HPCE测定鱼体内孔雀石绿主要代谢物的残留

[目的]为加强孔雀石绿的管理和监控提供理论依据。[方法]采用高效毛细管电泳法(检测波长为265 nm),研究孔雀石绿在鲫鱼体内的主要代谢物隐性孔雀石绿的残留情况。[结果]不同浓度的隐性孔雀石绿标准品在0.062 5~1.000 0μg/ml范围内与相应的峰面积呈良好的线性关系,回归直线方程为:y=610.230x-23.345(R=0.9994)。加样回收率试验表明,隐性孔雀石绿的回收率为95%~102%。隐性孔雀石绿的保留时间为6.732 min,其在鱼体内的残留时间较长,呈非常平缓的下降趋势,不易消除,药浴30 d后隐性孔雀石绿的残留量为0.028μg/ml。[结论]高效毛细管电泳法检测鱼体内隐性孔雀石绿的残留具有消耗少、分离速度快、灵敏度高、重复性好等优点,且可以直接检测出隐性孔雀石绿。     

孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿在中华绒螯蟹体中的消除规律

采用超高效液相色谱-串联质谱法,研究用2 mg/L孔雀石绿溶液药浴中华绒螯蟹1 h后,孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿在不同条件下的残留消除规律。结果表明,药浴后34 d时,孔雀石绿及隐性孔雀石绿在中华绒螯蟹体内的残留量均低于检测限;28℃条件下消除速率快于22℃;室外开放水域中的消除速率快于室内条件下。     

超高效液相色谱串联质谱法检测水体中孔雀石绿及其代谢物隐性孔雀石绿的含量

研究建立应用超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定环境水体中痕量孔雀石绿(MG)及其代谢物隐性孔雀石绿(LMG)的方法。水样直接通过MCX固相萃取柱富集和净化,通过BEH C18(1.7m,50mm×2.1mm)色谱柱分离,以含0.1%甲酸的5mmol/L乙酸铵水溶液和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾正离子模式,在多反应监测条件下采集质谱信号,外标法定量。结果表明:MG和LMG在0.25~25μg/L浓度范围内成良好的线性关系,0.02μg/L、0.1μg/L、0.5μg/L 3个浓度梯度的回收率为80.6%~92.7%,相对标准偏差为3.29%~8.23%。该方法简便、高效、准确,适用于检测水体中痕量的孔雀石绿(MG)和隐性孔雀石绿(LMG)。     

氨基隐性孔雀石绿抗体的制备及ELISA方法的建立

以N,N-二甲基苯胺、对硝基苯甲醛为原料,合成改造了氨基隐性孔雀石绿半抗原,并通过紫外、红外、质谱鉴定。结果表明,氨基隐性孔雀石绿半抗原改造成功。采用重氮化法合成了氨基隐性孔雀石绿人工抗原,并通过紫外光谱进行鉴定,结果显示偶联蛋白成功。免疫大白兔制备了隐性孔雀石绿抗体,抗体效价达6.4×10~4。建立了隐性孔雀石绿ELISA方法,最低检测线为0.1μg/L。     

应用酶联免疫法快速检测水产品孔雀石绿残留

[目的]探讨酶联免疫检测法在快速检测水产品孔雀石绿残留中的应用。[方法]应用一种酶联免疫试剂盒对市场抽取的43份水产品中残留的孔雀石绿和隐性孔雀石绿进行快速检测。[结果]水产品中孔雀石绿和隐形孔雀石绿检出率为6.98%。[结论]该快速检测法可用于大批量水产品的孔雀石绿和隐性孔雀石绿快速筛查。     

孔雀石绿胶体金快速检测试剂板的研制及应用

为建立孔雀石绿免疫胶体金快速检测试剂板,采用杭州南开日新生物技术有限公司实验室自制的包被抗原孔雀石绿-卵清蛋白偶联物(MG-OVA)、抗孔雀石绿单抗作为原料,将各组分经过调试优化后组装成试剂板。结果表明,该试剂板对阴性水产样品的检测结果与液相-串联质谱法(LC-MS/MS)完全符合,对水产品中孔雀石绿和隐性孔雀石绿的最低检出限分别为1μg/kg和3μg/kg,整个检测所需时间约30min。该试剂板具有快速、灵敏、准确的特点。     

安捷伦高分离快速液相色谱(RRLC)分析孔雀石绿与结晶紫

本文讨论了HPLC方法到RRLC方法的转换,考察了不同延迟体积和温度对孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物梯度分离的影响;主要考察了标准液相和快速高分离液相色谱技术对于孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫和隐性结晶紫的分析结果;还考察了延迟体积、自动延迟体积降低功能(ADVR)对分析结     

孔雀石绿及其代谢物的检测技术研究进展

孔雀石绿已成为影响食品质量安全的重要因素之一。本文介绍了孔雀石绿及其代谢物的化学性质、在生物体内的代谢过程及毒性作用,归纳分析了近年来孔雀石绿及其代谢物检测技术研究进展。     

对国标中HPLC测定孔雀石绿及隐色孔雀石绿的方法改进

[目的]改善国家标准中测定孔雀石绿及隐色孔雀石绿的HPLC。[方法]在国家标准HPLC测定水产品中孔雀石绿(MG)及隐色孔雀石绿(LMG)残留量的基础上,适当优化测定方法,并探讨测定过程应注意的问题。[结果]从HPLC色谱图可以看出,MG和LMG达到了较好的分离。从标准曲线来看,MG和LMG都达到了较好的线性关系。从加标回收曲线来看,加标的MG和LMG也都达到了较好的线性关系。水产品肌肉组织中MGL、MG的检测限为2.0μg/kg。[结论]改善后的HPLC方法简便,精密度高,且没有使用剧毒试剂,适用于水产品中MG及LMG残留量的检测。     

冷冻干燥法制备孔雀石绿降解菌剂及其应用效果研究

利用两株对孔雀石绿具有高效降解能力的菌株，采用冷冻干燥法制备孔雀石绿复合型降解菌剂，通过冻干保护剂的种类、预冷冻时间、菌体含量和冻干厚度等因素对降解菌剂进行性能优化，并对降解菌剂在渔业养殖水体及底泥中的应用进行初步研究。结果表明：多种类的冻干保护剂比单一的保护剂菌体成活率更高，采用冻干保护剂为15 mL·g^-1的15%脱脂乳、5 mL·g^-1的10%蔗糖和0.25 mL·g^-1的甘油，冻干厚度为0.4 cm，预冷冻时间为48 h，真空冷冻干燥16 h，该条件下获得的孔雀石绿降解菌剂外观良好，菌剂细腻，菌体成活率约82.3%。光照条件下，菌剂对渔业养殖水体中浓度为5 mg·L^-1孔雀石绿12 h降解率超过90%，对渔业底泥中浓度为2 mg·kg^-1孔雀石绿及代谢产物隐性孔雀石绿25 d降解率分别为73.36%和76.80%。避光条件下，环境中孔雀石绿更容易转化为隐性孔雀石绿，添加菌剂可有效降低底泥中隐性孔雀石绿转化为孔雀石绿，增加光照可促进菌剂对两种药物的降解速率，在菌剂和光照的共同作用下，可有效减弱两类药物互相转化，同时提高降解效率。菌剂对养殖环境中的鱼体生长无显著影响（P>0.05）。本研究获得的孔雀石绿复合型降解菌剂具有良好的应用前景。     

孔雀石绿在水产品中残留检测的研究

[目的]为了对孔雀石绿及其代谢产物隐色孔雀石绿的残留研究有更全面、更深入的了解,并为进一步开展孔雀石绿残留检测工作提供参考。[方法]从化学检测法和生物检测法2个方面分别综述了孔雀石绿在水产品中残留检测的主要方法,包括薄层色谱法、分光光度法、共振瑞利散射法、气质联用法、高效液相色谱法和酶联免疫法等。[结果]由于MG和LMG的活性很强,其前处理过程复杂,有待进一步简化并提高回收率。同时,MG和LMG的最大吸收波长1个在可见光范围,1个在紫外范围。给其同时测定带来了一定的难度,因而其残留分析过程比较复杂。[结论]基层的大规模筛选检测以免疫学检测方法更适用更有应用前景,但国际公认的确证方法仍是化学分析法。     

高效液相色谱法检测水产品中的孔雀石绿

采用高效液相色谱法检测水产品中的农药残留孔雀石绿。样品中的孔雀石绿经乙腈与乙酸铵提取,浓缩后固相萃取柱净化、硼氢化钾还原、反向色谱柱分离,再使用荧光检测器检测。应用该方法孔雀石绿的加标回收率在75.1%～95.1%之间,相对标准偏差3.7%～7.1%,检出限均为0.5μg/kg。结果表明:该方法检测孔雀石绿处理简单快捷,灵敏度高,可用于大量样品的快速分析。     

孔雀石绿对日本锦鲤小瓜虫病的治疗试验

小瓜虫病是观赏鱼养殖常见病、多发病,若治疗不及时,死亡率高达90%以上;温室养殖日本锦鲤,由于养殖密度较大,水质较差,极易诱发小瓜虫病。通过孔雀石绿对日本锦鲤小瓜虫病治疗试验,对比不同浓度孔雀石绿对小瓜虫病的疗效,结果表明:80min内孔雀石绿对小瓜虫的半致死质量浓度为0.47mg/L。     

菌群EK对孔雀石绿的脱色研究初探

从南京江宁开发区污水处理厂的污泥中分离筛选出一组孔雀石绿脱色菌群EK,研究了该脱色菌群在不同染料质量浓度、培养时间、pH值、温度等培养条件下对孔雀石绿染料的脱色情况。试验结果表明,脱色菌群EK对外界条件无严格要求,适应范围广。但在pH为8.0、温度为35℃、培养时间为48 h条件下对染料有较好的脱色效果;孔雀石绿的最适脱色质量浓度为1400 mg/L。此外,通过对脱色前后体系分光光度的测定比对结果表明,该菌株对孔雀石绿的脱色率可高达99.3%。     

孔雀石绿及其代谢产物在水产动物体内的残留、危害及检测研究进展

从组织病理学、血液学及毒性试验等角度分析了孔雀石绿对动物的危害,描述了有色孔雀石绿和代谢产物无色孔雀石绿间的生物转化关系,并就国内外对孔雀石绿和无色孔雀石绿的检测进展情况等进行了评述.建议国内应大力研究从养殖排出水中清除孔雀石绿的方法,开发出安全有效的孔雀石绿替代药物.     

Na+-Ti(SO4)2法检测鲫鱼组织中孔雀石绿残留

[目的]探究Na^＋-Ti（SO4）2法检测鲫鱼中孔雀石绿残留的方法。[方法]将孔雀石绿溶于浓硫酸显黄色,稀释后显暗黄色,用Ti（SO4）,使其褪色,加入№’变为白色沉淀,依据沉淀量对孔雀石绿残留进行定量测量并采用正交实验优化实验条件。[结果]采用pH值为7．4、硫酸钛和氯化钠的浓度均为2．0mol／L时,可有效地检测孔雀石绿残留。该方法最低检测限为0．01mg／ks,在鲫鱼肌肉和肝脏中的回收率分别为86．63％～91．31％和76．63％。78．08％,相对标准偏差分别为4．21％-2．19％和3．93％-1．86％。孔雀石绿残留在药浴1h后鲫鱼肝脏中能检测到的含量最高（0．0332mg）;到6h时再次出现检测峰值（0．0310mg）,之后随鲫鱼暂养时间的延长检测量显著下降,到第30天肌肉和肝脏中均仅能检测到0．0001mg。[结论]该方法实验成本低,操作简单,周期短,适用于检测水产品中孔雀石绿残留。     

辽宁省淡水鱼中孔雀石绿残留量检测

[目的]了解2013年辽宁省餐饮业淡水鱼中孔雀石绿残留状况,为监管部门提供科学的理论依据.[方法]采用多阶段分层随机抽样的方法在辽宁省5个城市中抽取淡水鱼180份.按照检测标准要求采用液相色谱-串联质谱法,以相应的氘代物为内标物进行测定.[结果]180批样品中有93批检测出孔雀石绿残留,检出率为51.6％.不同城市和不同品种间检出率存在显著差异.[结论]辽宁省淡水鱼中孔雀石绿残留情况比较严重.     

高效液相色谱法检测鳗鱼中孔雀石绿及其代谢物残留

[目的]采用高效液相色谱法测定鳗鱼中孔雀石绿及其代谢物隐色孔雀石绿残留量。[方法]鳗鱼样品用乙腈提取,经脱脂、浓缩、净化和流动相溶解,用高效液相色谱二极管阵列检测器（DAD）测定。[结果]在HPLC条件下,14min内可完成对孔雀石绿和隐色孔雀石绿的测定。在0～0．1μg/ml浓度范围内,孔雀石绿和隐色孔雀石标样工作曲线的相关系数（r）分别为0．9999和0．9998;在2、25、100μg/kg添加水平条件下,孔雀石绿、隐色孔雀石绿的加标回收率分别为85．7％～89．7％和87．6％～91．2％,测定相对标准偏差（RSD）小于5％（n=5）;该方法对孔雀石绿和隐色孔雀石绿的检测限分别为1和2μg／kg（S／N≥3）。[结论]该研究应用HPLC测定鳗鱼中孔雀石绿等残留准确、可靠,其灵敏度符合法规要求。     

孔雀石绿对蚕豆根尖细胞有丝分裂的影响

[目的]研究孔雀石绿对蚕豆根尖细胞有丝分裂的影响。[方法]采用不同浓度的孔雀石绿溶液处理蚕豆根尖细胞12、24、36、48和72h,通过常规染色体压片技术,观察蚕豆根尖细胞有丝分裂,并计算各处理组的有丝分裂指数。[结果]随着处理时间的延长,有丝分裂指数呈M型变化趋势,说明蚕豆根尖对孔雀石绿有一个适应过程。随着孔雀石绿浓度的升高,有丝分裂指数逐渐升高,在浓度为0.50～1.00mg/L时,有丝分裂指数整体达到顶点;随着孔雀石绿浓度的进一步升高,有丝分裂指数有所下降,说明孔雀石绿在一定浓度范围内对植物生长有利。[结论]该研究可以为孔雀石绿的合理利用提供依据,并为评价孔雀石绿对环境的危害提供参考。