不同基因型甘蔗离体培养技术研究

为探讨甘蔗不同基因型的组织培养技术,以ROC22、03-75、02-6和B8品种(系)为试验材料,经过(52±0.2)℃水浴热处理及培养后,筛选出适宜的愈伤组织诱导培养基、愈伤组织分化培养基、芽增殖和苗生根培养基。结果表明:甘蔗在不同培养阶段对激素种类、质量浓度有差异,其中MS+3.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA培养基对愈伤组织诱导培养较适宜,愈伤组织的分化培养基、增殖培养基分别为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.05 mg/L TDZ、MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/L PP333,1/2MS改良+4.0 mg/L NAA+1.0 mg/L PP333培养基为最佳的生根培养基,各甘蔗品种(系)的生根率高,根系粗壮。     

猫须草组织培养研究

[目的]研究猫须草离体培养的最佳激素配比和最佳培养基。[方法]以猫须草幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,比较不同浓度和不同种类的生长激素对茎段腋芽萌发、愈伤组织增殖及丛生芽生根的影响。[结果]6-BA可促进腋芽萌发,分化丛生芽。随着6-BA浓度的增加,萌发腋芽的数量反而减少,当6-BA的浓度大于2.5 mg/L时,茎段便不再长出腋芽,而是在其顶端出现愈伤组织。在一定浓度范围内,随着2,4-D浓度的增加,愈伤组织的生长就越旺盛,当2,4-D浓度为2.0 mg/L时,愈伤组织增殖效果最好。NAA浓度为1.0 mg/L时诱导茎段生根效果最好,生根率达到100%。[结论]适宜的诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L,适宜继代增殖培养基为MS+2,4-D2.0 mg/L,茎段生根的适宜培养基为MS+NAA1.0 mg/L。     

耧斗菜的组织培养

以耧斗菜幼嫩叶片及叶柄为外植体,研究了不同生长调节物质对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,在培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L上诱导叶柄产生愈伤效果最好,诱导率为80.5%;在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上叶片愈伤诱导效果最好,诱导率为92.7%。继代培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中分化芽;分化的芽在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中增殖。生根培养基为1/2 MS+NAA0.1 mg/L或1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

婆婆纳组织培养再生体系的建立

以婆婆纳(Veronica didymaTenore)的叶片、茎节、茎段、顶芽为外植体,接种在附加2,4-D、6-BA、NAA等不同质量浓度和组合的培养基中进行离体培养,并比较了不同培养基上不同外植体的诱导率。结果表明,诱导愈伤组织的最佳外植体是叶片,诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.0 mg/L,愈伤组织诱导率为100%。诱导愈伤组织分化的最适培养基为MS+2,4-D0.01 mg/L+6-BA0.75mg/L+NAA1.75 mg/L,分化率为90%。诱导生根的培养基为l/2MS+NAA0.2 mg/L,生根率为90%。     

八仙花叶柄离体培养和植株再生技术研究

以八仙花中部和上部叶柄(包括叶片)为繁殖材料,比较不同浓度激素配比情况下,不同部位叶柄愈伤组织的诱导、分化及不定芽的快速繁殖,并筛选适宜的愈伤组织诱导培养基、不定芽增殖培养基及生根培养基。结果表明,八仙花叶柄可作为离体培养的繁殖材料,其中,中部叶柄比上部叶柄愈伤组织诱导率高;较适宜的愈伤组织诱导培养基为:MS+6-BA 2.5 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L;较适宜的不定芽诱导培养基为:MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA0.2 mg/L;较适宜的增殖培养基为:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;较适宜的生根培养基为:MS+NAA 0.8 mg/L或MS+IBA 0.6 mg/L+NAA 0.3 mg/L。     

长寿花叶片愈伤组织培养及植株再生的研究

以长寿花幼嫩叶片为材料,以2,4-D,6-BA,NAA为主要研究因子,研究不同激素配比对长寿花愈伤组织生长、分化及其芽增殖情况的影响。试验表明,当叶片在MS＋2,4-D2mg/L＋6-BA0.2mg/L的培养基中培养,有利于愈伤组织的形成,在MS＋6-BA1.0 mg/L＋NAA0.1mg/L的培养基中培养利于愈伤组织的分化和芽的增殖,1/2MS＋IBA0.2mg/L培养基利于生根。     

红掌组织培养再生体系建立的研究

以红掌"骄阳"幼嫩叶片为材料,筛选出红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根的最佳培养基及激素配比。结果表明:红掌愈伤组织诱导的最佳培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+2.4-D0.5 mg/L,不定芽分化培养基为改良MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L,生根培养基为改良MS+IBA 0.6 mg/L+IBA 0.3 mg/L,生根率达到100%。     

半夏愈伤组织诱导与分化最适培养基筛选

以半夏[Pinellia ternata(Thunb.)Breit.]叶片为试验材料,研究不同培养基配方对半夏叶片的诱导脱分化、愈伤组织增殖及分化的影响。结果表明,适合半夏叶片诱导脱分化的培养基为MS+0.8 mg/L6-BA+1.8 mg/L NAA+0.1 mg/L 2,4-D;适合愈伤组织增殖的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L2,4-D;适合分化生长的培养基为MS+0.8 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+3.0 mg/L 2,4-D。     

玉米湘农3号幼胚愈伤组织诱导及再生体系建立

以玉米品种湘农3号幼胚为外植体,以MS为基本培养基,研究2,4-D与NAA浓度配比对愈伤组织诱导、KT与IBA浓度配比对愈伤组织分化、NAA与6-BA浓度配比对试管苗生根的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;愈伤组织分化的最适培养基为MS+KT 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;生根的最适培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.6 mg/L。     

红掌“粉冠军”组培快繁体系的优化

以红掌品种"粉冠军"幼嫩叶片为外植体,进行组培快繁技术优化研究。结果表明,红掌品种"粉冠军"叶片愈伤组织最佳诱导培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D,其愈伤组织诱导率可达到76.7%;最佳不定芽分化培养基为MS+1 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,;最佳的继代增殖培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA,;最佳生根培养基为1/2MS+0.05 mg/L IBA。     

小蓟叶片愈伤组织的诱导及增殖条件优化

[目的]建立小蓟愈伤组织的诱导及增殖培养体系。[方法]以野生小蓟无菌苗叶片为外植体,分析2,4-D、6-BA、NAA对小蓟愈伤组织的诱导及增殖的影响,确定最适宜的激素组合。[结果]单因素条件下,0.8 mg/L 2,4-D、0.9 mg/L 6-BA、2.0 mg/L NAA为小蓟叶片愈伤组织诱导的最佳浓度;MS+2,4-D 0.6 mg/L+6-BA 0.9 mg/L+NAA 2.5 mg/L培养基为小蓟叶片愈伤组织最适诱导组合。单因素条件下,2,4-D、NAA不适合小蓟愈伤组织增殖培养,MS+6-BA 0.3 mg/L为小蓟叶片愈伤最佳增殖培养基。[结论]该研究为小蓟的进一步开发利用奠定基础。     

马齿苋的组织培养和植株再生

用马齿苋的幼嫩叶片和茎段建立了马齿苋组织培养及植株再生系统。最适愈伤组织诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L 2,4-D 0.5 mg/L或2,4-D 1.0 mg/L,愈伤组织诱导率均可达100%。将生长良好的愈伤组织块转入分化培养基中以诱导不定芽的分化,其最适分化培养基为MS 6-BA 4.0 mg/L NAA 0.2 mg/L,分化率达到87.5%。再生苗在1/2MS IBA 2.0 mg/L的培养基上诱导生根,经过15d培养,100%生根成苗。     

叶用芥菜细胞悬浮培养的研究

以叶用芥菜的子叶为外植体,对愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系进行了研究.结果表明,愈伤组织诱导的最适培养基为MS+0.3 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D,愈伤组织最佳增殖培养基为MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养2～10 d达对数生长期.将小细胞团接种于Ms+1.0 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA分化培养基上,继代两次后,分化出芽,分化芽在培养基MS+0.1 mg/L NAA上诱导生根,形成小植株.     

甘薯的组织培养

以甘薯的叶片为外植体进行组织培养,结果表明:适合甘薯愈伤组织诱导的培养基是MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L和MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,适宜愈伤组织分化出根的分化培养基是MS+KT 0.5 mg/L或MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5mg/L或MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,适宜根分化出试管苗的分化培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基为MS;生根的培养基为1/2 MS.     

唐菖蒲球茎芽高频再生体系的建立

将带芽的唐菖蒲子球茎切块接种在附加2,4-D 3.0 mg/L的MS基本培养基上诱导愈伤组织的发生.愈伤组织转至MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L诱导芽的分化.丛生芽继代增殖在MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1mg/L上,增殖系数最高.生根培养以1/2 MS+NAA 0.1 mg/L效果最佳.     

太阳扇愈伤组织培养及植株再生体系建立

以太阳扇(Scaevola aemula)嫩叶、老叶、茎段、茎节为材料进行外植体筛选;以太阳扇嫩叶为外植体,研究愈伤组织诱导、不定芽分化及增殖、生根培养的适宜条件.结果表明:嫩叶为太阳扇愈伤组织诱导最佳外植体;MS+6-BA 0.50mg/L+2,4-D 0.20mg/L为愈伤组织诱导最佳培养基;MS+6-BA 0.50mg/L+NAA 0.10mg/L为芽分化最佳培养基,分化率可达96.5%;1/2MS+NAA 0.01mg/L为芽增殖最佳培养基,增殖系数最高可达3.33;糖浓度、NAA均影响太阳扇无菌苗生根,1/2MS+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L为生根培养最适培养基;g腐殖质∶g珍珠岩∶g细土=2∶1∶1为组培苗移栽最佳基质,移栽成活率达75%.     

铁炮百合离体再生体系的建立

以铁炮百合无菌苗的叶片、鳞片为外植体,进行铁炮百合再生体系的研究。结果表明:鳞片的诱导分化能力高于叶片,鳞片分化培养基(MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA、MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA)的分化率高达90.98%。用叶片为外植体,不同部位对不定芽的诱导影响较大,以叶片中部分化能力最强,上部次之,下部最差。叶片分化培养基为MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,分化率为85.36%。2,4-D浓度对愈伤组织的诱导影响显著,愈伤诱导培养基以MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D为佳,愈伤率达80%以上。     

崇左金花茶的组培诱导愈伤研究

[目的]探索崇左金花茶组织培养中诱导愈伤组织的途径和方法。[方法]用崇左金花茶的幼嫩叶片、幼嫩茎段和种子作为外植体,在不同激素组合培养基上进行愈伤组织诱导试验。[结果]幼嫩叶片愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L2,4-D;幼嫩茎段愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D;种子愈伤组织诱导最佳培养基为改良MS+4mg/L 6-BA+0.6 mg/L 2,4-D。[结论]该研究获得了崇左金花茶的最佳愈伤组织诱导培养基,为崇左金花茶组织培养体系的建立提供了技术支持。     

小玉竹组织培养及无性系的建立

以小玉竹根茎为外植体,以MS为基本培养基,附加不同浓度的6-BA,2,4-D,IAA,NAA,诱导根茎形成愈伤组织,并使愈伤组织分化形成不定芽,培养成生根试管苗,建立起小玉竹无性系。结果表明,MS+6-BA 0.4 mg/L+NAA 1.0 mg/L是根茎愈伤组织诱导的理想培养基;MS+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.2 mg/L是愈伤组织和不定芽分化培养的理想培养基;1/3MS+IAA 0.4 mg/L是试管苗生根培养的理想培养基。     

苜蓿胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

以苜蓿5～7 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L为苜蓿胚性愈伤组织诱导的适宜培养基,诱导率为37.8%。胚性愈伤组织分化成苗培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA 0.02 mg/L+蔗糖10.0 g/L。