一株蛭弧菌的分离、纯化与PCR鉴定

以弧菌为宿主菌,从南美白对虾养殖池水中分离纯化到一株蛭弧菌,根据噬菌蛭弧菌hit基因序列设计引物并进行PCR扩增,得到了近710bp的扩增产物,经测序比对鉴定,该产物与噬菌蛭弧菌的hit基因100%同源,表明该菌为噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)。     

2种青虾运输方法的比较试验

在保持水温15~17℃条件下,采用添加与未添加噬菌蛭弧菌的尼龙袋充氧法和添加与未添加噬菌蛭弧菌的网格增氧法运输青虾(Macrobrachium nipponensis),统计运输时间分别为4、6、8、10、12、16、20、24、283、2 h的青虾存活率。结果表明,长时间运输时,采用网格增氧法运输所获得的存活率比采用尼龙袋充氧法运输的高,而且噬菌蛭弧菌溶液对运输存活率的提高有明显的改善作用。     

噬菌蛭弧菌预防和治疗斑点叉尾(鱼回)细菌性败血病的初步研究

进行噬菌蛭弧菌预防和治疗斑点叉尾鱼回细菌性败血病试验,结果:在试验水体中加入嗜水气单胞菌对斑点叉尾鱼回进行感染,同时在水体中加入噬菌蛭弧菌,当水中的噬菌蛭弧菌浓度达到105个/ml以上时有预防斑点叉尾鱼回败血病的效果;采用背肌注射嗜水气单胞菌的方法对斑点叉尾鱼回进行感染,然后在水体中加入噬菌蛭弧菌,结果试验鱼全部死亡,说明噬菌蛭弧菌不能起到治疗斑点叉尾鱼回败血病的作用.     

草鱼养殖池噬菌蛭弧菌的分离与鉴定

利用双层平板法,以嗜水气胞菌(Aeromonas hydrophila)为宿主菌,从草鱼养殖池水中分离蛭弧菌一株;根据蛭弧菌hit基因序列设计引物进行PCR扩增,所得产物经胶回收、测序比对,发现其序列与噬菌蛭弧菌的hit基因100%同源,表明所分离得到的为噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)。     

噬菌蛭弧菌预防和治疗斑点叉尾鮰细菌性败血病的初步研究

进行噬菌蛭弧菌预防和治疗斑点叉尾鮰回细菌性败血病试验，结果：在试验水体中加入嗜水气单胞菌对斑点叉尾鮰进行感染，同时在水体中加入噬菌蛭弧菌，当水中的噬菌蛭弧菌浓度达到10^5个／ml以上时有预防斑点叉尾鮰败血病的效果；采用背肌注射嗜水气单胞菌的方法对斑点叉尾鮰回进行感染，然后在水体中加入噬菌蛭弧菌，结果试验鱼全部死亡，说明噬菌蛭弧菌不能起到治疗斑点叉尾鮰败血病的作用。     

噬菌蛭弧菌研究新进展

噬菌蛭弧菌是美国科学家Stolp和Starr1963年发现的一种小型寄生性革兰氏阴性细菌。噬菌蛭弧菌的细胞呈弧状,具有单极生鞭毛,广泛存在于自然界中。它具有独特的双相生活周期,一相是在宿主细胞外的自由游动阶段,另一相是在宿主细胞内的生长繁殖阶段。噬菌蛭弧菌这种奇特的生活方式,引起了人们的广泛兴趣。1967年李明典首次在国内介绍了噬菌蛭弧菌,1981年司稚东进行了国内噬菌蛭弧菌华东地区的分布和分离研究,随后又进行了噬菌蛭弧菌在卫生、水质方面的研究。但1997年后,国内这方面研究日趋减少,因此,本文将国外近年有关噬菌蛭弧菌的研究进行…     

蛭弧菌对草鱼片大肠杆菌生长的控制研究

[目的]研究噬菌蛭弧菌BDYJAL对新鲜草鱼片大肠杆菌生长的控制作用。[方法]进行了蛭弧菌BDYJAL对32株潜在致病菌的裂解试验;并通过设置3个组别：蛭弧菌低浓度组（蛭弧菌∶宿主=1∶1）、蛭弧菌高浓度组（蛭弧菌∶宿主=10∶1）和非添加蛭弧菌对照组,进行了蛭弧菌BDYJAL对草鱼片大肠杆菌的生长控制试验。[结果]蛭弧菌BDYJAL对32株潜在致病菌的裂解率达到了93.8%;鱼片大肠杆菌控制试验中,与对照组相比2个试验组对大肠杆菌的消除控制存在显著差异（P〈0.05）,但这2个试验组在0~36 h内的消除效果无显著差异（P〉0.05）。[结论]蛭弧菌BDYJAL能有效控制新鲜草鱼片的大肠杆菌生长。     

2种青虾运输方法的比较试验

在保持水温15～17℃条件下，采用添加与未添加噬菌蛭弧菌的尼龙袋充氧法和霹加与未添加噬苗蛭弧茼的刚格增氧法运输青虾（Macrobrachium nipponensis）．统计运输时间分别为4、6、8、10、12、16、20、24、28、32h的青虾存活率。结果表明．长时间运输时，采用网格增氧法运输所获得的存活率比采用尼龙袋充氧法运输的高．而且噬菌蛭弧茁溶液对运输存活率的提高有明显的改善作用。     

噬菌蛭弧菌颗粒剂制备条件的优化

试验采用海藻酸钠包埋法对噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)进行固定化,制备得到噬菌蛭弧菌颗粒。以噬菌蛭弧菌活菌数为考核指标,优化噬菌蛭弧菌固定化条件。通过单因素试验和正交试验,评价了海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、蛭弧菌菌液与海藻酸钠胶体溶液的比例(V/V)、玉米油浓度、包埋温度、搅拌时间、搅拌速度和交联时间对噬菌蛭弧菌固定化的影响。结果表明,作为载体配方优化因素的海藻酸钠浓度和玉米油浓度对活菌数具有显著性影响,而氯化钙浓度和蛭弧菌菌液与海藻酸钠胶体溶液的比例(V/V)影响不显著;作为过程优化因素的温度和搅拌速度对活菌数具有显著性影响,而搅拌时间和交联时间影响不显著。在海藻酸钠浓度1.5%、氯化钙浓度6.5%、蛭弧菌菌液与海藻酸钠胶体溶液的比例(V/V)50%、玉米油浓度4.5%、包埋温度47.5℃、搅拌时间40min、搅拌速度450r/min和交联时间36h的条件下,制得的固定化蛭弧菌颗粒活菌数对数值达到7.51。本方法经济、安全、保存效能好,适合在水产养殖中应用。     

噬菌蛭弧菌对池塘水中细菌总数的影响

在池塘水中加入噬菌蛭弧菌,30d后试验组水中的噬菌蛭弧菌数量从最初的1.7×104pfu/mL上升到2.6×104pfu/mL,细菌总数由最初的5.7×106cfu/mL下降到1.4×105cfu/mL;对照组水中的细菌总数变化不明显.试验结果表明,在池塘水中加入噬菌蛭弧菌可以导致细菌总数的下降.     

莆田市用噬菌蛭弧菌给鲍鱼治病，开全国先河

2007年7月26日，莆田市海洋与渔业局水技站技术人员到鲍鱼池做噬菌蛭弧菌的给药、口服比较测试。这是首次在鲍鱼养殖上引进噬菌蛭弧菌，捕食海水里的致病菌。[第一段]     

上海沿海地区蛭弧菌分离及其生长条件研究

[目的]了解上海沿海地区蛭弧菌的分布状况及其生物学特性,为蛭弧菌在防治水产动物病害方面的应用提供参考依据.[方法]采用双层琼脂平板法对采自上海沿海地区不同水域环境中的蛭弧菌进行分离,利用16S rRNA进行鉴定,并对其裂解谱、盐度耐受性、弧菌裂解差异性和培养方式进行研究.[结果]从上海沿海地区共分离到12株蛭弧菌,其中3株(4.2、5.1和3N.3)对弧菌属具有很强的裂解性,但对枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌、脱氮副球菌、乳酸链球菌和保加利亚乳杆菌等有益菌无裂解作用.3株蛭弧菌在盐度1.5%~3.0%的范围内生长状况良好,5.1蛭弧菌株对溶藻弧菌的裂解能力较对副溶血弧菌和哈维氏弧菌的强,其差异达显著水平(P<0.05).宿主菌灭活可有效提高蛭弧菌的生长速度及其浓度,在培养第60 h达峰值;蛭弧菌与宿主菌(大肠杆菌)经异步发酵后,蛭弧菌在培养第72 h达峰值.[结论]从上海沿海地区分离获得的蛭弧菌具有良好噬菌能力,对主要的海水致病菌和淡水致病菌均具有侵染裂解能力,对有益菌无杀灭效果,且具有广盐性特征,可用于蛭弧菌微生态制剂的研发.     

噬茵蛭弧菌在罗非鱼养殖生产中的防病效果

[目的]为了探讨噬菌蛭弧菌（Bdellovibrio bacteriovorus）在罗非鱼养殖生产中的防病效果。[方法]向罗非鱼养殖池泼洒不同浓度的噬菌蛭弧菌或光合细商,观察1个生产周期内养殖池的细菌总数和大肠菌群的变化及罗非鱼的发病情况和产量。[结果]噬菌蛭弧菌用量在5×10^7PFU／m^3以下时,随着用量的增加,细菌总数和大肠菌群的减少幅度越来越明显,罗非鱼因细菌痛导致的死亡也明显减少,产量明显提高;噬菌蛭弧菌与光合细菌配合使用的效果更好;单用光合细菌时,细菌总数和大肠菌群的减少幅度较小,发生较严重的细菌病,不能达到防病的效果。[结论]在罗非鱼养殖生产中,噬菌蛭弧茵的使用量为5×10^7PFU／m^3即可达到预防细菌病的目的。     

噬菌蛭弧菌BDF-H16长期简易保藏方法研究

实验使用自来水双层检测法与平板计数法,研究了不同的保护液、保藏温度和保藏载体的选择对蛭弧菌长期保藏的影响,以及对优化保藏条件下的蛭弧菌复苏率和复苏蛭弧菌的噬菌能力检测,并且对保藏期限内宿主菌的存活情况与蛭弧菌的存活情况的相互影响做了首次的报道。结果表明：以1／100NB等低营养液体为保护液、琼脂为载体、加入适量宿主菌于4qc,蛭弧菌保存可达2年以上,保存期内蛭弧菌的复苏率和出斑数目较对照组都有极其显著的提高（P〈0．01）。宿主菌与蛭弧菌浓度在保藏期内呈下降趋势,在宿主菌浓度下降到10^6 cfu／mL之前,蛭弧菌浓度下降至10^3 pfu／mL;在宿主菌的浓度下降到10^4 cfu／mL之后,蛭弧菌的数目下降至1．0&#215;10^2 pfu／mL。实验结束时,二元保藏中宿主菌／蛭弧菌浓度比保持在10^4／10^2。     

噬菌蛭弧菌BDF-H16长期简易保藏方法研究

实验使用自来水双层检测法与平板计数法,研究了不同的保护液、保藏温度和保藏载体的选择对蛭弧菌长期保藏的影响,以及对优化保藏条件下的蛭弧菌复苏率和复苏蛭弧菌的噬菌能力检测,并且对保藏期限内宿主菌的存活情况与蛭弧菌的存活情况的相互影响做了首次的报道。结果表明：以1／100NB等低营养液体为保护液、琼脂为载体、加入适量宿主菌于4qc,蛭弧菌保存可达2年以上,保存期内蛭弧菌的复苏率和出斑数目较对照组都有极其显著的提高（P〈0．01）。宿主菌与蛭弧菌浓度在保藏期内呈下降趋势,在宿主菌浓度下降到10^6 cfu／mL之前,蛭弧菌浓度下降至10^3 pfu／mL;在宿主菌的浓度下降到10^4 cfu／mL之后,蛭弧菌的数目下降至1．0&#215;10^2 pfu／mL。实验结束时,二元保藏中宿主菌／蛭弧菌浓度比保持在10^4／10^2。     

噬菌蛭弧菌对池塘养殖水质的影响

为了探讨噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio bacteriovorus)在池塘养殖生产中的效果,向大宗淡水鱼类混养池泼洒噬菌蛭弧菌,观察养殖池养殖水体的水温、pH值、NH3-N、亚硝酸盐、硫化氢等主要水质指标的变化及鱼的死亡情况。结果表明:蛭弧菌制剂对养殖水体的主要水化指标具有明显的改善作用,试验塘的NH3-N、亚硝酸盐值极显著低于对照塘(p0.01),而试验塘与对照塘的硫化氢、pH值差异不显著(P0.05)。在鱼病预防方面,蛭弧菌制剂使用后,能有效预防草鱼的赤皮、烂鳃和肠炎病,草鱼的发病率、死亡率明显下降。     

蛭弧菌对九孔鲍生长及养殖 体系细菌群落的影响

研究了蛭弧菌BDH12(登录号为EF094471）对九孔鲍(Haliotis diversicolor aquatilis) 生长、肠道和养殖水 体总菌、弧菌以及水体细菌群落数的影响。结果显示,蛭弧菌组九孔鲍的存活率、壳长和体重分别比对照组增加了 111%、1.8%和7.0%;蛭弧菌组的九孔鲍肠道总菌和弧菌分别比对照组降低8.6%~21.0%和12.2%~27.7%,养殖水体总 菌和弧菌分别比对照组降低2.1%~16.7%和8.0%~34.8%;养殖水体的PCR-DGGE 图谱显示,对照组和蛭弧菌组养殖 水体的细菌丰度值分别在0.54~0.97 和0.50~0.75 之间。结果表明,蛭弧菌BDH12 可以作为一种生物控制因子用于 九孔鲍的健康养殖。     

蛭弧菌防治大菱鲆红嘴病试验

在正常的工厂养殖方式下,红嘴病的发生率为10.17％,添加蛭弧菌后红嘴病发生率可降至0.93％,说明蛭弧菌能有效预防红嘴病的发生.在治疗红嘴病方面,添加蛭弧菌后能100％治愈红嘴病.蛭弧菌浓度越高,红嘴病痊愈越快,最快5d即可全部治愈,所使用的蛭弧菌浓度107 PFU/mL.单独泼洒蛭弧菌或者喂食经蛭弧菌浸泡的饲料,或...     

噬菌蛭弧菌应用研究进展

噬菌蛭弧菌(Bdellovibrio)是寄生于其他细菌并能导致其裂解的一类革兰氏阴性细菌。它对人、动物和植物的绝大多数致病菌具有裂解作用。该文就蛭弧菌在水产养殖、家禽养殖及其他方面的潜在应用以及目前存在的主要问题进行了综述。     

食菌蛭弧菌的分离鉴定初报

从鸡场三批鸡粪便的污水中，以鸡大肠杆菌Ｏ５０、新分离的鸡大肠杆菌和鸡白痢沙门氏菌作为被捕食菌，分离出二株食菌蛭弧菌，这些蛭弧菌在３０℃中培养３￣５ｄ出现蚀斑，以后蚀班面积逐渐扩大。