健康犬肠道乳酸杆菌某些生物学特性的研究

从健康犬的肠道中分离并鉴定出5株乳酸杆菌,其中嗜酸乳杆菌3株、肠乳杆菌1株、发酵乳杆菌1株。根据其耐胆盐、生长表现等特性选择2株嗜酸乳杆菌（D1-3、D4-3）,作进一步的耐酸性、粘附性、抑菌作用等生物学特性试验。结果表明：D1-3和D4-3菌株能耐受高达6．0g／L的胆盐以及pH值低至2．0的酸性环境,对犬肠粘膜上皮细胞有良好的粘附性,其代谢产物对常见致病菌有较好的抑制作用,对小白鼠无毒性。     

富硒乳酸蛋白粉对乳酸菌生物学特性影响的研究

为初步研究富硒乳酸蛋白粉对乳酸菌生物学特性影响,选择乳酸乳球菌、鼠乳杆菌、嗜酸乳杆菌作为受试菌种,进行蛋白粉对乳酸菌生长增殖影响试验、耐温性试验、酸碱耐受性试验和胆盐耐受性试验以及对乳酸菌产酸的影响试验等。结果显示:蛋白粉具有促进乳酸乳球菌、鼠乳杆菌和嗜酸乳杆菌增殖的作用,富硒乳酸蛋白粉对乳酸乳球菌、鼠乳杆菌和嗜酸乳杆菌的最适浓度分别为1、3和4mg/mL,乳酸蛋白粉对其的最适浓度分别为3、6和9mg/mL;蛋白粉还一定程度的提高了乳酸菌的酸碱耐受性、耐温性和耐胆盐性;还提高了乳酸菌的产酸量。     

嗜酸乳杆菌代谢特性研究

通过对嗜酸乳杆菌菌株Lakcid、336在低pH值、高胆汁盐、常用抗生素的耐药性、胆盐利用等指标的分析来评价嗜酸乳杆菌的代谢特性。结果表明．嗜酸乳杆菌菌株Lakcid、336在低pH值条件下．活菌数存活率分别为47．6％、40．0％;在高胆汁盐的条件下存活率分别为69．5％、98．2％：336菌株对几种常用抗生素的耐药性比较高;在含有4．6845g／LTDCA的MRS培养基中,对TDCA的吸收率分别为74．3％、92．1％,而在含有2．2231g／LTDCA的MRS培养基中．对TDCA的吸收率分别为31．1％、45．3％。综合评价分析,菌株336具有广阔的应用前景。     

富锗酵母蛋白粉对细菌生长及部分生物学特性的影响

为了研究富锗酵母蛋白粉对细菌生长及部分生物学特性的影响,选择大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和嗜酸乳杆菌的标准菌株作为受试菌种,进行富锗酵母蛋白粉对细菌的增菌、耐盐性、酸碱耐受性、温度耐受性的影响以及其对嗜酸乳杆菌产酸和抑菌效果的影响等试验。结果表明:富锗酵母蛋白粉对嗜酸乳杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌有增菌作用,其最适作用浓度分别为1、1、4、4 mg/mL。富锗酵母蛋白粉能一定程度地提高细菌的耐酸碱能力、胆盐耐受能力及温度耐受能力,提高嗜酸乳杆菌的产酸量和其细菌素对大肠杆菌的抑菌效果。本试验为富锗酵母蛋白粉在饲料中的添加提供一定的理论基础。     

动物源乳杆菌筛选及生物特性参数测定

根据益生素选择的关键指标，从健康动物肠道筛选到鸡源乳杆菌２株，猪源乳杆菌３株。其中嗜酸乳杆菌３株、唾液乳杆菌１株、短乳杆菌１株。５株乳杆菌均能耐受浓度为０．５％苯酚和０．８％～１．０％牛胆盐，对ｐＨ３．０有较强的抵抗性，此３项指标均优于保加利亚乳杆菌。其代谢产物对常见致病菌均有一定程度的抑制作用。这５株乳杆菌对小白鼠和１日龄雏鸡均无毒性作用。２株鸡源乳杆菌对雏鸡小肠粘膜上皮细胞有良好的粘附性     

动物源乳杆菌筛选及生物特性参数测定

根据益生素选择的关键指标，从健康动物肠道筛选到鸡源乳杆菌２株，猪源乳杆菌３株。其中嗜酸乳杆菌３株、唾液乳杆菌１株、短直菌１株。５株乳相菌均能耐受浓度为０．５％苯酚和０．８－１．０％牛胆盐，对Ｐ肯较强的抵抗性，此３项指标均优于保加利亚乳杆菌。其代谢产物对常见致病菌均有一定程度的抑制作用。这５株乳杆菌对小白鼠和１日龄鸡均无生作用。２株鸡鸡源乳杆菌对雏鸡小肠粘膜上皮细胞有良好的粘附性。     

MS-D活性糖对肠道菌生长及部分生物学特性影响的初步探究

为研究MS-D活性糖对肠道细菌生长及其生物活性的影响,选择大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和嗜酸乳杆菌4种肠道菌的标准菌株作为受试菌种,进行MS-D对细菌的生长、酸碱耐受性、温度耐受性及耐盐性的影响等试验。结果表明:MS-D对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、嗜酸乳杆菌和金黄色葡萄球菌有增菌作用,最适作用量分别为5%、2%、0.1%和0.4%;MS-D对4种细菌的耐酸碱能力均有一定的保护作用;提高了对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的温度耐受能力;对嗜酸乳杆菌和枯草芽孢杆菌的胆盐耐受能力有一定的保护作用。     

基于永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02对猪源益生性乳酸菌的筛选

【目的】从健康仔猪的粪便及各肠段内容物和黏液中分离乳酸菌,并以永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02为体外细胞模型对猪源益生性乳酸菌进行筛选。【方法】采用分离培养和常规生化试验对乳酸菌进行分离与鉴定。用永生化猪小肠上皮细胞ZYM-SIEC02作为体外模型,通过黏附性试验、耐酸耐胆盐试验和对致病菌的黏附抑制试验对菌株进行筛选。【结果】分离筛选出了12株乳酸菌,其黏附能力存在差异。Y091231、Y091221、Y224031、X302032、Y223052和Y223072等6株菌的黏附性较好,黏附指数依次为:2 903.25±83.33,2 320.37±81.02,1 965.43±37.72,1 416.12±62.74,1 100.00±68.10,988.73±17.06。对其进行耐酸耐胆盐试验和抑菌试验,结果表明,菌株Y091231、Y091221和Y224031对致病菌均具有较强的黏附抑制能力,且对高胆盐、低pH具有较强的耐受性。其中Y091231对大肠杆菌C83921的黏附抑制率可达(99.40±3.17)%,Y091221对致病性沙门氏菌的黏附抑制率为(97.10±2.04)%,Y091231对金黄色葡萄球菌CVCC2258的黏附抑制率为(98.00±2.31)%。Y091231、Y091221和Y224031 3株菌分别被鉴定为发酵乳杆菌、乳酸乳杆菌和嗜酸乳杆菌。【结论】筛选得到的3株益生性乳酸菌,不仅具有耐酸耐胆盐能力,而且对小肠黏膜上皮细胞具有强黏附性,对大肠杆菌C83921、致病性沙门氏菌和金黄色葡萄球菌CVCC2258具有较强的黏附抑制能力,可作为肠道微生态制剂的候选菌株。     

新疆酸马奶中优良乳酸菌的分离鉴定及发酵特性分析

从新疆地区自然发酵酸乳中分离到25株乳酸细菌,通过在牛乳中的传代发酵试验筛选出3株遗传性状稳定、凝乳状态好、风味独特乳酸菌菌株,其中杆菌1株,球菌2株,经形态特征、生理生化特性和16 Sr DNA序列同源性分析,将菌株5-3鉴定为肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides),菌株6-7鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum),菌株1-6鉴定为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus),同时对3株菌进行发酵性能测定及感官综合评价,结果表明:3株菌都具有较好的发酵性能和良好的发酵风味.     

两株鹿源芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

为获得鹿源肠道菌群中的芽孢杆菌并研究其益生作用,对梅花鹿肠道分泌物85℃水浴处理15min以筛选芽孢杆菌。根据菌落形态、生理生化特征及分子生物学结果进行鉴定,通过抑菌试验、耐酸、耐胆盐试验及产纤维素酶试验等方法对其生物学特性进行研究。结果表明:试验共分离出4株芽孢杆菌,分别编号为XF-1、XF-2、XF-3、XF-4,对其中的两株进行鉴定,最终确定XF-1为地衣芽孢杆菌,XF-3为解淀粉芽孢杆菌。采用牛津杯法研究两株芽孢杆菌对4种致病菌的抑制作用,发现XF-1对大肠杆菌、链球菌、沙门氏菌都具有良好的抑制作用,XF-3对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌、沙门氏菌都具有良好的抑制作用。选择CMC-Na培养基检测这两株芽孢杆菌的产纤维素酶能力,试验表明,菌株XF-1的纤维素降解指标为D/d=2.18,菌株XF-3纤维素降解指标为D/d=3.18,XF-3的降解纤维素能力高于XF-1。试验中计算在不同酸性环境和胆盐环境中菌株的成活率,评价耐受能力的差异,结果表明:XF-1在p H值3.0环境中24h存活率是7.3%,在0.2%胆盐环境中24h存活率为8.57%,可产纤维素酶;XF-3在p H值3.0环境中24h存活率是12.5%,在0.2%胆盐环境中24h存活率为6.67%,可产纤维素酶。试验结果证明这两株芽孢杆菌有一定的抗逆性和益生能力,具有作为益生菌研究开发的潜力。     

狼山鸡消化道乳酸菌的分离·鉴定以及生物学特性研究

[目的]分离和鉴定狼山鸡消化道乳酸菌,为开发新型禽用微生态制剂提供依据。[方法]利用厌氧菌分离技术,从狼山鸡肠道中分离乳酸菌,通过形态、生理生化特性、16S rRNA基因序列测定以及同源性分析对其进行鉴定,并对菌株进行耐酸性、抗菌活性等筛选。[结果]分离到5株乳酸菌LCr-01、LCr-02、LCe-01、LCe-02、LCe-03,经过生理生化试验、16S rRNA基因序列测定以及同源性分析,初步鉴定植物乳杆菌、卷曲乳杆菌、德氏乳杆菌以及嗜酸乳杆菌。其中,LCr-02具有较强的耐酸性和抗菌活性。[结论]筛选到的5株菌乳杆菌中LCr-02具有较强的耐酸性与抗菌活性。     

海南文昌鸡源抑菌乳酸菌的筛选鉴定

为获取具有抑菌活性的海南文昌鸡源乳酸菌，笔者以海南文昌鸡的肠道粘膜及内容物为样品分离乳酸菌。通过菌株形态观察，革兰氏染色镜检、过氧化氢试验和16S rRNA基因序列测序鉴定乳酸菌；而后利用乳酸菌对酸和胆盐的耐受性及其抑菌试验从中筛选出热带动物肠道源抑菌乳酸菌。本研究共获得17株乳酸菌，分别为13株植物乳杆菌和4株粪肠球菌，其中植物乳杆菌对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌均有较高抑制作用，有一定耐酸耐胆盐的能力；粪肠球菌抑菌效果均较差。研究结果表明，筛选获得的海南文昌鸡源植物乳杆菌S4-1综合抑菌效果较好，可用于畜禽肠道益生菌制剂开发的后续研究。     

我国特色发酵蔬菜降解亚硝酸盐菌株的筛选鉴定及应用

从中国传统特色发酵蔬菜中分离纯化出72株乳酸菌,从中筛选出30株亚硝酸盐降解率在85%以上的乳酸菌,并将其进行耐酸耐胆盐试验,获得5株对胃酸和胆盐有较好耐受力的菌株。通过形态学以及16S rDNA测序鉴定,5株乳酸菌均为植物乳杆菌。对这5株菌进行发酵特性研究,结果表明,JLSC2-6生长繁殖旺盛,产酸能力强,耐盐性能好,功能优良,且具有高效降解亚硝酸盐的能力。接种JLSC2-6发酵泡菜,测定发酵过程中泡菜的pH值、亚硝酸盐含量,结果发现,JLSC2-6发酵泡菜的pH值和亚硝酸盐含量与自然发酵泡菜相比显著下降。因此,植物乳杆菌JLSC2-6可作为一种高效安全的发酵菌株应用于发酵蔬菜。     

新疆酸马奶中嗜酸乳杆菌的发酵特性研究

[目的]从新疆传统酸马奶以及市售酸奶中分离鉴定出嗜酸乳杆菌,从中筛选出具有潜在益生特性的菌株进行发酵特性研究,寻找具有优良发酵特性的嗜酸乳杆菌菌株.[方法]利用MRS培养基活化嗜酸乳杆菌,并采用平板菌落计数法测定发酵乳中嗜酸乳杆菌的活菌数,同时利用pH计和NaOH标准溶液滴定酸度以测定发酵乳在发酵过程以及冷藏期间的酸度变化.[结果]发酵24h,嗜酸乳杆菌G14、S22和G13先后到达发酵终点的顺序依次为G14＞ S22＞ G13,其中嗜酸乳杆菌G14的产酸能力最强,发酵乳的滴定酸度为94.83°T,pH值为4.30.4℃冷藏期间,嗜酸乳杆菌G14和S22发酵乳的后酸化程度较菌株G13低.冷藏16d时,各菌株仍具有较高的对数存活率,且菌株G13、S22和G14的对数存活率分别为79.18;、80.12;和85.57;,存活能力的顺序依次为G14＞ S22＞ G13.[结论]嗜酸乳杆菌G14产酸能力最强,最先到达发酵终点.冷藏过程中,嗜酸乳杆菌G14和S22的发酵乳后酸化程度较低,且嗜酸乳杆菌G14的对数存活率最高.     

常见中草药对两种肠道有益菌体外生长的影响

为了解中草药对机体肠道有益菌两歧双歧杆菌、嗜酸乳杆菌体外生长的影响 ,探讨中草药的使用前景。选取清热解毒类的板蓝根、柴胡、连翘 ,泻下类的厚朴、大黄、芒硝 ,补益类的枸杞子、地黄、五味子共 9种常见中草药制成浸提液 ,添加于有益菌体的外生长培养基中 ,采用亨盖特厌氧滚管技术活菌计数。结果显示清热解毒类中药在 3种试验浓度下对两歧双歧杆菌的生长没有显著影响 ,对嗜酸乳杆菌均有抑制作用 (P <0 .0 5 ) ,但不同浓度下抑制作用不同 ;泻下类中药均强烈抑制 2类有益菌的生长 (P <0 .0 1或P <0 .0 5 ) ,且随着浓度的增加抑制作用增强 ;而补益类中药对 2种试验菌均有明显的促进生长作用 (其中对双歧杆菌P <0 .0 5 ) ,且随着浓度增加 ,促进效果增强。因此认为 :在调节肠道微生态平衡方面发挥一定的作用。     

藏灵菇发酵乳中乳杆菌的分离与鉴定

从藏灵菇发酵乳中分离益生乳杆菌,研究其生理生化特性,为功能性乳制品的开发提供优良菌种.先用乳酸菌分离培养基MRS从藏灵菇发酵牛乳中分离得到乳酸菌,再分离纯化出乳杆菌,并对分离的乳杆菌进行生理、生化鉴定,研究其生长特性.结果表明,用MRS培养基从藏灵菇发酵牛乳中共分离出乳杆菌菌株6株,通过生理生化试验确定这6抹分别为：2株发酵乳杆菌、2株嗜酸乳杆菌和2株短乳杆菌.将分离出的菌发酵鲜牛乳,在品尝过程中发现口感较酸,推断其有很强的产酸能力.     

南阳酵子中乳酸菌的分离鉴定及性能研究

采用MRS培养基纯培养的方法从南阳酵子中分离出6株乳酸菌,通过生理生化反应、形态学观察和16S rDNA测序进行鉴定,对分离菌株的生长性能、产酸性能、人工胃液的耐受性和耐胆盐性能进行研究。结果表明：从5个样品中分离到6株乳酸菌分别为发酵乳酸杆菌(Limosilactobacillus fermentum)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)和食窦魏斯氏菌(Weissella cibaria)。其中,I-8发酵乳酸杆菌(Limosilactobacillus fermentum)产酸性能、人工胃液耐受性和耐胆盐性能最高,具有一定的应用开发潜力。     

具有潜在抑制肠道致病菌能力的乳酸菌的筛选

[目的]从实验室保藏的乳酸菌中筛选出耐酸耐胆盐能力较强的乳酸菌,并研究其对肠上皮细胞的黏附能力及对肠道病原菌的抑制能力。[方法]通过模拟人工胃肠液及体外与IEC-6细胞共培养来分别研究乳酸菌的耐酸耐胆盐能力及对细胞的黏附能力,并利用单层琼脂平板扩散法测定其抑菌效果。[结果]试验的27株乳酸菌中,10株乳酸菌在p H 3.0的人工模拟胃液中培养3 h的存活率均大于44.00%,在p H 8.0的人工模拟肠液中培养4 h的存活率均大于51.56%,在含0.30%胆盐的培养基中培养24 h的存活率均大20.00%;其中菌株C13、A03、A17及A90对IEC-6细胞的黏附个数均大于8个/cell;菌株C13、A03对艰难梭菌、沙门氏菌和大肠杆菌的抑制能力较强,抑菌圈直径均大于22 mm。经16S rRNA测序将C13和A03分别鉴定为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosu)和植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。[结论]L.rhamnosu C13、L.plantarum A03的耐酸耐胆盐能力及对上皮细胞的黏附能力较强,对肠道病原菌有较好的抑制作用,可作为良好的抑制肠道病原菌的候选益生菌株。     

益生菌酪酸菌CB-7的生物学特性研究

[目的]考察酪酸菌CB-7的生物学特性。[方法]对菌株的耐酸、耐胆盐、耐高温性能及其对动物肠道致病菌大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌的抑制作用,对肠道有益菌嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和粪链球菌生长的促进作用进行了研究。[结果]酪酸菌CB-7在pH值为3.0的培养基中37℃培养4 h后,存活率达90.0%;在含0.3%牛胆盐的培养基中37℃培养4 h后,存活率达到91.8%;经90℃水浴处理10 min、100℃水浴处理5 min后,存活率均在90.0%以上;对大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌均有显著的抑制作用,其发酵提取物可显著促进嗜酸乳杆菌、双歧杆菌和粪链球菌的生长。[结论]酪酸菌CB-7具有较强的耐酸、耐胆盐和耐高温性能,对肠道致病菌具有较强的抑制作用,且可显著促进肠道有益菌的生长,因此是一株性能优良的饲用菌株。