猪瘟抗体ELISA效价与保护力的相关性

对不同猪瘟抗体水平的6个试验组的24头猪及4头对照组猪用已建立的“ELISA间接法检测猪瘟抗体”法进行血清猪瘟抗体ELISA效价的测定,用石门系猪瘟强毒攻击受试猪测定保护力.研究结果表明,血清猪瘟抗体ELISA效价在1:30以上多数能够抵御猪瘟强毒的攻击.该临界线的确定为“ELISA间接法检测猪瘟抗体”技术在猪群免疫监测及防疫注射质量考核中的推广应用提供了依据.     

猪伪狂犬病病毒的分离与鉴定

用猪睾丸细胞(ST细胞)从1只发病仔猪的脑组织中分离到1株病毒,第6代时的毒价为107.75 TCID50/mL.用猪伪狂犬病病毒特异性引物可从该病毒细胞培养物中扩增出与预期大小相同的gB基因部分核苷酸片段.测序结果表明:该gB基因的部分序列与GeneBank登录的5株PRV同源性为98.0％～99.5％.接种家兔后可观察到典型的伪狂犬病临床症状,ELD50为10-7.50/mL,分离毒可被PRV阳性血清中和.该分离毒为猪伪狂犬病病毒强毒株.     

猪支原体肺炎发病模型的建立

本研究旨在选择含有猪肺炎支原体强毒株的猪病肺组织为攻毒材料,建立一种猪支原体肺炎的发病模型。首先,通过荧光定量PCR方法确定猪支原体肺炎冻干病变组织中病原的含量;其次,利用小鼠接种试验,确定该组织毒用做攻毒材料的安全性;再次,选择猪肺炎支原体阴性大白×二花脸杂交猪,按1:10,1:100,1:1 000,1:10 000稀释后组织强毒经气管内注射途径进行攻毒;最后,攻毒后28 d剖检感染猪,观察肺脏病变情况和临床症状,并通过攻毒剂量比较,确定了猪肺炎支原体感染剂量大于9.50×10~4拷贝时,能够引起猪发病,从而建立猪支原体肺炎人工发病模型,为猪肺炎支原体相关研究提供基础保障。     

国产丙氧咪唑(Oxibendazol)对猪蛔虫的驱虫试验

国产丙氧咪唑系国家医药管理总局上海医药工业研究院合成,由江苏省武进制药厂试产的粉剂。驱虫试验的猪一律按每公斤体重10毫克的剂量,加面粉约18倍,制成面团令其自食,不肯自食者再加入适量大麦粉诱其自食。个别猪以开口器强行塞服。安全试验的3只猪分别按每公斤体重30、35和50毫克的剂量作成面团自食。     

二花脸猪抗气喘病和猪丹毒病能力的测定

一、抗气喘病性能测定(一)研究方法选择健康发育正常的40斤左右已去势的二花脸猪和长白猪各7头,组成两个试验组.试验猪只均经隔离饲养一个月以上,并经血清学的微粒凝集反应和X光透视法互为对照重复检查,确认为无气喘病猪只.饲养管理与一般育肥猪相同.猪气喘病安宁系89号冻干强毒以Hank’s溶液按1:25稀释,每头滴鼻5毫升作病原接种.     

猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株RT-PCR快速鉴别检测方法的建立

【目的】建立猪瘟病毒强毒株和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR快速鉴别检测方法。【方法】根据Gen-Bank中36株猪瘟病毒(CSFV)强毒株和兔化弱毒疫苗株的基因序列,分别设计了针对CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的特异性引物,建立了一种能区分CSFV强毒和兔化弱毒疫苗株的RT-PCR检测方法。【结果】建立的RT-PCR检测方法可以从CSFV强毒株和兔化弱毒疫苗株中分别扩增出大小为187和492 bp的特异性片段,对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪源性病毒的检测结果均为阴性,说明该方法具有较好的特异性。对10份疑似猪瘟临床样品进行检测后发现,利用该方法可以从中分别检测出CSFV强毒和疫苗毒。【结论】建立了可鉴别检测CSFV强毒株和弱毒疫苗株的RT-PCR方法,为猪瘟的早期诊断及疫苗免疫猪和野毒感染猪的鉴别提供了技术参考。     

种猪猪瘟单抗的检测

本文应用猪瘟单抗酶联试剂先后检测了２０９份种猪血清抗体。１９９７年检测结果表明：猪群的猪瘟弱毒抗体阳性率为２９４％,强毒抗体阳性率为９２％。说明该猪群免疫效果不确实,且有猪瘟强毒感染。通过加强免疫和淘汰强毒抗体阳性猪,使得猪瘟弱毒抗体阳性率在１９９８年达到了８１０％,猪瘟强毒抗体阳性率下降为１０％。对强毒阳性猪再淘汰,并加强消毒,基本上净化了该猪场。说明猪瘟单抗酶联试剂可用于检测猪瘟的免疫水平,同时对种猪的隐性感染可作出早期诊断。     

渝荣1号猪配套系

品种来源:"渝荣Ⅰ号猪配套系"(CRP配套系)是以优良地方猪——荣昌猪的优良基因资源利用为基础,历经九年深入研究和艰苦攻关培育而成的新配套系.它克服了现有瘦肉型猪种生产类型单一、抗逆境能力差、繁殖性能较低及肌肉品质差等不足,具有肉质优良、繁殖力好、适应性强等突出特性,特色鲜明.     

鉴别猪瘟强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应(RT-nPCR)检测方法的建立

[目的]建立一种能区分猪瘟病毒（classical swine fever，CSFV）强毒和弱毒的反转录-复合套式聚合酶链式反应（RT-nPCR）检测方法。[方法]根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列，选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物，并在该对引物跨越区域的内部设计了猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒特异性引物，建立了一种能区分猪瘟强毒和弱毒的RT-nPCR鉴别诊断方法。[结果]应用该方法从猪瘟兔化弱毒疫苗和石门强毒株基因组中扩增出了大小分别为447和343bp的一条特异性片段，从两种病毒基因组混合物中扩增出了大小为447和343bp的两条特异性片段，但对牛病毒性腹泻病毒和其它常见猪源病毒细胞培养物以及正常细胞基因组进行检测时均为阴性。该方法可以检测出0．04pg的CSFV RNA。对从黑龙江省采集的15份疑似猪瘟病料进行了检测，结果表明，有14份类似猪瘟强毒，1份类似弱毒疫苗。限制性片段长度多态性和种系发生分析证实了RT-nPCR的检测结果。[结论]本研究建立的RT-nPCR可以有效区分猪瘟强毒和弱毒，减少了未感染的免疫猪被误杀的可能性。     

仔猪乳前攻击猪瘟强毒免疫试验

仔猪乳前猪瘟免疫,经前一阶段试验证实,在仔猪生后即行猪瘟兔化弱毒苗注射,间隔0.5,1.5,3.5,4.5小时后令其吸吮初乳,饲养155天行兔体中和抗体测定,0.5小时组5头猪的血清对10只家兔有90%(9/10)获得中和.为进一步验证其免疫效果,应用石门系猪瘟强毒进行攻击试验.     

猪传染性水泡病研究——漯河系鼠化弱毒疫苗研究

猪传染性水泡病在我省发生以来,我们遵照毛主席关于“以养猪为中心,全面发展畜牧业”的教导,在批林批孔运动的推动下,以路线斗争为纲,为迅速扑灭本病,我们在学习、推广上海龙华四系鼠化弱毒疫苗的基础上,开展漯河系鼠化弱毒疫苗的研究。一、弱毒的培育强毒是在一九七二年十二月采自漯河冷冻厂病猪水泡皮。开始所用病毒材料为病猪未破的新鲜水泡皮。采前用无菌盐水冲洗,以消毒剪刀剪     

猪瘟生前快速诊断试验

采取人工感染石门系猪瘟强毒病猪和自然感染可疑猪瘟病猪的粪便、尿液和直肠粘膜刮取物作为检验材料,并设猪瘟标准抗原,健康猪的粪便、尿液和直肠粘膜刮取物作对照,应用免疫扩散试验共检测人工感染石门系猜瘟病毒病猪2头,从某农场356头自然感染可疑猪瘟病猪中抽检12头,某猪舍18头可疑猪瘟病猪中抽检6头,共检20头。其结果:人工感染的     

猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β基因表达的变化

Toll样受体(TLR)作为一种重要的模式识别受体,在动物的天然免疫中发挥重要作用,是机体抵抗感染的第1道屏障.该研究通过建立猪肺炎支原体感染模型,探讨猪感染肺炎支原体后肺组织TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1βmRNA的表达及意义.选取80日龄无注射气喘病疫苗苏钟猪14头,随机分为攻毒组和对照组,攻毒组气管内注射猪肺炎支原体组织强毒,对照组气管内注射灭菌生理盐水.感染后观察临床症状,攻毒后18d时X射线透视猪肺部,记录体重;攻毒后28d时检测抗体,记录体重,扑杀剖检,采集肺脏.应用Real-time PCR方法检测肺组织TLR2、TLR4及TNF-α、IL-1βmRNA的表达变化.结果显示:猪感染肺炎支原体后,生长缓慢,体重下降;X射线透视,肺部出现典型阴影;攻毒组猪出现典型的病理变化;TLR2、TLR4及TNF-α、IL-1β表达显著升高(P＜0.05).表明:猪肺炎支原体感染后TLR2、TLR4及促炎症因子TNF-α、IL-1β表达量增加,导致肺部炎症;猪肺炎支原体感染与TLR2、TLR4的变化有密切联系,启示肺炎支原体可能通过TLR信号传导通道.     

猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒Nsp2基因缺失株Jiangxi-3毒力的进一步研究

通过Reed-Muench法检测从江西发生持续高热的病猪体内分离的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)Nsp2基因缺失株Jiangxi-3第9代(Jiangxi-3 F9)的病毒滴度;将此毒株接种于PRRSV和猪圆环病毒2型(PCV2)抗原与抗体均为阴性的60日龄健康猪进行猪半数致死量(LD50)的测定,并且对LD50试验中存活下来的试验猪再次进行较大剂量的攻毒试验,另将病毒接种于PRRSV和PCV2抗原和抗体均为阴性的6月龄健康猪,对所有攻毒试验猪通过体温检测、临床症状观察、RT-PCR、ELISA等方法进一步研究Jiangxi-3 F9的毒力.结果表明:Jiangxi-3 F9的病毒滴度为105.25 TCID50·mL-1,Jiangxi-3 F9病毒的LD50为1022·mL-1.动物试验各项检测结果说明Jiangxi-3 F9毒力强.     

瘦肉型母系猪苏钟Ⅰ系繁殖性能的观测

对瘦肉型猪"苏钟Ⅰ系"繁殖性能进行观测.结果表明,总产仔数:初产猪11.30±2.05头、二胎猪11.93±2.52头;妊娠期:初产猪113.41±1.55 d、二胎猪112.38±2.16 d;发情周期:初产猪19.70±1.59 d,经产猪20.58±1.16 d;乳头数:种公猪14.90±1.14枚、种母猪14.14±1.09枚、仔猪14.97±1.72枚.苏钟Ⅰ系具有较好的繁殖性能,是生产商品杂优猪的理想瘦肉型母系猪.     

猪流行性腹泻病毒卵黄抗体的研制

选取猪流行性腹泻病毒感染组织制备灭活苗,免疫蛋鸡制备卵黄抗体,3次免疫后琼扩抗体效价达到1:32;经动物实验证实,卵黄抗体可有效抵抗猪流行性腹泻病毒强毒的攻击,试验为猪流行性腹泻病毒的有效防控奠定基础。     

蒽环类抗生素80334在鸡体内残留动态

1980年,上海医药工业研究院筛选出的新抗生素80334,试验证明防治鸡球虫病有明显的效果。为进一步评价其利用,生产价值,我们利用 Hifa-chi MPF-4萤光分光光度计测定了80334在鸡体内的药剂残留量排泄时间,现将主要结果报告如下测定结果:三种样品,从第1天开始以后.     

以活疫苗经鼻道作试验性免疫抗猪霉形体性肺炎(Ⅰ)

以弱毒猪肺炎霉形体培养物No.3—9作滴鼻接种,每猪2毫升,4次试验共免疫二花脸猪44头.接种后每周用X线透视达2～3个月,肺部始终无病变阴影者8头.33头肺部有轻度病变阴影,于发现后2～6周消失.3头肺阴影未消失,于攻毒后4周消失.以病猪肺悬液滴鼻攻毒,每周仍用X线透视.27头猪肺部全属阴性,15头肺部有很轻阴影,于发现阴影后1～6周全部消失,余2头未恢复.攻毒先后用二花脸猪18头作对照,3头于攻毒后5周内患气喘病死亡,剖解肺部有典型病变,2头发病于4～6周内恢复,余13头均发病于攻毒后5～7周仍未恢复.同法免疫长白×二花脸杂交一代猪,两次试验共用10头,透视全无反应.以病肺悬液攻毒,8头全抵抗,2头肺部有轻微阴影,2～3周内全部复恢.攻毒对照猪用同种杂交猪4头,均发病,其中3头于攻毒后7周恢复,另1头未恢复.由结果看来,弱毒株No.3—9培养物对易感性高的二花脸猪大多数有轻度致病力,但恢复较快.用病肺攻毒绝大多数有坚强的免疫力,少数仅发轻病,而恢复迅速,很少数不易恢复.用此菌株免疫抵抗力较强的杂交猪既安全,产生的免疫力也颇坚强.尚有许多工作要做,以检查有无实用可能.     

猪源伪狂犬病病毒变异株传代致弱株LA2017株的获得与鉴定

将猪源伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)的强毒变异株AH02LA株在鸡胚成纤维细胞上进行连续传代,获得了不同代次的弱毒株,检测其安全性、免疫效力、生长特性及稳定性,并对其gE基因上、下游片段进行测序.对PRV AH02LA株的F151代进行3轮挑斑纯化,获得了1个毒株并将其命名为PRV LA2017株.用该毒株接种(剂量为106.00TCID50/头)试验猪,在接种后14 d内无任何临床症状;在免疫(106.00TCID50/头)后21 d攻毒(106.50TCID50/头),所有试验猪未出现任何猪伪狂犬病症状,体温正常,没有排毒.在攻毒前用ELISA检测,PRV gB抗体全部为阳性,PRV gE抗体全部为阴性;在攻毒后14 d这两种抗体均为阳性,体现出良好的安全性与保护性.对照组BarthaK61在攻毒后试验猪全部发病,体温高至40.5℃以上,且均检出排毒.测序结果显示LA2017株的gI部分基因与gE全部基因缺失.该毒株在CEF细胞及ST细胞上生长良好,在CEF上的滴度达到108.0TCID50/mL,在ST细胞上的滴度最高达109.5TCID50/mL,能满足活疫苗生产的要求.LA2017株安全性好,免疫效力强,生长滴度高,可以作为研制针对PRV变异株疫苗的候选毒株.     

新疆阿克苏地区部分猪场伪狂犬病病毒gE蛋白抗体ELISA检测与分析

为初步了解2019年新疆阿克苏地区部分规模化养殖场猪伪狂犬病毒(PRV)野毒感染情况,本试验采集了阿克苏地区6个猪场血样644份,采用间接ELISA方法检测猪PRV-gE蛋白的抗体情况。结果显示:6个猪场A-F中,E场的gE蛋白抗体阳性率最高为6. 38%(3/47),A场、C场和F场的gE蛋白抗体阳性率最低都为0,其平均抗体阳性率为2. 48%;对不同年龄的猪群分析,PRV-gE蛋白的阳性率最高为仔猪2. 78%,最低为种公猪1. 52%。试验表明,阿克苏地区依然存在猪伪狂犬病毒野毒的感染。