西葫芦未受精子房离体培养的影响因素

【目的】探究西葫芦未受精子房离体培养的主要影响因素,以提高其胚状体诱导率和生根品质,增加再生植株数量,丰富西葫芦育种材料。【方法】以西葫芦"春玉一号"未受精子房为材料,分析MS、B5、N6和White 4种基本培养基的诱胚效果;在MS培养基中添加不同质量浓度的6-BA(0,0.5,1.0,2.0mg/L)和NAA(0,0.2,0.5,1.0mg/L),筛选2种激素的最佳组合;之后添加不同质量浓度的2,4-D(0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mg/L),筛选2,4-D的适宜质量浓度;在MS培养基中添加不同质量浓度的NAA(0,0.05,0.1,0.2,0.5,1.0mg/L),分析其对胚状体芽生根效果的影响。【结果】西葫芦未受精子房以MS为基本培养基时胚状体诱导率最高,为16.67%;在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA时的诱导效果最好,诱导率为19.76%;在MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA培养基中添加1.0mg/L 2,4-D可以加快胚珠膨大的速度,增加胚珠转绿的数量,但对出胚的提高效果不显著。MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA有利于提高胚状体芽的生根品质,且根系生长健壮。【结论】MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+1.0mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA+1.0mg/L 2,4-D是西葫芦未受精子房离体培养中胚状体诱导的最佳培养基,MS+30g/L蔗糖+8g/L琼脂+0.1mg/L NAA是诱导其胚状体芽生根的较适宜培养基。     

秦薯5号甘薯茎尖分生组织培养脱毒及种苗快繁技术研究

为获得秦薯5号甘薯脱毒苗用于规模化种苗生产,研究了秦薯5号茎尖分生组织培养各阶段的培养基,适宜的茎尖分生组织芽诱导培养基为MS+6-BA0.5mg/L+IAA0.2 mg/L+GA₃ 0.05 mg/L+蔗糖3%,适宜的试管苗增殖培养基为MS+6-BA0.1 mg/L+NAA0.05 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%, 1/2MS+NAA0.01 mg/L+蔗糖2%+琼脂0.6%适宜生根培养,繁殖倍数可达5.8。试管苗炼苗后移栽至泥炭与珍珠岩(2∶1)混合基质中,成活率可达98%以上。     

影响甘蓝小孢子DH植株生长的几个因素

旨在筛选甘蓝小孢子DH植株健壮生长的最适培养基和光照强度。为缩短小孢子DH植株培养时间并为获得健壮植株创造条件,从而加快甘蓝DH系育种进程。以甘蓝‘秦甘50’为材料进行游离小孢子培养至诱导分化出不定芽,转接到NAA质量浓度不同的2种培养基上(1/2MS+0、0.1、0.2、0.3mg/L NAA和MS+0.1mg/L NAA),不同光照强度[40、60、80、100μmol/(m2·s)]及添加不同质量浓度NH4NO3(0、0.4、0.8、1.2g/L)培养,研究DH植株的生长势,获得甘蓝小孢子DH植株最适培养基和培养条件。结果表明,在NAA质量浓度不同的培养基中,1/2MS+0.1mg/L NAA培养基中小孢子DH植株生长速度最显著,生根快、植株长势强;在80μmol/(m2·s)光照强度下培养小孢子DH植株净生长高度显著,10.3d再生出根系,根质量较好,叶片大而厚;MS培养基中添加质量浓度为0.4g/L的NH4NO3,小孢子DH植株生长健壮,35d内植株净生长高度最大为56.25mm。以上结果说明,甘蓝小孢子DH植株快速健壮生长的适宜培养基为1/2MS+0.1mg/L NAA+8g/L琼脂+30g/L蔗糖;在80μmol/(m2·s)光照强度下或MS培养基中添加质量浓度为0.4g/L的NH4NO3均能够促进甘蓝小孢子DH植株根茎叶生长旺盛。     

牛大力组织培养技术研究

本试验通过组织培养手段,以牛大力种子为材料,对外植体诱导及无菌组织培养进行了尝试,以期获得牛大力外植体诱导、增殖和生根的适宜培养基和培养条件。结果表明,消毒方式为75%酒精消毒30 s+0.1%氯化汞消毒15 min,外植体诱导培养基为改良1/2 MS+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L+6-BA 0.4 mg/L+NAA 0.15 mg/L+益培灵0.20 g/L,增殖培养基为改良MS+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L+6-BA 0.6 mg/L+NAA0.20 mg/L+益培灵0.10 g/L,生根培养基为改良1/2 MS+蔗糖15 g/L+琼脂6 g/L+IBA 1.5 mg/L+ABT 1 1.5 mg/L+益培灵0.05 g/L,较适宜牛大力组织培养。     

百合试管小鳞茎高效再生体系的研究

以百合试管鳞茎诱导丛生芽,适宜诱导的培养基为MS+ 2.0 mg/L 6-BA+ 0.1 mg/L NAA+ 30 g/L蔗糖+5500 mg/L琼脂,光照强度1 500 ～2 000 lx.芽长至1～2 cm时,转入鳞茎分化培养基,适宜的鳞茎分化培养基为MS+1.0 mg/L NAA+ 90 g/L蔗糖+300 mg/L活性炭+5500mg/L琼脂,黑暗条件.提高培养基中的糖浓度可以提高百合再生小鳞茎的重量;在培养基中添加活性炭可提高再生小鳞茎形态的正常率.     

洋桔梗小孢子培养初步研究

[目的]探索预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响。[方法]以洋桔梗为材料进行小孢子培养,研究预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响,并筛选胚性愈伤组织适宜诱导培养基、不定芽植株培养基以及最佳生根培养基。[结果]利用4℃低温预处理24 h有利于小孢子愈伤组织的形成。愈伤组织适宜诱导培养基为:MS+3 mg/L KT+2.5 mg/L 2,4-D;不定芽植株培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA;最佳生根培养基为:MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+1.5 mg/L IBA+0.3 g/L活性炭。经过染色体倍性鉴定,显示小孢子培养后染色体数目减半。[结论]该方法研究了预处理和培养基类型对小孢子离体培养的影响,为洋桔梗游离小孢子培养体系的建立以及单倍体育种奠定基础。     

金桔无性快繁体系建立的研究

以金桔的成龄叶片、带腋芽茎段及种胚为外植体,将它们接种于附加不同激素的MS培养基中,并进一步诱导分化出芽及再生植株。结果表明:剥去种皮的种胚诱导效果远好于成龄叶及茎段的诱导效果。而MS+蔗糖30g/L且不添加生长调节剂的配方最适宜种胚初代诱导。诱导获得的上胚轴节段在MS+BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L的培养基上进一步分化成苗,将无根苗接在1/2MS+NAA0.02mg/L的培养基中,经3周培养生根。     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

四川竹根姜胚性愈伤组织诱导和植株再生

选用四川竹根姜的茎尖组织,诱导产生了胚性愈伤组织,建立了高频再生体系。筛选出了适于胚性愈伤诱导及扩增最佳培养基MSN+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L KT+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;胚性愈伤组织分化培养基MS+0.2 mg/L 2,4-D+5.0 mg/L BA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;根状茎形成培养基MS+3.0 mg/LBA+0.1 mg/L NAA+6.0%蔗糖+0.7%琼脂。在3.0%~6.0%的范围内蔗糖浓度越高越促进根状茎形成。     

枸杞花药离体培养技术体系的建立

以宁杞1号为试验材料,探讨枸杞花药离体培养中不同激素组合、不同活性炭及蔗糖浓度、低温预处理或热激处理、不同光照培养条件对花药培养效果的影响.试验结果表明:最佳激素组合为2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,花药愈伤组织诱导率达11.7%;4 ℃低温预处理5 d和32 ℃高温预培养2 d,均可显著提高愈伤组织诱导率;添加活性炭能提高胚状体的诱导率;培养基中适宜的蔗糖浓度为3%;暗培养优于光照培养和弱光培养.愈伤组织转入分化培养基(MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L)分化出大量绿色小芽,分化芽转入生根培养基(MS+NAA 0.1 mg/L)中,20 d后得到完整植株.     

芒萁组织培养和快繁技术研究

以孢子为外植体对芒萁进行组织培养。在基本培养基中添加不同生长调节物质对孢子萌发和孢子体进行诱导。结果表明,孢子体萌发阶段最适培养基组合是1/2MS培养基+30 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,pH值5.8~6.0;原叶体增殖阶段,最佳培养基组合为1/2MS+NAA 1.0 mg/L+6·BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7g/L;孢子体的诱导最适培养基组合是1/2MS培养基+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L。     

紫花苜蓿高频植株再生体系的建立

研究了不同品种间愈伤组织诱导及植株再生的差异.结果表明,MS+2,4-D(2.0 mg/L)+6-BA(0.5mg/L)+蔗糖0.3%+琼脂0.08%,MS+KT(0.5 mg/L)+NAA(0.01 mg/L)+蔗糖0.3%+琼脂0.08%,1/2MS+NAA(0.01 mg/L)+蔗糖0.15%+琼脂0.08%分别是紫花苜蓿的愈伤组织诱导、芽、根分化的适宜诱导培养基.     

大岩桐的组织培养和快繁技术研究

以大岩桐新生嫩叶为外植体进行了植株再生和快速繁殖研究.结果表明:诱导不定芽以MS 3%蔗糖 0.5%琼脂 0.05 mg/L NAA 0.50 mg/L 6-BA效果最好,分化率达100%;增殖培养以MS 3%蔗糖 0.5%琼脂 0.10 mg/L 6-BA 0.10 mg/L NAA培养基增殖倍数最大,为6.5倍;诱导不定根,在1/2MS 1.5%蔗糖 0.5%琼脂 0.10 mg/L NAA培养基上生根率为100%,达到植株再生和快繁的目的.     

虾脊兰原球茎诱导及植株高效再生体系研究

以野生虾脊兰(Calanthe discolor)未成熟蒴果为材料,MS为基本培养基,探讨不同光照度、热激和不同培养基配方对虾脊兰种子萌发、原球茎发生及植株再生的影响。结果表明,未完全成熟的种子在1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯+1.0 g/L活性炭培养基中萌芽率最佳;在1 500 lx光照度条件下培养时种子萌发速率较快。通过黑暗条件下35℃热激5 d有利于已萌动种子脱分化形成原球茎。使用MS+3.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖培养基诱导原球茎形成胚性愈伤组织效果最好。MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+20 g/L马铃薯培养基分化形成植株分化率最高,1/2MS+0.2 mg/L IBA+7 g/L琼脂+30 g/L蔗糖+0.1 g/L活性炭培养基则为最佳生根培养基,生根率100%,植株根系发达,长势健壮。该研究建立了虾脊兰无菌快繁体系,为保护野生虾脊兰资源和种苗人工繁育提供了有效技术途径,也为其遗传转化研究奠定基础。     

铁皮石斛组培诱导研究

利用植物组织培养技术,对铁皮石斛的种子及外植体进行组培诱导试验。结果表明:铁皮石斛种子诱导最佳增殖培养基配方为1/2MS+NAA0.2mg/L+马铃薯汁100mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂;外植体中茎段较适宜诱导,最佳培养基配方为MS+NAA1.0mg/L+BA1.0mg/L+马铃薯汁100mg/L+3%蔗糖+0.7%琼脂。     

甘蓝小孢子胚状体分化不定芽再生植株的研究

【目的】探讨甘蓝小孢子胚状体诱导不定芽的适宜生根转接高度及添加烯效唑对再生植株生长的影响,寻找胚状体芽生根和再生植株生长发育的最佳培养条件,为甘蓝小孢子培养技术体系的不断完善奠定基础。【方法】以"绿球66"甘蓝游离小孢子为材料,诱导分化出不定芽,根据芽高度不同分为≥1.0～<2.0cm(小芽)和≥2.0～<3.5cm(大芽)2组,分别转接到MS+NAA 0.2mg/L+烯效唑(0(对照),0.01,0.05,0.1mg/L)+Suc30g/L+Agar 7g/L培养基上诱导生根,培养再生植株,观测再生植株的生长情况,筛选不定芽适宜转接高度和烯效唑最佳质量浓度。【结果】甘蓝小孢子胚状体诱导生成不定芽高度≥1.0～<3.5cm时转接生根,不仅能促进胚状体丛生芽中小芽继续生长,而且有利于增加当代小孢子再生植株数量。对照甘蓝小孢子再生植株根系根瘦弱细长、数量少、韧性较差;添加0.01和0.05mg/L烯效唑后,再生植株根短粗、数量多、韧性强、健壮,且以0.05mg/L烯效唑处理的再生植株生长最好。生根培养基中添加0.01和0.05mg/L烯效唑后,小芽再生植株移栽到营养钵和定植到田间的成活率分别为90.7%,98.8%和89.7%,97.6%,大芽再生植株则分别为91.0%,100.0%和94.4%,97.7%。【结论】甘蓝小孢子在MS+NAA 0.2mg/L+烯效唑0.05mg/L+Suc 30g/L+Agar 7g/L培养基中生根再生的植株,其移栽到营养钵和田间的成活率均超过了97.6%。     

无种质基因型限制结缕草组培快繁体系研究

结缕草从愈伤组织发育成胚性愈伤再进一步分化为完整植株一直是该领域的研究重点与难点。本研究通过试验建立起一套完善的无种质基因型限制的结缕草组培快繁体系。结果表明,愈伤组织诱导培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+40 g/L蔗糖最为合适,体胚细胞诱导培养基为改良MS+2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+40 g/L蔗糖最为合适,胚状体增殖与生长培养基为MS+0.1～0.2 mg/L 2,4-D+1 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖最为合适,成苗快繁培养基为MS+0.02～0.05 mg/L NAA+1～2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖最为合适,生根培养基MS最为合适。     

球根海棠"金正日"的离体培养研究

通过诱导胚状体建立组织培养再生系统,研究了球根海棠"金正日"的离体培养.结果表明,外植体经HgCl2溶液表面消毒后,接种到MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 1 mg/L培养基上诱导愈伤组织,15 d后转接到1/2 MS+6-BA 0.5 mg/L +NAA 0.1 mg/L培养基上,诱导胚状体,诱导率90%以上.胚状体在MS+6-BA 0.3 mg/L +NAA 0.03 mg/L培养基上以丛生芽形式增殖,增殖系数达4～8倍.试管苗生根可采用MS+IBA 0.1 mg/L、蔗糖2%培养基.生根率100%.     

拂子茅组培再生体系的建立

为建立拂子茅植株再生体系,以茎尖为外植体,对拂子茅花叶灭菌方式以及愈伤组织诱导和植株再生培养条件进行分析与筛选。结果表明:用75%乙醇灭菌30 s,再用0.1%升汞灭菌12 min,灭菌效果最佳,去污染率达到90%;在MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L的培养基上进行愈伤组织诱导,诱导率达33.4%;用MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L培养基诱导不定芽再生,诱导率最高、可达76.9%;用MS基本培养基诱导不定芽生根,生根率达到100%。     

黑果枸杞产业现状及快速繁殖技术研究

为掌握黑果枸杞组培快繁技术,促进产业发展,以野生黑果枸杞为研究对象,对其不定芽增殖、诱导生根的培养条件进行筛选,并探讨产业发展措施。结果表明,黑果枸杞组培苗最佳初代培养基是MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L+30mg/g蔗糖+6mg/g琼脂,达到83.3%的萌芽率;最有利于不定芽增殖的继代培养基为MS+6-BA0.5mg/L+NAA 0.1 mg/L+30mg/g蔗糖+6mg/g琼脂,芽增殖系数达3.63;最佳生根培养基1/2MS+NAA 0.1mg/L+IBA 0.1 mg/L+15mg/g蔗糖+6mg/g琼脂,生根率达到100%。