小金海棠超氧化物歧化酶基因MxSod2克隆与序列分析

以苹果属植物小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)为试材,利用差异筛选消减cDNA文库和RACE相结合的方法,分离到了小金海棠超氧化物歧化酶基因MxSod2(Genbank登录号为DQ431473),该基因全长805个碱基,开放阅读框为471 bp,编码157个氨基酸,推测分子量15 kDa.该基因具有CuZn.SOD基因的典型结构域特征.通过系统进化树分析,小金海棠MxSod2与龙眼、荔枝等非禾本科植物保持了较近的亲缘关系,与花生、水稻、玉米等禾本科植物亲缘关系较远.     

10个观赏海棠品种叶片春季色彩变化及其与色素含量的相关性

为了挖掘春季具有较长观赏期的观叶海棠品种,并探究色素含量对观赏海棠叶片色彩的影响,以引自北美的‘黛玉’海棠(Malus‘Black Jade’)、‘粉冠’海棠(Malus‘Pink Spires’)、‘丰盛’海棠(Malus‘Profusion’)、‘高原红’海棠(Malus‘Prairifire’)、‘皇家雨点’海棠(Malus‘Royal Raindrop’)、‘鲁道夫’海棠(Malus‘Roudph’)、‘时光秀’海棠(Malus‘Show Time’)、‘硕红’海棠(Malus‘Big Red’)、‘完美紫’海棠(Malus‘Perfect Purple’)、‘紫王子’海棠(Malus‘Purple Prince’)10个观赏海棠品种为材料,测定不同发育时期(展叶前期L_1、展叶初期L_2、展叶后期L_3)叶片色彩参数及其色素含量。结果表明:多数品种明度(lightness, L~*)值变化相对平稳,而红度(redness, a~*)、黄度(yellowness, b~*)值变化幅度大。‘黛玉’‘粉冠’‘丰盛’‘鲁道夫’‘硕红’‘完美紫’‘紫王子’7个观赏海棠品种的a~*值显著降低(P0.05)‘,高原红’‘皇家雨点‘’时光秀’3个品种的a~*值呈升高趋势。b~*值在10个品种中的整体变化规律一致,呈显著性升高(P0.05)。结合色彩图谱分析发现,红绿色相a~*值可作为观赏海棠春季观叶的主要指示值,黄绿色相b~*值是观赏海棠叶色变化的辅助指示值。随发育时期的变化,观赏海棠叶片叶绿素和类胡萝卜素含量逐渐增加,花青素含量逐渐减少,并且叶绿素含量始终高于其他色素含量。叶片色彩与色素含量的相关性分析结果表明:10个观赏海棠品种花青素含量与叶片a~*值呈显著或极显著正相关,类胡萝卜素含量与叶片b~*值呈极显著正相关,叶绿素含量与色彩参数间的相关性因品种而异。综上所述,在10个观赏海棠品种中,‘高原红’‘皇家雨点‘’时光秀’3个品种的观赏价值较高,在3个发育时期中其叶片呈红色周期长,达35 d左右,可作为春季观红叶树种加以开发利用。     

海棠皮下嫁接凯尔斯海棠技术

文章通过对凯尔斯海棠嫁接技术的系统研究,结果表明:利用海棠Malus prunifolia(Willd.)Borkh作砧木,经过接穗采集、蜡封处理、砧木选择、皮下嫁接和嫁接后养护等措施,能够较快地培养出大型凯尔斯海棠(Malus‘ Kelsey’)观赏树.海棠作砧木树资源广,成本低,能达到很高的经济效益.     

干旱胁迫对2种海棠品种叶片生理和光合特性的影响

以我国北方地区主要种植的2个海棠品种,吉美海棠(Malus‘jimei’)和光辉海棠(Malus‘Guanghui’)为试验材料,分析了干旱条件下2种海棠叶片生理指标及光合PSⅡ功能的变化。结果表明:随着干旱时间的延长,2种海棠根系活力下降,其中光辉海棠叶面积增长缓慢,且可溶性糖质量分数高于吉美海棠。2种海棠叶片丙二醛(MDA)质量摩尔浓度随干旱时间的延长呈上升趋势。干旱15 d时叶片超氧化物歧化酶(SOD)活性比第一天下降3.9%,变化不显著,而光辉海棠叶片过氧化物酶(POD)却提高了77.6%。干旱下光辉海棠叶片的叶绿素含量指数和叶片相对含水率的降低幅度明显大于吉美海棠。干旱下2种海棠叶片的净光合速率(P_n)均明显降低,在干旱1 d时,吉美海棠叶片的P_n稍低于光辉海棠,但是随着干旱时间的增加,光辉海棠叶片P_n的降低幅度明显大于吉美海棠。2种海棠叶片的气孔导度(G_s)、蒸腾速率(T_r)和胞间CO_2摩尔分数(C_i)变化趋势相似,但在干旱10、15 d时,光辉海棠叶片的G_s和T_r均低于吉美海棠。2种海棠叶片的光化学淬灭系数(q_P)、PSⅡ最大光化学效率(F_v/F_m)、电子传递速率(ETR)随着干旱时间的增加均降低,且光辉海棠叶片q_p、F_v/F_m和ETR的降低幅度明显高于吉美海棠;在干旱10 d时,光辉海棠叶片的非光化学淬灭(NPQ)比干旱1 d时升高了72.67%,吉美海棠叶片PSⅡ功能在干旱胁迫下的受抑制程度明显小于光辉海棠,可以考虑以吉美海棠作为我国东北干旱地区主要种植的观赏海棠品种之一。     

干旱胁迫下苹果根系内源激素含量的变化

盆栽试验表明,山定子(Malus baccata Borkh.)、平邑甜茶(Malus prunifolia Borkh.)、八楞海棠(Malus micromalus Makino.)在不同程度的干旱胁迫下,根系脱落酸(ABA)、细胞分裂素(CTKs)、赤霉素(GA)和乙烯含量均大量增加,ABA和乙烯含量变化与品种抗旱性呈正相关;CTKs和GA的变化与品种抗旱性无明显相关性。     

盐胁迫对两种海棠生长和生理特性的影响

采用温室盆栽法对山荆子(Malus baccata(L.) Borkh.)和湖北海棠(Malus hupehensis(Pamp.) Rehd.)两种海棠幼苗进行盐胁迫试验,研究了不同盐处理(0、0.1%、0.3%、0.5%)35d对两种苗木的叶片形态、叶绿素质量分数、丙二醛(MDA)质量摩尔浓度、可溶性糖质量分数、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)等各项指标的影响。研究结果表明:(1)随着盐质量分数的增加和胁迫时间的延长,两种海棠叶片出现失绿、焦枯甚至整株死亡,山荆子开始失绿的时间较湖北海棠早,且焦枯症状更为严重。(2)两种海棠叶片的叶绿素质量分数随着盐胁迫时间的延长呈下降趋势,但湖北海棠下降幅度远小于山荆子且含量始终高于山荆子。(3)随着盐胁迫时间延长,两种海棠MDA质量摩尔浓度呈上升趋势,胁迫结束时山荆子MDA质量摩尔浓度远高于湖北海棠。(4)两种海棠的可溶性糖质量分数在胁迫前期随盐质量分数的增加呈上升趋势,在胁迫后期随盐质量分数的增加呈先升高后降低趋势。整个胁迫期间,湖北海棠可溶性糖质量分数均高于山荆子。(5)两种海棠SOD、POD和CAT活性随胁迫时间延长总体呈先上升后下降的趋势,而湖北海棠的各酶活性峰值滞后山荆子一周,且活性始终高于山荆子,说明湖北海棠耐盐性高于山荆子。     

重庆地区北美海棠砧木的筛选

以山荆子(Malus baccata)、八棱海棠(M.nicromaalu Makino)和小金海棠(M.xiaojinensis)作为北美海棠(M.micromalus cv."American")嫁接砧木,通过比较一年生播种苗的形态指标、根系指标、生长量、发芽率等指标,筛选适合在重庆地区推广的砧木。结果表明,在重庆地区规模化繁育北美海棠时,宜选择八棱海棠作为砧木。小金海棠的生长速度最快,地径(0.835 cm)、苗高(105.93 cm)、鲜重(15.813 g/株)和干重(10.920 g/株)等指标显著或极显著高于山荆子和八棱海棠,但其播种发芽率只有24.4%,极大限制了其推广。     

苹果砧木山定子MbNas1的克隆、表达与亚细胞定位

以苹果砧木山定子(Malus baccata)为试材,根据小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)中克隆得到的尼克烟酰胺合成酶基因Mx Nas1(登录号:DQ403256)的全长序列设计特异引物,通过RT-PCR方法从山定子c DNA中克隆到Nas1基因并命名为Mb Nas1,该基因全长为978 bp。预测该基因可编码325个氨基酸,理论等电点为5.26,相对分子质量为36.09 ku。Real-time PCR结果表明,正常供铁(EDTA-Na Fe,40μmol/L)时,该基因在山定子水培苗的新叶、老叶、根、茎的韧皮部中均有表达,在木质部表达量较低;缺铁处理(4μmol/L)时,该基因在根和新叶中的表达加强,第6天达到最高值,之后开始下降;在老叶中表达逐渐减弱;高铁处理(160μmol/L)时,该基因在根和新叶中的表达减弱,在第9天达到最小值,之后有所上升;在老叶中表达逐渐增强。基因枪亚细胞定位试验表明,Mb Nas1蛋白质定位在细胞质膜上。     

三种苹果砧木在K+缺乏情况下的生理生长状况分析

K+作为矿质元素中的一种重要的营养元素,参与了苹果树体的许多生理进程并且决定了产量与品质。本试验以苹果砧木平邑甜茶(Malus hupehensis Rehd)、丽江山定子(Malus rockii Rehd)、小金海棠(Malus xiaojinensis Cheng et Jiang)为材料,研究了三种砧木缺钾乏的生理反应,结果显示低钾处理抑制了三种苹果砧木幼苗的生长,降低了幼苗的生长量、光合速率、叶绿素含量,但三种砧木表现不同,小金海棠在K+缺乏相比于其它两种砧木生长较好,具有较高钾利用效率。     

北美海棠良种火之舞选育及栽培技术

火之舞是北美海棠(Malus micromalus)的一个品种。该品种的主要特点为四红,即花色深红、幼叶和果皮红色及枝皮红褐色;另外,花量大、花期长、挂果期长。主要依靠嫁接繁殖,适合在长江流域及以北地区园林绿化中推广应用。     

赞皇大枣枣疯病植原体分子分类

 【目的】枣疯病是一种重要的植原体病害,本试验旨在明确惟一已知的天然三倍体品种--赞皇大枣枣疯病植原体的分类地位,为赞皇大枣枣疯病植原体分类研究提供参考。【方法】利用植原体16S rDNA通用引物对赞皇大枣枣疯病病株的DNA进行PCR扩增和克隆测序,通过BLAST比对进行序列分析,利用临位相连法构建16S rDNA系统演化树,并应用DNAstar软件进行虚拟RFLP分析。【结果】获得的赞皇大枣枣疯病植原体16S rDNA序列长度为1 850 bp（GenBank登录号GU184180）,包括1 529 bp的16S rDNA基因全序列、264 bp的邻近间隔区序列及57 bp的23S rDNA部分基因序列。同源分析表明,赞皇大枣枣疯病病原16S rDNA序列与其它植原体的相似性在87%—98%,其中与榆树黄化 Elm yellows（EY）(GenBank登录号l33763)最高相似性为98%;与大多数二倍体枣品种的植原体序列相似率达99%以上;其虚拟RFLP图谱与4个16SrⅤ亚组的代表序列图谱差异显著,赞皇大枣枣疯病植原体延伸因子tuf基因的序列(GenBank登录号JN001985) 比对结果表明,与其它亚组序列同源性为52.3%—76.7%。【结论】三倍体赞皇大枣枣疯病病原属于榆树黄化组(16Sr V),并与其中的B亚组亲缘关系最近;与二倍体品种的病原分类地位一致,说明枣疯病植原体在系统进化上比较保守。     

Analysis of the Genetic Relationships in Chinese Ziziphus with SRAP Markers

The phylogenic and genetic relationships in germplasm resources of Chinese Ziziphus were studied at molecular levels, for providing new molecular evidences of classification, protection, and utilization of germplasm resources of Ziziphus. The sequence-related amplified polymorphism （SRAP） was assessed to analyse the genetic relationships among 14 species of Ziziphus, 11 cultivars of Z. jujuba Mill., and one outgroup. A total of 580 DNA bands were amplified by 19 selective primers, 570 of which （98.28%） were polymorphic. The average number of polymorphic DNA bands amplified by each primer was 30. The genetic similarities of 26 sample materials were between 0.22 and 0.99. UPGMA method cluster analysis showed that 26 sample materials were classified into six cluster groups with the genetic similarity of 0.28. The results showed that SRAP technique is efficient in studying genetic relationships among Ziziphus, Z. jujuba Mill. and Z. acidojujuba C. Y. Cheng et M. J. Liu which should be treated as one species, and further infraspecific classification of Z. jujuba Mill. should be classified into two subspecies; the scientific names of new taxa, Chinese jujube, and wild jujube were Ziziphus jujuba Mill. subsp, jujuba and Ziziphus jujuba Mill. subsp, spinosa （Bunge） J. Y. Peng, X. Y. Li et L. Li, respectively. Z. xiangchengensis Y. L.Chen et P. K. Chou, Z. montana W.W. Smith and Z. mairei Dode might be originated from same ancestry. Z xiangchengensis Y. L. Chen et P. K. Chou and Z. montana W.W. Smith should be treated as one species. The infrasubspecific taxon of Z. jujuba Mill. was not suitable to set up varieties.     

中国枣属植物亲缘关系的SRAP分析

 【目的】从分子水平研究中国枣属植物的系统发育,探讨枣属属下种间及种下分类单元间的亲缘关系,为自然的中国枣属植物分类系统的建立提供新的分子证据,同时为中国枣种质资源的保护和利用提供科学依据。【方法】利用SRAP标记方法对原产中国的枣属全部14个种、11个枣品种和1个外类群的基因组DNA进行分析。【结果】筛选出的19对SRAP引物组合对26份供试材料共扩增出580条DNA带,其中570条为多态带（占98.28%）,平均每个引物扩增多态性带30条。26份材料间的遗传相似系数变化范围为0.22～0.99。UPGMA聚类表明,26份材料在相似系数0.38处被划分为6个类群。【结论】SRAP标记技术能很好地用于枣属植物亲缘关系的研究,枣和酸枣应该作为1个种处理,可进一步分为2个亚种,给予新学名为原亚种枣Ziziphus jujuba Mill. subsp. jujuba;亚种酸枣Ziziphus jujuba Mill. subsp. spinosa（Bunge）J.Y. Peng,X.Y.Li et L.Li;蜀枣、山枣和大果枣应该起源于一个较近的共同祖先,蜀枣和山枣应该归并为1个种,合并后以山枣学名为准;原亚种枣下不宜设变种。     

枣树基因组DNA提取及其RAPD体系优化

以不同生长期的枣和酸枣为研究对象,采用CTAB法提取枣基因组DNA;通过单因素5水平试验,筛选模板、Mg2+、Taq酶、dNTPs和随机引物的浓度及其用量,建立了枣和酸枣RAPD技术最优体系,即25μl反应体系中各组分含量为10×Taq Buffer+KCl 2.5μl;Taq DNA聚合酶0.04 U/μl;MgCl22.0 mmol/L;模板DNA2 ng/μl;引物0.3μmol/L;dNTP为0.2 mmol/L。适宜的扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃循环变性50 s,36℃退火50 s,72℃延伸1.5 min,38个循环;72℃延伸10 min。     

培养环境对枣组培微嫁接的影响

[目的]建立一套高效的枣组培微嫁接体系。[方法]以感染枣疯病的婆枣组培苗(以下简称染病苗)为砧木,以冬枣组培苗茎段为接穗,研究若干环境因子对枣组培微嫁接成活率的影响。[结果]将枣组培微嫁接苗置于蔗糖浓度为50 g/LMS无激素培养基中的成活率较高。适宜的培养基pH值为6。采用不同封口材料控制培养瓶内湿度的研究表明,棉塞和单层封口膜封口可保持瓶内湿度,并有利于微嫁接苗的成活。微嫁接苗在28℃进行培养较为适宜。在适宜条件下枣组培微嫁接的成活率最高,达33.3%。[结论]培养基蔗糖浓度、pH值、培养温度和湿度均会影响枣微嫁接苗成活率。     

冬枣的组织培养技术研究

[目的]建立冬枣的离体快繁体系。[方法]分别以休眠期一年生冬枣枝条茎段、生长季新梢茎段及水培休眠期一年生枝条幼芽为材料筛选最佳外植体,并对其进行增殖及生根培养,研究不同培养基对其增殖及生根的影响。[结果]水培休眠期一年生枝条幼芽为冬枣组织培养的最佳外植体;继代培养30d后,MS＋AC 0.3g/L＋BA1.5mg/L＋KT 0.5mg/L＋CM 50ml/L增殖培养基中组培苗生长最快,苗高达到（4.55±0.40）cm,且组培苗生长健壮,叶色正常;1/2MS＋IBA1.5mg/L培养基中组培苗产生的根系数量最多,且根最长,培养21d后根系数量达（5.90＋0.73）条,培养42d后新生根长度达（4.50＋0.31）cm。[结论]冬枣外植体的最佳增殖和生根培养基分别为MS＋AC 0.3g/L＋BA 1.5＋KT 0.5＋CM 50ml/L和0.5MS＋IBA 1.5。     

灵武长枣采后生理及贮藏保鲜技术研究进展

介绍了近年来灵武长枣果实采后生理与贮藏特性的研究进展,主要分析了灵武长枣的呼吸特性,阐述了目前有关灵武长枣果实采后主要的贮藏保鲜技术。     

金丝小枣水溶性粗多糖性质研究

用水提醇沉的方法对金丝小枣的粗多糖进行了提取。通过化学方法以及HPLC、GC、IR等现代仪器方法对金丝小枣粗多糖的性质进行了研究。结果表明:金丝小枣果肉含粗多糖20.3%,其主成分为果胶多糖,组成最主要为半乳糖醛酸(62.62%),其次为半乳糖、阿拉伯糖和鼠李糖,还有少量的木糖和葡萄糖。分子量主要分布在2.0×106Da左右。     

保水缓释肥对金丝小枣浆烂病发病率的影响

研究了保水缓释肥对金丝小枣浆烂病发病率的影响。结果表明：施用保水缓释肥能明显降低浆烂病的发病率。     

金丝小枣浆烂果病症状、危害及病原菌鉴定

金丝小枣浆烂果病严重危害我国北方枣树，并且逐年加重。本研究通过室内分离培养与田间调查，经多年多地试验，查明此病的症状、危害及病原菌。结果显示：金丝小枣浆烂果病在河北、山东、天津的产区普遍发生，以河北泊头市发病最重。该病在枣果进入白熟期(8月20日左右)开始发病，形成侵染点明显的红色近圆形软腐病斑。1998—2000年3年平均发病率和病情指数分别为36．7％和26．9。依据柯赫氏法则对金丝小枣浆烂果病病原菌进行了研究，根据病原菌形态特征，病原菌有性阶段鉴定为囊孢壳菌(Physalospora obtuse，(Schw．))，无性世代鉴定为梭壳孢菌(Fusicoccum sp．)。经黑光灯诱导后，囊孢壳菌在室内PDA培养基上可形成子座与分生孢子器。有性世代的子囊壳与子囊孢子只发现于越冬后的病枣果中。