大豆体细胞胚胎发生系统组织学研究

大豆体细胞可以诱导发生在形态和结构上类似胚结构的胚状体。利用大豆体细胞胚发生系统进行大豆遗传转化,具有转化频率高、同步性好、转基因植株嵌合体少等诸多优点。对经根癌农杆菌侵染后,在含卡那霉素筛选培养基上生长的大豆未成熟子叶胚性细胞的发生、分化及发育进行了组织学研究。结果表明,体细胞胚以非芽体方式发生。胚性细胞可以从外植体表层或表层下1-2层细胞开始发生。随着胚性细胞的分裂,周围细胞开始退化解体,并形成具有类似胚柄结构的胚状体。之后,呈球形的胚状体突出于表皮之外,并依次发育成心形胚、鱼雷形胚和子叶形胚。以期为利用大豆未成熟子叶诱导体细胞胚发生系统高效转化体系的建立提供理论依据。     

生长素诱导大豆未成熟子叶胚胎发生效应的研究

用 2 ,4_D与萘乙酸两种生长素的各 4种浓度诱导大豆未成熟子叶胚胎发生。结果表明 ,两种生长素均可诱导胚胎发生 ,并且胚胎发生率和平均胚数在两种生长素间无显著差异 ;品种在平均胚数上存在差异。高浓度的 2 ,4_D诱导胚胎发生效果好于低浓度 ,诱导率达 4 1 2 3%。同时 ,观察到诱导大豆未成熟子叶胚胎发生时 ,开始第一周高浓度的 2 ,4_D对胚胎发生有更重要的作用     

低温预处理对大豆未成熟子叶胚胎发生影响的研究

选用3个栽培大豆品种的未成熟子叶在接种前用4℃低温预处理幼苗0，2，3，4，5，6d,研究低温预处理对大豆体细胞胚胎发生的影响。结果表明：4℃低温预处理幼荚3－4d，可刺激大豆体细胞胚胎发生，提高胚胎发生频率。不同品种对低温预处理的反应基本一致。     

草莓胚状体形态发生的研究

对草莓丰香不同器官体细胞胚胎的诱导及形态发生进行了研究。结果表明,草莓体细胞胚胎形态发生经历了与合子胚形态发生相似的阶段,即球形胚—心形胚—鱼雷形胚—子叶期胚等,最后发育成再生植株。草莓不同器官花药、花蕾、叶、叶柄、子叶和下胚轴均能形成体细胞胚,但不同器官的体细胞胚发生率不同,其中以花蕾最高(平均61 74%),子叶次之(平均49 24%)。培养基中激素种类与配比对各器官体细胞胚的诱导率均有明显影响。     

大豆体细胞胚胎发生影响因子的研究

 采用正交试验设计方法研究了MS微量元素、2 ,4 D、萘乙酸、脯氨酸和腺嘌呤的浓度对 5种基因型大豆未成熟子叶愈伤形成和体细胞胚胎发生的影响。结果表明 ,MS微量元素的浓度对出愈率和胚胎发生率均有显著的作用 ;在MS培养基中附加 2 ,4 D、萘乙酸、脯氨酸和腺嘌呤对愈伤的形成有明显的促进作用。微量元素浓度对大豆体细胞胚胎发生有明显的影响 ,各基因型间在胚胎发生时所需激素种类和浓度不尽相同     

大豆体细胞胚的成熟处理及植株再生

选用体细胞胚高频发生的黑龙江省主栽大豆品种 (东农 7819)的未成熟子叶 ,在含高浓度的生长素 MSB培养基上诱导体细胞胚的产生。体细胞胚分别置于 M3、M10、MC三种成熟培养基上或单纯置于灭菌过的培养皿进行干化处理。成熟处理为大豆体细胞胚萌发所必需。单纯干化处理不利于体细胞胚存活 ,而在高渗成熟培养基 MC或 M10成熟处理过的体细胞胚在 MSG(1/2 MSB+ GA)萌发培养基上的萌发率明显高于 M3。成熟处理后 ,形态正常体细胞胚的萌发率达90 % ,明显高于形态不正常胚 4 %的萌发率。对成熟处理过的体细胞胚的组织学研究表明 ,形态学上苗端未分化是形态不正常胚不能形成完整植株的原因之一。     

木薯组织培养研究进展

从器官发生途径和体细胞胚胎发生途径，综述木薯(Manihot esculenta Crantz)组织培养研究进展。木薯器官建成可从顶端分生组织、单芽茎段、叶片、胚轴和子叶等外植体诱导发生。初级体细胞胚可从胚轴、子叶、叶片和花诱导发生，以初级体胚为材料还可进行体胚的循环培养。     

大豆未成熟子叶诱导胚状体发生再生植株

本文以大豆未成熟子叶为外植体，进行了大豆胚状体发生和再生植株的研究。结果表明；ＭＳ基本培养基附加高浓度的生长素，可成功地诱导胚状体发生。２．４－Ｄ比ＮＡＡ具有更强的诱导效果；２．４－Ｄ与ＮＡＡ配比所诱导的正常胚率高于其单用；未成熟子叶不同的放置方式对胚体发生影响极大。畸型胚进行了改良并获得了完整小植株。     

基因型和采样时期对甜樱桃体细胞胚胎发生的影响

以不同基因型甜樱桃的未成熟胚为材料,从幼胚的采样时期、蔗糖浓度和2,4-D等方面探讨了甜樱桃体细胞胚胎发生的影响因素。结果表明：采样时期在花后35 d左右,幼胚≤5 mm时,胚性愈伤组织形成的频率较高（92.9%）;体细胞胚胎发生的适宜培养基为MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋蔗糖40 g/L。     

巴西橡胶树花药体细胞胚胎发生的研究—培养基配方优化及体胚发生的组织学观察

利用来自巴西橡胶树(Hevea brasiliensis Muell.Arg)未成熟花药的愈伤组织进行了体细胞胚胎发生的研究。采用附加BAP、NAA及2,4-D各1mg/L的改良MS培养基诱导获得带有明显前胚结构的胚性愈伤组织。将这些愈伤组织再转移到含有1mg/L激动素及0.1mg/LIAA的培养基上进行培养继而获得体细胞胚胎。胚性愈伤组织的组织学研究结果显示,体细胞胚胎产生于愈伤组织外表的分生组织细胞。此外,在愈伤组织诱导及体细胞胚胎发生中均观察到克隆变异的发生。     

大豆体细胞胚胎发生系统组织学研究(英文)

Soybean somatic cell could induce the development of embryoid which was similar to embryo morphologically and structurally. Somatic embryogenesis system of soybean was used to conduct genetic transformation of soybean because of its several advantages such as higher transformational efficiency,beetter synchronism and fewer plant chimeras among transgenic plants. After infected with agrobacterium tumefaciens,the initiation,differentiation and development of young cotyledon embryogenic cell of soybean which was cultured on selective culture medium with kanamycin were investigated through histological study. The result showed that somatic embryo was differentiated in non-bud differentiation way. The embryogenic cells were differentiated from epidermis of explant or cells in 1 layer or 2 layers,with the division of embryogenic cells and degradation and disorganization of surrounding cells,the embryogenic cells would form embryoid with analogous suspensor structure.Later,globular embryoid would extrude from epidermis then developed into heart-shape embryo.The experiment was expected to provide theoretical reference for the construction of high transformational system of using plant somatic embryogenesis induced by young cotyledon of soybean.     

Histological Study on Soybean Somatic Embryogenesis

Soybean somatic cell could induce the development of embryoid which was similar to embryo morphologically and structurally. Somatic embryogenesis system of soybean was used to conduct genetic transformation of soybean because of its several advantages such as higher transformational efficiency,beetter synchronism and fewer plant chimeras among transgenic plants. After infected with agrobacterium tumefaciens,the initiation,differentiation and development of young cotyledon embryogenic cell of soybean which was cultured on selective culture medium with kanamycin were investigated through histological study. The result showed that somatic embryo was differentiated in non-bud differentiation way. The embryogenic cells were differentiated from epidermis of explant or cells in 1 layer or 2 layers,with the division of embryogenic cells and degradation and disorganization of surrounding cells,the embryogenic cells would form embryoid with analogous suspensor structure.Later,globular embryoid would extrude from epidermis then developed into heart-shape embryo.The experiment was expected to provide theoretical reference for the construction of high transformational system of using plant somatic embryogenesis induced by young cotyledon of soybean.     

Histological Study on Soybean Somatic Embryogenesis

Soybean somatic cell could induce the development of embryoid which was similar to embryo morphologically and structurally. Somatic embryo-genesis system of soybean was used to conduct genetic transformation of soybean because of its several advantages such as higher transformational efficiency, beetter synchronism and fewer plant chimeras among transgenic plants. After infected with agrobacterium tumefaciens,the initiation, differentiation and de-velopment of young cotyledon embryogenic cell of soybean which was cultured on selective culture medium with kanamycin were investigated through histo-logical study. The resuh showed that somatic embryo was differentiated in non-bud differentiation way. The embryogenic coils were differentiated from epi-dermis of explant or cells in 1 layer or 2 layers, with the division of embryogenic cells and degradation and disorganization of surrounding cells, the embryo-genic cells would form embryoid with analogous suspensor structure, later, globular embryoid would extrude from epidermis then developed into heart-shape embryo. The experiment was expected to provide theoretical reference for the construction of high transformational system of using plant somatic embryogene-sis induced by young cotyledon of soybean.     

茶树体细胞植株再生的光照效应

为了探寻光照对茶树体细胞植株再生的影响效果,以茶树全胚,具有子叶柄的子叶为材料,研究５００,１５００ｌｘ,黑暗３种光照条件对植株再生的影响。结果表明,胚状体主要发生在子叶柄了子叶片的隆起处,子叶片隆起发生率随光照度增加而降低,子叶发生隆起的子叶培养物在５００ｌｘ光照度下培养,子叶片的胚状体分化率较高,子叶柄的胚状体,不定芽分化随光照度下降而下降;连续在黑暗下培养,子叶片的畸形胚发生率高,且数量多。     

薇甘菊组织培养及体细胞胚胎发生的研究

研究了4种外植体、10种不同浓度激素组合对薇甘菊(Mikania micrantha H.B.K.)离体再生的影响,并对胚性愈伤组织中的体细胞胚发生发育过程进行了组织细胞学观察.结果表明,所用不同浓度激素组合的培养基均能诱导薇甘菊外植体产生愈伤,培养基以MS+6BA 1 mg/L为最宜;不同种类的愈伤组织再分化结果有明显差异,生长良好的胚性愈伤组织转入分化培养基后可诱导体细胞胚的发生.薇甘菊体细胞胚胎发生的形式为单细胞内起源.体细胞胚起源于胚性愈伤组织的胚性细胞,胚性细胞经过一次不均等分裂产生两个细胞,即胚细胞和胚柄细胞.然后依次经过具胚柄的多细胞原胚,再经过球形胚、心形胚、鱼雷胚阶段,发育成具有子叶的成熟胚状体,然后长成为再生植株.     

紫花苜蓿体细胞胚胎发生及其细胞组织学观察

通过对紫花苜蓿（ Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）外植体愈伤组织进行诱导及对体细胞胚胎发生过程的组织学观察,得出以下结果：１）外植体在 Ｍ Ｓ附加１．０ｍ ｇ／ Ｌ６－ Ｂ Ａ 和１０．０ｍ ｇ／ Ｌ Ｉ Ａ Ａ 的培养基上愈伤组织生长良好,而愈伤组织转入 Ｍ Ｓ附加５００ｍ ｇ／ Ｌ水解酪蛋白的培养基中胚状体的分化能力较强。２）紫花苜蓿的体细胞胚大多是由单个具胚状体发生能力的胚性细胞发育而来,发育过程与合子胚的发育过程相似。在早期原胚发育过程中胚体外一直包围有厚壁。原胚时期和子叶胚时期出现两次淀粉积累现象。     

枣幼胚体细胞胚发生发育的组织学观察

为深入研究枣体细胞胚胎发生的形态建成过程,以小梨枣幼胚为材料,采用苏木精-伊红法染色和石蜡切片技术对体细胞胚发生、发育进行了组织学观察。结果表明：胚型愈伤组织细胞体积小,细胞核大,细胞质浓,细胞排列紧密；而非胚性愈伤组织细胞体积大,细胞核小,细胞质稀薄。体细胞胚产生于幼胚愈伤组织的表层细胞或内部细胞,且发生不同步,其发育过程与合子胚发育过程相似,即经历球形期、心形期和鱼雷期,最终形成子叶形胚。     

棉花优良新品种泗棉3号高频体细胞胚发生和植株再生的研究

选择我国棉花优良品种泗棉３号进行组织培养，获得了具有高频胚胎发生的愈伤组织、胚状体和小植株。在附加ＺＴ的ＭＳ培养基上，泗棉３号的下胚轴、子叶、根均诱导获得了愈伤组织，但其形成率和形成量不同，其中下胚较易诱导获得愈伤组织，根和子叶较差。ＺＴ对愈伤组织形成和生长影响较大，其在愈伤组织诱导中较适的使用浓度为３．０或５．０ｍｇ／Ｌ。     

龙眼胚性培养物APX同工酶的分析方法建立及其在龙眼体胚发生过程中的变化

以龙眼胚性培养物为材料,进行抗坏血酸过氧化物酶(APX)同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法研究,建立一套适合分离龙眼胚性培养物中不同类型APX同工酶的垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳方法;进一步研究了APX同工酶在龙眼体胚发生过程中的变化,发现在胚性愈伤组织、球形胚、子叶形胚3个阶段APX同工酶存在差异.     

攸县油茶胚状体发生及其组织学观察

[目的]研究以攸县油茶(Camellia yuhsienensis Hu)成熟子叶为外植体的胚状体发生情况。[方法]以子叶为外植体,接种于MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT培养基上,诱导胚性愈伤组织。胚性愈伤组织块转接至以MS为基本培养基,添加不同浓度6-BA和NAA的激素组合的培养基上诱导产生胚状体。取不同发育阶段的组织块制作石蜡切片,进行组织学观察。[结果]成熟子叶块接种于诱导培养基MS+2.0mg/L2,4-D+1.0mg/LKT,15d左右开始出现胚性愈伤组织。胚性愈伤组织转接至培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA时胚状体诱导率最高,为87.78%;无激素培养基也能诱导胚性愈伤组织产生胚状体,但诱导率极低,仅为6.67%。组织学观察表明,胚性细胞由愈伤组织表面及其内部邻近的若干细胞分化而来,经过球形胚、心形胚、子叶形胚等不同发育阶段直至成熟胚状体。[结论]诱导胚性愈伤组织分化为胚状体的最佳培养基为MS+2.0mg/L6-BA+0.6mg/LNAA。