不同pH人工精浆对性逆转金鳟雄鱼精子活力的影响

研究了性逆转金鳟雄鱼（XX，伪雄鱼）精子在不同pH的人工精浆（ artificial seminal plasma,ASP）溶液中的活动情况。结果显示，随着pH的提高精子活力不断增强。伪雄鱼精子在不同ASP—pHs中培养1h后，pH9．5～10．5培养组精子活力超过正常雄鱼精子（XY）活力水平，且正常雄鱼精子与pH8．5～9．5培养组的精子活力不存在显著性差异（P〉0．05）。将金鳟伪雄鱼精液培育在pH8．5～10．5的ASP中，0～180min内，pH10．5中的精子寿命和激活比例都最佳，180min之后的精子寿命超过80s，激活比例在90％以上，显著好于其他pH组（P〈0．05）。在低温储藏12h后，正常雄鱼精子在ASP—pH10．5溶液中寿命时间最长，为（284．05±78．37）S，其次是同等稀释条件下的伪雄鱼精子寿命，其时间为（203．89±43．68）s，正常雄鱼精液原浆精子寿命最短，为（122．19±37．61）s。直接用金鳟伪雄鱼精液受精，发眼率和仔鱼上浮率仅为12．50％和8．77％，而通过pH10．5的ASP培养后，其发眼率和孵化率分别提高到了52％和49．95％。因此，在高pH的ASP中培养金鳟伪雄鱼精子能提高其活力和延长寿命。通过这种处理也能够显著的提高金鳟全雌和全雌三倍不育后代的育苗生产效率。     

金鳟伪雄鱼的制备及全雌三倍体的诱导

以4龄金鳟Oncorhynchus mykiss为试验鱼（雄、雌性平均体重分别为1．7、2．2kg）,采用人工诱导雌核发育技术灭活金鳟精子,对受精卵进行热休克处理后正常孵化,获得初孵仔鱼;再用雄性激素诱导全雌二倍体,得到性逆转雄鱼（伪雄鱼）;培育至性成熟后进行人工繁殖,采用热休克法对受精卵进行处理获得全雌三倍体鱼类。结果表明：金鳟全雌二倍体的诱导出现率为80％,金鳟伪雄鱼获取成功率为75％;用不同pH人工精浆激活伪雄鱼精巢精子,高pH（9—10）的人工精浆激活受精卵的效果最好,金鳟三倍体的出现率为75％-80％,其中还有一定比率的嵌合体出现。     

薄片镜蛤人工育苗技术的初步研究

于2007年5月-9月,对薄片镜蛤Dosinia laminata的室内人工育苗技术进行了初步研究,并成功培育出壳长1．2～1．5mm的稚贝300万粒。平均壳长为（60．90±2．24）mm的雌性个体每次产卵量为200万粒;在水温24．5～25．5℃、盐度27、pH7．5的条件下,受精卵约经过22h40min发育为D形幼虫;薄片镜蛤的卵径、D形幼虫、变态规格、单水管稚贝和双水管稚贝大小（壳长×壳高,下同）分别为（70．33±1．06）μm、（100．33±1．30）μm×（81.07±1．72）μm、（213．33±8．02）μm×（202．00±5．96）μm、（309．17±9．17）μm×（301．67±10．81）μm、（1158．33±9．31）μm×（1067．50±10．84）μm。浮游期间（0～10日龄）,幼虫壳长、壳高的生长速度分别为（8．28±0．70）μm／d、（9．19±0．76）μm／d,存活率为（36．8±3．78）％;变态期间（10～14d）,幼虫壳长、壳高的生长速度分别为（8．46±0．42）μm、（8．04±0．45）μm,变态率为（5．0±1．25）％,变态持续时间为4～5d;稚贝期间（14～40日龄）,单水管、双水管稚贝的生长快于幼虫期,单水管稚贝壳长、壳高生长速度分别为（32．19±2．06）μm／d、（28．75±1．97）μm／d,双水管稚贝壳长、壳高生长速度分别为（53．07±40．43）μm／d、（47．86±38．22）μm／d,存活率为（81．2±3．36）％。以海泥为附着基采苗效果较好。     

瓦氏黄颡鱼肌肉营养成分的分析和评价

用常规方法对瓦氏黄颡鱼Pelteoebagrus vachelli（体长19．0—21．0cm、体重120．0～125．0g）全鱼和肌肉的营养成分进行了分析。结果表明：瓦氏黄颡鱼肌肉中水分（75．71％±2．39％）和粗蛋白（15．87％±0．57％）的含量高于全鱼（72．68％±1．86％、12．52％±1．80％）,而粗脂肪（7．55％±0．63％）、粗灰分（1．11％±1．11％）、Ca（0．20％±0．02％）、P（0．87％±0．01％）、能量密度（6．74）和E／P值（42．47）均低于全鱼（11．04％±0．60％、3．17％±0．32％、3．12％±0．10％、2．19％±0．06％、7．32和58．47）;该鱼肌肉水解物中共检出17种氨基酸,其中包括7种人体必需氨基酸、2种人体半必需氨基酸和8种非必需氨基酸;肌肉中主要含9种脂肪酸,其中饱和脂肪酸有3种,不饱和脂肪酸有6种。     

腹腔镜治疗异位妊娠240例

目的：观察腹腔镜在异位妊娠手术中的临床应用效果。方法：回顾性分析异位妊娠手术患者440例的临床资料,其中腹腔镜组240例,开腹组200例,比较两组手术效果和术后恢复情况。结果：腹腔镜组和开腹组的手术时间分别为（44．34±15．24）、（68．76±14．36）min;术中出血量分别为（20．12±8．45）、（57．19±24．32）ml,两组相比具有统计学意义（P〈0．05）;下床活动时间分别为术后（5．71±2．18）、（24．23±3．39）h,排气时间分别为术后（8．23±2．45）、（26．32±10．34）h,两组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）;腹腔镜组患者术后康复快,对手术效果满意。结论：腹腔镜异位妊娠手术比开腹手术效果好,手术创伤小,康复快,是值得推广应用的微创术式。     

北方沿海四角蛤蜊人工育苗技术的初步研究

于2004年和2006年对四角蛤蜊Mactra veneriformis人工育苗技术进行了研究。2004年在4个100L塑料桶和30m^3水泥池中分别培育出2—3mm稚贝20万粒和3000万粒,2006年在2个100L塑料桶中育出2～3mm稚贝12万粒。结果表明：室外土池中培育的亲贝（壳长33．97mm±2．90mm）产卵量为（79．7±4．0）万粒／个,海区采集的亲贝（壳长为39．62mm±2．78mm）产卵量为13．2万粒／个;在水温为25．4℃、盐度为24、pH为8．0的条件下,受精卵经过20h 30min发育为D形幼虫;四角蛤蜊的卵径、D形幼虫、后期面盘幼虫、变态规格、单水管、双水管稚贝的大小分别为（50．93±0．49）、（70．96±0．92）、（164．00±3．54）、（186．00±4．22）、（212．00±5．46）、（496．00±9．87）um;壳顶前期生长速度为（7．83—8．83）um／d,壳顶中、后期为（11．38—14．99）um／d;存活率为（80．34±1．86）％。稚贝期（10-45日龄）四角蛤蜊壳长、壳高的比例接近成体;10—15日龄稚贝的生长速度为（32．15—36．82）um／d,存活率近100％;15—30日龄,生长速度达（71．20±9．91）um／d,存活率为（85．30±1．28）％;30～45日龄,生长速度为（49．30±7．12）um／d,存活率只有（14．10±1．61）％。     

人工巢箱条件下大山雀的窝卵数与繁殖成功的关系

2004—2006年,利用人工巢箱在吉林省左家自然保护区次生林中对大山雀（Parus major）的窝卵数与繁殖成功的关系开展了研究。研究表明：大山雀对人工巢箱的利用率逐年减少,年份间差异显著（P〈0．05）。营巢成功率为74．3％,营巢失败的主要原因是人为破坏和天敌占用。大山雀的窝卵数为6—14枚,平均10．2枚,常见窝卵数为10—12枚,卵质量平均为（1．47±0．12）g,卵大小平均为16．5min×12．9min。孵化期平均为（13．8±1．4）d,平均出雏率为（88．4±1．3）％,育雏期平均为（17．3±0．9）d,平均出飞率为（78．1±2．0）％。大山雀窝卵数与孵化期、出雏率、育雏期和出飞率显著正相关.大山雀繁殖成功率逐年增加,不同年份间繁殖成功率差异极显著（P〈0．01）,窝卵数与繁殖成功率无明显相关性。     

上海世博园区水体底泥重金属污染特征与评价

分析上海世博园区水体底泥中Hg、Cu、Zn、Cd、Pb、Cr、As、Se等重金属（类金属）含量,结果表明,№为（0．35±0．17）mg／kg,Cu为（65．86±11．33）mg／kg,Zn为（190．9±28．9）mg／kg,Cd为（0．3585±0．0611）mg／kg,Pb为（32．50±11．04）mg／kg,Cr为（180．7±68．5）mg／kg,As为（10．8±5．5）mg／kg,Se〈0．02mg／kg。运用地累积指数I。。进行评价,结果表明cr和Zn有轻度污染。同时运用潜在生态危害指数RI进行评价,结果为中等生态风险,其中Hg为强生态风险。上海世博园区水体底泥受到Hg、cr、zn等重金属污染,应引起高度重视。     

上海世博园区水体底泥重金属污染特征与评价

分析上海世博园区水体底泥中Hg、Cu、Zn、Cd、Pb、Cr、As、Se等重金属（类金属）含量,结果表明,№为（0．35±0．17）mg／kg,Cu为（65．86±11．33）mg／kg,Zn为（190．9±28．9）mg／kg,Cd为（0．3585±0．0611）mg／kg,Pb为（32．50±11．04）mg／kg,Cr为（180．7±68．5）mg／kg,As为（10．8±5．5）mg／kg,Se〈0．02mg／kg。运用地累积指数I。。进行评价,结果表明cr和Zn有轻度污染。同时运用潜在生态危害指数RI进行评价,结果为中等生态风险,其中Hg为强生态风险。上海世博园区水体底泥受到Hg、cr、zn等重金属污染,应引起高度重视。     

毒死蜱对大鼠生精细胞增殖细胞核抗原表达的影响

目的：探讨毒死蜱对大鼠睾丸生精细胞增殖及相关因素的影响。方法：SD大鼠30只随机分为3组,对照组、低剂量0．8mg／（kg·d）和高剂量8．0mg／（kg·d）染毒组,28d后观察大鼠体质量、睾丸脏器系数变化,采用免疫组化SP法检测睾丸生精细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果：低、高剂量染毒组体质量分别为（278．86±20．47）、（244．80±21．18）g,低于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）;生精细胞PCNA增殖指数P1分别为（22．66±2．59）％、（14．26±2．31）％,均低于阴性对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：毒死蜱可降低生殖细胞PCNA的表达,对雄性生殖系统造成损害。     

游离氨基酸对褐鳟和金鳟精子活力的影响

为探究体外储存条件下游离氨基酸(FAA)对鳟鱼精子活力的影响,分析褐鳟(Salmo trutta)和金鳟(Oncorhynchus mykiss)精液中FAA组成,通过向人工精液保存液(ASP)中添加不同种类氨基酸孵育褐鳟和金鳟精子,孵育1、24、48、72和96 h后,研究FAA对精子活力的影响(定义为孵育后可激活活力)。结果表明,褐鳟精浆FAA主要为缬氨酸、亮氨酸、精氨酸、异亮氨酸、赖氨酸、丝氨酸及甲硫氨酸,其精子FAA主要为天冬氨酸、精氨酸、谷氨酸及丝氨酸。金鳟精浆和精子中主要FAA为精氨酸。当精子与精浆孵育48 h后,两种鱼的氨基酸含量与组成模式均发生变化,发生新陈代谢。丝氨酸、异亮氨酸及甲硫氨酸+异亮氨酸对两种鱼的精子活力有积极影响,在一定时间内能够通过添加可FAA延续精子活力,解决鳟鱼雌雄成熟不同步问题,提高受精效果,对鳟鱼苗种繁育及养殖具有重要意义。     

除精浆提高冷冻精液品质的实验研究

采用离心洗涤法去除精浆后,对精液进行冷冻处理。发现:1、除精浆精子冻后的活率、Ⅰ类顶体率和精子畸形率与未除精浆组存在显著差异(P<0．05);2、除精浆使稀释后精液精浆中GOT和LDH活性明显升高(P<0．05)。从平衡后到解冻后各组GOT和LDH活性都呈上升趋势。但除精浆试验组比未除精浆试验组上升缓慢;3、除精浆试验组精子的穿卵率、卵内平均精子数都显著高于未除精浆试验组(P<0．05);4除精浆离心洗涤液用生理盐水和脱脂乳-卵柠液．两者之间无显著差异(P>0．05)。     

鸡蛋黄和鹌鹑蛋黄在崇明白山羊精液冷冻保存中效果比较

对崇明白山羊精液采取3种不同离心处理去除精清,比较添加鹌鹑蛋黄和鸡蛋黄对精液冷冻保存效果的影响.结果表明:崇明白山羊精液冷冻保存中以1 000 r/min离心5 min去除精清后,添加鸡蛋黄组解冻后精子活力为50.48%,鹌鹑蛋黄组解冻后精子活力为42.98%.添加鸡蛋黄组的效果显著优于鹌鹑蛋处理组.     

Na+、K+、葡萄糖及甘油对高体雅罗鱼精子活力的影响

[目的]明确水体介质参数与高体雅罗鱼精子活力的关系,解决高体雅罗鱼人工繁殖受精率低及鱼苗鱼种生产效率低的技术难题.[方法]以快速运动时间(FT)、寿命时间(LT)和精子激活率为评价指标,探究Na+、K+、葡萄糖及甘油对高体雅罗鱼精子活力的影响.[结果]Na+浓度为135 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为71 s,LT为1020 s,精子激活率为95%;K+浓度为5 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为52 s,LT为280 s,精子激活率为80%;葡萄糖浓度为180 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为78 s,LT为1200 s,精子激活率为95%;甘油浓度为180 mmol/L时高体雅罗鱼精子活力最强,FT为79 s,LT为1380 s,精子激活率为90%.[结论]适宜浓度的Na+、K+、葡萄糖及甘油具有单独提高高体雅罗鱼精子活力的作用,但高浓度Na+、K+、葡萄糖及甘油对高体雅罗鱼精子的激活率呈明显抑制作用.实际生产中,可选择135 mmol/L Na+、5 mmol/L K+、180 mmol/L葡萄糖或180 mmol/L甘油作为高体雅罗鱼精子的激活液,提高其人工繁殖生产效率.     

超低温冷冻对俄罗斯鲟精子抗氧化酶活性的影响

为了探讨超低温（-196℃）对精子的损伤机理,采用试剂盒测定了冷冻前后俄罗斯鲟精浆和精子中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）和谷胱甘肽还原酶（GR）等酶活性。结果表明,经过超低温冷冻保存后,俄罗斯鲟精子活力下降,添加抗冻保护液冷冻后的精浆中SOD、CAT、GSH—PX活性较鲜精组显著升高（P〈0．05）,较未添加保护液组显著降低（P〈0．05）,GR的活性则显著低于鲜精组（P〈0．05）,但显著高于未添加保护液组（P〈0．05）;添加抗冻保护液冷冻后的精子中SOD、CAT、GSH—PX活性较鲜精组显著降低（P〈0．05）,较未添加保护液组显著升高（P〈0．05）,GR活性则显著高于鲜精组（P〈0．05）,但显著低于未添加保护液组（P〈0．05）。这说明超低温冷冻对俄罗斯鲟精子的抗氧化系统产生了较大影响,成为影响精子活力的一个重要原因。     

不同稀释液2—5℃保存鸡精液的研究

试验使用不同稀释液在2—5℃稀释保存鸡精液,测定了体外保存的精子活力和pH值变化。随保存时间的延长,不同稀释精液的精子活力和pH值下降幅度有差异。精子活力与pH值密切相关。精液稀释保存24小时的受精率以BPSE液最高(86.37％),与新鲜未稀释精液的受精率无显著差异;不同稀释液的受精蛋孵化率均无显著差异。用BPSE液加氧和减压保存的效果均无改进。Lake液以1:1(精液:稀释液,v/v)的倍数稀释,保存24小时后精子活力和pH值明显低于较高稀释倍数(1:2或1:3);保存24小时的受精率显著低于输精前加入BPSE液调整Lake液后的受精率。     

猪精液预处理稀释液与冷冻基础液的配伍效应

采用6种预处理稀释液对猪精液进行预处理,然后用3种冷冻基础液冷冻保存,研究精液预处理稀释液和冷冻基础液对精子冷冻保存效果的影响,以及其间的配伍效应。结果表明,不同的预处理稀释液对解冻后精子活力的影响差异显著(P<0.05),而3种冷冻基础液对冻后精子活力的影响差异不显著(P>0.05)。不同的预处理稀释液与冷冻基础液之间存在明显的配伍效应,并且用含甘油的稀释液对平衡不同时间的精液冷冻时,其配伍效应又有所不同。猪精液中去除精清可显著提高精子冻后活力和顶体完整率(P<0.05),有利于提高精液品质。     

化学因子对蓝曼龙精子活力的影响

[目的]探讨不同浓度KCl、Na Cl、Ca Cl2、Mg Cl2溶液对蓝曼龙精子活力的影响。[方法]选取成熟蓝曼龙雄鱼,解剖取5期性腺,匀浆后获得组织液,在显微镜下观察不同浓度KCl、Na Cl、Ca Cl2、Mg Cl2溶液对精子活力的影响。[结果]当KCl浓度为0.5 g/L时蓝曼龙精子活力最高,精子活力为245 s,浓度高于0.5 g/L时,精子活力逐渐下降;Na Cl浓度为0.4 g/L时蓝曼龙精子运动时间最长,精子活力为103 s;Ca Cl2浓度为0.4 g/L时,蓝曼龙精子活力最高,精子活力为26 s;Mg Cl2浓度为0.3 g/L时,蓝曼龙精子活力最高,精子活力为20 s。[结论]该研究可为蓝曼龙的人工繁殖提供参考。     

不同锌水平对荷斯坦种公牛精液品质及血液理化指标的影响

【研究目的】本文旨在研究不同锌水平日粮对荷斯坦种公牛精液品质和血液理化指标的影响。【方法】选取30头荷斯坦种公牛,随机分为5组,A为对照组,饲喂基础日粮,B、C、D、E组锌的添加水平分别为50、80、110、200mg/kg,试验期8个月。【结果】结果表明,(1)不同锌水平对荷斯坦种公牛精子活力、射精量、精子密度影响极显著(P<0.01);对精子顶体完整率无显著影响(P>0.05),能显著降低精子畸形率(P<0.05)。(2)不同锌水平对荷斯坦种公牛血清中睾酮含量影响极显著(P<0.01),对血清锌、精清锌和精清睾酮含量无显著影响(P>0.05)。(3)不同锌水平对荷斯坦种公牛精清中谷草转氨酶(GOT)活性影响极显著(P<0.01),对碱性磷酸酶(AKP)和谷丙转氨酶(GPT)活性有显著影响(P<0.05),对乳酸脱氢酶(LDH)活性无显著影响(P>0.05);对血清中GOT和GPT活性影响极显著(P<0.01),对AKP和LDH活性无显著影响(P>0.05)。【结论】综合分析不同锌水平试验牛生理生化指标的变化,本次试验研究表明:锌的适宜添加量为110mg/kg日粮干物质。     

纳米锌水平对公羊精液品质、抗氧化酶活性及附睾Cu-ZnSOD表达的影响

【目的】微量元素锌是动物正常繁殖所必需的元素,研究旨在了解日粮纳米锌对公羊精液品质、抗氧化酶和附睾Cu-ZnSOD蛋白表达的影响,分析公羊精液品质参数与精浆抗氧化酶活性的相关性。【方法】将16只9月龄健康状况良好体重相近的晋中绵羊公羊,随机分成4组,分别喂给基础日粮（对照组）,基础日粮+50 mg·kg^-1、100 mg·kg^-1和150 mg·kg^-1 DM纳米锌。试验期90 d。在试验78 d和79 d连续两天采集精液,每次采集精液取出100 µL评价精液品质参数,剩余精液离心分离精浆,测定精浆Cu-ZnSOD、GPxs活性及总抗氧化能力;试验结束时,用手术去势法采集附睾头、附睾体和附睾尾组织,采用免疫组化技术对附睾头、附睾体和附睾尾中Cu-ZnSOD进行定位,并用Image Pro Plus 7.0软件分析的平均光密度值进行Cu-ZnSOD蛋白定量。【结果】日粮纳米锌对公羊射精量影响差异不显著（P＞0.05）。与对照组相比,添加50 mg·kg^-1或100 mg·kg^-1纳米锌组公羊的精子密度、精子活力和精子质膜完整性显著增加（P＜0.05）,精子畸形率显著降低（P＜0.05）;添加150 mg·kg^-1组精子质膜的完整度显著增加（P＜0.05）,其精子活力和精子密度与对照组的差异不显著（P＞0.05）。日粮添加50 mg·kg^-1或100 mg·kg^-1纳米锌组公羊精浆Cu-ZnSOD活性、GPxs活性和总抗氧化能力显著高于对照组（P＜0.05）,精浆MDA含量显著低于对照组（P＜0.05）;添加150 mg·kg^-1组公羊精浆总抗氧化能力显著高于对照组（P＜0.05）,其精浆Cu-ZnSOD活性、GPxs活性和MDA含量与对照组差异不显著（P＞0.05）。免疫组化定位结果显示Cu-ZnSOD在附睾头和附睾体假复层上皮、结缔组织和附睾尾的单层柱状上皮中均检测到阳性信号,试验处理组公羊附睾中Cu-ZnSOD表达量由高到低顺序是：附睾体＞附睾头＞附睾尾;然而对照组的顺序为：附睾头＞附睾体＞附睾尾。50 mg·kg^-1或100 mg·kg^-1纳米锌组公羊附睾头和附睾体阳性信号的平均光密度显著高于对照组和150 mg·kg^-1纳米锌（P＜0.05）。精浆Cu-ZnSOD活性与精子密度、精子活力和精子质膜完整性呈正相关,与精子畸形率呈负相关。【结论】日粮添加50 mg·kg^-1或100 mg·kg^-1纳米锌可改善精液品质,提高精浆抗氧化能力,增加附睾中Cu-ZnSOD蛋白表达量。精浆Cu-ZnSOD活性可以作为检测精液品质优劣的指标在羊生产中应用。微量元素锌对精液品质影响调控的分子机理还需进一步深入研究。