黄瓜子叶节再生体系优化研究

研究了TDZ和IBA浓度、苗态、外植体切割和接种方式及基因型对黄瓜子叶节再生体系建立的影响。结果表明,最佳芽诱导培养基为M S+0.005 m g/L TDZ+0.05 m g/L IBA;两片子叶脱离种壳且与下胚轴处于弯曲状态的子叶节再生频率最高;保留单片子叶、下胚轴纵切、切除此子叶的2/3且竖直插入为最佳切割和接种方式;农城3号为最佳基因型,每块外植体再生芽数可达1.89。     

酿酒葡萄“赤霞珠”叶片和叶柄离体再生系统建立的研究

以赤霞珠叶片、叶柄为材料,研究了细胞分裂素(TDZ)、不同基本培养基、叶柄砧有无对其不定芽再生的影响。结果表明:TDZ对赤霞珠离体叶片、叶柄不定芽再生有诱导作用,对叶片、叶柄的最高诱导率分别为18.06%和28.57%;叶片再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L,叶柄再生的最佳培养基为MS+TDZ4.0mg/L+NAA0.01mg/L,叶片不定芽生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L+20g/L蔗糖。     

葡萄砧木99R再生体系的建立

以99R葡萄无菌苗叶片、叶柄和茎段为外植体诱导不定芽再生,在MS培养基中附加不同浓度的6-BA与IBA、TDZ与IBA、6-BA与2,4-D组合。结果表明,叶片和叶柄较适宜的再生培养基为MS 5.0 mg/LBA 0.1 mg/L IBA,再生率分别为40.54%和50.00%,茎段适宜培养基为MS 2.0 mg/L BA 0.02 mg/L IBA,再生率达62.50%;一定时间的暗培养处理利于99R葡萄不定芽再生,3周为最适暗培养时间;不同节位外植体不定芽再生率随叶片节位下降而降低;卡那霉素浓度>3.0 mg/L时显著抑制叶片不定芽的发生,头孢霉素浓度<300 mg/L对叶片再生不定芽影响很小。     

美人指葡萄再生体系的建立

以美人指葡萄为试材,研究了不同外植体类型、激素浓度配比以及暗培养时间等对器官再生的影响。结果表明:叶片、叶柄、茎段外植体均可再生出不定芽,其中叶柄的再生率最高;TDZ对美人指葡萄叶柄再生效果比6-BA好,IBA诱导美人指葡萄叶柄不定芽再生率高于NAA和2,4-D;暗培养3周时,美人指葡萄叶柄的再生率最高。叶片再生的最适培养基为:MS+1.0 mg/L TDZ+0.1 mg/L IBA,再生率为60.71%,增殖系数为5.65;叶柄再生的最适培养基为:MS+1.0mg/LTDZ+0.1 mg/L IBA,再生率为93.10%,增殖系数为5.91;茎段再生的最适培养基为:MS+1.0 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,再生率为47.37%,增殖系数为5.00。将再生不定芽置于3/4 MS+0.35 mg/L IBA培养基上诱导生根,完整植株培养35~50 d后炼苗移栽,成活率可达90%。     

小白菜高效子叶离体植株再生体系的建立

以丰顺小白菜带柄子叶为外植体,研究了苗龄、不同激素配比、A gNO3浓度和抗生素、共培养时间对不定芽再生的影响。结果显示,子叶不定芽再生的最佳苗龄为5~9d;经过2d的预培养,在M S 1.0m g/L TDZ 0.1m g/L NAA 7.5m g/L A gNO3 0.5m g/L ABA培养基中,带柄子叶不定芽再生率最高,为82.53%;在含有2.0m g/LIBA的1/2M S0培养基中诱导生根,不定根形成率为100%。抗生素敏感性试验表明,可选择浓度为20m g/L Hyg(潮霉素)作为最适合选择压,抑制农杆菌生长的抗生素选用500m g/L Cb(羧卞青霉素)。不同浓度农杆菌菌液对子叶再生不定芽的影响不大,但共培养时间的长短却明显地影响不定芽的分化。     

宁镇1号大豆子叶节植株再生体系的建立

选用宁镇1号大豆子叶节作为外植体进行离体再生,研究外植体消毒时间、不同激素浓度对大豆子叶节再生的影响。结果表明:宁镇1号大豆用0.1%HgCl_2消毒最适时间为12～16min,不定芽诱导最适的6-BA和TDZ浓度分别为2.0mg/L和0.1mg/L,最适的6-BA和TDZ组合浓度为6-BA 1.00mg/L和TDZ 0.05mg/L,最适合生根的IBA浓度为0.4mg/L。     

蚕豆组织培养再生植株的研究

[目的]研究不同外植体、培养基、基因型及放置方式对蚕豆不定芽诱导效果和植株再生的影响。[方法]以蚕豆幼胚、未成熟子叶、成熟子叶、成熟子叶节为材料,通过诱导不定芽→分成单个小植株→诱导生根这一过程检测不同外植体、培养基、基因型、放置方式对不定芽诱导及植株再生的影响。[结果]所试4种外植体中,以成熟子叶节芽诱导频率最高,可达95%;不同外植体所需要的适宜培养基不同;不同基因型对蚕豆子叶节诱导芽效果差异很大;子叶节垂直半埋于培养基比平置于培养基时,其芽诱导效率高,且不定芽在IBA浓度为120mg/L的MS培养基上诱导生根,长成完整小植株。[结论]该研究建立了蚕豆器官发生再生植株的试验程序,为进一步研究提供试验依据。     

澳洲青苹离体叶片不定芽再生体系的建立

以澳洲青苹试管苗的叶片为外植体诱导不定芽再生,研究不同的BA浓度、TDZ浓度、暗培养时间、叶片放置方式和AgNO3对叶片不定芽再生的影响。结果表明:最适宜的叶片不定芽再生的培养基为MS TDZ 2.0mg/L NAA 0.3 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L和MS BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L 琼脂6.0 g/L 蔗糖30.0 g/L,最适的暗培养时间是20 d,在上述2种培养基中澳洲青苹离体叶片不定芽的再生频率分别达到100.0%和91.7%。     

看护培养和子叶部位对儿菜(Brassica juncea Coss. Var. Gemmifera Lee et Lin) 再生芽发生的影响

以‘种都1号儿菜’(BrassicajunceaCoss.var.gemmiferaLeeetLincv.Zhong-DouNo.1)无菌子叶为材料,对看护培养效果及子叶部位对再生芽发生的影响进行了研究。结果表明,子叶可以直接分化产生再生芽。在接种子叶的同时,接种已有芽点分化的子叶外植体,可以提早再生芽的发生,并能显著提高芽再生率,但对平均再生芽数无明显影响。带子叶柄的完整子叶,其芽再生率最高,并极显著高于不带子叶柄的子叶叶片,但平均再生芽数以不带子叶柄的完整子叶叶片最高;子叶柄培养未能获得再生芽。     

葡萄砧木“1202”离体再生体系的建立

以葡萄砧木"1202"为试材,研究了不同外植体类型、不同植物生长调节剂浓度及配比、不同外植体放置方式等对其不定芽再生频率的影响。结果表明:叶片的再生效果最好,不定芽率达68.78%;葡萄砧木"1202"叶片不定芽再生的最适培养基为MS+TDZ 1.0 mg/L+IBA 0.01 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂5.5 g/L,pH 5.8;叶片最佳放置方式为远轴面接触培养基。将再生不定芽置于3/4 MS+IBA 0.35 mg/L培养基上诱导生根,生根率达80%。再生植株培养35～50 d后移栽炼苗,成活率可达90%。     

松果菊根外植体植株再生能力的评价

为了评价松果菊Echinacea purpurea L.根外植体的再生能力,将从松果菊无菌小苗得到的根外植体和叶片以及叶柄外植体接种到含有不同种类和浓度的细胞分裂素和生长素的培养基上,诱导不定芽的再生.结果表明,在多数情况下,根外植体的再生能力显著高于叶片,和叶柄类似.0.3 mg/L的苄基腺嘌呤和0.01 mg/L的萘乙酸是诱导根外植体不定芽再生最合适的激素种类和质量浓度组合.根外植体培养的不定芽再生频率为100%,每个根外植体得到再生芽1.75个.当把这些由根再生的不定芽从母体组织切开并转移培养到含有0.01 mg/L萘乙酸的培养基后,很容易生根并成为完整的植株.可见根是组培快繁松果菊理想的外植体材料.     

花椰菜下胚轴培养和高频率芽再生技术的研究

以“春秋”花椰菜为试验材料 ,研究了影响下胚轴再生的若干因子。结果表明 ,6 d苗龄的下胚轴在附加 2～ 3m g/ L 6 - BA和 1.0 m g/ L NAA的 MS培养基上培养 ,芽分化率最高 ,达 93.33% ,平均每个外植体产芽5 .71个 ;Ag NO3对下胚轴的细胞生长有明显的促进作用 ;下胚轴的下端比上端产芽早 ,并且较易产生不定芽。     

葡萄抗寒砧木外植体愈伤组织诱导和植株再生体系的研究

[目的] 研究葡萄抗寒砧木外植体愈伤组织的诱导和植株再生体系的建立.[方法] 以河岸、山河系列葡萄抗寒砧木为试材,采用对比试验和正交试验,研究葡萄试管苗再生的最佳外植体、最佳激素组合.[结果] 通过对葡萄叶片、叶柄砧、无芽茎段、新根再生的研究,得出最佳再生外植体为叶柄砧.利用细胞分裂素6-BA、TDZ与生长素组合诱导不定芽,MS＋ 6-BA 3.0mg/L＋ NAA 0.05 mg/L不定芽生成诱导率为6.52％;以MS＋TDZ 3.0 mg/L＋ IAA0.05 mg/L为培养基,诱导率为2.5％.[结论] 建立了葡萄抗寒砧木的再生体系.     

芥蓝子叶离体培养再生植株的研究

以芥蓝Brassica alboglabra Bailey品种‘尖叶夏芥兰’带叶柄子叶和不带叶柄子叶切块为外植体，探讨了直接分化形成不定芽以及不定芽生根的适宜培养基组成．结果表明：带叶柄子叶比不带叶柄子叶切块的不定芽分化率高，其中在MS＋0．05mg／L NAA＋2．0mg／L6-BA＋30．00g／L蔗糖＋8．00g／L琼脂（pH5．8）培养基上，带叶柄子叶的不定芽分化率达93．75％；将分化形成的不定芽转接到不添加NAA和添加0．1mg／LNAA的生根培养基中，不定芽生根率分别达到100％和86．11％，其中以后者所形成的根多且较粗壮．     

加拿大枫树离体再生体系的建立

为了建立加拿大枫树的高效再生体系,以加拿大枫树无菌苗为试材,通过采用不同外植体和含有不同激素的培养基配方,获得了加拿大枫树的芽再生、根系诱导的最佳配方。结果显示：培养基配方2（MS＋1．0mg／LBA＋0．2mg／LIAA）的芽再生率较高（80％）,平均每块外植体的再生芽数最高（2．7个芽/外植体块）,再生芽的质量最好;下胚轴和叶柄的芽再生率为100％,子叶最低,为77．5％。下胚轴平均每块外植体的再生芽数最高（6．5个／块）,叶柄的居中（3．6个,块）,子叶的最低（2．6个／块）;1／2MS＋0．2mg／LNAA配方的枫树生根率为100％,单株生根数最高,为5．9条,且根系生长粗壮。     

薹菜再生体系的建立

为了建立薹菜再生体系进而为转基因工作做准备,以薹菜无菌苗子叶-子叶柄和下胚轴为外植体,研究了适于薹菜再生的外植体类型,以苗龄、AgNO3 的质量浓度和植物生长调节剂组合,建立了薹菜的再生体系.结果表明,5 d苗龄的子叶-子叶柄为最佳外植体材料. 筛选出最佳培养基为1/2NH4+浓度的MS+BAP 5 mg/L+ZT 2 mg/L +NAA 0.7 mg/L+AgNO3 7.5 mg/L,子叶-子叶柄再生频率达67.8%.     

长白山笃斯越桔离体器官再生不定芽的研究

以长白山笃斯越桔组培苗为试材,研究了外植体类型、培养基种类、植物生长调节剂组合、暗培养时间对笃斯越桔不定芽再生的影响。结果表明,以组培苗叶片为外植体的再生不定芽效果好于叶柄和无芽茎段,基本培养基中以改良MS最为适合,1／z改良MS、1／4改良MS培养基均不利于不定芽的再生,培养基中添加ZT的诱导效果好于TDZ、IBA。改良MS为基本培养基附加ZT2．0mg／L和IBA0．3mg／L,暗培养14d后转到光下培养30d,可以使再生频率达到78％,再生芽数达到12．6。