公猪精液品质和精子形态的品种差异及随年龄变化的规律分析

为综合评价公猪精液质量,研究公猪精液质量参数和精子形态参数的品种差异,并探讨公猪精液质量随年龄的变化规律,选取杜洛克、长白和大白公猪共114头,采用一般线性模型,以品种和年龄为固定因素对其精液质量参数、精子形态参数进行多变量分析。结果显示,杜洛克公猪的精子密度(619.20百万个/mL)显著(P0.05)高于长白公猪(363.18百万个/mL)和大白公猪(336.92百万个/mL);杜洛克与大白公猪的精子活力和直线运动率均显著高于长白公猪(P0.05);长白公猪精子正常形态率(92.95%)显著(P0.05)高于杜洛克公猪(90.78%);1年龄的公猪精子密度(556.98百万个/mL)显著(P0.05)高于2、3年龄(382.44百万个/mL、373.32百万个/mL);大白公猪精液的弯尾率、卷尾率均显著(P0.05)低于杜洛克公猪和长白公猪,长白公猪的精子近端质滴率(2.28%)显著(P0.05)低于杜洛克公猪(3.94%)和大白公猪(2.92%),3年龄的公猪精子近端质滴率显著(P0.05)低于2年龄;在正常精子形态参数方面,杜洛克公猪和大白公猪精子的头部长度、尾巴长度均显著高于长白公猪(P0.05),杜洛克公猪(2.96μm)和长白公猪(2.94μm)精子的头部宽度均显著(P0.05)高于大白公猪(2.87μm),杜洛克、大白、长白公猪精子的头部周长依次降低且彼此间差异显著(P0.05),长白公猪精子的头部面积/总精子长度显著(P0.05)高于大白公猪,长白公猪的头部宽度/头部长度显著(P0.05)高于杜洛克公猪和大白公猪,1、2年龄的公猪精子头部长度、头部周长、头部长度/总精子长度、头部长度/尾巴长度均显著(P0.05)高于3年龄,1、2年龄的公猪精子尾巴长度/总精子长度和头部宽度/头部长度均显著(P0.05)低于3年龄。综上,杜洛克公猪常规精液质量参数最优,其次为大白公猪和长白公猪,但其精子形态参数相比于长、大白公猪较劣。年龄因素对公猪精液质量影响不显著。     

猪精液冷冻保存的剂型及品种效应

为了评价细管类型在不同品种公猪精液冷冻中的效果,为猪精液冷冻的实际生产中冷冻细管的选择提供理论依据,试验将长白、大约克与杜洛克3种美系公猪(每品种7头次)精液进行不同细管类型(5.00、0.50、0.25 mL)的分装冷冻,比较各种细管类型下不同品种公猪之间和同一品种公猪不同细管类型精液冻后质量(冻后精子活力、畸形率及顶体完整率).结果表明,①相同剂型下,除了0.25 mL细管分装时杜洛克公猪冻后精子顶体完整率显著(P＜0.05)高于长白公猪外,3种公猪之间在3个指标上差异均不显著(P＞0.05);②3种公猪冻后精子活力最高的剂型均为0.50 mL细管,冻后精子畸形率及顶体完整率最好的剂型均为5.00 mL细管.总之,3种细管类型中,仅0.25 mL剂型存在品种效应,而3个品种公猪却存在着基本类似的剂型效应.     

富硒益生菌对种公猪精液品质的影响

在成年长白种公猪的饲料中,以0.3 mg/kg(以硒浓度计算)添加富硒益生菌,研究了富硒益牛菌对种公猪精液品质的影响.结果显示,试验组种公猪精液中的精子活率、顶体完整率、还原型谷胱甘肽过氧化物酶的活性均比对照组高,但精液中的精子畸形率比对照组低,说明富硒益生菌能明显改善种公猪的精液品质.     

陆川猪与外来猪精液质量及精子黏附蛋白基因家族mRNA表达的比较（英文）

精子黏附蛋白基因家族是公猪精液中精浆蛋白的最主要成分,对精子的活力、获能和与卵子的结合都会起到调控作用。为了研究不同猪种之间繁殖力的差异,试验以陆川猪、长白猪和杜洛克猪为研究对象,以常规方法检测新鲜精液的精子活力、活率及畸形率,并应用半定量RT-PCR技术检测精子黏附蛋白基因家族m RNA的表达,最后采用单因素方差分析法分析数据之间差异的显著性。结果表明,陆川猪的精子活力及活率与长白猪、杜洛克猪差异不显著(P>0.05),但是精子畸形率极显著低于2种外来猪种(P<0.01);陆川猪精子黏附蛋白基因家族中仅AQN1基因m RNA表达水平显著低于杜洛克猪(P<0.05),其余与长白猪、杜洛克猪之间无显著差异(P>0.05);长白猪精液中精子黏附蛋白基因家族的AQN3、AWN和PSP-II基因m RNA表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)高于杜洛克猪。总之,不同猪种精子黏附蛋白基因家族m RNA表达水平存在明显差异,但与精子活力、活率及畸形率等精液质量指标的高低没有规律性的关联。     

精力莱公猪料对公猪精液品质的比较试验

试验旨在探讨精力莱公猪料对公猪品质的影响,本试验通过评价精液采集量、精子密度、活力及畸形率等指标来判定其对猪精液的影响。试验表明,公猪日粮对公猪精液的采集量,精子密度、活力均有极显著提高(P<0.01);极显著降低精子的畸形率(P<0.01),为公猪饲养过程中提供生产指导。     

陆川猪与外来猪精液质量及精子黏附蛋白基因家族 mRNA表达的比较

精子黏附蛋白基因家族是公猪精液中精浆蛋白的最主要成分,对精子的活力、获能和与卵子的结合都会起到调控作用。为了研究不同猪种之间繁殖力的差异,试验以陆川猪、长白猪和杜洛克猪为研究对象,以常规方法检测新鲜精液的精子活力、活率及畸形率,并应用半定量RT-PCR技术检测精子黏附蛋白基因家族mRNA的表达,最后采用单因素方差分析法分析数据之间差异的显著性。结果表明,陆川猪的精子活力及活率与长白猪、杜洛克猪差异不显著（P>0.05）,但是精子畸形率极显著低于2种外来猪种（P<0.01）;陆川猪精子黏附蛋白基因家族中仅 AQN1基因 mRNA表达水平显著低于杜洛克猪（P<0.05）,其余与长白猪、杜洛克猪之间无显著差异（P>0.05）;长白猪精液中精子黏附蛋白基因家族的 AQN3、AWN和PSP-II基因 mRNA表达水平显著（P<0.05）或极显著（P<0.01）高于杜洛克猪。总之,不同猪种精子黏附蛋白基因家族 mRNA表达水平存在明显差异,但与精子活力、活率及畸形率等精液质量指标的高低没有规律性的关联。     

实时精子分离系统对猪精子冷冻品质的影响

【目的】探索实时精子分离系统对猪精子冷冻品质的影响。【方法】采用实时精子分离系统对精液进行分离优选,液氮冷冻法制作细管冻精,以未分离精液为对照,检测实时精子分离系统对猪精子冷冻品质的影响。【结果】分离优选精子解冻后,精子活率、顶体完整率、质膜完整率、正常染色质率均明显高于对照组(P<0.01);分离组精子的正常形态率也显著高于对照组,且未受冷冻-解冻过程的影响(P>0.01);分离过程对精子密度也未产生显著影响(P>0.01)。【结论】实时精子分离系统可以显著改善猪冷冻精液的品质。     

猪0.5 mL细管冷冻精液的人工授精试验

【目的】制备猪0.5mL细管冷冻精液,并对其输精效果进行检测。【方法】制备猪0.5mL细管冷冻精液,解冻后对其品质(活力、快速直线游动精子比例、质膜完整率、顶体完整率)进行检测。将36头母猪随机分为8组:A-1、A-2组(各5头)均输新鲜精液精子4×109个,稀释至80mL,其中A-1组采用常规输精,A-2组采用子宫内人工输精;B-1、B-2组(各4头)均采用子宫内人工输冷冻精液,精子数量分别为1×109和2×109个,均稀释至20mL;C-1、C-2组(各5头)均采用子宫内人工输冷冻精液精子2×109个,C-1组稀释至60mL,C-2组稀释至80mL;D-1、D-2组(各4头)均采用子宫内人工输冷冻精液精子4×109个,D-1组稀释至60mL,D-2组稀释至80mL。人工授精后记录妊娠率、受胎率及产仔数量。【结果】制作的猪0.5mL细管冷冻精液解冻后,活力最高的达到(42.4±0.9)%,质膜完整率为(47.2±0.3)%,顶体完整率为(46.8±0.4)%。新鲜精液平均妊娠率为100%,产仔数为9.00±0.63;冷冻精液平均妊娠率为72%,产仔数为6.64±0.82,新鲜精液妊娠率和产仔数均显著优于冷冻精液。【结论】新鲜精液人工输精效果优于冷冻精液;冷冻精液采用60和80mL稀释液体积对产仔率、产仔数没有明显影响;冷冻精液通过子宫内人工输精,效果最佳的精子数为2×109个,稀释液体积为60mL。     

提高猪繁殖力的关键技术

(续第5期第38页)一、提高种公猪的繁殖力种公猪的繁殖力集中表现在它的精液品质和配种受胎效果上。一头优良种公猪必须具有优良血统、良好的体质外貌,性欲旺盛,能正常顺利完成采精和交配。其精液品质的基本要求是:射精量不低于100毫升,总精子数不低于100亿个,活力不低于70%,畸形率不超过20%。为提高种公猪的繁殖力,应做好以下工作。1.选好种公猪对种公猪的选     

茶多酚对猪精液常温保存效果的影响

【目的】研究茶多酚(TPP)对猪精液常温保存效果的影响。【方法】手握法采集20月龄健康杜洛克种公猪精液,在基础稀释液中添加不同质量浓度的TPP(0(CK),0.01,0.02,0.04,0.08,0.16g/L)作为稀释液进行常温(17℃)保存,每隔24h检查精子活率、质膜完整率和顶体完整率,分别在精液保存0,2,4,6d时检测精液中的细菌含量,并在3d和6d时检测精液中的丙二醛含量(MDA)和总抗氧化(T-AOC)活性。【结果】添加0.02,0.04,0.08g/L TPP可明显提高猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和T-AOC活性,降低精液的MDA含量和细菌含量。且以0.04g/L TPP效果最佳,精液有效保存时间为6d。6d时0.04g/L TPP组猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化(T-AOC)活性和细菌含量分别为60.02%,46.40%,75.25%,2.39nmol/L,2.31U/mL和2.19×106 CFU/mL。【结论】茶多酚能有效提高猪精液常温保存效果,最适添加量为0.04g/L。     

不同品种公猪睾丸、精液品质发育规律及相关性研究

为明确公猪睾丸在选育中的意义，研究公猪睾丸参数、精液质量参数的发育性规律以及两者间的关联性。选择936头分布在280～1 409日龄的生产公猪，其中589头杜洛克、233头长白、114头大白。对睾丸和精液质量参数采用一般线性模型，以品种和日龄分组为固定因素进行多变量分析；使用二次项模型分品种分别对睾丸总体积和有效精子数进行发育曲线拟合；控制日龄变量，对睾丸与精液质量参数进行偏相关性分析。在睾丸大小方面：杜洛克>大白>长白，其中杜洛克与大白差异不显著（P>0.05），但两者均极显著（P<001）高于长白；在精液质量整体比较上：长白优于杜洛克优于大白，但差异不显著（P>0.05）；但在体积、密度、活力和畸形率上，三品种公猪均存在显著（P>0.05）或极显著(P<0.01)差异；睾丸随日龄增长呈先增大后萎缩趋势，精液整体质量随日龄增长呈下滑趋势；三品种公猪睾丸的大小均与精液量和有效精子数呈正相关，且大部分具有显著（P<0.05）或极显著性(P<0.01)。同日龄时期，三品种公猪睾丸的大小顺序为杜洛克>长白>大白，其中长白大于大白具有普遍性； 综合来看，三品种的精液质量比较结果为长白优于杜洛克优于大白，其中长白优于大白具有普遍性；公猪睾丸萎缩临界日龄可用于公猪淘汰依据，选育公猪时可重点选留睾丸较大者。     

二花脸公猪不同耐冻性精子的蛋白质组学分析

目的 二花脸猪是我国优良的地方猪种之一，冷冻精液可提高二花脸公猪的利用率，并加强其种质资源保护，但目前生产的二花脸猪冷冻精液基本不能满足生产需要。研究通过分析二花脸公猪不同耐冻性精子的蛋白质组学，以促进二花脸公猪精子耐冻性蛋白质标志物的筛选，从遗传水平分析精子耐冻性的影响因素，为提高精子耐冻性提供参考依据。方法 通过冻存14头二花脸种公猪的精液，再对冷冻精液的冻后质量进行分析，根据精子冻后活率和冻后活力的高低筛选出耐冻性好和差（good freezability ejaculates, GFE和poor freezability ejaculates, PFE）的公猪各3头，利用串联质谱标记(tandem mass tag, TMT)技术对GFE组和PFE组的精子蛋白进行定量蛋白质组学分析，鉴定出GFE组和PFE组精子中的差异蛋白(differentially abundant proteins, DAPs)。利用GO富集分析对差异蛋白的功能进行注释，利用 KEGG富集分析对差异蛋白的生物通路进行注释，通过STRING蛋白质互作数据库进行差异蛋白的互作网络分析并利用Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。结果 研究发现GFE组和PFE组间共存在138个差异蛋白，PFE组与GFE组相比,有109个DAPs上调，29个DAPs下调。GO富集分析表明，共124个DAPs富集到47个GO term，主要富集到“细胞进程”“单有机体过程”“分子结合”“细胞”“细胞组分”等GO term。KEGG富集分析表明，DAPs主要富集到“肾素-血管紧张素系统”“补体和凝血级联”“血小板活化”等通路。从PPI网络可见53个节点和69 条连接边线，有8个具有强互作关系的蛋白ALB、ACRBP、ACR、ZAN、ZPBP2、HSPA5、FGB、FGG，这些蛋白质的功能主要富集于“单受精”“有性生殖”“精细胞发育”等与动物生殖生理以及精子发生密切相关的功能。进一步分析表明，GFE组和PFE组间的DAPs主要包括氧化还原相关蛋白（GSTM3、PRDX5、ALB、PDIA1、PDIA4等）、精子发生与功能相关蛋白（HSPA5、MFGE8、DNAH1、DNAH7、CUL3等）、能量相关蛋白（HK1、PGM1等）以及凋亡与炎症相关蛋白（THBS1、ELSPBP1、CP等）；PPI网络图分析可知3个DAPs（MME、ANPEP和PRCP）在肾素-血管紧张素系统（RAS）中相互作用。结论 二花脸公猪不同耐冻性精子的蛋白质组分存在明显差异，可能对精子的冷冻性能产生影响，这些DAPs可作为精子耐冻性的候选蛋白标志物。     

ESR基因在苏姜猪世代选育中的遗传变异及与猪群繁殖性状的关联

【目的】探讨苏姜猪ESR基因的PvuⅡ酶切位点多态性在世代选育过程中的遗传变异及与猪群繁殖性状的关系。【方法】采用PCR-RFLP的方法对906头、2-6世代苏姜猪ESR基因PvuⅡ酶切位点的多态性进行分析,并采用最小二乘法和单因子方差分析该位点多态性与苏姜猪群的繁殖性状的关联效应。【结果】ESR基因在苏姜猪的第2-6世代中B等位基因频率呈现出不断增加的趋势,BB基因型个体从第三世代开始出现,并且频率呈现出上升的趋势。仅考虑公猪基因型时,与配母猪总产仔数、产活仔数及死胎数之间无显著差异,但不同基因型公、母猪交配后母猪产仔数则有显著差异（P＜0.05）。【结论】ESR基因的PvuⅡ酶切位点的多态性对不同基因型公、母猪交配后母猪的产仔数有显著影响。     

季节、品种对种公猪精液量及精子活力的影响

[目的]研究季节、品种两大因素对成年公猪精液量及精子活力的影响效应。[方法]对21头长白猪和26头大白猪在一年内不同季节的精液量和精子活力进行观察和测定,并对这些精液品质进行统计学分析。[结果]季节对成年公猪精液量的影响达到显著水平（P〈0．05）,但2个品种对精液量的影响没有显著差异（P〉O．05）,其中长白猪的精液量在春季最多,秋、冬、夏依次减少,而大白猪的精液量在秋季最多,夏、春、冬三季则依次减少;季节和品种对成年公猪精子活力的影响均不显著（P〉O．05）,但是长白猪和大白猪的精子活力均在春季最高,而夏季最低,此外一年四季长白猪的精子活力明显高于大白猪。[结论]结果为提高猪场的繁殖效率和生产水平奠定基础。     

热应激对猪睾丸Cyt-C和Caspase-3表达的影响

【目的】环境高温影响猪精子发生和精液品质,但其分子机制尚不清楚。为此探索环境温度升高导致的热应激对猪睾丸细胞凋亡调节蛋白Cyt-C和Caspase-3表达的影响。【方法】性成熟长白公猪9头,对照组3头,饲养在20—27℃的猪舍环境;短期热应激处理组(heat stress 7 d,HS7d)3头,每天置37—40℃的猪舍环境3 h,连续7 d;一个精子发生周期热应激处理组(heat stress 42 d,HS42d)3头,每天置37—40℃的猪舍环境3 h,连续42 d;每天于热应激处理后将猪驱赶回20—27℃的猪舍。手术摘取睾丸组织,用QRT-PCR、Western blot和免疫组织化学方法检测Cyt-C和Caspase-3表达与定位的变化。【结果】QPT-PCR结果显示,与对照组相比,热应激处理7 d组和42 d组,Cyt-C和Caspase-3m RNA的相对表达量均显著升高;热应激处理7 d组Cyt-C和Caspase-3m RNA的相对表达量最高。Western blot结果显示,热应激处理7 d组和42 d组Cyt-C和Caspase-3蛋白水平与对照组相比均显著升高;热应激处理7 d组Cyt-C和Caspase-3的蛋白表达水平最高。免疫组织化学研究发现,Cyt-C在猪睾丸组织中免疫反应阳性物定位于间质细胞、支持细胞和各个发育阶段生精细胞的胞质中,在生精细胞Cyt-C低表达于精原细胞,高表达于减数分裂后精母细胞和精子细胞。热应激处理导致Cyt-C的胞质内定位更加弥散,提示Cyt-C从线粒体到胞质的释放。Caspase-3在间质细胞和精原细胞低表达,大量减数分裂后的生精细胞呈Caspase-3阳性。与对照组相比,热应激处理导致部分支持细胞Caspase-3的表达,大量生精细胞的细胞核呈Caspase-3阳性着色。【结论】高温热应激处理导致猪睾丸Cyt-C和Caspase-3的蛋白和m RNA表达水平升高、细胞定位改变,提示Cyt-C和Caspase-3可能与热应激导致的猪精液品质下降存在关联。     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的研究

选取杜洛克公猪精液作为试验材料,比较5种稀释液对猪精液的保存效果,结果表明:用葡萄糖—柠檬酸稀释液,所保存精液的pH值、精子活率、精子畸形率等品质指标表现良好,且稀释液的成本低廉,自配简单易行,适于农村养猪户推行;基层常用的葡萄糖稀释液保存3 d时的精子活率性状表现不佳,仅适合于现配现用。BL─液(美国)稀释液的保存效果也比较好,但该稀释液组分复杂,配制较难,成本也较高,可在规模养猪场中推广。     

他克林对猪精子冻后质量、抗氧化能力及糖代谢的影响

旨在研究他克林对猪精液冻后质量、抗氧化能力及糖代谢的影响机制。手握法采集12头18～24月龄健康杜洛克种公猪精液,在其冷冻保存稀释液中加0.10mmol/L他克林并冷冻保存,检测冻后精子活率、质膜完整率、顶体完整率和畸形率、线粒体膜电位、DNA完整性,同时利用试剂盒检测总抗氧能力、丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、总胆固醇含量、丙酮酸含量及己糖激酶活性。结果表明,与鲜精相比,冻融后精子活率和质膜完整率、顶体完整率、线粒体膜电位、DNA完整性、抗氧化能力及糖代谢指标均极显著下降,畸形率极显著升高。与空白组相比,他克林显著提高冻后精子顶体完整率、DNA完整率、超氧化物歧化酶、丙酮酸含量;极显著提高精子活率、质膜完整率、线粒体膜电位、总抗氧能力、丙二醛含量、总胆固醇含量及己糖激酶活性,极显著降低畸形率。总之,猪精液冷冻前添加浓度为0.10 mmol/L的他克林可能通过提高抗氧化能力和糖代谢水平改善冻融后猪精子的质量。     

公猪精子形态特性及其与后裔经济性状关系的初步分析

用长白猪、大约克猪、雅南猪等3个品种21头公猪观察了头长、中段长等6个性状。结果表明:(1) 个体的精子变异很小,但在不同品种间,品种内不同公猪间差异较大;(2) 由长白公猪间遗传距离,长白公猪可分成不同的遗传类群;(3) 长白品种公猪精子中段长度与其后代平均日增重,饲料报酬和瘦肉率的相关系数分别为0.31,-0.29和-0.24。     

猪品种选育及繁育体系建立的研究

采用完全闭锁的群体继代法对美系长白、大白、杜洛克、汉普夏及２４系种猪进行选育,经过１０ａ６个世代的测定与选择,各希性能指标均达育种目标。所选种猪具有高繁殖率、高生长率、高质、高效的特点;母系种猪（长白、大白）有发情明显、温驯、受胎率高、产活仔数多,长白猪平均窝产活仔１０．３７头,大白猪平均窝产活仔１０．８６头。２１天龄窝质量,长白猪为５４．２３ｋｇ,大白猪为５８．８１ｋｇ。父系公猪生长速度快,测定