小果型番木瓜组织培养的研究进展

小果型番木瓜是热带、亚热带的重要水果,果实含量丰富,具有很好的食疗和药用价值,应用前景广阔.本文概述了近年来国内番木瓜及其他植物组织培养技术研究进展,包括外植体取材及灭菌、组培发生方式等的研究内容,为番木瓜类的组织培养进一步的发展提供理论依据.     

7种睡莲属植物叶绿体基因组密码子偏好性分析

以7种睡莲属植物叶绿体基因组为研究对象,分析其叶绿体基因组的密码子使用偏好性,探讨影响其密码子偏好性形成的主要因素。结果表明,7种睡莲叶绿体密码子使用偏好性相似,基因组序列富含A/T碱基,密码子第3位碱基以A/T结尾为主;有效密码子数（ENc）分别为40.14~61.00、40.14~61.00、40.55~57.61、39.77~57.61、39.55~57.30、39.56~61.00和40.10~61.00,均明显大于35,表明其密码子使用偏好性较弱。ENc-plot、PR2-plot和中性绘图分析表明,它们的叶绿体密码子偏好性形成受自然选择、碱基突变等多种因素共同影响,其中自然选择起主导作用。通过同义密码子RSCU值分析,发现以A/T结尾的高频密码子27个,以G/C结尾的低频密码子26个,进一步依据密码子RSCU和△RSCU值,最终确定出4个最优密码子。此外,基于7种睡莲叶绿体基因组密码子使用偏好特征RSCU值、CDS序列及其全基因组序列分别构建系统进化树,分析发现3种方法构建的物种间进化关系相似,均划分为2大分支,其中Nymphaea alba var.rubra、Nymphaea alba、Nymphaea ampla、Nymphaea capensis、Nymphaea jamesoniana和Nymphaea lotus划归第1分支,Nymphaea mexicana单独形成第2分支。研究结果进一步支持了物种内遗传关系与密码子使用偏好性之间存在一定关系。     

矮壮素对木薯组培苗生长及分化的影响

以木薯桂热3号、桂热5号及GR0248品种为研究试材,探讨了不同浓度矮壮素(50、75、100 mg/L)与6-BA、NAA组合处理对培养40d木薯组培苗分化及矮化作用的影响.结果表明:在MS培养中加入不同浓度矮壮素均能使3个不同木薯品种组培苗的繁殖系数增加,高度降低,单株重下降,叶绿素含量增加,且表现矮化现象.从快速繁殖角度考虑,75 mg/L是适宜3个不同木薯组培苗最佳的处理浓度,繁殖系数分别比对照提高了77.13％、44.03％、50.20％,矮化效果明显,嫩梢长度分别比对照下降了36.05％、29.37％、19.46％,能保持木薯组培苗的正常生长.     

中国莲PHT1家族成员的生物信息学分析

以植物PHT1家族蛋白为研究对象,基于中国莲(Nelumbo nucifera)全基因组数据库,利用生物信息学方法发掘中国莲可能存在的PHT1家族成员,并对中国莲PHT1家族成员进行序列比对、系统进化、保守序列、跨膜结构、二级结构和亚细胞定位等分析。结果表明,从中国莲全基因组数据库中筛选获得4个PHT1蛋白,分别命名为:Nn PHT1:1、NnPHT1:2、NnPHT1:3、NnPHT1:4。它们在植物PHT1家族中属于GroupⅠ,均含有保守序列:GGDYPLSATIxSE。该序列具有11~12个跨膜区域,且保守序列位于第4个跨膜区域内,均定位于细胞质膜,且在细胞内侧第6和第7个跨膜区域之间均含有一个较大的细胞胞质内环结构;磷酸化位点和糖基化位点的数量范围分别在33~50个和4~9个;二级结构中α-螺旋和无规卷曲结构的数量总和均高于70%。研究结果展示了中国莲的PHT1家族成员的序列基本信息和结构特点,为深入研究中国莲的该家族成员基因及其编码蛋白的结构功能提供理论依据。     

澳系睡莲花粉离体萌发及低温保存研究

为研究适宜睡莲花粉离体萌发的培养基和低温保存的方法,以睡莲品种‘默笙’和3份原种睡莲的花粉为试验材料,采用单因素、正交试验设计,筛选出最适宜的培养基,观测睡莲花粉在不同温度下保存的萌发率。结果表明,4种澳系睡莲花粉的最适培养基的各组分浓度不同,花粉的生活力存在差异,澳洲原生浅色睡莲与澳洲原生深色睡莲的花粉生活力较高,分别为43.90%和45.63%;‘默笙’睡莲的花粉生活力次之,为31.84%;‘白巨睡莲’的花粉生活力较低,为9.73%;4种澳系睡莲花粉均不耐贮藏,不同温度下保存72 h后萌发率均为0。本研究结果可为睡莲杂交育种的亲本选择、花粉的低温保存研究提供参考。     

‘保罗兰’睡莲花粉离体萌发及花粉管生长的研究

【目的】研究不同培养基组分、不同培养时间对‘保罗兰’睡莲花粉萌发和花粉管生长的影响,为睡莲杂交育种提供科学的依据。【方法】采用花粉离体萌发法,用显微镜观察花粉离体萌发情况。【结果】20和40 mg/L的硼酸(H_3BO_3)处理均能促进花粉萌发,适宜浓度的蔗糖和低浓度的Ca~(2+)处理能显著提高花粉的萌发率;睡莲花粉在培养的4 h之内,花粉萌发率上升较快,4～6 h萌发率趋于稳定。花粉管生长在前2 h生长较快,2～6 h生长趋于稳定。【结论】10%蔗糖+20 mg/L或40 mg/L H_3BO_3+20 mg/L氯化钙(CaCl_2)是‘保罗兰’睡莲花粉最适萌发培养基组分,最佳镜检时间为4 h。     

广西剑麻黑斑病病原菌鉴定及其生防菌筛选

【目的】分离、鉴定一种在广西剑麻叶片上产生圆形、近圆形或长椭圆形黑色凹陷斑块病害的病原菌,并针对该病原菌筛选具有较好防治效果的生防菌,为病害防治提供科学依据。【方法】从广西5个剑麻种植农场采集具有圆形、近圆形或长椭圆形黑色凹陷斑块的病叶,采用组织分离法分离病原菌;采用叶片针刺法接种,进行病原菌致病性测定;通过病原菌形态特征观察和分子生物学方法鉴定病原菌。采用平板对峙培养法和载玻片孢子萌发法研究哈茨木霉（Trichoderma harzianum）菌株GZ-5、深绿木霉（T.atroviride）菌株ST-1、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）菌株B11和解淀粉芽孢杆菌（B.amyloliquefaciens）菌株YZ14-3对剑麻黑斑病病原菌菌丝生长和孢子萌发的抑制效果。【结果】从病叶组织中分离出6种真菌,其中编号为JMHB1的菌株分离率最高,达96%;致病性测定结果表明菌株JMHB1为致病菌;依据形态特征和分子生物学方法,将菌株JMHB1鉴定为新暗色柱节孢（Neoscytalidium dimidiatum）。对峙培养结果显示,生防菌菌株B11和YZ14-3可显著抑制菌株JMHB1的菌丝生长（P<0.05）,抑菌圈半径分别为12.14和13.22mm,且2株生防菌株的培养滤液均可导致菌株JMHB1的菌丝隘缩、断裂;生防菌菌株ST-1和GZ-5对菌株JMHB1的拮抗系数为Ⅲ级和Ⅳ级,但其培养滤液对菌株JMHB1的菌丝无抑制作用。菌株JMHB1的孢子可在菌株YZ14-3、B11、ST-1和GZ-5的培养滤液中的萌发,萌发率分别为31.67%,32.37%,68.63%和76.63%。【结论】引起广西剑麻叶片产生圆形、近圆形或长椭圆形黑色凹陷斑块病害的病原菌为新暗色柱节孢[N.dimidiatum（Penz.） Crous&;Slipper],这是我国首次报道新暗色柱节孢侵染剑麻引起黑斑病。病害名称暂定为剑麻Neoscytalidium黑斑病。剑麻生产上可选择和搭配使用解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、深绿木霉及其商品制剂防治剑麻Neoscytalidium黑斑病。     

潮汐系统下不同盐度水体对红花玉蕊幼苗 生理特性的影响

[目的]分析潮汐系统下不同盐度水体胁迫对红花玉蕊幼苗生理特性的影响,为美化水岸环境及恢复红树林和湿地植被提供参考依据.[方法]模拟半日潮,每天在温室分别以不同盐度(5‰、10‰、15‰、20‰、25‰、30‰、35‰和40‰)水体对一年生红花玉蕊实生苗进行完全浸没胁迫处理12 h,以浸泡0盐度水体为对照(CK),处理后第3 d开始调查各处理幼苗的形态指标,处理后第7 d取样测定各处理的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)和脯氨酸(Pro)含量及叶绿素荧光参数(Fv/Fm),综合分析红花玉蕊的耐盐性.[结果]胁迫红花玉蕊幼苗的水体盐度超过20‰时,其叶片脱落率迅速增加.5‰盐度水体协迫处理红花玉蕊幼苗叶片的SOD活性显著低于CK(P<0.05,下同),随着水体盐度的升高,SOD活性总体上呈升高趋势,但均低于CK.当水体盐度高于15‰时,POD活性均显著高于CK,并在水体盐度30‰时达最高值.MDA含量随水体盐度升高呈先升后降的变化趋势,水体盐度为25‰时MDA含量最高,在40‰时最低,但与CK相比,各盐度水体协迫处理的MDA含量均无显著差异;Pro含量随水体盐度的升高而升高,但水体盐度为5‰时,Pro含量比CK稍微上升,说明红花玉蕊可能也适合在5‰水体盐度下生长.Fv/Fm随水体盐度的升高而降低,与Pro含量和叶片脱落率的变化趋势相反.[结论]红花玉蕊幼苗能适应5‰盐度水体淹浸12 h胁迫;在不同盐度水体胁迫下的叶片脱落率和Fv/Fm均可作为耐受水体盐度胁迫伤害程度的参考指标;POD活性和Pro含量可作为红花玉蕊幼苗耐受盐度胁迫响应的生理指标.     

锯叶棕体细胞胚胎发生及植株再生体系的建立

从锯叶棕成熟种子中成功实现体细胞胚胎发生和植株再生。成熟种子放在MS培养基上培养，加入0.15%活性炭，452 μmol/L 2,4-D和14.7 μmol/L N6-2iP，所有成熟合子胚培养5周后长出体胚簇，12周后，外植体转移到2,4-D浓度减到90.4 μmol/L的MS培养基中进行体胚增殖，之后体胚转移到含有0.9, 9 μmol/L TDZ或没有生长调节剂的基本培养基中转化成小植株。9 μmol/L TDZ对植株再生是无效的，然而，在0.9 μmol/L TDZ中作次培养有12%胚胎能长成完整植株，没有生长调节剂中35%胚胎长出嫩枝，这些嫩枝转移到含有22.2 μmol/L NAA的培养基中全部都会生根。picloram和2,4-D对锯叶棕幼苗愈伤的诱导效果最佳，6-BA次之，对子叶来说，picloram和2,4-D对愈伤的诱导起不到任何作用，而对茎尖的诱导效果最好。