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相似文献
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1.
油梨果实在7℃下贮藏一定时期,取果实样品抽提总RNA,通过oligo dT纤维素柱纯化,获得poly(A)^+mRNA,利用λZap-cDNA合成试剂盒合成双链cDNA,再将cDNA连接到克隆载体Uni-ZapXR上,构成与油梨果实成熟有关的cDNA文库,同时,利用纤维素酶和乙烯形成酶克隆探针,对文库作了筛选。  相似文献   

2.
欧洲油菜花粉cDNA文库的构建   总被引:4,自引:0,他引:4  
从欧洲油菜(Brassicanapus)成熟花粉中提纯出mRNA.poly(A)+mRNA在oligo(dT)引导下,用反转录酶合成cD-NA第一链,用大肠杆菌RNA酶H和大肠杆菌DNA聚合酶I置换合成CDNA第二链.加上EcoRI/NotI接头。最后将双链DNA克隆子λgtll载体中。用Bcpl作探针,杂交筛选构建的cDNA文库。  相似文献   

3.
牛生长激素cDNA的克隆与序列分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
从平脑垂体中分离总RNA,经oligo(dT)一纤维素柱纯化mRNA,反转录合成cDNA,经PCR技术扩增牛生长激素(bGH)cDNA序列,长度为620hp,将PCR产物克隆于pUC19Smal位Ⅰ点转化大肠杆菌DH5α,经蓝白斑筛选,获得重组克隆,分离重组质粒,经限制性内切酶酶切分析后,进行序列分析。结果表明,一质粒中所含克隆片段为bGHcDNA全序列,与国外所发表的bGH核旮酸序列基本相同  相似文献   

4.
小鼠卵母细胞wee 1和cdc25 mRNART-PCR方法的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
在没有现成的哺乳动物卵母细胞wee1、cdc25 mRNA的RT-PCR方法可借鉴的情况下,经过反复摸索,终于选出了1对适宜的wee1 cDNA引物和1对cdc25cDNA引物,并对RT-PCR条件进行了优化试验,成功地建立起了一套稳定的wee1、cdc25 mRNA的RT-PCR方法,为研究哺乳动物卵母细胞,乃至哺乳动物早期胚胎的基因表达奠定了技术基础。  相似文献   

5.
根据已报道的6种哺乳动物白细胞介素1β(IL-1β)的cDNA序列保守区设计合成一段互补DNA。制备ATP标记的DNA探针,采用斑点杂交及原位杂交技术对感染了禽脑脊髓炎病毒(AEV)的鸡脑组织中IL-1βmRNA进行检测,结果表明杂交反应均呈阳性。  相似文献   

6.
白粉菌诱导的小黑麦异多附加系M17特异cDNA克隆的研究   总被引:1,自引:1,他引:0  
实验以对小麦白粉病菌免疫的小黑麦异多附加系M17(1R″6R″) 为材料, 一组接种小麦白粉病菌,另一组不接种。分别提取两组叶片的总RNA,分离出mRNA,在体外反转录合成cDNA,克隆进λgt10 载体,得到了1 个含9-8 ×104 个重组子的cDNA 文库。两组cDNA 双链经切口平移法制成总cDNA 探针,分别与cDNA文库杂交,通过差别筛选的方法,找到了6 个与小麦白粉病菌诱导有关的阳性克隆cDNA 克隆。将这6 个阳性克隆用Hind Ⅲ和Bgl Ⅱ进行双酶切分析,通过比较2 个克隆酶切片段的差异,从1 个克隆中找出1 个约2-0 kb 的片段,此片段中包含约0-86 kb 的外源cDNA 的片段。  相似文献   

7.
鸡白细胞介素-2 cDNA克隆   总被引:8,自引:1,他引:7  
用哺乳动物细胞表达克隆系统克隆了鸡IL-2cDNA。以ConA(20μg/mL)诱导SPF鸡脾脏淋巴细胞,第20小时收集细胞,提取mRNA,以SuperScriptPlasmidSystemforcDNASynthesis试剂盒合成cDNA,定向连结于穿梭质粒pSV·SportⅠ,构建cDNA文库。将文库分组提取重组质粒,转染COS-7细胞,表达cDNAs。以淋巴细胞增殖试验检测表达产物IL-2活性。经过3轮筛选,获得14个具有IL-2活性的克隆。选择其中4个进行酶切分析,结果显示这4个cDNA大小分别为1.5,1.0,0.8和0.8kb。  相似文献   

8.
采用“富集PCR”方法,用单个特异引物和oligo(dT)15从桃伤处理叶片cDNA 中扩增出特异性片段⒚将扩增产物分离并克隆筛选到13 个重组克隆,其中有6 个克隆能与ACC氧化酶基因组DNA 杂交,对其中一个阳性克隆pGEMAC12 作酶切分析,发现其酶切图谱与已报道的桃果实成熟相关的ACC氧化酶cDNA 基本一致⒚DNA 序列分析表明,插入片段两端DNA 序列均是 5'端特异引物序列,表明是由5'端特异引物单个引物扩增出来,全序列分析表明插入片段全长833 bp,是ACC 氧化酶cDNA 基因编码区的一部分,5'端缺少启始密码子ATG,3'端缺少部分编码序列和终止密码子TAA⒚  相似文献   

9.
从人胎肝中提取得总mRNA,然后通过RTase反转录得到cDNA,利用PCR技术克隆EPO基因(全长为527bp),经过计算机分析已知EPO基因保守区段的限制性内切酶位点,选择BglI和HincⅡ进行酶解,确认所获得DNA片段为EPO基因。  相似文献   

10.
分别制备了遗传工程稻GER-1及其DNA供体(慈利玉米)、DNA受体(水稻湘早籼8号)的叶绿体DNA(cpDNA),对三者之间的多种限制性内切酶酶切图谱比较表明,GER-1的cpDNA基本与DNA受体水稻一致.进一步克隆了CER-1的psbA基因,并构建其酶切图谱、测定其3′非翻译区(3′UTR)序列,初步认为该基因的序列结构与水稻相同,从而排除了GER-1的性状变异是由其psbA基因发生变化所致的可能.此外,对叶绿体DNA的制备及酶切消化作了较深入的探讨  相似文献   

11.
本文对多发风险模型的负盈余持续时间进行了计算,从数值上对古典风险模型与多发风险模型的负盈余持续时间进行了比较,进一步说明了二者的不同之处。  相似文献   

12.
观察测量屠宰肉尸452头,其中440头为有无腹股沟深淋巴结的形态学观察;10头为后躯被检淋巴结的形态学观察;2头为管道注射,观察引流区。结果:1.猪有腹股沟深淋巴结,在统计230头,460例肉尸中,有24头存在,占10.43%。腹股沟深淋巴结平均重0.88±0.38克,平均大小为2.82±0.70×1.64±0.36×0.47±0.13厘米;汇集股部内侧和下腹部的淋巴液,注入髂内侧淋巴结。2.髂内侧淋巴结平均重1.87±0.71克,平均大小为3.19±0.80×1.38±0.42×0.55±0.18厘米;输入管数为5—6条,管外径为0.09±0.04厘米,输出管数为1—3条,管外径为0.24±0.10厘米。3.髂内侧淋巴结收纳腘浅淋巴结,腹股沟浅淋巴结和髂下淋巴结引流区的淋巴液和部分盆腔内脏的淋巴液。管辖范围广,位置恒定,淋巴结较大,浅在胴体脏面,易找到,不破坏商品,不影响商品的外观,是屠宰肉尸后躯被检的主要淋巴结。  相似文献   

13.
猪大肠杆菌病病原学研究进展   总被引:5,自引:0,他引:5  
猪的大肠杆菌病主要由产肠毒大肠杆菌(ETEC)引起,包括仔猪黄痢、仔猪白痢、猪水肿病等就ETEC的毒力因子和O抗原群,猪的日龄及其肠道受体与这些疾病的关系作了比较详尽的综述并讨论了可能存在的其它猪大肠杆菌病病型  相似文献   

14.
本文用比较组织学方法,观察大量舌组织切片,初步发现:舌感受器随着动物进化发展在种类与形态结构上有较明显的差异,两栖类最为简单,只看到游离神经末梢;啮齿、偶蹄和食肉类较复杂,有游离神经末梢、丛束状神经末梢、味蕾和肌梭等;人类最为高级,结构最为复杂,增加了肌间结缔组织感受器、肌束膜感受器、血管旁感受器和肌腱感受器等。此外,本文还对上述感受器进行了生理机能、组织发生和生物进化方面的分析和讨论。  相似文献   

15.
16.
17.
用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对经卫星搭载、在外层空间飞行8天的棉花种子第一代和第二代植株的子叶、叶片和花药,进行了酯酶、过氧化物酶和淀粉酶三种同工酶的酶谱分析,发现某些后代植株的酯酶同工酶和过氧化物酶同工酶与对照相比在活性和酶带数目上都有变化,但没有观察到淀粉酶同工酶在处理和对照之间的差异。  相似文献   

18.
鸡腿菇菌丝体的酯酶同工酶研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
选择碳源(玉米粉)、氮源(蛋白胨)、pH、温度、培养时间等培养条件,采用L27(5^5)五元二次回归正交试验.液态培养鸡腿菇菌丝体。同工酶分析结果表明,鸡腿蘑菌丝体酯酶(EST)同工酶在不同培养案件间存在差异。  相似文献   

19.
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