香水莲花多糖粗提物的除蛋白及抗氧化活性研究

为了寻找新型天然抗氧化剂,对香水莲花(Nymphaea hybrid)多糖粗提物进行了除蛋白纯化并测定了纯化产物的抗氧化活性。实验结果表明,三氯乙酸法(TCA)的除蛋白效果优于Sevage法和TCA-Sevage法,其蛋白清除率为70.49%,多糖损失率29.24%。TCA法除蛋白后的多糖,对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基都有较强的清除能力,且与浓度呈量效关系,有一定的还原能力,对脂质过氧化抑制效果明显,具有一定的抗氧化活性。     

玉竹多糖中蛋白质去除方法的对比研究

研究不同方法对玉竹多糖脱蛋白效果的影响.采用4种方法,即沙维积法(Sevag法)、三氯乙酸法(TCA法)、酶法、酶法与Sevag法联用,通过比较不同方法处理后多糖的蛋白含量及多糖含量来确定最佳的脱蛋白方法.结果显示,玉竹多糖脱蛋白的最好方法是酶法与Sevag法的联用,用于去除玉竹粗多糖中蛋白质成分切实可行,可作为纯化玉竹粗多糖的手段之一.     

条斑紫菜多糖脱蛋白方法与条件优化

对紫菜多糖提取液中的杂蛋白质去除方法和条件优化进行了研究。采用Sevag法与三氯乙酸（TCA）法去除紫菜多糖中的游离蛋白质，分别研究了不同溶剂体积比、用量、处理温度和时间等主要因子对蛋白质去除的影响。结果表明，Sevag法最佳脱蛋白条件为氯仿：正丁醇=3：1，样品：氯仿-正丁醇=3：1，振荡时间为30min；三氯乙酸法（TCA法）最佳脱蛋白条件为反应温度80℃、三氯乙酸用量4％、反应时间30min。两种脱蛋白方法比较发现：三氯乙酸法去除蛋白质质的效果优于Sevag法。     

条斑紫菜多糖脱蛋白方法与条件优化

对紫菜多糖提取液中的杂蛋白质去除方法和条件优化进行了研究。采用Sevag法与三氯乙酸（TCA）法去除紫菜多糖中的游离蛋白质，分别研究了不同溶剂体积比、用量、处理温度和时间等主要因子对蛋白质去除的影响。结果表明，Sevag法最佳脱蛋白条件为氯仿：正丁醇=3：1，样品：氯仿-正丁醇=3：1，振荡时间为30min；三氯乙酸法（TCA法）最佳脱蛋白条件为反应温度80℃、三氯乙酸用量4％、反应时间30min。两种脱蛋白方法比较发现：三氯乙酸法去除蛋白质质的效果优于Sevag法。     

嗜热链球菌胞外多糖纯化条件的研究

[目的]探索一种分离纯化嗜热链球菌胞外多糖的途径。[方法]采用嗜热链球菌为材料,以MRS培养基为基础培养基,生产嗜热链球菌胞外多糖。采用酶法、TCA法、Sevag法、酶＋TCA法、酶＋Sevag法、TCA＋Sevag法、酶＋TCA＋Sevag法研究对嗜热链球菌胞外多糖去蛋白的影响,对得到的粗多糖用DEAE-Cellulose离子交换柱和葡聚糖G-100凝胶柱进行了分离,并用紫外光谱扫描对其的纯度进行鉴定。[结果]粗多糖用蒸馏水和0.1 mol/L NaC l通过DEAE-Cellulose离子交换柱可以分为中性多糖和酸性多糖,用葡聚糖G-100凝胶柱对酸性多糖的纯度进行了鉴定,得到单一的峰,紫外光谱扫描对酸性多糖进行全波长扫描,酸性多糖中不含蛋白质和核酸,证明得到的酸性多糖为纯多糖。[结论]酶＋Sevag法为最佳去蛋白法。     

褐藻糖胶脱蛋白及脱色方法研究

采用Sevag法、三氯乙酸(TCA)法和Sevag法与三氯乙酸法相结合的方法对褐藻糖胶进行脱蛋白研究,并研究脱蛋白与未脱蛋白对褐藻糖胶脱色的影响.结果表明,Sevag法与三氯乙酸法相结合脱蛋白效果最佳,当Sevag法操作2次,TCA溶液添加量为1.3 mL/10mL多糖溶液时,蛋白脱除率为78.68%,多糖损失率为28...     

沙棘多糖脱蛋白工艺的优化研究

植物多糖纯化过程中脱蛋白是较为重要的环节之一,为了提高多糖纯化效率,对沙棘多糖脱蛋白的工艺进行了优化研究。先选取了3种不同方法脱蛋白,即三氯乙酸法(TCA法)、沙维积法(Sevag法)、酶法与Sevag法联用,通过比较不同方法处理后的蛋白含量及多糖含量来确定最佳的脱蛋白方法。结果表明,对于三氯乙酸法而言,5%的三氯乙酸脱蛋白效率最高且多糖损失最小;对于Sevag法,反复处理5次脱蛋白效率相对较高且多糖损失率较小;对于酶法与Sevag法联用,酶法+Sevag法2次进行脱蛋白效果最好。并且3种方法相比,酶法与Sevag法联用脱蛋白效率相对最高,且多糖损失率最小。因此进一步设计正交试验来确定木瓜蛋白酶法脱蛋白的最佳条件,结果表明,木瓜蛋白酶法脱蛋白的最佳条件是酶加量5 mg/mL,酶解温度60℃,pH6,且此条件下的蛋白清除率为73.58%。     

桑黄多糖脱蛋白方法与条件的优化

[目的]对桑黄多糖提取液中的蛋白质去除方法和条件进行了优化,并比较了2种方法对蛋白质去除的影响。[方法]采用Sevag法与三氯乙酸（TCA）法去除桑黄多糖中的游离蛋白质。[结果]三氯乙酸法去除蛋白质的效果优于Sevag法,其最佳脱蛋白条件为：5%三氯乙酸用量,处理3次,反应时间30min,。在此条件下,蛋白质去除率为82%,多糖损失率为10.8%。[结论]TCA法为最佳的桑黄多糖脱蛋白方法。     

3种脱除南瓜水溶性多糖蛋白方法的比较

探讨了三氯乙酸法、重金属离子沉淀法和Sevag法3种方法对南瓜多糖提取物进行脱除蛋白处理的效果.结果表明,综合考虑多糖损失率、脱除蛋白率和活性等因素,Sevag法优于三氯乙酸法和重金属离子沉淀法,是适用于南瓜水溶性多糖脱除蛋白的有效方法.     

桑黄多糖脱蛋白方法与条件优化

对桑黄多糖提取液中的蛋白质去除方法和条件进行了优化.采用Sevag法与三氯乙酸(TCA)法去除桑黄多糖中的游离蛋白质,比较两种方法对蛋白质去除的影响.结果表明,三氯乙酸法去除蛋白质的效果优于Sevag法,其最佳脱蛋白条件为:5%三氯乙酸用量,处理3次,反应时间30 min,在此条件下,蛋白质去除率为82%,多糖损失率为10.8%.     

阿胶粗多糖脱蛋白方法比较及抑制酪氨酸酶活性研究

[目的]研究阿胶多糖的分离提纯工艺及其抑制酪氨酸酶活性。[方法]针对阿胶多糖提取中蛋白质的干扰,通过对几种脱蛋白方法(TCA法、Sevage法、蛋白酶法)的比较,优选出阿胶多糖提取液的脱蛋白方法,并探讨阿胶多糖对酪氨酸酶的抑制作用。[结果]TCA法、Sevage法及蛋白酶法的脱蛋白率分别为78.94%、87.73%和29.97%,多糖保留率分别为73.96%、32.14%和72.57%。所得阿胶多糖对酪氨酸酶有一定的抑制作用,当浓度为1 mg/mL时,抑制率为24.42%。[结论]TCA法脱蛋白率较高、多糖损失率较低,筛选方法可有效去除阿胶粗多糖中的蛋白,所得阿胶多糖具有良好的抑制酪氨酸酶作用。     

不同方法对红托竹荪多糖的脱蛋白效果

为保证多糖的药理活性,以蛋白脱出率和多糖损失率为考察指标,比较Sevag法、TCA法、木瓜蛋白酶法和酶-Sevag联用法对红托竹荪粗多糖脱蛋白的效果。结果表明:木瓜蛋白酶法脱蛋白效果最佳,其最佳脱蛋白条件为木瓜蛋白酶浓度4%、酶解温度55℃、酶解时间3h,酶液pH 6.0,在此条件下,蛋白脱出率为77.97%,多糖损失率为19.31%。该法用于脱除红托竹荪多糖蛋白质的工艺简单,成本低,具有一定的应用价值。     

蝉花虫草多糖脱蛋白研究

蝉花虫草粗多糖中杂有蛋白、核酸、酚类等物质,给多糖的分离纯化带来许多干扰,为了排除杂质干扰,获得较为纯净的多糖组分,采用Sevag法和大孔树脂吸附法相结合对蝉花虫草粗多糖进行了脱蛋白试验。结果表明:采用大孔树脂法或Sevag法均不能完全去除粗多糖中的游离蛋白,两种方法结合脱蛋白除杂效果较为理想,蛋白去除率达96%以上。初步分离获得大孔树脂水相洗脱部位和20%乙醇洗脱部位2种主要多糖组分。综合分析,先用Sevag法脱蛋白2~3次,再用大孔树脂AB-8吸附分离,或先大孔树脂AB-8吸附分离获得不同多糖组分,再用Sevag法辅助脱蛋白1~2次,两种方法去除蝉花虫草粗多糖中蛋白的效果均较好。     

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为保证多糖的药理活性,以蛋白脱出率和多糖损失率为考察指标,比较Sevag法、TCA法、木瓜蛋白酶法和酶-Sevag联用法对红托竹荪粗多糖脱蛋白的效果.结果表明:木瓜蛋白酶法脱蛋白效果最佳,其最佳脱蛋白条件为木瓜蛋白酶浓度4％、酶解温度55℃、酶解时间3h,酶液pH 6.0,在此条件下,蛋白脱出率为77.97％,多糖损失率为19.31％.该法用于脱除红托竹荪多糖蛋白质的工艺简单,成本低,具有一定的应用价值.     

刺五加叶多糖的分离纯化及免疫活性研究

研究刺五加叶水溶性多糖结构信息和免疫活性。采用热水提取、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白后得到刺五加粗多糖,粗多糖经EDAE-SepharoseFastFlow离子交换柱和SephadexG-75凝胶过滤柱2次纯化,得到均-多糖组分ASP-2—1;ASP-2—1经三氟乙酸水解、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）衍生化、毛细管区带电泳法（CZE）测定其单糖组成;高效凝胶渗透色谱法测定其纯度和分子量;体外脾淋巴细胞增值试验测定其免疫活性。从刺五加叶中分离纯化得到的均-多糖组分SPA-2—1主要由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、果糖、鼠李糖、木糖等6种单糖组成,摩尔比为27．33：8．92：3．03：1：7．59：20．51,其分子量为13．6KD;小鼠脾淋巴细胞增殖试验表明,SPA-2—1可显著促进脾淋巴细胞的增殖,刺五加叶多糖SPA-2—1具有较强的体外免疫活性。     

镉胁迫对两种海洋微藻生长和抗氧化系统的影响

采用实验生态学和生物化学的方法,研究了不同含量Cd（Ⅱ）（0.05、0.1、0.5、1.0 mmol/L）对两种海洋微藻的可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化氢（H2O2）、丙二醛（MDA）和还原型谷胱甘肽（GSH）含量的影响。结果表明：0.05 mmol/L的Cd（Ⅱ）对湛江等鞭金藻Isochrysis zhan-jiangensis的生长无明显影响,与对照组相比,可溶性蛋白含量略微增加,而高浓度（〉0.05 mmol/L）的Cd（Ⅱ）对湛江等鞭金藻的生长有显著抑制作用,可溶性蛋白含量也迅速减少;普通小球藻Chlorella vul-garis的生长也明显受到Cd（Ⅱ）的抑制,可溶性蛋白含量减少。Cd（Ⅱ）胁迫抑制了两种藻类的SOD活性;随着Cd（Ⅱ）浓度增加,普通小球藻和湛江等鞭金藻的H2O2和MDA含量升高,普通小球藻的GSH含量升高,而湛江等鞭金藻的GSH含量在低浓度Cd（Ⅱ）胁迫下有所升高,高浓度时则下降。Cd（Ⅱ）胁迫对普通小球藻和湛江等鞭金藻的生长和抗氧化系统都产生了一定程度的影响。     

海洋尖尾藻的室内培养

[目的]研究海洋尖尾藻(Oxyrrhis marina Dujardin)室内培养的可行性,为其生理生态特性及其赤潮形成机理的研究奠定基础。[方法]在实验室培养海洋尖尾藻,饵料藻为蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)、湛江等鞭金藻(Isochrysis zhangjiangensis)、亚心形扁藻(Platymonas subcordiformis)和绿色巴夫藻(Pavlova viridis)。[结果]在实验室条件下,除高密度的蛋白核小球藻和湛江等鞭金藻外,以亚心形扁藻和绿色巴夫藻作为饵料时海洋尖尾藻均能良好地生长和繁殖。[结论]该研究为海洋尖尾藻的室内培养解决了饵料问题,实现了海洋尖尾藻室内的长期培养。     

槐米多糖的提取和纯化工艺研究

为探讨中药槐米中可溶性粗多糖的提取工艺,通过单因素试验和L9(33)正交试验,研究了提取温度、料水质量比、提取时间对多糖提取率的影响。结果显示,3个因素对多糖提取率的影响顺序为提取时间、料液比、提取温度,最佳提取工艺为提取温度90℃,料水质量比1∶15,提取时间90 min,所得槐米粗多糖的提取率为5.10%。对槐米粗多糖脱蛋白方法的研究显示木瓜蛋白酶+Sevag法脱蛋白处理效果优于Sevag法和3%三氯乙酸法。     

葡萄多糖-1(VLP-1)的分离及其组成单糖的分析

葡萄干浸泡，匀浆后热水提取，Sevag法除蛋白，DEAE-Sephadex A-25柱层析得葡萄多糖-1。葡萄粗多糖水解物经纸层析及糖脂乙酰酯衍生物气相色谱分析，证明其组成单糖主要为阿拉伯糖(Arabinose)、半乳糖(Galactose)、葡萄糖(G1ucose)、甘露糖(Mannose)，其物质的量之比为50.97％，42．49％，2．83％，3.68％。     

黄芪多糖除蛋白质方法与条件优化

为研究Sevag法除黄芪粗多糖中蛋白质的最佳条件,并比较Sevag法和反复冻融法的除蛋白质效果,采用单因素试验方法,研究不同溶剂比例、用量、处理时间对蛋白质去除的影响。结果显示,Sevag法除蛋白质最佳条件为氯仿：正丁醇=4：1,多糖溶液：Sevag试剂=2：1,搅拌时间为25min。Sevag法与反复冻融法除蛋白质的最适次数为4次,前者除蛋白质的效果优于后者,从而优化了去除黄芪粗多糖中蛋白质的方法,可为黄芪多糖的研究与生产提供技术参考。