舒巴坦和EDTA使产ESBLs鸡大肠杆菌恢复对抗菌药物敏感性

摘要：为测定舒巴坦和EDTA对抗菌药物体外抗菌活性的影响,采用微量肉汤稀释法,测定10种抗菌药物及其与舒巴坦、EDTA、舒巴坦 EDTA联用对产ESBLs鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。结果表明,舒巴坦和EDTA可以增强部分抗菌药对产ESBLs鸡大肠杆菌的抗菌活性,产ESBLs菌对常用第三代头孢头孢噻呋、头孢噻肟的耐药率高于80%,对氟喹诺酮类、多西环素、氟苯尼考、阿米卡星、磷霉素的耐药率高达100%,对第四代头孢头孢吡肟的敏感率为100%;对加舒巴坦的头孢噻肟、氟苯尼考、阿米卡星及磷霉素的耐药率低于未加舒巴坦的单方药物,分别为0、88.9%、88.9%、0;对加EDTA的加替沙星、多西环素、氟苯尼考、阿米卡星及磷霉素的耐药率低于未加EDTA的单方药物,分别为30%、11.1%、22.2%、11.1%、0;多数菌株对加舒巴坦 EDTA的阿米卡星、磷霉素、氟苯尼考、头孢噻呋的耐药率较加舒巴坦或EDTA进一步降低,耐药率均为0。     

舒巴坦钠和EDTA使产ESBLs鸡大肠杆菌恢复对抗菌药物敏感性

为测定舒巴坦钠、膜通透性促进剂(EDTA)对抗菌药物体外抗菌活性的影响,采用微量肉汤稀释法,测定10种抗菌药物及其与舒巴坦钠、EDTA、舒巴坦钠+EDTA联用对产ESBLs鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC).结果表明,舒巴坦钠和EDTA可以增强部分抗菌药物对产ESBLs鸡大肠杆菌的抗菌活性,产ESBLs菌对常用第三代头孢噻呋、头孢噻肟的耐药率高于80%,对氟喹诺酮类、多西环素、氟苯尼考、阿米卡星、磷霉素的耐药率高达100%,对第四代头孢头孢吡肟的敏感率为100%;对加舒巴坦钠的头孢噻肟、氟苯尼考、阿米卡星及磷霉素的耐药率低于未加舒巴坦钠的单方药物,耐药率分别为0、88.9%、88.9%、0;对加EDTA的加替沙星、多西环素、氟苯尼考、阿米卡星及磷霉素的耐药率低于未加EDTA的单方药物,耐药率分别为30%、11.1%、22.2%、11.1%、0;多数菌株对加舒巴坦钠+EDTA的阿米卡星、磷霉素、氟苯尼考、头孢噻呋的耐药率均较仅加舒巴坦钠或EDTA的低,耐药率均为0.     

泵抑制剂对诱导产ESBLs鸡大肠杆菌抗菌药物敏感性的影响

目的:探讨头孢曲松、头孢噻肟、头孢噻呋诱导鸡源大肠杆菌耐药产ESBLs与主动外排机制的关系。方法:用头孢曲松、头孢噻肟、头孢噻呋诱导3株临床分离菌和标准菌O78至产ESBLs;采用琼脂二倍稀释法观察外排泵抑制剂利血平和CCCP对诱导菌抗菌药物敏感性的影响。结果:加入利血平后,头孢曲松诱导后的菌株,阿米卡星、氟苯尼考、磷霉素组的MIC值变化有统计学差异,耐药率下降范围为25%～75%;头孢噻肟诱导后的菌株,头孢曲松、头孢噻呋、多西环素、氟苯尼考、磷霉素组MIC值变化有统计学差异,耐药率下降为25%～100%;头孢噻呋诱导后的菌株,其中头孢曲松、头孢噻呋、阿米卡星、氟苯尼考、磷霉素有统计学差异,耐药率下降为25%～100%。加入CCCP以后,仅头孢噻肟诱导后的菌株,头孢曲松MIC值变化差异显著;头孢噻呋诱导的菌株,头孢曲松、氟苯尼考差异显著;且耐药率下降范围均为25%～75%;利血平与抗菌药物合用后对诱导菌抗菌药物敏感性的影响高于CCCP。结论:3种头孢类药物诱导后的菌株对10种抗菌药物的外排表型存在差异;鸡大肠杆菌特异性耐药机制ESBLs可激活非特异性耐药机制外排表型的过度表达。     

黄柏与抗菌药联合抗耐药大肠杆菌的作用研究

为研究黄柏水提取物与抗菌药联合体外抗含fos A3和β-内酰胺酶(ESBLs)型耐药基因大肠杆菌的效果,对临床分离的细菌进行鉴定,确定细菌所含耐药基因种类,采用二倍微量稀释法分别检测黄柏水提取物与抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),并以1/2 MIC的黄柏水提取物与抗菌药联合抑制耐药大肠杆菌。结果显示,分离到含fos A3和CTX-M耐药基因大肠杆菌;黄柏水提取物的MIC大于0.5 g/m L,以1/2 MIC的黄柏水提取物与14种抗菌药联合使用3代后,抗菌药抗菌活性显著增强,黄柏水提取物可显著降低抗菌药MIC,头孢曲松钠、阿莫西林、环丙沙星、左旋氧氟沙星、黏杆菌素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、加替沙星、头孢他啶、头孢噻呋钠、氟苯尼考、磷霉素的MIC均降到1.562 5μg/m L以下。黄柏水提取物联合抗菌药应用可能具有协同抑菌作用,可用于耐药细菌感染疾病的临床治疗。     

舒巴坦、EDTA对抗菌药物体外抗菌活性的影响

为探明β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦和膜通透性促进剂EDTA对抗菌药物体外抗菌活性的影响及二者之间的相互作用。采用微量肉汤稀释法,测定了12种抗菌药物及其与舒巴坦、EDTA、舒巴坦+EDTA联用对临床分离的6株产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鸡大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明,舒巴坦降低了第3代头孢菌素类、阿米卡星、氟苯尼考及磷霉素的MIC值;EDTA降低了氟喹诺酮类、多西环素、氟苯尼考及黏菌素的MIC值;舒巴坦+EDTA与阿米卡星、磷霉素、氟苯尼考、第3代头孢菌素联用较舒巴坦或EDTA与这4类抗菌药联用对多数菌株的MIC值均进一步降低。β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦和膜通透性促进剂EDTA不仅可以增强部分抗菌药对产ESBLs鸡大肠杆菌的抗菌效果,而且二者之间有一定的协同作用。     

东北地区猪大肠杆菌mcr-1与多重耐药表型的相关性

2017年,本实验室从东北三省分离收集猪大肠杆菌239株,检测受试菌株对13种抗菌药物的多重耐药表型及耐黏菌素菌株的mcr-1携带率,并分析两者之间的相关性。结果发现有112株菌检出mcr-1,检出率为46.9%(112/239),有9株对黏菌素耐药的菌株未检出mcr-1。mcr-1阳性菌株对头孢噻呋、头孢喹肟、庆大霉素、阿米卡星、多西环素、氟苯尼考、黏菌素、恩诺沙星和乙酰甲喹的耐药率均极显著高于mcr-1阴性菌。结论:mcr-1耐药基因与猪大肠杆菌的多重耐药表型特征具有明显的相关性。     

爬山虎水提液与抗菌药联用对含fosA3基因大肠杆菌的抑菌效果

[目的]探讨爬山虎水提液与抗菌药联用对含fosA3基因大肠杆菌的抑菌效果,为爬山虎的综合开发利用提供参考依据.[方法]从病猪的肠道组织分泌物中分离菌株,对其进行鉴定和fosA3基因检测,采用二倍微量稀释法检测爬山虎水提液与不同抗菌药的最小抑菌浓度(MIC),然后用微量棋盘稀释法测定爬山虎水提液与抗菌药联用的抑菌浓度指数(FICI).[结果]分离获得的菌株为含fosA3基因大肠杆菌,爬山虎水提液对含fosA3大肠杆菌的MIC为500g/mL.以500 g/mL爬山虎水提液与头孢曲松钠、磷霉素、粘杆菌素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢噻呋钠、氟苯尼考、头孢噻肟等9种抗菌药联用的FICI为0.188～1.000,其中,爬山虎水提液与粘杆菌素、氟苯尼考间存在协同作用,与头孢曲松钠、磷霉素、痢菌净、磺胺间甲氧嘧啶、阿米卡星、头孢噻呋钠、头孢噻肟呈相加作用.[结论]爬山虎水提液可增强部分抗菌药对含fosA3大肠杆菌的抗菌活性,且呈协同或相加作用.     

淫羊藿水提取物联合抗菌药对耐药大肠杆菌的体外抑制效果

【目的】探究淫羊藿水提取物联合抗菌药对耐药大肠杆菌的体外抑菌效果,为兽医临床中西联合用药提供参考依据,也为中药在抑制耐药菌株上的开发研究打下基础。【方法】采用二倍微量肉汤稀释法测定淫羊藿水提取物及各抗菌药对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC),然后以微量肉汤棋盘稀释法测定淫羊藿水提取物与抗菌药联用后的部分抑菌浓度指数(FICI)。【结果】淫羊藿水提取物与粘杆菌素、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻呋、阿莫西林、磷霉素、阿米卡星、氟苯尼考、乙酰甲喹、林可霉素联用后能有效降低药物的MIC,对应的MIC均降低4倍以上,联合用药的FICI分别为0.13、0.26、0.26、0.25、0.51、0.51、0.50、0.75、0.75和0.75,对产ESBLs大肠杆菌的抑制效果表现出协同或相加作用;以其联合诱导产ESBLs大肠杆菌传代,从第1代即能明显降低这些抗菌药的MIC,且稳定至第3代。【结论】淫羊藿水提取物与粘杆菌素、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻呋、阿莫西林、磷霉素、阿米卡星、氟苯尼考、乙酰甲喹、林可霉素联用是通过协同或相加作用而提高抗菌药对产ESBLs大肠杆菌的抑制效果,但不宜与磺胺类、喹诺酮类联合用药。     

含珠草水提取物与抗菌药联用对含fosA3耐药基因大肠杆菌的抑菌效果研究

为探讨含珠草水提取物与抗菌药物联用体外抗含fos A3耐药基因大肠杆菌的效果,对临床分离的细菌进行鉴定,确定细菌所含耐药基因种类,采用96孔反应板二倍微量稀释法分别检测含珠草水提取物与抗菌药物的最小抑菌浓度(MIC),以1/2 MIC的含珠草水提取物与抗菌药联合诱导含fos A3耐药基因大肠杆菌,并进行传代试验,采用微量棋盘稀释法测定含珠草水提取物与抗菌药联合作用后的部分抑菌浓度指数(FICI)。结果显示,分离到的菌株为含fos A3耐药基因大肠杆菌;含珠草水提取物的MIC为0.5 g/m L,以0.25 g/m L的含珠草水提取物与14种抗菌药联合使用3代后,14种抗菌药的MIC显著降低,均降到1.562 5以下;含珠草水提取物与头孢曲松钠、磷霉素、黏杆菌素、磺胺间甲氧嘧啶、头孢他啶、头孢噻呋钠联合应用后其FICI均小于等于0.5,与阿莫西林、环丙沙星、诺氟沙星、左旋氧氟沙星、痢菌净、克林沙星、阿米卡星、氟苯尼考联合应用后FICI均大于0.5且小于1。表明,含珠草水提取物与抗菌药联合应用后,抗菌药体外抗菌活性显著增强,二者之间具有协同或相加作用。     

兔源大肠杆菌的分离鉴定及药物敏感性检测研究

对河南省部分地区的兔源大肠杆菌做了分离鉴定,并进行兽医临床常用抗菌药物的敏感性检测。从郑州、济源、登封、武陟4个地区的兔场分离鉴定出27株大肠杆菌,进行了11种药物的敏感性检测,结果表明:27株大肠杆菌对多粘菌素的敏感率(96.3%)最高,对头孢噻呋/舒巴坦、头孢噻呋、阿米卡星的敏感率依次为:59.3%、59.3%、55.6%,对兽用常见抗生素头孢噻呋、阿米卡星、氟苯尼考等均有不同程度的耐药现象。     

氟苯尼考水溶性油剂对人工诱发鸡大肠杆菌病的疗效

目的:观察氟苯尼考水溶性油剂对实验性鸡大肠杆菌病的临床疗效.方法:采用试管二倍稀释法测定氟苯尼考与氯霉素对质控菌ATCC25 922、试验菌O78和临床分离的72株耐氯霉素大肠杆菌的体外抗菌活性;180只22日龄海兰褐蛋雏鸡人工诱发大肠杆菌病后,随机分为3个不同剂量氟苯尼考组(150 mg/L、100mg/L和50 mg/L)、氯霉素组(200 mg/Kg)、健康对照组和感染对照组,每组30只,按设定剂量连续口服给药3d,统计各组的治愈率和增重.结果:表明质控菌和O78对氟苯尼考、氯霉素均敏感,72株耐氯霉素临床分离菌株对氟苯尼考的敏感率为68.1%;氟苯尼考高、中、低剂量组及氯霉素组对鸡大肠杆菌病的治愈率分别为96.7%、93.3%、90%及83.3%,而感染对照组鸡的死亡率为63.3%;各用药组的增重效果极显著高于感染对照(P<0.01).结论:说明氟苯尼考对耐氯霉素的大肠杆菌仍然有较高的敏感率以及水溶性油剂对临床大肠杆菌病疗效显著.     

鸡致病性大肠杆菌耐药菌株分离与鉴定(英文)

[目的]对鸡致病性大肠杆菌耐药菌株进行分离和鉴定。[方法]对采自商丘市周边4个鸡场的粪样,进行大肠杆菌的分离,并对所分离的菌株进行生化鉴定,同时采用试纸片法对获得的大肠杆菌进行耐药谱分析。[结果]试验获得的35株大肠杆菌中,有11株对氟苯尼考、丁胺卡那霉素、新霉素、庆大霉素敏感,12株对环丙沙星、强力霉素、诺氟沙星中度敏感,15株对红霉素、青霉素、链霉素耐药。[结论]加强生物安全措施,合理使用疫苗,选择有效的抗生素,才是控制大肠杆菌最经济有效的办法。     

氟苯尼考与黏菌素联用对猪大肠杆菌与链球菌的体外抗菌作用

采用棋盘法,测定了氟苯尼考与黏菌素联用对猪大肠杆菌、链球菌分离株的体外抗菌活性。结果表明:猪大肠杆菌、链球菌分离株均对氟苯尼考呈现出耐药性,其最小抑菌浓度(MIC)为0.64~5.12 mg/L,大部分大肠杆菌分离株对黏菌素耐药,仅对其中一株有明显效果。棋盘法测得氟苯尼考与黏菌素联合对猪大肠杆菌、猪链球菌分离株的部分抑菌浓度(FIC)指数为0.031 26~0.140 63,均为协同作用。当浓度大于或等于0.16 mg/L时即呈现出协同作用。     

青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌耐药性调查与优势基因型分析

【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对249株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证实验,采用PCR方法、序列测定以及生物学分析软件进行ESBLs耐药质粒的DNA扩展和基因型分析,利用SPSS19.0软件对产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】83.13%（207/249）的鸡源大肠杆菌菌株产ESBLs;产ESBLs菌株对7种抗菌药的耐药率高于非产ESBLs菌株,其中对庆大霉素、大观霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋等5种药物差异显著（P＜0.05）,而产ESBLs菌株对四环素和氟苯尼考2种抗菌药的耐药率显著低于非产ESBLs菌株;产ESBLs菌株多重耐药程度显著高于非产ESBLs菌株,其多重耐药率分别为99.03%和92.86%（P=0.035）;CTX-M型、TEM型和OXA型ESBLs菌株的检出率分别为100.00%、99.52%和47.83%,未检测出SHV型ESBLs菌株;产酶菌株分属于10个基因亚型,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型是优势基因亚型,并首次从健康家禽中检测到基因重组嵌合体CTX-M-123和CTX-M-64。【结论】产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株在青岛地区广泛流行和传播;产ESBLs菌株耐药相对非产ESBLs菌株严重;相比国内其它地区,CTX-M型和TEM型同样成为青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株的流行基因型,但基因亚型存在差异,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型分别是各基因型的优势基因亚型。     

中西药联用对禽源大肠杆菌的体外抑菌效果研究

[目的]探讨中西药联用对禽源大肠杆菌的体外抑菌效果.[方法]采用微量肉汤稀释法测定2种临床常用西药（氟苯尼考、恩诺沙星）和4味中药（黄连、黄芩、金银花和板蓝根）对大肠杆菌多重耐药菌株的MIC值,探讨2种西药和4味中药联用对禽源大肠杆菌多重耐药菌株的体外抑菌活性.[结果]6种药物对大肠杆菌标准菌株和多重耐药菌株均具有抑菌活性.在8种中西药联用药物组合中,氟苯尼考/黄芩、恩诺沙星/黄连、恩诺沙星/黄芩3组药物组合联用具有相加作用,其他5组中西药物组合均呈现无关作用.[结论]该研究可为进一步筛选有效药物组合防治禽大肠杆菌病提供重要指导.     

几种抗菌药物体外抑菌试验

目的：观察4种复方抗菌药物对常见细菌的抑菌作用。方法：配制不同浓度梯度的药物溶液,通过药敏纸片法测量药物对细菌的抑菌圈直径来确定该药物的抑菌效果,评价其在实际生产中的应用价值。结果：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌对浓度为128μg/mL氟苯尼考高敏,大肠杆菌对浓度为64μg/mL氧氟沙星高敏,金黄色葡萄球菌对浓度为256μg/mL盐酸多西环素高敏,大肠杆菌、金黄色葡萄球菌对氨苄西林敏感性不高。结论：氟苯尼考、氧氟沙星对大肠杆菌有较好的抑菌作用效果,氟苯尼考、盐酸多西环素对金黄色葡萄球菌有较好的抑制效果。     

鸭源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR的流行调查

[目的]了解我国部分地区鸭源大肠杆菌氟苯尼考耐药基因floR在临床菌株中的流行情况。[方法]采用美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的肉汤微量稀释法测定22株鸭大肠杆菌对氟苯尼考等9种药物的敏感性,并应用PCR方法检测氟苯尼考耐药基因floR。[结果]22株鸭源大肠杆菌对氟苯尼考和四环素全部耐药,耐药率达100%,呈现多重耐药性特点;其氟苯尼考耐药基因floR检出率为90.9%,与耐药表型基本一致。[结论]氟苯尼考在我国部分地区呈现高耐药性,对其耐药基因的监测为临床抗菌药物的合理使用提供了理论依据。     

Wild-type MIC Distribution and Epidemiological Cut-off Value and Resistant Characteristics of Colistin Against Escherichia Coli from Chickens

The aim of the present study was to investigate minimum inhibitory concentration (MIC) distributions by broth microdilution (BMD) method and to determine the preliminary epidemiological cut-off value (ECV) of colistin by epidemiologicalcut-off (ECOFF) finder against E.coli from chickens in China.Anal swabs were collected from chicken farms in China.BMD method was used to measure MIC50 and MIC90 of colistin which were 2 and 4 μg ? mL~(-1),respectively.MIC frequency distributions for colistin were used to estimate preliminary ECV (8 μg ? mL~(-1)).High percentages of resistance to ampicillin (94.12%),nalidixic acid (94.12%),enrofloxacin (94.12%),tetracycline (94.12%),ciprofloxacin (88.24%),florfenicol (88.24%),neomycin (64.71%),gentamicin (58.82%),levofloxacin (58.82%),doxycycline (88.24%) and cefalexin (76.47%) were found.In addition,low percentages of resistance to amikacin (5.88%),spectinomycin (17.65%) and fosfomycin (41.18%) were noted.Notably,amoxicillin,sulfisoxazole and trimethoprim resulted in a 100 % resistance generation efficacy rate.Prevalence of mcr-1 in E.coli (9/17) in chromosomal DNA was higher than mcr-4 (2/17) gene,and mcr-1 (5/17) was higher than mcr-4 (3/17) in plasmid.