树型金银花染色体制片优化及核型分析

以树型金银花茎尖为材料,比较材料的不同采集时间、预处理方法、解离时间和染色方法对树形金银花茎尖染色体制片的影响。结果表明,取材时间为上午10:00-11:00、预处理方式为饱和对二氯苯处理3～4 h、解离采用1mol/L HCl在60℃下13min、染色液以改良石碳酸品红染色10min染色体制片效果最佳。核型分析结果表明:染色体核型公式为2n=18=8m+8sm+2st,其中第9对染色体具随体,染色体相对长度组成为2n=18=4L+8M2+4M1+2S,属于"2B"型,核型不对称指数为64.47%,属于由对称向不对称演化的过渡型,表明树型金银花是较野生型金银花进化类型。     

根尖压片法制备树莓染色体标本的研究

以红泡刺藤(R.niveus)、栽秧泡(R.ellipticusvar.obcordatus)和插田泡(R.coreanus)绿枝或硬枝扦插生根的根尖为材料,通过取材时季与扦插环境气温,8-羟基喹啉、秋水仙素和对二氯苯3种药剂在不同的温度下预处理不同时间,混合酶液和盐酸在不同温度下解离,醋酸洋红、卡宝品红、席夫试剂和铁矾-苏木精各染色剂染色压片等的对比研究,并以细胞中有丝分裂中期分裂相的数目、染色体的清晰性、分散程度和聚缩程度以及染色体的形态为衡量指标,探索出适于树莓属植物核型分析的根尖压片方法是:当根尖长至1~2 cm、扦插环境气温17~23℃时取材,卡诺氏固定液I低温固定24 h,用0.002 mol/L 8-羟基喹啉在0~4℃下预处理24 h,再用1 mol/L HCl(60±1)℃恒温解离4~7 min,最后用卡宝品红染色压片能获得效果好树莓染色体标本,该染色体标本完全适用于核型分析。     

平邑甜茶根尖染色体制片技术优化及核型分析

为探讨制备平邑甜茶染色体制片的最佳技术参数,以平邑甜茶根尖为试验材料,比较材料的不同采集时间、预处理方法、酶解时间和后低渗时间对平邑甜茶根尖染色体制片的影响。结果表明:在26℃培养条件下,平邑甜茶最佳取材时间为11:00—11:30; 4℃低温冰水混合物进行预处理能够获得较为分散的染色体标本;酶解采用2. 5%果胶纤维素混合酶在37℃下处理最佳时间为2 h,后低渗最佳时间为20 min。核型分析发现平邑甜茶染色体属于小型染色体,染色体臂比变化在1. 01～2. 46之间,差异不大,核型组成成分为中部着丝点染色体(m)、亚中部着丝点染色体(sm),核型属于2B型。     

大麻染色体制片技术

[目的]探究大麻染色体的制片技术。[方法]对大麻染色体制片技术的预处理液、解离时间、染色时间等进行试验研究,并对其进行染色体数目观察。[结果]研究表明:用大麻根尖在常温下用0.003%的8-羟基喹啉溶液预处理2 h或用饱和对二氯苯处理1.5 h,经卡诺固定液固定30 min后,在1∶1的1 mol/L HCl和45%醋酸60℃下恒温水浴中解离30 s,地衣红染液染色8 h压片镜检,能取得良好的制片效果。大麻染色体数目观察表明,大麻染色体数目2n=2x=20。[结论]该研究为大麻细胞学方面的深入研究提供了资料。     

新疆紫草不同材料染色体制片技术研究

[目的]研究新疆紫草不同材料的染色体制片方法,为今后倍性鉴定奠定技术基础.[方法]以新疆紫草根尖及毛状根根尖为试验材料,采用常规制片法,分别考察培养方式及培养时间、取材时间、预处理方法、酸解方法、酸解时间、染色时间对染色体制片效果的影响.[结果]B5固体培养基培养4d的毛状根中期分裂相指数较大,且染色体清晰,制片效果较好;早上08:00取材的毛状根根尖的中期分裂相指数(124.2‰)最高,原植物根尖(115.4‰)在早上10:00取材较为适宜;毛状根根尖采用0.1;秋水仙素、温度15℃、预处理时间4h时的中期分裂指数为97.6‰～124.2‰,室温酸解法、10;盐酸、酸解时间为12 min、染色时间为20 min有利于毛状根根尖的制片.原植物根尖采用0.1;～0.2;秋水仙素、温度4 ～15℃、预处理时间3h、室温酸解法、10;盐酸、酸解时间为15 min时的中期分裂指数为128.6‰～128.9‰.[结论]材料不同则取材时间及秋水仙素预处理时间就有所不同.秋水仙素预处理时间、温度及酸解时间是影响新疆紫草染色体制片效果的关键因素.     

用于菊花品种核型分析的根尖压片技术研究

根尖压片技术是研究植物中期染色体数目和形态的一种重要方法。以2个大菊品种的根尖为材料,以典型中期分裂相的数目、中期染色体的分散程度、聚缩程度和中期染色体的清晰性为衡量制片效果优劣的标准,通过对比不同预处理药剂、取材时间、预处理温度、预处理时间长短以及解离时间条件下的制片效果,得出如下结论：当根长至1 cm时,在9：00~10：00取根,用饱和对二氯苯溶液在4℃条件下预处理4 h,然后用卡诺固定液固定22~24 h,用1 mol/L的HCl60℃下解离10 min,能够得到数量较多、染色体分散良好、染色体形态清晰以及染色体长度适中的中期分裂相。     

桉树染色体压片技术优化研究

为了探索和优化桉树染色体压片技术,获得收缩度好、分散充分的桉树染色体显微镜观察图,对比不同取材时间、不同预处理剂和不同解离方法处理下的染色体压片效果,得出最优的处理方法为:上午09:00进行取材,以8-羟基喹啉进行预处理4 h,用卡诺氏固定液于4℃固定24 h,酶解35 min,卡宝品红染色10 min,最后在显微镜下观察,可以得到清晰、可计数的染色体。该技术可用于桉树染色体核型分析和倍性鉴定等细胞生物学层面的研究。     

吊兰体细胞有丝分裂的制片研究

吊兰是一种常见的观叶植物,易于水培培养,取材方便,通过压片法观察吊兰根尖有丝分裂情况,发现早晨8:00~10:00点吊兰根尖处于旺盛的分裂期。且以0.002mol/L的8-羟基喹啉于室温预处理3.5~4h,可获得染色体形态良好的中期分裂相。使用改良石炭酸品红染色液,染色时间短,染色效果好。对吊兰根尖染色体制片研究结果,获得了有丝分裂各个时期的染色体形态,并确认吊兰体细胞染色体为2n=28。     

禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum Schw.)菌丝融合和细胞核数目的观察

禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum Schw.)在人工培养条件下,培养性状和致病力常发生各种变异。为了解菌株变异的原因,作者对禾谷镰刀菌的菌丝融合现象和细胞核数目进行了初步观察。方法是移接菌丝或涂孢子液于0.2%琼脂层玻片上,于25℃保湿培养8～15小时(芽管融合)或24小时(菌丝融合),观察菌丝或芽管的桥状融合,并用铁矾-苏木精染色,镜检细胞核,结果如下。     

芝麻染色体常规制片技术关键因子的优化研究

为了探索最佳的染色体制片方法,以芝麻活体种子根尖为材料,研究根尖预处理方法、解离时间、取材长度和染色方法等关键因子对芝麻染色体制片的影响.结果表明,预处理方法为40 mg/L的放线茵酮溶液处理3h、饱和对二氯苯溶液处理4h或0.002 mol/L 8-羟基喹啉溶液处理3h;取材长度为0.5～1.0 mm;在V无水酒精∶...     

百合根尖染色体制片技术研究

以卷丹百合根尖为试材,对其染色体制片技术的取样时间、预处理液、解离时间、染色剂等方面进行了试验研究,并对3个居群的卷丹百合染色体数目进行了观察。结果表明,根尖取样时间以上午8:30~9:30为佳,用0.1%秋水仙碱溶液4℃下预处理24小时,经卡诺固定液固定6h后,在1mol/L盐酸60℃下恒温水浴中解离8 min,改良卡宝品红溶液染色压片镜检,能取得良好的制片效果。卷丹染色体数目观察表明,3个卷丹居群的染色体数目均为2n=3x=36。     

果蝇唾腺染色体的制作技术研究

[目的]为果蝇唾腺染色体试验教学及相关研究提供成熟的制作技术。[方法]以野生型果蝇三龄幼虫为试验材料,通过三龄幼虫培养、唾腺剥离、压片、解离、染色等完整的制片过程探索染色体制片规律。[结果]利用镊子柄部进行压片效果很好,染色体伸展充分。通过比较4种染色试剂（苏木精、醋酸洋红、卡宝品红和改良苯酚品红）的染色效果选出的最佳试剂为改良苯酚品红。[结论]该研究为果蝇唾腺染色体的制作提供了成熟的技术参考。     

3个广藿香品种染色体制片技术优化与计数

以广藿香根尖为试验材料袁采用常规压片法比较取材时间尧预处理液尧处理时间尧酶液浓度尧酶解时间尧 低渗时间对广藿香染色体制片效果的影响袁采用去壁低渗法对石牌尧海南尧高要3 个广藿香品种进行染色体计数遥结 果表明院上午10:30~11:00 取材尧冰水混合液处理24 h尧4%混合酶液渊纤维素酶和果胶酶各占4%袁g/V冤酶解30 min尧低 渗15 min 所得广藿香染色体制片效果较好曰3 个广藿香品种分散良好尧清晰的50 个分裂相细胞袁70%以上的细胞染 色体数目为2n=64袁3 个广藿香品种在染色体数目上没有差异遥     

利用改进的整体染色与透明技术观察垂柳的幼胚

[目的]利用改进的整体染色与透明技术,对垂柳受精后的胚珠进行了整体染色与透明,以观察胚珠内的幼胚形态。[方法]使用稀释的爱氏苏木精染液对垂柳胚珠进行适时染色,然后用生理盐水（或水）冲洗,使用无水乙醇和油镜油的混合液对其进行脱水,用油镜油进行透明、制片。同时,还对整体染色与透明技术的方法进行了讨论。[结果]在普通（明视野）显微镜下,不仅能够观察到垂柳受精后胚珠的层次结构,还能清楚地观察到胚珠内的幼胚形态。垂柳的鱼雷形幼胚具有2枚子叶,偶尔见到具有3枚子叶的鱼雷形幼胚。[结论]与爱氏苏木精染色-冬青油透明技术相比,使用油镜油作为透明剂,制片方法简单,制片时间短,并且具有比较好的观察效果。     

非洲凤仙根尖染色体制片技术及细胞学研究

对非洲凤仙(Impatiens walleriana Hook.f.)进行染色体研究,旨在为多倍体育种提供细胞学资料。以非洲凤仙根尖为材料,采用常规压片法制片,光学显微镜观察染色体。结果表明,根尖8:00~9:00取材、在4℃下0.002 mol/L的8-羟基喹啉预处理2 h的处理组合效果最佳。间期核由一些大大小小的染色较深的异染色质颗粒构成,间期核属于前染色体型。前期染色体由染色较深的异固缩节段和染色较浅的常染色质节段相间排列而成,较多地分布于细胞中央,前期染色体属于渐变型。中期染色体数目2n=16,为二倍体。核型公式为:2n=2x=16=14m+2sm,其中第一对为近中部着丝点染色体,其余均为中部着丝点染色体,未观察到随体。最长染色体与最短染色体的比值为1.56,臂比大于2的染色体占12.5%,核型属2A型,核型不对称系数为54.8%,为对称的核型。该种的核型为首次报道。     

树上干杏染色体制片优化及核型分析

比较不同取材时间，预处理和解离方法对树上干杏染色体制片的影响，观察1 000个根尖细胞，比较不同部位中期细胞和适宜核型分析的中期细胞所占比例。结果显示，取材时间为8:30，用0.002 mol/L 8-羟基喹啉预处理4 h制片所得染色体分散效果最佳。核型公式为2n=2N=16m，核型不对称系数(As.K)为 53.66% ，属4A类型，核型对称性程度高，表明树上干杏在进化中处于偏向原始类型。     

紫薇属植物染色体制片技术优化

以紫薇属紫薇(Lagerstroemia indica)、屋久岛紫薇(L.fauriei)、福建紫薇(L.limii)为研究对象,从取材、预处理、制片方法等方面比较了常规压片和去壁低渗法两种染色体制片技术的效果,并进行染色体计数。结果表明:利用新萌发的茎尖在改良固定液(无水乙醇∶冰醋酸∶三氯甲烷=5∶3∶2)中-20℃固定过夜后的制片效果最好;常规压片法适用于普通计数、观察,利用火焰干燥法可获得维持染色体原有形态、能用于荧光原位杂交实验的染色体制片。此外,本研究观察到紫薇、屋久岛紫薇和福建紫薇的染色体数目均为2n=48,福建紫薇和屋久岛紫薇的染色体数目均为初次报道。     

马蓝染色体制片技术优化

以莆田地区马蓝分生组织为材料,采用压片技术,探讨马蓝不同取材部位、不同取材时间、不同预处理试剂处理、不同解离时间等对马蓝染色体制片的影响,并进行核型分析。结果表明:以根尖分生组织为材料,在上午8:00、8:30取材,用0.1%秋水仙素溶液室温预处理0.5h,用卡诺液固定4h,然后用1mol·L-1盐酸在60℃水浴8min,卡宝品红染色8min,可获得分散良好,形态清晰的染色体。核型分析表明,马蓝染色体为32条,马蓝的核型公式是2x=2n=32=4sm+28m,核型类型为1B,不对称系数为59.54%。说明莆田地区马蓝在相对稳定的自然环境中进化速度缓慢。     

宣威野生药用植物滇龙胆倍性鉴定研究

通过染色体计数方法对滇龙胆的染色体进行研究,对其倍性进行鉴定。结果表明:最佳取材时间为早上10:00～11:00;预处理用秋水仙碱和对二氯苯处理1h;最佳解离时间为10 min;染色体压片结果显示宣威野生药用植物滇龙胆染色体数为2n=22,鉴定其为2倍体。     

玉米染色体常规制片技术中关键因子处理效应及优化

利用五因素二次回归旋转组合设计研究玉米染色体常规制片技术中5个关键因子(取材时间、根尖长度、α-溴萘水溶液预处理时间、解离时间和α-溴萘水溶液的体积分数)及其处理效应.回归分析结果表明,除根尖长度外,其余4个处理因子对染色体制片效果有极显著影响.此外,基于回归方程的统计选优方法获得了比较符合实际的各处理因子的适宜范围,即取材时间8:00,根尖长度1.49～1.81 cm,97.62%～99.38%的α-溴萘水溶液预处理4.16～4.66 h和60℃1 mol/L HCl解离11.25～11.55 min,将取得较好的玉米染色体制片效果.