60Co-γ辐射对番茄离体子叶再生及不定芽分化的影响

用0～100 Gy的60Co-γ射线对番茄品种'1479'的组培无菌苗子叶进行辐射,研究60Co-γ辐射对番茄组织培养中外植体分化的辐射效应.结果表明:60Co-γ射线辐射'1479'子叶后.其出愈率、胚性愈伤诱导率和胚性愈伤的分化情况受到显著的影响.高辐射剂量(>50 Gy)显著抑制了子叶外植体的出愈率和胚性愈伤组织的形成.并对胚性愈伤中芽的分化产生了显著的影响,但对胚性愈伤不定根的诱导影响较小.番茄子叶外植体半致死剂量为50 Gy左右.     

'沾冬2号'(2x+4x)倍性分离与纯四倍体的获得

‘沾冬2号’是从我国第一大主栽鲜食枣品种‘冬枣’(二倍体)的自然变异中选育出的大果型优质新品种,经鉴定为二、四混倍体。其在田间容易发生倍性的自然分离,果实性状很不稳定,严重影响了其推广应用。对其田间自然变异进行了大规模筛查和倍性鉴定,并开展了其田间枝干截面愈伤途径诱导不定芽再生,以期获得纯四倍体材料。结果表明,在基于形态观察表现倍性分离的150个自然新稍中,经流式细胞仪鉴定72个为二倍体,75个为二、四混倍体,3个为四倍体(仅占2.00%)。对二、四混倍体植株的茎干进行了短截和生长调节剂诱导不定芽处理,其中茎粗3 cm左右的枝条截面经4 mg/L TDZ+2.0 mg/L硝酸银溶液处理后,在18 d时愈伤率达96.67%,出芽率为20%,平均单枝截面出芽数为0.20,经流式细胞仪检测枝干截面再生的14个不定芽均为二倍体。可见,‘沾冬2号’在自然萌发和人工诱导不定芽条件下均可发生倍性分离,虽然分离产生的材料中二倍体和二、四混倍体占绝大多数,但仍可获得少量的纯四倍体。     

紫花苜蓿品种'德宝'不同外植体愈伤组织诱导研究

以紫花苜蓿'德宝'的下胚轴、叶片、子叶和叶柄为外植体,研究了不同浓度(1.5、2.0、2.5 mg/L)2,4-D对各外植体愈伤组织诱导的影响.结果表明:4种不同外植体的愈伤组织发生能力存在显著差异,下胚轴的愈伤组织诱导率最高,达98.5％,显著高于叶片(P＜0.05),其他各外植体之间差异不显著.不同浓度2,4-D下各外植体愈伤组织发生也存在显著差异,浓度1.5 mg/L和2.0 mg/L的2,4-D MS培养基对愈伤组织的诱导效果优于浓度2.5 mg/L的2,4-D MS培养基(P＜0.05),且有利于愈伤组织的胚性化.另外,2,4-D浓度在1.5～2.5 mg/L范围内,低浓度利于叶片和子叶愈伤组织发生,二者在1.5mg/L浓度下的愈伤率可达100％,显著高于2.5 mg/L浓度处理,而叶柄和下胚轴的愈伤率在各浓度下差异不显著.     

光质对龙眼胚性愈伤组织柯里拉京含量的影响

通过超声波提取‘红核子'龙眼胚性愈伤组织中的柯里拉京[β-1-O-galloyl-3,6-(R)-hexahydroxydiphenoyl-D-glucose],并优化色谱分离条件,采用超高效液相色谱法(ultra performance liquid chromatography,UPLC)测定其含量,探讨培养天数及光质对龙眼胚性愈伤组织柯里拉京含量的影响。结果表明,龙眼胚性愈伤组织黑暗培养25 d柯里拉京含量最高;不同光质处理下柯里拉京含量依次为:黑暗(18.81 mg·g-1)红光(16.99 mg·g-1)绿光(16.89 mg·g-1)白光(15.10 mg·g-1)蓝光(12.52 mg·g-1),黑暗条件最有利于其合成,而蓝光则抑制其合成。     

不同外源激素对紫斑牡丹愈伤组织诱导的影响

试验以‘美髯公’‘粉荷’‘粉冠彩带’3个紫斑牡丹品种的叶片和叶柄为材料,研究不同处理时间0.1%HgCl_2处理牡丹对叶片、叶柄污染率、褐化率、存活率及死亡率的影响.并研究了6-BA和NAA组合,2,4-D和NAA组合以及2,4-D和6-BA组合分别对紫斑牡丹叶片和叶柄愈伤组织诱导、增殖以及再分化的影响.结果表明:(1)用0.1%HgCl2进行消毒处理,叶片和叶柄的最佳消毒时间分别为6、8 min.(2)3个品种的牡丹叶片在6-BA(2.0mg/L)/NAA(0.3mg/L)处理下的愈伤组织诱导率均为最高,叶柄在6-BA(2.0mg/L)/NAA(0.4mg/L)处理下的愈伤组织诱导率均为最高;‘粉冠彩带’叶片和叶柄的愈伤组织诱导率显著高于其他两个品种;同一品种之间叶柄的愈伤组织诱导率明显高于叶片的诱导率.(3)2,4-D(0.5mg/L)/NAA(1.5mg/L)组合处理中,叶片和叶柄愈伤增殖率均达到最高,且NAA质量浓度越高愈伤组织质地越好.(4)2,4-D(0.2mg/L)/6-BA(4mg/L)处理愈伤组织再分化过程中发现有少数透明状的胚状体.     

矾根‘莱姆里基’愈伤组织诱导及快速繁殖技术

[目的]本文旨在通过组织培养的方法,建立矾根‘莱姆里基’(Heuchera micrantha‘Lemriki’)愈伤组织诱导和快速离体繁殖技术体系。[方法]以矾根‘莱姆里基’的幼嫩茎段、叶柄、叶片为外植体进行组织培养,明确0.1%的升汞溶液不同消毒时长的灭菌效果以及对3个外植体愈伤诱导的影响,研究不同配比的激素对3个外植体愈伤组织诱导,对茎段不定芽及不定根诱导的影响。[结果]结果表明,消毒时长对矾根‘莱姆里基’不同部位外植体的消毒效果影响显著,幼嫩叶柄、茎段和叶片的最佳消毒时长分别为:0.1%升汞6 min,8 min,10 min。叶柄和叶片诱导愈伤的最佳激素配方为:1 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA,愈伤率为91.11%、90.00%。幼嫩茎段诱导愈伤的最佳激素配方为:1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,愈伤率为75%。幼嫩茎段诱导不定芽的最佳激素配方为:0.1 mg·L~(-1)6-BA+0.05 mg·L~(-1)NAA,诱导率为72.2%;茎段不定芽诱导生根的最佳激素配方为:1.0 mg·L~(-1)IBA,生根率为100%,且根系健壮。[结论]本研究通过组织培养的方法初步建立了矾根离体繁殖技术体系,可为矾根资源保护和分子育种提供技术支撑,并且有效解决了矾根传统繁殖方式速度慢的难题,对矾根的标准化、规模化生产和新品种的开发和应用具有重要的现实意义。     

不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响

以观赏茄‘金蛋'为材料,研究了不同因素对观赏茄花药愈伤组织诱导的影响.结果表明,花药愈伤组织的诱导受多种因素的影响,最适的诱导培养基组合为MS+2,4-D 0.5 mg/L+KT0.25 mg/L+LH 1000 mg/L+Gln 500mg/L+蔗糖50g/L;低温预处理和短期热激处理都能显著提高花药愈伤组织的诱导率,但2者效应没有叠加作用.     

插穗母树年龄和粗度对薄壳山核桃硬枝扦插的影响

探讨薄壳山核桃不同母树年龄和不同粗度对插穗生根能力的影响,采用1年生硬枝进行扦插试验.母树选择2、5、16年生和25年生,采用IBA-0.2 g· L-1处理插穗.插穗粗度设为≤0.5、0.5～0.8、≥0.8 cm3个径级,插穗用不同浓度的IBA、NAA进行处理.结果表明,2年生母树穗条的愈伤组织产生率和生根率分别为87.7％、14.4％,明显高于其他年龄母树.插穗粗度≥0.8cm穗条的效果最好,其平均愈伤组织产生率和生根率分别达33.1％和9.7％.≥0.8 cm穗条的IBA1.0 g·L-1+NAA0.25 g·L-1混合液处理效果最佳,2个指标分别达43.0％和14.6％.相同母树年龄的插穗其愈伤组织产生率和生根率与粗度成正相关.     

几种细胞分裂素和生长素对杜仲下胚轴离体培养的影响

培养在附加不同种类的激素和不同激素浓度组合的 MS 基本培养基上的杜仲下胚轴切段,能诱导出愈伤组织,但诱导出的愈伤组织的生物产量及芽数不同:1.含0.2mgL~(-1)～2mgL(-1)BA 和2mgL(-1)ZT的 MS 培养基上,外植体诱导出了愈伤组织和芽,而在附加2mgL(-1)KT 的 MS 培养基上,外植体只能诱导出愈伤组织。2.在 MS+8mgL(-1)BA 的培养基上,只有愈伤组织的产生而无芽的分化,说明8mgL(-1)BA 抑制了芽的发生。3.MS+2mgL(-1)BA+0.2mgL(-1)生长素(NAA、IAA、IBA)的培养基,能促进外植体诱导出愈伤组织,也能分化出芽。     

不同砧木对‘赤霞珠'葡萄生长及果实品质的影响

【目的】研究不同砧木对酿酒葡萄‘赤霞珠'生长发育和果实品质的影响.【材料】以4年生的‘赤霞珠/3309C'‘赤霞珠/5BB'‘赤霞珠/贝达'和‘赤霞珠/SO4'砧穗组合为处理,‘赤霞珠'自根苗为对照,测定不同砧木‘赤霞珠'的生长、光合性能、荧光参数和果实品质指标.【结果】以‘5BB'和‘3309C'为砧木能够显著增加‘赤霞珠'的新梢长度和粗度,但叶面积却显著减小,各处理间叶片干鲜比无显著差异;以‘3309C'、‘SO4'、‘5BB'和‘贝达'为砧木的‘赤霞珠'净光合速率(Pn)分别比自根苗高25.4%、23.2%、14.3%、3.8%;‘赤霞珠/3309C'的可溶性固形物和可溶性总糖含量均最高,分别达23.01%和21.48%,‘赤霞珠/5BB'次之.主成分分析显示:各处理在果实品质方面的综合排名由高到低的顺序为‘赤霞珠/3309C'、‘赤霞珠/5BB'、‘赤霞珠/SO4'、‘赤霞珠/贝达'、‘赤霞珠'自根苗.【结论】以‘3309C'和‘5BB'为砧木的‘赤霞珠'在光合特性和果实品质方面均表现均较好,更适宜在该地区推广种植.     

枣子叶再生植株研究

以枣树‘雄性不育3号’未成熟胚的子叶为材料,建立了枣子叶再生植株体系。子叶愈伤诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.3 g/L,愈伤诱导率达到40%。从愈伤组织诱导不定芽的培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.3 g/L+TDZ 1.5 mg/L,不定芽发生率为88.9%,不定芽数量与愈伤数量之比为3.5。生根培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.0 g/L+IBA 1.0 mg/L,生根率达到33.3%。此外,培养温度显著影响玻璃化苗的生长。在24℃条件下培养30 d,仅有9.7%的玻璃化苗向正常植株转化,而在20℃培养条件下的玻璃化率仅为6.7%。附加30~80 g/L蔗糖的不同培养基上,玻璃化苗向正常苗转化情况无显著差异。     

哈密大枣叶片不定芽再生体系研究

建立哈密大枣叶片离体再生体系,为遗传转化奠定基础.采用哈密大枣叶片为外植体,研究基本培养基、激素浓度、暗培养时间、AgNO3等因素对离体叶片不定芽诱导的影响,并获得再生植株.MS、NN69、WPM三种培养基相比较,NN69更适合做为诱导愈伤组织的基本培养基;TDZ诱导叶片再生不定芽的效果显著优于 BA;再生培养基中添加1 mg/L AgNO3对不定芽的形成有显著的影响（P ＜0．05）;培养初期经过2周避光培养更有利于提高再生效率;采用10 mg/L维生素 C浸泡15 min可以防止褐化,并能提高不定芽再生率;培养基中添加聚乙烯吡咯烷酮（PVP）或者维生素C,不定芽再生率无显著提高（P ＞0．05）;培养基添加活性炭（AC）会抑制外植体的分化.叶片在 NN69＋1．0 mg/L TDZ＋0．20 mg/L IBA＋AgNO31．0 mg/L培养基上,暗培养2周后转入光照培养,出芽外植体转入 MS＋1 mg/L 6GBA＋0．20 mg/L IBA 不定芽再生效果最好.不定芽生长至3 cm 以上时,转至0．40 mg/L IBA的1/2MS培养基上进行诱导生根.     

草莓叶柄组织培养再生研究

以草莓品种晶瑶为试材,研究了不同激素浓度和配比对叶柄的诱导愈伤组织、分化出芽的影响以及叶柄材料不同部位对不定芽再生的影响,建立了草莓叶柄的离体再生体系。结果表明,叶柄在MS+TDZ1.5mg/L+IBA0.3mg/L的诱导培养基上出愈率可达到78.2%,且愈伤组织状态较好;该愈伤组织在分化培养基MS+NAA0.2mg/L+BA1.0mg/L上的不定芽分化率可达到21.25%,并且叶柄的植物学下端部位利于不定芽的再生。     

野生梭梭的离体培养和植株再生

以野生梭梭带腋芽茎段为外植体进行离体再生研究,探讨不同植物生长调节剂、硝酸银和蔗糖的质量浓度对其愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,野生梭梭带腋芽茎段愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.0 g/L,诱导率为100%;不定芽分化的最佳培养基为MS+NAA 0.5 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+AgNO33.5 mg/L+蔗糖26 g/L+琼脂6.5 g/L,不定芽分化率为97.8%;影响野生梭梭再生的最主要因素是NAA,其次是TDZ和AgNO3,蔗糖影响最小。     

花生幼叶丛生芽高效诱导的制约因素研究

以花生品种豫花14号4 d苗龄的幼叶为外植体,对花生幼叶高频不定芽诱导进行研究。在MS培养基的基础上,添加了芽诱导常用的细胞分裂素6-BA、生长素NAA及两种不太常用的脱落酸(ABA)、噻重氮苯基脲(TDZ),结果表明,单独使用6-BA,NAA或TDZ,不定芽诱导率较低;采用较高浓度的6-BA(8 mg/L)、较低浓度的NAA(1 mg/L),添加低浓度的ABA(1 mg/L),不定芽诱导率可达80%以上。最佳诱导培养基为MS+6-BA 8 mg/L+NAA 1 mg/L+ABA 1 mg/L+AgNO32 mg/L,从整体上观察,最佳继代培养基为MS+6-BA 5 mg/L+NAA 2 mg/L+AgNO32 mg/L。同时研究发现,花生幼叶近叶柄基部切口处不定芽诱导率较高,是较理想的不定芽诱导部位。     

植物激素和光暗培养条件对卷丹百合再生体系的影响

【目的】探究植物激素和光暗培养条件对卷丹百合（Lilium lancifolium Thunb）再生体系的影响,为卷丹百合种质资源开发和大面积推广种植打下基础。【方法】以卷丹百合鳞片为外植体,分析培养基中不同植物激素［NAA、6-BA、2,4-D、噻苯隆（TDZ）和毒莠定（PIC）］配比及光（光照时间14 h/d）、暗（全天黑暗）培养条件对卷丹百合鳞片愈伤组织诱导、增殖及不定芽再生的影响,建立卷丹百合组培高效再生体系。【结果】与不添加任何激素的对照（CK）相比,添加激素的培养基均能显著提高卷丹百合鳞片愈伤组织的诱导率（P<0.05）,其中TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L组合的效果最佳,暗培养条件下其愈伤组织诱导率达65.57%;在TDZ 0.4 mg/L+2,4-D 0.05 mg/L的培养基中暗培养20 d后,再转入TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L的培养基中继续暗培养40 d,愈伤组织增殖倍数最高,可达2.45倍。6-BA与NAA组合比6-BA与PIC组合更利于诱导不定芽的产生,芽再生倍数最高的培养基为6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.1mg/L,暗培养条件下其再生倍数最高可达6.08倍。与光培养相比,暗培养更利于愈伤组织诱导和增殖,但在愈伤组织诱导不定芽阶段,长时间暗培养不利于芽的生长,暗培养20 d后转移至光培养条件下继续培养40 d,生成的不定芽色泽鲜绿,叶片伸展,长势旺盛,利于壮苗和生根。【结论】卷丹百合组织培养的不同阶段受不同种类和浓度的植物激素组合影响;暗培养条件更利于愈伤组织的诱导和增殖,暗培养结合光培养条件最适合不定芽的再生和分化。     

刺儿菜的组织培养及无性系建立研究

以刺儿菜嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导、愈伤组织和不定芽分化以及试管苗生根假植、扦插、移植等研究,建立了刺儿菜的无性繁殖体系.研究结果表明:在刺儿菜组培繁殖过程中,MS+NH4H2PO4 50 mg/L+BA0.5 mg/L+2,4-D0.8 mg/L是诱导嫩茎形成颗粒状愈伤组织的理想培养基,MS+AgNO31.5 mg/L+BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L是诱导愈伤组织分化和不定芽分化的理想培养基,1/3 MS+IAA0.3 mg/L是不定芽生根培养的理想培养基,炉灰渣是试管苗移栽和扦插的理想基质:移植到荒坡上的刺儿菜小苗生长旺盛,并保持了野生刺儿菜的特有生物学性状.     

库尔勒香梨离体叶片再生体系的建立

【目的】建立库尔勒香梨叶片诱导再生的稳定高效再生体系。为梨的遗传转化研究奠定基础。【方法】以库尔勒香梨离体培养的继代30 d左右的无菌苗叶片为材料,1/2 MS为基本培养基,用 TDZ与 IBA或 NAA分别组合设计配方,研究不同生长调节剂质量浓度组合对不定芽诱导过程中愈伤组织形成率和不定芽形成率的影响,选取最优配方附加不同质量浓度的AgNO₃,获得不定芽再生的最佳培养基。用IBA和NAA分别组合设计生根生长调节剂的配比,根据生根率、平均生根数以及平均生根长度筛选最适宜生根的生长调节剂的配比,建立生根的培养体系。【结果】库尔勒香梨叶片诱导不定芽再生的最佳培养基为1/2 MS+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+AgNO₃ 0.5 mg/L,愈伤组织诱导率100%,不定芽形成率84.92%。最适宜香梨再生苗生根的培养配方为1/2 MS + 0.5 mg/L IBA + 0.9 mg/L NAA,结合前期暗培养7 d,生根率可达100%,平均生根条数为5.66,平均根长度为 2.8 cm。【结论】建立了库尔勒香梨的再生体系。     

明水梨叶片不定芽再生体系的建立

以‘明水’梨(Akemizu)叶片为外植体,研究了不同基本培养基,不同浓度噻重氮苯基脲(TDZ)和吲哚丁酸(IBA)的组合,不同暗培养时间以及不同浓度的硝酸银(AgNO3)对梨叶片不定芽再生的影响。试验结果表明,在NN69+TDZ 1.5mg/L+IBA0.2 mg/L+AgNO31.0 mg/L中暗培养25 d后,叶片不定芽再生率最高,达到71.8%。     

白玉龙火龙果不同外植体的离体培养

【目的】研究白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节的不定芽诱导及茎段增殖技术,为白玉龙火龙果的品种改良及快繁育苗提供技术支持。【方法】以白玉龙火龙果种子培育的无菌苗为材料,采用正交试验设计分析不同培养基、不同植物生长调节剂与浓度及其组合对白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节不定芽诱导及茎段增殖与生根的影响。【结果】白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节均能直接诱导不定芽发生。其中,16个正交处理均能诱导子叶节不定芽发生,其最优诱导培养基为WPM+0.50 mg/L TDZ+0.50 mg/L CPPU+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,诱导率为87.1%~100.0%;子叶仅1个处理未能诱导出不定芽,最高诱导率为36.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.50 mg/L TDZ+0.05mg/L CPPU+2.00 mg/L 6-BA+0 mg/L NAA;下胚轴仅5个处理能诱导出不定芽,最高诱导率仅3.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.05 mg/L TDZ+2.00 mg/L CPPU+1.00 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA。茎段去顶处理有利于腋芽的诱导萌发,去顶处理的最大增殖系数为4.2,不去顶处理的最大增殖系数为3.1,其最优增殖培养基为WPM+0.50 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IBA。NAA处理能促进茎段生根,适宜的生根培养基为1/2MS+0.1~0.5 mg/L NAA,生根率达100.0%。【结论】不同基本培养基、植物生长调节剂与浓度及其组合均能诱导白玉龙火龙果子叶、下胚轴和子叶节不定芽发生及茎段芽增殖和不定根产生。其中,不定芽诱导以子叶节最易诱导发生,其次为子叶,下胚轴较难;茎段芽增殖和不定根诱导均较容易。