优质魔芋组培快繁技术研究*

 以魔芋的根状茎为外植体,用正交试验法研究了不同氮素含量的基本培养基、不同浓度的BA以及NAA对魔芋根状茎愈伤组织诱导的影响;不同激素组合对不定芽分化、组培苗生根诱导的影响,并针对魔芋组织培养中的褐变现象采取了有效措施。结果表明:诱导魔芋根状茎愈伤组织产生的最适培养基为NN基本培养基+1.0mg/L BA+1.0mg/L NAA;MS基本培养基+2.0mg/L BA+1.0mg/L IAA为不定芽分化的最适培养基,在不定芽诱导和生长上,BA与IAA的组合较与NAA的组合好;MS+0.5mg/L IBA+0.5mg/L GA3为组培苗的最佳生根培养基,生根率达100%;一定浓度的PVP,Vc或者AC能有效控制褐变现象的发生。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

绿萝组织培养和遗传转化条件优化

为优化绿萝离体再生条件，建立更高效的遗传转化体系，分别以绿萝叶片和叶柄为外植体，比较不同植物生长物质对绿萝不定芽诱导和植株离体再生的影响。并通过PCR技术克隆拟南芥AtFALDH基因，利用农杆菌介导法对绿萝愈伤组织进行遗传转化，比较不同转化条件下绿萝愈伤组织抗性不定芽诱导率。结果表明，绿萝叶柄愈伤组织和不定芽诱导效果均优于叶片。绿萝叶片愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D，该培养基下诱导率大约为61.5%；叶柄愈伤组织诱导最适培养基为MS+0.5 mg/L TDZ+0.5 mg/L NAA，该培养基下诱导率达到97.8%。绿萝叶片不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA，该培养基下诱导率接近100%；叶柄不定芽诱导最适培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA，该培养基下诱导率约为100%，但叶柄来源的愈伤组织诱导产生的不定芽数量较多，而且生长更旺盛。生根最适培养基为1/2 MS+0.05 mg/L NAA，该培养基下生根...     

濒危药材金线莲愈伤组织诱导及分化成苗研究

[目的]建立有效的濒危药材金线莲的再生体系,为其工厂化生产奠定技术基础。[方法]选取福建金线莲的叶片、茎片、带节茎段、不定芽为外植体,建立无菌体系,而后以愈伤组织的诱导率为指标,采用正交设计优化不同外植体各阶段(愈伤组织的诱导和分化)培养基中激素的种类及浓度。[结果]在试验的福建金线莲4种外植体中,不定芽的愈伤组织诱导率最高,可达96.67%,其最适培养基配方为MS+0.5 mg/L NAA+4.0 mg/L BA+0.3 mg/L KT。在此培养基上,诱导的愈伤组织在分化培养基MS+0.5 mg/L NAA+2.0 mg/L BA和增殖培养基MS+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L BA上继代形成了无根试管苗。[结论]该研究建立的无菌繁殖体系,解决了前人所指出的金线莲愈伤组织诱导率极低的瓶颈问题,组培成苗的效率有较大提高。     

盆栽安祖花叶片愈伤组织诱导及植株再生的影响因素

以近几年新引进的6个安祖花盆栽品种为试材.以刚展开的幼嫩叶片为外植体,研究了基本培养基、植物生长调节剂配比、培养条件等因素对其愈伤组织诱导及不定芽分化、增殖的影响.结果表明:MP和1/2MS培养基比MS、B5和N6培养基更适于愈伤组织的诱导,1.0～2.0 mg/L BA+0.1～0.2 mg/L 2,4-D对多数品种的愈伤诱导较为合适,MS+O.5 mg/L BA+0.5 rng/L NAA和MP+1.0 mg/L BA适于参试品种的不定芽分化,N6培养基不利于芽的分化;不定芽的增殖以MS+1.0 mg/L BA最为合适.不同品种的愈伤组织诱导能力、不定芽分化能力及其增殖效率差异明显.黑暗培养比光照培养更有利于愈伤组织的诱导.理想的生根培养基和移栽基质分别为1/2 MS+0.5 mg/L IAA和泥炭土与珍珠岩的混合物,生根率与移栽成活率均可达100%.     

非洲菊叶片愈伤组织诱导和不定芽分化的研究

以非洲菊3个品种叶片为材料,研究了不同基因型、叶片叶龄和叶片不同部位以及激素对非洲菊愈伤组织诱导和不定芽分化的影响。结果表明:诱导愈伤组织较为适宜的外植体为嫩叶,以MS+6-BA 1.0~5.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L为培养基,愈伤组织诱导率均98%;诱导分化不定芽较为适宜的外植体为叶柄,最适培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,但不定芽分化率较低,仅为4.2%。     

川芎的组织培养技术研究

探索川芎的不同组培条件,优化其诱导和分化培养基。以川芎根、茎段和叶片作外植体进行组织培养,获得了大量的组培苗,建立了相应的植株再生系统。川芎根诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+6-BA 0.8 mg/L+NAA 1.2 mg/L;茎段及叶片诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L;根愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.2 mg/L+IAA 0.3 mg/L;茎段及叶片愈伤组织分化不定芽的最佳培养基为MS+KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L。根外植体在愈伤组织、分化不定芽和生根方面的诱导率分别为84%、86%和87%;茎段和叶片愈伤组织的诱导率达到92%和96%,其不定芽分化率为98%,生根率为93%。经炼苗后,获得的组培苗的移栽成活率达98%。提出了优化激素搭配的培养基,得到了高效的诱导率、分化率和生根率。     

杜仲愈伤组织诱导和植株再生体系的建立

【目的】研究在BA、NAA、IBA、2,4-D等激素作用下,杜仲愈伤组织诱导、愈伤组织诱导丛生芽及丛生芽诱导生根各阶段的最佳培养基配方,建立杜仲植株再生体系,为杜仲转基因研究提供基础材料。【方法】以杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段为外植体,使用BA、NAA、IBA、2,4-D等激素,配制成不同质量浓度的培养基,进行杜仲愈伤组织诱导,同时分析愈伤组织诱导丛生芽和丛生芽诱导生根培养基的最佳配方,建立杜仲植株的再生体系。【结果】杜仲愈伤组织诱导的培养基分别为:成熟胚MS+BA 2.0mg/L+NAA 2.5mg/L,诱导率77.8%;幼嫩胚MS+BA 0.5mg/L+2,4-D 2.0mg/L,诱导率88.9%;叶片MS+BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L,诱导率100%;茎段MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导率为100%。愈伤组织诱导不定芽形成的适宜培养基为MS+BA 1.0mg/L+NAA 0.05mg/L,不定芽诱导率为88.9%,增殖系数为3±1;杜仲在1/4MS的基本培养基中生根最好,生根率达80%,激素的存在反而会抑制生根。【结论】杜仲成熟胚、幼嫩胚、叶片和茎段均可通过愈伤组织途径诱导不定芽的形成,并诱导生根,建立杜仲愈伤组织再生体系,但不定芽的增殖系数较低。     

桔梗叶片愈伤组织诱导分化研究

以桔梗叶片作为外植体,采用酒精和氯化汞组合消毒,研究不同消毒时间对消毒效果的影响,并比较不同浓度激素下愈伤组织诱导及分化的变化。结果表明,桔梗外植体最适合的消毒方案为:酒精消毒30 s后氯化汞消毒6 min;桔梗叶片愈伤组织诱导的最适培养基为:1/2MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L;桔梗叶片诱导分化的最适培养基为:1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.2mg/L,此培养基培养,桔梗不定芽的诱导分化率能达到37%,且不定芽数量多,芽强壮。     

不同浓度的外源激素对香石竹组织培养的影响

研究了不同浓度的外源激素对香石竹组织培养过程中愈伤组织诱导、芽分化和芽增殖的影响。结果表明,愈伤组织的诱导与BA与NAA浓度比及KT浓度有关;芽诱导与BA、KT、NAA均有关;芽增殖与BA的浓度及BA和NAA的浓度比有关。MS+BA 0.3 mg/L+KT0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L培养基对愈伤组织诱导效果最好;最佳的芽分化培养基为MS+BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L+NAA 2.0 mg/L,芽分化率达65%;芽增殖培养基以MS+BA 0.3 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最佳,增殖芽数最多,玻璃化率最低。     

花蔺无性系建立的研究

以花蔺根茎为材料,进行了愈伤组织的诱导和继代、不定芽分化、试管苗生根、移栽定植的研究,建立起根茎无性系。结果表明：根茎愈伤组织诱导培养和继代培养的理想培养基是MS＋BA 0.5 mg/L＋2,4-D2.0 mg/L;愈伤组织颗粒团分化培养的理想培养基是MS＋BA0.5~1.0 mg/L＋NAA0.1 mg/L;试管苗生根培养的理想培养基是1/2 MS＋NAA0.1 mg/L＋IAA0.2 mg/L。试管苗定植容易成活,且长势旺盛,并保持了野生植株的所有生物性状。     

小红参愈伤组织的诱导及分化

通过不同外植体、基本培养基、暗培养、激素对小红参愈伤组织诱导和分化的试验研究,结果表明诱导小红参愈伤组织产生的最佳条件为:以真叶和顶芽(或侧芽)为外植体,在MS BA 0.2 mg/L NAA 3.0mg/L培养基上,进行暗培养,愈伤诱导率达95%。芽形成的愈伤组织组织在MS BA 5.0 NAA 1.5~2.0中均能分化出幼苗,分化率达100%,但叶形成的愈伤组织未能分化出苗。     

黄山药愈伤组织的诱导与分化

研究黄山药愈伤组织形成、器官分化和植株再生,结果表明:叶片是诱导黄山药愈伤组织的最佳外植体;含2,4-D2.0 mg/L和BA2.0 mg/L的培养基对愈伤组织诱导效果最好;大多数愈伤组织在含有1.0 mg/LBA、0.5 mg/L NAA和2%蔗糖的培养基(pH值6.4)中能诱导出芽;含有0.5 mg/LBA、0.1 mg/L NAA和3%蔗糖的MS培养基(pH值6.8)能诱导大多数转接芽中根的形成。     

野生紫斑百合高效离体再生体系的建立

 采用丽江野生紫斑百合鳞片为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度激素,进行鳞片分化诱导、增殖和生根培养,筛选适宜激素浓度配比。结果表明：鳞片可以通过愈伤诱导发生途径再生,从愈伤组织上直接形成不定芽,最佳愈伤诱导培养基为MS+0.5mg/L TDZ+0.5mg/L NAA,诱导率为45.00%;不定芽增殖最佳培养基为MS+1.0mg/L 6BA+0.5mg/L NAA,增殖率为72.58%;最佳生根培养基为1/2MS + 1.5mg/L IBA,生根率达到93.33%。     

非洲菊愈伤组织诱导和不定芽分化研究

以非洲菊深圳5号为材料,研究了几种因素对非洲菊花托愈伤组织诱导和不定芽分化的影响,结果表明,花托在1/2MS 6-BA 10 mg/L NAA 0.2 mg/L IAA 0.3 mg/L培养基中诱导愈伤组织的速度最快,诱导率达100%;花托在在1/2MS基本培养基中诱导出的愈伤组织较少褐变,且易分化不定芽;将愈伤组织转接到1/2MS 6-BA 3 mg/L NAA 0.2mg/L IAA 0.1 mg/L培养基中进行继代增殖培养可有效降低褐化率,不定芽分化率达67.5%、不定芽平均数为2.3株,指出高效的愈伤组织和不定芽再生频率为非洲菊基因转化体系的建立奠定了基础。     

草莓叶柄组织培养再生研究

以草莓品种晶瑶为试材,研究了不同激素浓度和配比对叶柄的诱导愈伤组织、分化出芽的影响以及叶柄材料不同部位对不定芽再生的影响,建立了草莓叶柄的离体再生体系。结果表明,叶柄在MS+TDZ1.5mg/L+IBA0.3mg/L的诱导培养基上出愈率可达到78.2%,且愈伤组织状态较好;该愈伤组织在分化培养基MS+NAA0.2mg/L+BA1.0mg/L上的不定芽分化率可达到21.25%,并且叶柄的植物学下端部位利于不定芽的再生。     

6-BA和NAA对袋鼠花组织培养特性的影响

研究了不同质量浓度的6-BA和NAA对袋鼠花侧芽组织培养特性的影响。结果表明,6-BA与NAA配合使用能有效促进袋鼠花侧芽愈伤组织的形成和愈伤组织不定芽的发生。促进愈伤组织形成的最佳激素配比为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L;6-BA对袋鼠花侧芽愈伤组织不定芽的发生有显著的促进作用,在低质量浓度NAA条件下,随着培养基中6-BA质量浓度的增加,促进效应更加明显,适合袋鼠花侧芽愈伤组织不定芽形成的最佳激素处理为MS+NAA0.2mg/L+6-BA2.0mg/L;附加一定质量浓度NAA的1/2MS培养基,能显著促进袋鼠花不定芽根的形成,其最佳培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA。     

野葛愈伤组织诱导及分化的研究

对野葛叶片和茎段愈伤组织的诱导及分化进行了研究,结果表明:6-BA 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L对叶片愈伤组织的诱导效果最好,6-BA 2 mg/L+NAA 1 mg/L对茎段愈伤组织的诱导效果最好,出愈率均达100%;6-BA 2 mg/L+NAA 1 mg/L有利于叶片形成的愈伤组织分化为芽,6-BA 2mg/L+NAA 0.5 mg/L则有利于茎段形成的愈伤组织分化为芽.     

杂交构树叶片愈伤诱导及植株再生

以杂交构树试管苗叶片为外植体,探讨了不同植物生长调节剂组合、叶片着生部位、GA3浓度对杂交构树不定芽再生的影响,建立了叶片不定芽再生体系,为今后的遗传转化奠定了基础。结果表明:杂交构树叶片愈伤诱导和不定芽分化的最适培养基是MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L,愈伤诱导率为100%,不定芽再生率为91.7%;叶片培养最佳取材部位是自试管苗顶端向下伸展叶第l～3片叶;培养基添加0.5mg/LGA3,芽增殖系数高达8.22,芽有一定的伸长生长;附加低浓度的6-BA0.3mg/L,芽明显伸长,长为3.89cm,得到壮苗,可直接用于生根培养;生根培养添加NAA1.0mg/L,诱导生根的时间最短为9d,生根率最高,达86.7%。