优化及花粉活力测定方法的筛选

为大红火龙果人工授粉及其丰产栽培、杂交育种及果实品质改良提供参考，采用单因素试验，研究不同培养基组分对花粉萌发的影响，并运用离体萌发法测定花粉萌发率；比较TTC染色法、醋酸洋红染色法、亚历山大红染色法和I2-KI染色法测定大红火龙果的花粉活力，筛选准确测定大红火龙果花粉活力的最佳方法。结果表明：大红火龙果花粉离体萌发最佳培养基组分为Ca(NO3)2﹒4H2O 0.3 g/L + MgSO4﹒7H2O 1.2 g/L + KNO3 0.1 g/L + 15% 蔗糖 + 700 mg/L硼酸 + 1% 琼脂，pH为6.7，此条件下花粉萌发率高，为（43.9 ± 6.27）%，且利于花粉管伸长。醋酸洋红法测定的大红火龙果花粉活力为（37.67 ± 4.18）%，与离体萌发法测定的萌发率无显著差异，为花粉活力的最佳测定方法。     

香花槐花粉萌发特性的测定

以香花槐的新鲜花粉为试验材料,利用TTC(氯化三苯四氮唑)和碘-碘化钾染色法及培养基萌发试验,选配出最适合花粉萌发的培养基.以研究不同浓度的Ca2+对花粉萌发和花粉管伸长的影响.结果袁明:香花槐花粉管萌发和花粉管生长的最适培养基是10 mg/L蔗糖+2.0mg/L硼酸+0.8g琼脂.较低浓度的钙对花粉萌发和花粉管生长有促进作用,而较高浓度的钙对其有一定的抑制作用.     

西葫芦花粉生活力测定方法及最佳授粉时间的研究

研究了西葫芦新鲜花粉的生活力测定方法、离体培养条件、短期贮藏方法以及不同时间的花粉生活力强度。结果显示:TTC染色法的测定值与离体培养法的测定结果相近且差异不显著,是一种快捷、准确测定西葫芦花粉生活力的染色方法。培养基15%蔗糖+100mg/L硼酸+300mg/LCa(NO3)2.4H2O+200mg/L MgSO4.7H2O+100mg/L KNO3,适宜西葫芦花粉离体萌发,花粉离体萌发率最高,为60.602%,0℃黑暗干燥或4℃黑暗干燥贮藏花粉,生活力保持最好,均在70.000%以上,且散粉情况较好;人工授粉最好在上午10:00之前完成,最佳授粉时间为6:00-8:00,此时种子的结实率最高。     

钙和硼对菊花品种金陵丰收花粉萌发及花粉管生长的影响

以国庆小菊金陵丰收为试验材料,使用的培养基是ME3+150 g/L PEG4000)+100 g/L蔗糖),添加不同浓度钙和硼酸,研究不同浓度的钙和硼酸对国庆菊花粉萌发和花粉管生长的影响,旨在获得菊花花粉离体萌发最佳培养基。结果发现:硼酸对花粉萌发率影响明显,当硼酸浓度是100 mg/L时,花粉培养2 h时花粉萌发率达到最高,为10.05%。外源钙能促进花粉的萌发,并影响花粉管的生长速度和生长质量,一定浓度的钙使花粉管生长笔直,在钙浓度为400 mg/L时金陵丰收花粉管生长状况最佳。外源钙浓度过高和培养时间过长时,花粉管生长出现细弱、畸形,而且容易断落。     

新疆野苹果不同S基因型间杂交亲和性差异比较

以不同S基因型的新疆野苹果植株为试验材料,通过田间授粉试验调查了单花花粉量及不同组合S基因型杂交的坐果率,利用花柱荧光显微观察的方法研究了不同S基因型授粉组合的亲和程度。结果表明,相同S基因型授粉组合S1S6×S1S6坐果率最低(2.67%),花粉管萌发较晚(授粉后8h),且生长速度较慢,48h后有少量花粉管到达花柱基部,大部分花粉管在花柱1/2～2/3处停止生长,自交不亲和程度较强;部分相同S基因型授粉组合S6S33×S1S6坐果率较高(8.09%),花粉管萌发较晚(授粉后8～10h大量萌发),生长速度适中,48h后80%花粉管到达花柱基部,亲和程度较弱;不同S基因型授粉组合S21S21×S1S6坐果率高(21.27%),花粉管萌发早(授粉后4～8h大量萌发),96h后全部花粉管到达花柱基部,亲和程度较强。     

糖、硼、钙对思茅松花粉离体萌发及花粉管生长的影响

【目的】开展思茅松花粉活力研究,为思茅松杂交育种提供技术保障。【方法】以思茅松花粉为研究对象,研究了蔗糖、硼酸和氯化钙单因子及正交试验对思茅松花粉萌发和花粉管生长的影响。【结果】培养基内蔗糖、硼酸和氯化钙在一定质量浓度范围内,对花粉萌发及花粉管生长起促进作用,花粉生活力测定最适蔗糖、硼酸和氯化钙用量分别为10%、100 mg/L和100 mg/L;正交试验中蔗糖对思茅松花粉萌发和花粉管生长有显著影响,最佳配方组合为10%蔗糖+30 mg/L硼酸+100 mg/L氯化钙。【结论】获得了适宜思茅松花粉活力检测的离体培养基。     

基于荧光显微观察不同仁用杏杂交组合的花粉萌发特性

为选择适宜的仁用杏授粉品种,以龙王帽和优一为母本,白玉扁、一窝蜂和北山大扁3个品种为父本进行品种间授粉,利用荧光显微技术观察人工授粉后柱头上花粉的黏附、萌发和花粉管生长情况。结果表明:龙王帽×白玉扁杂交组合授粉后4h花粉萌发,而其他组合授粉后6h花粉才萌发,但授粉24h后全部授粉组合的花粉管伸长穿过花柱中部。不同授粉组合之间有花粉黏附柱头比率、单个柱头平均花粉数、有花粉柱头比率和单个柱头平均花粉萌发率差异显著,但有花粉黏附柱头比率和有花粉萌发柱头比率之间,以及单个柱头平均花粉数和单个柱头平均花粉萌发率之间无相关性。龙王帽×白玉扁、龙王帽×一窝蜂和优一×白玉扁3个杂交组合的花粉萌发率高、深入花柱的花粉管数量多,是较为适合的杂交组合。故选择白玉扁作为龙王帽和优一的授粉品种,而一窝蜂只能作为龙王帽的授粉树。     

‘保罗兰’睡莲花粉离体萌发及花粉管生长的研究

【目的】研究不同培养基组分、不同培养时间对‘保罗兰’睡莲花粉萌发和花粉管生长的影响,为睡莲杂交育种提供科学的依据。【方法】采用花粉离体萌发法,用显微镜观察花粉离体萌发情况。【结果】20和40 mg/L的硼酸(H_3BO_3)处理均能促进花粉萌发,适宜浓度的蔗糖和低浓度的Ca~(2+)处理能显著提高花粉的萌发率;睡莲花粉在培养的4 h之内,花粉萌发率上升较快,4～6 h萌发率趋于稳定。花粉管生长在前2 h生长较快,2～6 h生长趋于稳定。【结论】10%蔗糖+20 mg/L或40 mg/L H_3BO_3+20 mg/L氯化钙(CaCl_2)是‘保罗兰’睡莲花粉最适萌发培养基组分,最佳镜检时间为4 h。     

桃花粉管通道法转基因技术的初步研究

以曙光为试材,对桃花粉管通道法转基因技术进行探索性研究,结果表明:(1)活体人工授粉后,24 h花粉开始在柱头上萌发授粉后48 h已有大量的花粉管长至花柱上端;授粉后96 h大量的花粉管生长至花柱的中部;授粉后144 h大量的花粉管到达花柱基部.(2)确定外源DNA的注射时间为人工授粉后的144 h;花柱横切滴加法注射方式不适用于桃;当外源质粒DNA浓度为0.2 mg/L时,发育期内其坐果率都显著高于其它浓度水平.