Detection of NBS-LRR type disease resistance gene in the resistance cultivars of tomato to Meloidogyne incognita

采用盆栽病土接种法,鉴定58份番茄(Solanum lycopersicum)种质材料对南方根结线虫(Meloidogyne incognita)的抗性.结果表明:供试的58份番茄种质材料对南方根结线虫的抗病性存在明显差异,其中高抗材料1份,抗病材料3份,感病材料3份,高感材料51份;根据已知NBS-LRR类抗病基因NBS区域的保守系列,设计简并引物,对抗性材料基因组进行体外扩增,获得了约500 bp的预期片段.     

番茄种质材料对南方根结线虫抗性鉴定

采用盆栽接种2龄幼虫法,对4份番茄种质材料进行抗南方根结线虫鉴定,并对其有关生理生化指标进行观测。结果显示,番茄种质材料无限生长（红色）和Bss368对南方根结线虫表现为抗性,红吉星和大明星表现为感病,具体表现为抗性材料根际线虫量及根结数比感病材料少,根际线虫高峰期比感病材料晚;感病材料地上部分生长受抑制明显,根冠比高于抗病材料;抗病材料过氧化物酶（POD）活性高,积累量大,能及时阻止线虫的侵染。     

贵州晾晒烟品种资源对根结线虫的抗性研究

为筛选烟草根结线虫抗性种质资源,对116份晾晒烟种质资源进行了田间抗性鉴定。试验烟田内根结线虫经形态学鉴定为南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(M.javanica)、花生根结线虫(M.arenaria)的混合种群,鉴定结果发现有6份材料在该混合种群下表现为高抗、20份材料表现为抗病、17份表现为中抗,其他材料均感病或抗性较差。     

番茄种质材料对南方根结线虫的抗性鉴定及Mi-1基因检测

采用盆栽接种2龄幼虫法,对6份番茄Solanum lycopersicum种质材料进行了对南方根结线虫Meloidogyne incognita的抗性鉴定。结果表明:供试的番茄材料对南方根结线虫的抗性存在差异,其中,高抗材料4份,抗病材料1份,感病材料1份;采用酶切扩增多态性序列(Cleaved amplified polymorphic sequences,CAPS)方法对番茄抗性材料进行Mi-1基因检测,发现TY52、T27和Bss368 3份材料不含Mi-1基因,无限生长(红色)和T24含有Mi-1基因。     

辣椒种质对南方根结线虫抗性的鉴定（英文）

[目的]筛选高抗南方根结线虫辣椒种质材料,为辣椒抗病育种提供抗源。[方法]通过测定67份辣椒种质接种南方根结线虫50 d后的相关抗病指标,利用聚类分析和隶属函数运算相结合的方法进行综合分析。[结果]南方根结线虫对不同辣椒种质相关抗病指标的影响显著不同,卵粒指数和根结指数存在丰富的遗传变异,变异系数分别为143.16%和118.95%。以根结指数为统计参数对供试辣椒种质进行聚类分析,可将67份供试辣椒种质材料分为抗病、中抗、感病和高感4类。根据抗病指标隶属函数总值,确定了供试辣椒种质抗南方根结线虫的顺序。其中,Rela 2和L506M隶属函数总值最高,达2.00,表明其对南方根结线虫表现免疫,L287-2、L522-1M、L504M、L515-2、13SM100-1、L512M、L292-1、L319、L316、L317、13SM87-1和Rela 5的隶属函数总值均超过了1.95,对南方根结线虫表现高抗。[结论]该研究为辣椒根结线虫抗性育种提供了抗源。     

辣椒种质对南方根结线虫抗性的鉴定

[目的]筛选高抗南方根结线虫辣椒种质材料,为辣椒抗病育种提供抗源.[方法]通过测定67份辣椒种质接种南方根结线虫50 d后的相关抗病指标,利用聚类分析和隶属函数运算相结合的方法进行综合分析.[结果]南方根结线虫对不同辣椒种质相关抗病指标的影响显著不同,卵粒指数和根结指数存在丰富的遗传变异,变异系数分别为143.16％和118.95％.以根结指数为统计参数对供试辣椒种质进行聚类分析,可将67份供试辣椒种质材料分为抗病、中抗、感病和高感4类.根据抗病指标隶属函数总值,确定了供试辣椒种质抗南方根结线虫的顺序.其中,Rela 2和L506M隶属函数总值最高,达2.00,表明其对南方根结线虫表现免疫,L287-2、L522-1M、L504M、L515-2、13SM100-1、L512M、L292-1、L319、L316、L317、13SM87-1和Rela 5的隶属函数总值均超过了1.95,对南方根结线虫表现高抗.[结论]该研究为辣椒根结线虫抗性育种提供了抗源.     

贵州烤烟品种资源对根结线虫的抗性鉴定

为了解贵州烤烟品种资源对根结线虫病的抗性,对贵州省地方烤烟品种资源进行田间根结线虫抗性鉴定。经形态学鉴定试验烟田内根结线虫为南方根结线虫(Meloidogyne incognita)、爪哇根结线虫(Meloidogyne javanica)和花生根结线虫(Meloidogyne arenria)的混合种群;在225个烤烟品种资源材料中发现有8份材料在该混合种群下表现为高抗、18份材料表现为抗病、31份表现为中抗,其它材料均感病或抗性较差。     

番茄抗根结线虫接种鉴定技术及其应用

用3个番茄抗线虫品种和两个感线虫品种作为试验材料,对北京地区危害番茄的南方根结线虫进行 苗期人工接种鉴定,研究结果表明,采用灌根接种法,适宜的接种体浓度为2000卵／株,适宜的接种苗龄为10 ～20 d,供试3种栽培基质培育的幼苗对接种效果没有明显影响,接种后30 d进行调查即可明显区分出不同 番茄品种对根结线虫的抗、感差异。运用该方法对28份番茄育种材料进行抗线虫评价,筛选出对线虫免疫的 材料8份,高抗线虫的材料12份,抗线虫材料3份,感病材料5份,其中抗线虫材料占82．1％,说明番茄蕴藏着 丰富的对改良线虫抗性有利用价值的基因资源。     

番茄砧木对南方根结线虫抗性鉴定

 【目的】研究确定准确鉴定评价番茄砧木抗南方根结线虫侵染能力的方法,筛选抗性砧木材料。【方法】通过测定16个盆栽番茄砧木幼苗接种南方根结线虫50 d时的相对生长量及相关抗病指标,利用系统聚类分析和隶属函数运算相结合的方法进行综合分析。【结果】南方根结线虫侵染对不同番茄砧木幼苗各器官相对生长量、相关抗病指标及其变异系数的影响显著不同,其中生长量的变异系数以相对根鲜质量较大,为20.20%,相对茎粗较小,仅6.22%。采用相对生长量及抗病指标分别进行系统聚类的结果与利用根结指数的聚类结果一致,但与病情指数的聚类结果存在些微差异。根据综合指标隶属函数运算,确定了供试番茄砧木抗南方根结线虫的顺序。【结论】采用多指标综合聚类分析较单一指标聚类分析更能准确划分番茄砧木抗根结线虫的类群,通过聚类分析和隶属函数相结合的方法,确定Bパリア为免疫材料,BESUPA、坂砧2号、砧木606、砧木002、砧木001、TMS-150、サポ-ト、MIKADO、砧木401为抗病材料,アンカ-T为耐病材料,坂砧1号、北京1号为感病材料,128、BF兴津101、LS-89为高感材料。     

番茄对南方根结线虫抗性遗传规律的研究

以南方根结线虫的抗病亲本P2(0897-2-1-2-3-1-2-1)、感病亲本P1(9905-1-2-1-1-1-1-1)及 F1(P1×P2),F2(F1自交后代),BC1P1(F1×P1)和BC1P2(F1 × P2)为试材,以南方根结线虫二龄幼虫为虫源,进行苗期二龄幼虫人工接种鉴定和病土盘栽自然发病鉴定,研究番茄南方根结线虫病的遗传规律.结果表明,人工接种鉴定的植株在接种15 d左右,感病植株开始发病,接种45 d后感病植株已充分发病,表现为植株矮小,叶片变小、变黄,部分植株下部叶片黄枯,有的枯死;病土盘栽自然发病鉴定的植株较苗期接种鉴定的植株迟12 d左右发病,病症相似.卡方检测表明,F1、F2、BC1P1和BC1P2群体中抗病植株和感病植株分别符合1∶0、3∶1、1∶1和1∶0基因模型,符合孟德尔遗传规律.认为该试验所采用的抗性材料P2对番茄南方根结线虫的抗性是受一对显性基因控制的,为该材料的利用奠定基础,也为抗南方根结线虫番茄品种的选育提供参考.     

对根结线虫抗病及感病烟草品种的RAPD分析

对12个烟草品种分别提取DNA并用OPA、OPG、OPJ、OPK、OPL、OPM、OPN共7组140个引物进行扩增,其中113个引物能有效扩增,113个引物共产生788条不同分子量的谱带,但不同烟草品种间,甚至烤烟与晾晒品种间表现出的多态民生水平低（小于1％）。表明尽管这些烟草品种间形态上存在明显的差异,但基因组相似度很高,亲缘关系很近,它们在形态上的差异可能是少量基因表达差异引起,用113个能有效扩增的引物对12个烟草品种进行反复实验,发现OPJ13能够在包括晾晒烟在内的所有感病品种中扩增出一条780bp的DNA片段,而所有抗病品种的扩增产物中均无该片段,由于目前抗根结线虫烤烟品种的抗源均来自原始抗病亲本TI1706,RAPD标记J13－780极有可能是与烟草的抗、感病基因相连锁的。     

新疆野生樱桃李抗根结线虫相关基因片段的克隆与表达分析

为选育抗根结线虫的李属砧木,以新疆野生樱桃李(Prunus sogdiana)扦插苗为试验材料,对其接种南方根结线虫(Meloidogyne incognita),从中筛选出12株抗病植株。根据已知的抗根结线虫基因的NBS-LRR保守结构域设计简并引物,并以抗病植株的DNA和cDNA为模板对抗根结线虫同源基因序列进行扩增。获得6个抗根结线虫同源基因片段,依次命名为psoRPM1、psoRPM2、psoRPM3、psoRPM4、psoRPM5和psoRPM6,GenBank登录号为:HM593974、HM593975、HM593970、HM593971、HM593972和HM593973。其中前4个基因片段与桃、甜樱桃、酸樱桃以及樱花中的抗病基因的同源性高达90%以上。基因序列分析表明,这6个基因片段均具有典型的NBS保守结构域。根据其氨基酸序列的特点,推断这6个基因片段均属于non TIR-NBS-LRR型抗病基因。RT-PCR表达分析结果显示,psoRPM1和psoRPM6在接种南方根结线虫12和24 h后表达量显著增加,预示着这2个基因片段可能参与了樱桃李对根结线虫的识别和防御过程。本研究在樱桃李中克隆出...     

玉米主要品种对粗缩病的田间抗性评价

玉米粗缩病是安徽省玉米产区重要病害,选育和应用抗病品种是唯一经济高效的防治措施。于2009年,对安徽省33个玉米品种进行粗缩病田间鉴定。根据相对抗病指数,将品种分为高抗(HR,0～0.20)、抗病(R,0.21～0.39)、中抗(MR,0.40～0.59)、感病(S,0.60～0.79)、高感(HS,0.80～1.00)5类。鉴定结果表明:高感粗缩病的品种有13个(病指在52.1～100),分别是鲁宁202、雅玉12、弘大8号、滑玉13、苏玉20、郑单23、浚单18、中科11、益丰29、郑单958、申源213、蠡玉13和济单8号;感粗缩病的品种有8个(病指在41.0～52.0),分别是隆平206、浚单20、先玉335、金赛29、鲁单661、中农大236、鲁单981和金赛6850;中抗粗缩病的品种有5个(病指在31～40),分别是齐单1号、中农大311、利民15、皖玉17和东单80;抗粗缩病的品种有5个(病指在14.1～30.0),分别是中科4号、宿单9号、蠡玉35、鲁单6018和蠡玉16;高抗粗缩病的品种有2个(病指在0～14.0)分别是登海3号和农大108。     

甘薯蔓割病抗性相关SRAP标记的获得

以高抗甘薯蔓割病品种金山57和高感蔓割病甘薯品种新种花为亲本进行杂交,获得F1分离群体,对F1群体进行蔓割病抗性鉴定,从中选出7个高抗和7个高感蔓割病株系构建抗、感池。以抗、感池基因组DNA为模板,用276对SRAP引物组合对其扩增,从中筛选出98对具有多态性的引物组合,再以抗感亲本加抗感池基因组DNA为模板筛选,从98份SRAP引物组合中筛选出33对多态性较好的引物组合。后通过用一组小群体(6个高抗株系和6个高感株系)进一步筛选,最终获得一对与甘薯抗蔓割病连锁的SRAP引物组合a12b8,经过抗感亲本及F1代的进一步验证,认为该标记与甘薯抗蔓割病基因相关。     

根结线虫种及种群致病性的聚类分析

在相同的接种水平下,以烟草品种K326、红花大金元为供试寄主,用SAS软件,对坏死百分率、相对根结指数、相对卵块指数、株高、根长、地上部分重等6个指标进行聚类,分析不同或相似生态条件下,4种常见根结线虫中34个群体的致病性。结果表明,4种常见根结线虫的34个群体,无论对抗性寄主K326,还是感病寄主红花大金元,其致病性都能基本按种(species)划分,种间致病性存在差异;在抗性寄主上,不同来源的同种或同一小种,其致病性表现基本一致,能聚为同一相似组;在感病寄主上,除北方根结线虫外,其它3种根结线虫的致病性相近,这种归类不够明显。常见根结线虫的致病性受地理分布、生态环境、寄主类型等的影响较小。     

对辣椒抗性基因Me3表现毒性的南方根结线虫 群体的SCAR分子标记

【目的】研究南方根结线虫（Meloidogyne incognita）Me3毒性变异群体的分子标记,用快速有效的分子方法来鉴定毒性变异的发生。【方法】以南方根结线虫的无毒群体以及抗性基因Me3毒性群体为材料,用根据南方根结线虫基因组设计的100对引物和19对来自文献的引物进行扩增,筛选出在3个种群中扩增的差异条带,设计SCAR引物,并建立多重PCR反应体系。【结果】得到了7对能在3个群体稳定扩增出差异条带的多态性引物,把其中的2个位点开发为SCAR标记,能够区分开3个线虫群体。多重PCR反应体系在无毒群体和Me3毒性群体中分别扩增出1条999 bp和1条629 bp的条带,在混合群体扩增出999和629 bp的2条带。【结论】成功开发了对Me3表现毒性的南方根结线虫变异群体的分子标记,可用多重PCR体系一次性鉴定Me3毒性变异的发生。     

陕西设施蔬菜主栽品种对根结线虫的抗性评价

通过田间自然接种方式,开展陕西设施蔬菜主要栽培品种对南方根结线虫(Meloidyne incognita)的抗性对比试验。结果表明,黄瓜、南瓜和茄子主要栽培品种根结率均大于85%,表现为高度感病;辣椒、番茄、圣女果主要栽培品种中的日本朝天椒、早美、千禧、奥妮娜、春桃和尼瑞萨-1420表现为免疫,22号尖椒、鑫禧表现为抗病,津研19号、津椒5号、明泽3号、圣玛丽203、明泽81、圣玛丽新四号和金千禧表现为比较感病;其他品种表现为感病。抗性稳定性研究结果表明,番茄和圣女果抗病和免疫的品种,无性繁殖体抗病性表现稳定,芽扦插3个茬次,发病率、根结率和发病程度均没有变化,而有性繁殖随着繁殖世代的增加,发病率、根结率和发病程度均依次提高。辣椒抗病和免疫品种有性繁殖体抗病性表现稳定。     

绿豆抗豆象基因PCR标记的构建与应用

 采用PCR分子标记技术，对16个绿豆品种（系）进行了遗传分析。在选用的56个随机引物中，发现抗豆象品种与感豆象品种间有一定差异。根据聚类分析结果将它们分成抗豆象野生种（TC1966）、抗豆象栽培种（V2709）、抗豆象杂交后代（VC3890A2/TC1966-23）和混合类型4个大组。以绿豆抗豆象和感豆象品种及抗豆象品种×感豆象品种组合的F2群体为试验材料，利用BSA法，对抗（感）豆象品种池和一个组合F2的抗（感）豆象池进行了鉴定，获得一个共显性标记。经F2分析，在抗豆象个体中扩增出约1.79 kb的特异片段或2个特异片段（1.79 kb/1.03 kb）；在感豆象个体中仅扩增出约1.03 kb的特异片段。初步认为此标记与TC1966的抗豆象基因位点紧密联锁，可用于绿豆抗豆象种质鉴定和遗传育种的分子标记辅助选择。     

云南烟草根结线虫优势种群动态规律研究

 通过对云南烟草主要栽培品种中"抗病品种"和"感病品种"栽培面积比例变化及云南烟草根结线虫常见种及小种种群数量变动状况的分析,结果表明,随着抗南方根结线虫1号小种烟草品种栽培面积的增加,南方根结线虫1号小种由云南烟草根结线虫的优势种群逐渐转变为次要种群,花生根结线虫2号小种逐渐成为优势种群.可见,烟草根结线的优势种群处于动态变化中,这种动态变化规律主要取决于品种对常见根结线虫种和小种的抗感性,不能用"通常南方根结线虫是优势种群"这一普遍现象来代替烟草根结线虫优势种群随主栽品种抗感性变化而改变这一规律.充分认识烟草根结虫优势种群的动态变化规律对有效控制烟草结线虫病有重要意义.     

对大豆花叶病毒不同抗性类型品种的细胞超微结构特征

对质量抗性、数量抗性以及感病 3类品种接种大豆花叶病毒 (SMV) 后的叶肉细胞超微结构观察表明: 在未感染的对照品种南农 1138 2以及接种Sa株系的质量抗性品种科丰一号的细胞中没有病毒粒体和病毒内含体, 细胞超微结构正常。在接种Sa株系后的感病品种南农 1138 2的叶肉细胞中出现大量成簇的线状病毒粒子聚集体和柱状内含体, 柱状内含体横切面呈风轮状, 许多细胞出现核固缩、核膜降解、异染色质边聚、核仁融解、叶绿体被膜破碎甚至瓦解消失、基质及基粒片层解体或肿胀扭曲。数量抗性品种接种Sa株系后, 个别细胞中发现线状病毒粒子和风轮状内含体, 少数叶绿体的片层结构肿胀扭曲, 细胞核、线粒体的被膜以及形状和结构轻度受损。上述结果表明, 数量抗性品种的受害程度明显小于感病品种, SMV引起的超微病变特征在 3类抗性品种间是显著不同的。