防治稻曲病的生物药剂筛选与评价

为了筛选出防治稻曲病的高效生物药剂，采用菌丝干重法和孢子萌发法测定了7种生物药剂对稻曲病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制率，并进行了测试药剂的田间防治试验。结果表明，7种供试药剂在室内测试试验剂量下对稻曲病病原菌菌丝生长抑制率都达80%以上，其中井冈·蜡芽菌、井冈·枯芽菌、枯草芽孢杆菌对稻曲病病原菌菌丝抑制率都为100%;对稻曲病病原菌孢子萌发抑制率在70%以上的生物药剂有井冈·枯芽菌、蛇床子素、井冈·嘧苷素和井冈·蜡芽菌；田间防治效果较好的药剂是井冈·枯芽菌和蛇床子素，两者防效都在70%以上。研究结果证实在破口期前7 d左右和齐穗期前后施用6%井冈·240亿CFU·g^-1枯芽菌可湿性粉剂或1%蛇床子素水乳剂，可提高对稻曲病的综合防治效果。     

7种杀菌剂对牡丹黄斑病菌生长和发育的影响

为筛选防治牡丹黄斑病的化学药剂,采用菌丝生长速率法测定了7种杀菌剂对病菌菌丝生长的抑制活性,并采用涂布平板法测定了多菌灵、苯醚甲环唑及嘧菌酯对病菌分生孢子萌发的影响,在含药平板上测定了对产孢量影响。结果表明,嘧菌酯和醚菌酯可强烈抑制菌丝生长,EC_(50)分别为0.247、0.865 mg·L~(-1),嘧菌酯对孢子萌发和芽管伸长均具有很强的抑制活性,但对产孢量影响较弱。戊唑醇、氟环唑、丙环唑和苯醚甲环唑对菌丝生长也有不同程度的抑制活性,EC50分别为2.808、1.268、4.078、0.446 mg·L~(-1);苯醚甲环唑对孢子萌发的影响较弱,但对病菌产孢有强烈的抑制作用。多菌灵对病菌菌丝生长的毒力为1.034 mg·L~(-1),对孢子萌发及产孢量均有一定的抑制活性。3类杀菌剂均可用于牡丹黄斑病的化学防治,根据其不同的形态毒理学效应应采用不同的施用方法:嘧菌酯可作为保护剂在病害发生前期喷施;苯醚甲环唑可作为治疗剂在病害发生期使用;多菌灵可在病害发生前同嘧菌酯混用或病害发生期同苯醚甲环唑混用,以防止抗药性的出现。     

绿木霉菌株TY009防治纹枯病等水稻主要真菌病害的潜力

【目的】研究绿木霉(Trichoderma virens)菌株TY009对水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病菌作用效果,以及其代谢产物胶霉毒素在不同温度和pH条件下的活性稳定性,评价菌株TY009防治水稻纹枯病和其它水稻主要真菌病害的生防潜力。【方法】用色谱法从绿木霉菌株TY009培养液中分离、纯化出胶霉毒素;采用对峙培养方法测定菌株TY009对水稻纹枯病菌的拮抗作用;采用常规抑制方法测定其代谢产物胶霉毒素对水稻纹枯病菌菌丝生长、菌核萌发的抑制作用,以及对稻瘟病菌孢子萌发、附着胞形成和稻曲病菌孢子萌发和次生孢子形成的影响;在不同温度、pH条件下测定胶霉毒素生物活性的变化。【结果】菌株TY009对水稻纹枯病菌有显著的拮抗作用。150 μg•mL-1胶霉毒素完全抑制水稻纹枯病菌的菌丝生长;160 μg•mL-1胶霉毒素处理菌核4 h后,完全抑制了水稻纹枯病菌菌核的萌发;50和10 μg•mL-1胶霉毒素分别完全抑制稻瘟病菌分生孢子萌发和附着胞的形成;1.0 μg•mL-1胶霉毒素完全抑制稻曲病菌分生孢子萌发和次生孢子的形成。胶霉毒素在100℃处理 60 min后,其对水稻纹枯病菌菌丝的生物活性没有改变;在pH值大于6.0时,0.5 μg•mL-1胶霉毒素对稻曲病分生孢子没有明显的生物活性,但低的pH孢子悬浮液中,胶霉毒素显著抑制分生孢子萌发和次生孢子的形成。【结论】绿木霉(T. virens)菌株TY009拥有多种生防机制,是一个潜在的、有效的生防菌株,具有应用防治水稻纹枯病并兼防稻瘟病和稻曲病的潜力。     

柑橘绿霉病菌对咯菌腈的敏感基线的建立

咯菌腈(fludioxonil)是高渗透压甘油响应信号途径的干扰剂,对多种植物病害具有很好的防治效果。该研究采用孢子萌发法和菌丝生长速率法测定了来自浙江衢州和江西赣南两地78个柑橘绿霉病菌(Penicillium digitatum)菌株对咯菌腈的敏感性。结果表明,咯菌腈抑制柑橘绿霉病菌孢子萌发和菌丝生长的EC50值分别为0.0285~0.11μg·m L-1和0.0019~0.04μg·m L-1,平均值分别为(0.0557±0.0041)μg·m L-1和(0.0118±0.0015)μg·m L-1。EC50值的频次分布符合偏正态分布,可分别作为柑橘绿霉病菌孢子萌发和菌丝生长对咯菌腈的敏感基线。     

两种新型多烯大环内酯抗生素对四种水稻病原真菌的抗菌活性和毒力测定

离体条件下,采用菌丝生长速率法和菌丝干重法测定新型多烯大环内酯抗生素——抗真菌霉素702和制霉色基素对水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)、水稻菌核病菌(Helminthosporium sigmoideum Cav.)、稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)、稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)4种水稻病原真菌的抗菌活性和毒力.结果表明,抗真菌霉素702和制霉色基素对4种水稻病原真菌具有较强的抗菌活性,50 μg/mL抗真菌霉素702对水稻纹枯病菌、水稻菌核病菌、稻瘟病菌和稻曲病菌的抑菌率分别为100.00％、100.00％、91.72％和68.06％,EC50分别为7.00、10.30、14.41、26.71 μg/mL,EC90分别为13.20、17.66、27.67、128.28μg/mL.13 μg/mL制霉色基素对水稻纹枯病菌、水稻菌核病菌、稻瘟病菌和稻曲病菌的抑菌率分别为78.20％、100.00％、100.00％和79.17％,EC50分别为1.47、1.91、2.37、0.20 μg/mL,EC90分别为41.05、3.92、4.34、135.54 μg/mL.总体上,制霉色基素对4种水稻病原真菌的抑菌活性强于抗真菌霉素702.     

13种杀菌剂对冬小麦雪腐病菌的毒力测定

为筛选出有效的冬小麦雪腐病菌杀菌剂以指导小麦生产,以冬小麦感病材料337为试材,采用13种杀菌剂对冬小麦雪腐病菌的毒力进行研究。结果表明:13种药剂在系列浓度下对冬小麦雪腐病菌菌丝的生长及孢子的萌发均有不同程度的抑制作用,并对该病害具有一定的防治效果。50%腐霉利WP对冬小麦雪腐病菌的防治效果最佳,其EC50为2.88mg·L-1,菌丝抑制率达到85.48%,孢子萌发抑制率为65.4%,相对防效高达95.7%;12.5%腈菌唑EC的防治效果次之,EC50为4.62mg·L-1,孢子萌发抑制率为66.5%,相对防效为87.1%;50%多菌灵WP效果最差。     

75%肟菌·戊唑醇WG不同施药量防治水稻后期主要病害效果研究

75%肟菌·戊唑醇WG不同施药量防治水稻后主要病害试验结果表明,75%肟菌.戊唑醇WG对水稻穗瘟、稻曲病、纹枯病等主要病害均具有较好的防治效果,用药量225g/hm2,于水稻破口前3d、齐穗期各防治1次,对水稻穗瘟防效高于40%稻瘟灵EC 1500mL/hm2,对稻曲病、纹枯病的防效显著高于40%稻瘟灵EC 1500mL/hm2。75%肟菌.戊唑醇WG防治水稻主要病害对水稻具有较好的增产效果,主要是结实率提高、千粒重增加、空谷率下降。75%肟菌·戊唑醇WG防治水稻穗瘟、稻曲病、纹枯病等主要病害,建议用药量为150～225g/hm2;若防治感稻瘟病的水稻品种,75%肟菌·戊唑醇WG用药量应为225g/hm2,于水稻破口前3d、齐穗期各防治1次。     

贵州省水稻稻瘟病菌对四种杀菌剂的敏感性测定

采用菌丝生长速率抑制法及孢子萌发抑制法测定了贵州省开阳、桐梓和黄平县水稻稻瘟病菌对三环唑、稻瘟灵、咪鲜胺和春雷霉素的敏感性。结果表明:三地水稻稻瘟病菌对供试杀菌剂的敏感性存在不同程度的差异。其中,黄平县水稻稻瘟病菌对三环唑、咪鲜胺、春雷霉素的EC50值为最大,表现均为最不敏感;桐梓县水稻稻瘟病菌对4种供试杀菌剂的EC50值为最小,表现均为最敏感;开阳县水稻稻瘟病菌对稻瘟灵表现为最不敏感。     

枯草芽孢杆菌G87抗菌蛋白对稻瘟病菌和稻恶苗病菌的抑制作用

为明确枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)G87抗菌蛋白的生物活性,采用菌丝生长、分生孢子萌发和芽管伸长抑制的方法,研究其对稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)和稻恶苗病菌(Gibberella fujikuroi)的抑制作用。结果表明:抗菌蛋白能明显抑制2种病菌菌丝生长、分生孢子萌发和芽管伸长。1.20mg·mL-1抗菌蛋白对稻瘟病菌菌落直径和菌丝干重的抑制率分别达60%和80%以上;2.40mg·mL-1抗菌蛋白对稻恶苗病菌分生孢子萌发和芽管伸长的抑制率均达60%以上。抗菌蛋白还能显著破坏2种病菌菌丝形态,使菌丝细胞畸形膨大、原生质浓缩和外渗、细胞壁破损以及菌体崩溃等。因此,枯草芽孢杆菌G87抗菌蛋白具有重要的抗菌生物活性。     

嘧菌酯与稻瘟灵复配防治稻瘟病

正嘧菌酯(阿米西达)是先正达公司开发的杀菌剂,杀菌活性高、抗病谱广,具有保护和治疗双重功效。通过测试证明,嘧菌酯对稻瘟病菌丝生长、孢子萌发和产生孢量具有强烈的抑制作用,另外,嘧菌酯对稻瘟病菌黑色素合成也有抑制作用。稻瘟灵(富士一号)是一种内吸性杀菌剂,能抑制菌丝侵入,从而抑制病菌生长。嘧菌酯与稻瘟灵复配,具有很好的互补性,能有效防治稻瘟病。水稻生产期间,用上述药剂预防或治疗稻瘟病2次:第1次在水稻苗期,结合防治其他病虫害,每667平方米用嘧菌酯15克加稻瘟     

溴代白头翁素对几种植物病原真菌的抑制作用

利用白头翁植物体中的原白头翁素(性质不稳定)人工合成的前体溴代白头翁素对6种植物病原真菌进行了菌丝生长速率和孢子萌发试验。结果表明:溴代白头翁素对病原真菌具有很高的抑制效果,在浓度为1 000.000和500.000 mg·L~(-1)时,该药剂对所供试的病原真菌的菌丝生长抑制率均为100%,其中对黄瓜菌核病菌的抑制效果最好,EC_(50)为26.810 mg·L~(-1),当浓度为125.000 mg·L~(-1)时,除对烟草赤星病菌菌丝生长抑制率为41.07%外,对其它供试病原菌菌丝生长抑制率均在60%以上,当浓度降到15.625 mg·L~(-1)时,对所有供试病菌菌丝生长抑制率均低于10%;该药剂对供试病原菌孢子萌发具有很高抑制效果,当浓度为125.000 mg·L~(-1)时溴代白头翁素对所供试的病原真菌孢子萌发抑制率均为100%,对病菌孢子萌发抑制效果都好于常用的商品药剂,当浓度降到31.250 mg·L~(-1)时对供试的病原菌的孢子萌发抑制率仍高于50%。     

3,5-二叔丁基-4羟基-苄基甲醚抑菌活性的研究

为测定3,5-二叔丁基-4羟基-苄基甲醚的抑菌活性,分别采用生长速率法、悬滴法测定了该物质对6种植物病原真菌菌丝生长及孢子萌发的抑制作用。结果表明:该物质抑制6种病菌菌丝生长的EC50在186.48~711.78 mg.L-1之间,抑制孢子萌发的EC50在171.93~337.85 mg.L-1之间,且抑制孢子萌发的EC50普遍低于抑制菌丝的EC50。其中对番茄灰霉病菌的抑制作用最强,对菌丝和孢子萌发的EC50分别为186.48和171.93 mg.L-1。同时,比较了3,5-二叔丁基-4羟基-苄基甲醚与多菌灵、甲基托布津对番茄早疫及梨黑斑病菌的抑制作用,结果表明:该化合物抑制2种病菌菌丝生长的EC50虽然稍高于甲基托布津对病菌的EC50,但均低于多菌灵,表明该物质具有一定的开发应用前景。     

新杀菌剂5%广枯灵水剂对稻瘟病菌的室内毒力测定

 室内5%广枯灵水剂对水稻稻瘟病菌菌丝、孢子的毒力测定结果表明:新杀菌剂5%广枯灵水剂不但能抑制稻瘟病菌菌丝的生长,而且对稻瘟病孢子萌发的抑制作用较好。5%广枯灵水剂100 mg／L的抑菌效果为67.1%;400 mg／L的抑菌效果可达100%。对照药剂20%三环唑400 mg／L 的抑菌效果仅为84.4%,5%广枯灵水剂对稻瘟病菌孢子萌发的BC₅₀值47.99 mg／L;20%三环唑BC₅₀值56.43 mg／L;5%广枯灵水剂抑制稻瘟病菌菌丝生长,抑制稻瘟病菌孢子萌发以及BC₅₀值均明显好于当前广泛使用的20%三环唑。     

木荷皂苷对稻瘟病病原细胞的致毒作用

为了探索木荷皂苷抗稻瘟病菌的作用方式,通过显微观察、血球计数板计数、活体侵染等方法,测定木荷5种皂苷对稻瘟病菌孢子和附着胞的致毒作用。结果显示,木荷皂苷对稻瘟病菌孢子及附着胞的抑制作用均强于阳性对照稻瘟灵,R2-A、R2-1、R2-2、R2-3、R3-4、稻瘟灵对稻瘟病病菌的孢子萌发抑制EC50分别为2.73、2.27、0.61、0.95、4.68、13.94μg/m L;在浓度为10μg/m L时,它们对孢子产附着胞的抑制率分别为78.68%、93.27%、97.23%、91.93%、36.34%、9.11%;抑制稻瘟病病菌附着胞产黑色素的MIC分别为7.0、6.0、4.0、6.5、17.0、18.0μg/m L。受处理的稻瘟病病菌孢子侵染活体水稻叶片能力会不同程度下降,同时抑制附着胞黑色素的积聚成为空胞,难以形成高压渗透钉,阻断了稻瘟病病菌的侵染传播。研究表明,木荷皂苷抗稻瘟病病菌对稻瘟病病原不同类型细胞不具选择性,除了作用于菌丝细胞膜外,还可通过抑制孢子萌发、附着胞黑色素积累等方式产生作用;R2-1、R2-2、R2-3是木荷抗稻瘟病病菌的主要活性先导物。     

昆虫病原线虫共生菌YL001发酵液不同粗提物抑菌活性研究

采用不同溶剂对YL001发酵液进行提取,以抑制菌丝生长速率法、抑制孢子萌发试验法离体测定了不同粗提物对植物病原真菌的抑制活性。结果表明,氯仿粗提物在离体条件下能显著抑制多种供试真菌菌丝的生长,其对辣椒疫霉病菌和水稻稻瘟病菌的EC50值分别为63.58μg/mL和77.21μg/mL;正丁醇粗提物能显著抑制供试真菌孢子的萌发,其对番茄灰霉病菌的EC50值为0.445μg/mL;盆栽实验表明正丁醇粗提物比氯仿粗提物具有较好的防治效果,其对黄瓜霜霉病的保护和治疗作用分别达82.4%和75.1%。     

18种杀菌剂对黑龙江省稻瘟病菌的室内毒力测定

为筛选针对稻瘟病高效的药剂,研究采用生长速率抑制法和玻片萌发法,测定了18种杀菌剂对稻瘟病菌(Magnaporthe grisea)菌丝生长和孢子萌发的影响。结果表明:45%三苯基乙酸锡、25%腈菌唑、80%乙蒜素、25%咪鲜胺、戊唑醇(有效含量430 g·L~(-1))和75%肟菌·戊唑醇对稻瘟病菌菌丝生长具有最高的抑菌作用。其EC_(50)值分别为1.594 7,2.791 2,3.039 3,3.132 5,3.224 1,3.522 0μg·mL~(-1);25%腈菌唑、25%咪鲜胺、80%乙蒜素、45%三苯基乙酸锡对病原菌分生孢子萌发具有较高的抑制作用,其EC_(50)值分别为0.042 7,0.301 6,0.421 7,0.651 3μg·mL~(-1)。45%三苯基乙酸锡、25%腈菌唑、80%乙蒜素、25%咪鲜胺4种药剂既能抑制稻瘟病菌菌丝生长又能抑制孢子萌发。     

抗菌肽对稻瘟病菌的抑菌活性测定

本文将源自酪蛋白Casein的抗菌肽作为抑菌剂,测定了抗菌肽对稻瘟菌的抑制活性,并通过盆栽试验评价了其对水稻稻瘟病的防治效果。结果表明,对稻瘟病菌孢子萌发的抑制效果较好的抗菌肽有p390、p415和p416;其中抗菌肽p390和p415对稻瘟病菌的菌丝生长也有较好的抑制效果;盆栽防治试验表明抗菌肽p390浓度为0.2 mmol·L^-1,p415浓度为0.8 mmol·L^-1时,两者的防治效果达到50%以上,抗菌肽p390的防治效果优于p415。     

咯菌腈对四种牡丹叶片病原真菌的抑制活性

【目的】探究咯菌腈对牡丹黑斑病菌(Alternaria suffruticosae)、黄斑病菌(Phyllosticta commonsii)、腔孢叶斑病菌(Hainesia lythri)和叶霉病菌(Cladosporium paeoniae)菌丝生长、孢子萌发、芽管伸长及产孢的抑制活性,分析咯菌腈在牡丹病害化学防治上的应用前景。【方法】采用菌丝生长速率法测定咯菌腈对菌丝生长的抑制活性,采用涂布平板法测定咯菌腈对孢子萌发、产孢时间及产孢量、芽管伸长及芽管和孢子形态的影响。【结果】咯菌腈对腔孢叶斑病菌菌丝生长的抑制作用最强,EC_(50)为0.01μg·mL~(-1),其次为黑斑病菌和黄斑病菌,分别为0.07和0.35μg·mL~(-1);咯菌腈对4种病菌的孢子萌发均有较强的抑制作用,对腔孢叶斑病菌的抑制作用最强,其EC_(50)为1.26μg·mL~(-1),对其他3种病菌孢子萌发的EC_(50)在3.27—3.45μg·mL~(-1);0.1μg·mL~(-1)咯菌腈对4种病菌分生孢子芽管伸长的抑制率在40%—70%,表明咯菌腈对4种病菌分生孢子芽管伸长均有明显的抑制作用,浓度越大抑制作用越强,各浓度间差异显著,其中对腔孢叶斑病菌芽管伸长抑制的EC_(50)为0.04μg·mL~(-1),抑制作用最强,对其他3种病菌芽管伸长的EC_(50)在0.08—0.22μg·mL~(-1);咯菌腈对黑斑病菌和黄斑病菌分生孢子和芽管的致畸作用强烈,可导致孢子及芽管膨大、过度分枝,而对叶霉病菌和腔孢叶斑病菌致畸作用较弱,芽管及孢子形态基本正常;咯菌腈可推迟黑斑病菌、黄斑病菌及叶霉病菌的产孢时间,对黑斑病菌产孢量的抑制作用最强,EC_(50)为0.05μg·mL~(-1),对叶霉病菌次之,EC_(50)为0.38μg·mL~(-1),但对腔孢叶斑病菌产孢有促进作用。【结论】咯菌腈对牡丹黑斑病菌及腔孢叶斑病菌的菌丝生长、孢子萌发及芽管伸长均有很强的抑制作用,但对腔孢叶斑产孢具有一定的促进作用;对叶霉病菌和黄斑病菌孢子萌发及芽管伸长、黄斑病菌菌丝生长及叶霉病菌产孢的抑制作用强烈;由于咯菌腈内吸活性较弱,无法抑制已侵入牡丹叶片的病原真菌的生长,故建议作为保护剂在病害发生前施用。     

0.3％农抗702水剂防治水稻病原真菌的药效评价

采用菌丝生长速率法、菌丝湿重法测定0.3％农抗702水剂制剂对水稻纹枯病、稻瘟病、稻曲病的毒力作用,结果表明,0.3％农抗702水剂制剂对离体水稻纹枯病、稻瘟病和稻曲病的EC50值、EC90值分别为4.16和16.17 mg/L、16.05和41.85 mg/L、111.2和389.0mg/L.对水稻纹枯病、稻瘟病有较好的抑制作用,基本上能达到市售农药井冈霉素、春雷霉素的效果,但对稻曲病的抑制作用较弱.该水剂对水稻纹枯病的预防活性明显高于治疗活性.     

小花假泽兰的抑菌活性成分研究

为研究小花假泽兰的抑菌活性成分,采用活性跟踪法对小花假泽兰的全株乙醇提取物进行分离,并利用现代波谱技术(IR、1H-NMR和13C-NMR)对已分离的化合物进行结构鉴定.结果表明:从小花假泽兰中分离出4种具有抑菌活性的化合物,分别为豆甾醇、去氧薇甘菊内酯、二氢薇甘菊内酯和β-谷甾醇.采用生长速率法和孢子萌发法测定其中2种化合物(去氧薇甘菊内酯和二氢薇甘菊内酯)对8种重要植物病原菌的抑制作用.结果表明:这2种化合物对小麦纹枯病菌、辣椒疫霉病菌和棉花立枯病菌的菌丝生长抑制作用较强,100mg·L-1剂量下抑制率均在90%以上;对小麦纹枯病菌的有效抑制中浓度(EC50)分别为5.61和18.24mg·L-1;对辣椒疫霉病菌的EC50分别为13.88和12.84mg·L-1;对番茄灰霉病菌孢子萌发的EC50分别为10.49和34.68mg·L-1;对玉米大斑病菌孢子萌发的EC50分别为48.79和75.47mg·L-1.这2种化合物对农业植物病原菌的抑菌活性均为首次报道.