奶牛鲜胚移植黄牛或奶牛技术应用

对１３头黑白花奶牛作超排处理，超排有效１１头，有效率８４．６％，头均获胚３．５枚，其中可用胚头均２．８枚。移植受体奶牛８头，妊娠４头，妊娠率５０％；移植受体黄牛１６头；妊娠８头，妊娠率５０％。卵巢和黄体发育好的供体牛在超排有效反应及超排后黄体数明显优于差的供体牛（Ｐ〈０．０１）。进口ＦＳＨ和国产ＦＳＨ的超排效果没有显著差异（Ｐ〉０．０５）。     

提高地方杂种黄牛移植冷冻奶牛胚胎效果的研究

本试验共选用77头地方杂种黄牛作为受体，进行高产奶牛冷冻胚胎移植。对其中的70头受体牛进行同期发情处理，经过两次PG处理后有58头牛发情，同期发情率为82．9％，移植前经直肠检查有68．6％的受体牛黄体合格。但由于子宫炎症，最后移植了33头受体牛，并达到了51．5％的妊娠率。因此在不存在子宫炎症的情况下，我们已达到比较好的胚胎移植效果。     

奶牛一步细管冷冻胚胎移植试验

一步细管冷冻胚胎移植了76头受体，妊娠37头，移植妊娠率48．68％，与加拿大常规脱甘油的冷冻胚胎移植妊娠率（51．13％）相比较，差异不显著（P＞0．05）。     

中国荷斯坦牛冷冻胚胎分割移植试验研究

牛胚胎冷冻的成功，使胚胎移植技术不受时间、地域的限制，并且可以做到对受体进行选择，从而可提高移植妊娠率；牛胚胎分割的成功，是增加胚胎数目和生产同卵双犊或多犊、获得更多牛犊的一个有效方法。如果将胚胎冷冻和胚胎分割技术结合起来，那未就可以达到既增加胚胎数目，降低胚胎移植成本，又利于胚胎移植技术在生产中推广应用的双重目的，为此开展此项研究。将用１０％甘油为冷冻剂，８枚７日龄中国荷斯坦奶牛的冷冻胚胎，在３５℃水浴解冻，用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液脱除抗冻剂，７枚可用胚胎用简单方法分割成１４枚半胚，将裸半胚成对移植于与胚胎日龄同步的７头受体牛。结果３头妊娠，移植妊娠率为４２．９％（３／７），共产５头牛犊，其中２头产同卵双犊，半胚产犊率为３５．７％（５／１４），按整胚计算产犊率为７１．４％（５／７），较同期未分割的冷冻胚胎的产犊率３７．８％（１７／４５）提高３３．６个百分点。     

受体牛品种和移植季节对胚胎移植妊娠率的影响

研究分析了不同受体品种、受体牛饲养方式和移植季节对胚胎移植妊娠率的影响。用于移植的冷冻性控胚胎由加拿大进口。移植的受体选用鲁西黄牛和西门塔尔牛。分析结果显示：受体牛品种对胚胎移植的妊娠率有一定的影响，鲁西黄牛的妊娠率相对较高（40．80％），而西门塔尔牛的妊娠率则相对较低（38.10％）。经卡方独立性检验受体品种与妊娠率之间无显著性关联（P〉0．05）。另外，受体牛饲养方式和移植季节对胚胎移植的妊娠率也有一定的影响，集中含饲条件下受体的整体妊娠率相对较高。秋季移植受体的妊娠率要比春季移植的相对稍高，但二者之间的差异均没有得到显著的水平。     

牛胚胎分割及半胚移植研究

对来自黑白花及西门塔尔超排母牛的７～８日龄胚胎，采用手持微玻璃针，在普通解剖镜下进行分割。通过非手术法将裸半胚移入发情后７天的受体牛黄体侧子宫角。在太原市郊奶牛场及太行山区农民户养牛中，共移植受体牛４５头，结果妊娠产犊２５头，移植成功率为５５．６％。     

奶牛胚胎一步冷冻保存的研究

用ＦＳＨ－ＰＧＦ＿（２α）超排黑白花奶牛２２头，以非手术方法采得７～８日龄胚胎６８枚，其中４５枚胚胎用于一步冷冻试验。水浴解冻后共回收４０枚胚胎。用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖一步除去保护剂，胚胎形态完好率为９０％（３６／４０）；荧光染色阳性率为８７．５％（７／８）；体外培养发育率为７５％（６／８）；冻胚移植受体妊娠率为４３．５％（１０／２３）。     

奶牛鲜胚移植技术的研究

用PMSG+PG,PMSG+PG+激光照射,FSH+PG和PSH+PG+促排卵3号四组药物组合,超排处理15头黑白花奶牛。各组获得可用胚胎头均数分别为1.50±2.52枚(n=2)。3.30±2.52枚(n=3),2.86±3.85枚(n=7)和6.00±5.29枚(n=3),四组总头均数为3.40±3.70枚(n=15)。鲜胚移植三批受体妊娠率平均为62.2％(28/45),前两批移植妊娠率高达78.3％(18/23),其中1头供体一次冲胚11枚,移植11头受体,有9头妊娠。15头供体牛冲胚后40d内人工授精全部妊娠。     

奶牛胚胎分割移植试验研究

用简单方法直接分割7～8日龄新鲜胚胎(一分为二),裸半胚成对移植给66头受体,90d 妊检,移植妊娠率为56.1%(37/66)。除6头流产和尚有5头待产外,已有26头受体产犊35头,其中有9对同卵双胎,双胎率为34.6%(9/26),半胚产犊率为29.2%(35/110)。对影响成对半胚移植妊娠率和半胚产犊率的因素如胚胎质量、胚胎在体外停留时间、胚胎发育阶段、黄体状况、受体牛品种等进行了较系统的研究。此外对冷冻胚胎进行了分割试验,移植妊娠率为45.5%(5/11),产3头犊牛。对快速冷冻和常规冷冻胚胎分割后的移植妊娠率进行了比较,分别为25.0%(1/4)和57.4%(4/7)。     

安哥拉山羊胚胎的手术回收和移植

对３５只安哥拉山羊超排处理，配种后第３天放置阴道海绵栓，第６日由子宫手术回收胚胎。３１只发情配种的供体，共回收胚胎２０４枚，平均每只供体获可用胚４．３±３．９６枚。其中卵巢有功能黄体无大卵泡的６只供体，回收胚胎５１枚，回收率为８７．１５％±１５．９８％，平均每只获可用胚８．１±２．９６枚。卵巢上有大卵泡、或子宫及输卵管有病变者可使回收率和可用胚胎数严重降低。由于配种后放置了阴道栓，８只有黄体退化倾向的供体，平均每只仍获得可用胚４．６枚。移植桑椹胚和囊胚的５１只受体，３６只妊娠，妊娠率为７０．６％．移植４～１６细胞胚胎的对照组，妊娠率为５１．６％．本研究还证明，移植单胚较移植双胚的胚胎成羔率提高２８％以上     

家兔胚胎细胞核移植的研究

研究改进了兔胚胎细胞核移植的技术体系,并对核移植胚胎的体外培养以及克隆胚胎的体内发育进行了试验。结果表明：卵母细胞去核率为８８．９％（８／９）,重组胚融合率为７６．７％（１７６／２２９）,将融合的重组胚与兔胎儿成纤维细胞共同培养,其２￣４细胞发育率、８￣１６细胞发育率以及桑椹胚和囊胚的发育率分别为６５．７％（２３／３５）、２８．６％（１０／３５）、２２．９％（８／３５）,显著高于“ＴＣＭ－１９９＋１０％ＦＣＳ”系统培养的４３．３％（１３／３０）、２６．７％（８／３０）、１６．７％（５／３０）。１６及３２细胞期卵裂球的重组胚可发育到产仔,将１１１枚重组胚移植给９只同期处理的受体母兔,２只妊娠,其中１只产出２只足月克隆仔兔,１只在产前１周（妊娠２２ｄ）流产。     

奶牛胚胎一分为四分割移植试验

1990年7月至1991年3月,以非手术方法采得黑白花奶牛7日龄胚胎。在立体显微镜下,应用徒手简易胚胎分割法,一分为四分割6枚胚胎。将所分割的24枚1/4裸胚,以非手术方法,分别移植给18头受体牛。其中9头妊娠,受体移植妊娠率为50％(9/18),胚胎移植妊娠率为150％(9/6)。得到同胚三犊一组,同胚二胎一组(其中一头产犊,一头流产)和单胎四个(其中两头产犊,两头流产)。     

初情期前枫泾小母猪超数排卵及其胚胎发育研究

２４头初情期前的枫泾小母猪以ＰＭＳＧ、ＨＣＧ进行超排处理,平均获得２３．４枚卵子,人工授精后２８￣５０ｈ超排的卵母细胞的受精率为９８．１％,受精卵发育至桑椹胚和囊胚的比例为８９．７％。采用外科手术将１８０枚受精卵移植至８头同期发情的枫泾母猪子宫,其中有５头妊娠,产仔４４头,胚胎移植妊娠率为６２．５％     

绵羊冷冻胚胎移植试验报告

本试验用年龄为２～３岁的绵羊，产１胎次的３０只杂交羊作受体，采用自然发情和ＴＣＭ－１９９为基础液配制的解冻液，于１９９２年９月２日至２９日进行手术法移植，本试验共移植２５只受体母羊，共计３４枚冷冻胚胎，胚龄为５～６天，胚胎保存期为２～４个月。妊娠１７只，妊娠率为６８％，其中移植单胚１６只，妊娠１０只，妊娠率为６２％；移植双胚９只，妊娠７只，妊娠率为７７％。１９９３年１月２３日开始陆续产羔，共产羔２０只，产羔率为１１８％，其中３只羊产双羔。     

奶牛和小鼠半胚低温冷冻的研究

本实验对小鼠裸半胚采取了多种不同的处理方式，其中冷冻前不培养、冷冻前经短时间培养和冷冻前经长时间培养的冷冻半胚解冻后培养发育率分别为１４．５５％、２６．６７％和６．１２％；装透明带半胚和装透明带后再用琼脂包埋半胚的解冻后培养发育率分别为５６．６７％和６４．２９％；小鼠半胚快速冷冻解冻的培养发育率为６２．００％。此外．将１０枚奶牛半胚装带、包埋、冷冻解冻后，移植给５头受体．结果有１头妊娠；奶牛整胚冷冻后分割的半胚移植妊娠率为２８．５７％（４／１４）。     

奶山羊非手术采胚和移胚技术的研究

将蘸有２％盐酸丁卡因溶液的纱布块填塞在奶山羊子宫颈外口处松弛子宫颈，用自制的采胚管和移胚管进行非手术采胚和移胚。８只超排羊中有６只采出胚胎，采胚成功率为７５％（６／８），采胚率为３５．８（２４／６７），头均采胚４．００±３．４１枚（１￣１０）。非手术移植２只受体羊，有１只怀孕。     

波尔山羊胚胎徒手分割试验

在体视显微镜下，用含20％NCS的PBS液作为操作液，用显微玻璃针徒手分割波尔山羊早期囊胚。将13枚A级囊胚用于分割，其中11枚对称分割为两半胚，2枚为不对称分割。将13对半胚手术移植于13只同期发情的受体羊黄体侧子宫角．有5只受体妊娠，半胚移植受体妊娠率38．5％（5／13）。其中有2只妊娠受体发生流产，观察到3只流产胎儿，其余3只受体妊娠到期，获得3只正常半胚后代。     

奶山羊非手术采胚和移胚技术的研究

将蘸有２％盐酸丁卡因溶液的纱布块填塞在奶山羊子宫颈外口处松弛子宫颈，用自制的采胚管和移胚管进行非手术采胚和移胚。８只超排羊中有６只采出胚胎，采胚成功率为７５％（６／８），采胚率为３５．８（２４／６７），头均采胚４．００±３．４１枚（１～１０）。非手术移植２只受体羊，有１只怀孕。     

提高牛冷冻胚胎移植妊娠产犊率的研究

分别对牛冷冻胚胎的解冻液、解冻后胚胎的质量评定、解冻后的胚胎处理,及受体牛的同步发情处理方法和移植方法等方面开展研究。结果表明：(1)进口解冻液脱甘油的胚胎复苏率为76％(19／25),优于传统解冻液。(2)解冻后未作任何处理直接移植的妊娠率(68．4％),产犊率(47．37％)最高,切割未作培养的次之(妊娠率37．5％,产犊率25％,流产率33．3％),移植前切割培养的最差(妊娠率、产犊率均为9．09％);(3)受体黄体发育正常、同步发情率高达83％,妊娠率高达62．5％;(4)移植枪加套管受体妊娠率(52．9％)明显比不加套管的高。熟练的操作技术受体妊娠率较高(62．5％)。     

受体牛黄体位置及黄体等级对胚胎移植效果的影响

为探索黄体等级和黄体位置对胚胎移植后受体牛妊娠率的影响,便于在应用中准确判断受体牛是否可以进行移植,整理、统计分析了137头移植受体牛的记录资料,结果表明:"2次PG"法和"CIDR PG"法处理受体牛,对形成黄体的等级没有影响;同期发情处理后,受体牛A、B、C级黄体的移植妊娠率分别为47.37%、42.86%和48.34%,黄体等级之间无明显差异(p>0.05);左、右侧黄体的妊娠率分别为43.63%和47.56%,移植时黄体存在的位置与移植妊娠率没有明显差异(p>0.05)。