绵羊半胚移植的研究

本试验用含5％灭活羊血清的PBS为冲卵液,冲出绵羊胚胎,选择质量好的晚期桑椹胚和囊胚,保存在含20％灭活羊血清的PBS中,然后在立体显微镜下,用胚胎简易分割法平均分割胚胎。共分割34枚绵羊胚胎,分割成功率为85.3％(58/68),其中A级胚胎的分割成功率为95.7％(44/46),B级胚胎的分割成功率为63.6％(14/22)。将29枚裸半胚,移植于10只受体绵羊子宫,结果6只妊娠,共产12只羊羔,其中两对为同卵双生羊羔,妊娠率达60％(6/10),半胚成活率达41.4％(12/29)。在10只受体中,各移4枚半胚的4只受体绵羊均妊娠,其中一只产3只羊羔。     

小鼠冻胚分割试验

研究了分害虫所用溶液，冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响，结果表明：①将解冻囊胚分割后，无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响（P＞0.05）；②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异（P＞0.05）；③与分割解冻桑椹胚相比，在蔗糖液中分割解闲囊胚可显著提高冻胚分割效果（P＜0.05）。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体，结果有2只妊娠，共获得半胚仔鼠6只，其中2对为同卵双生。     

小鼠冻胚分割试验

研究了分割所用溶液、冷冻前胚胎发育时期和分割后将半胚是否装入透明带对冻胚分割效果的影响。结果证明:①将解冻囊胚分割后,无论是否将半胚装入透明带对冻胚分割的效果均无显著影响(P>0.05);②在PBS中分割解冻桑椹胚和囊胚的效果无显著差异(P>0.05);③与分割解冻桑椹胚相比,在蔗糖液中分割解冻囊胚可显著提高冻胚分割效果(P<0.05)。将在蔗糖液中分割冻囊胚获得10对半胚移植于5只受体,结果有2只妊娠,共获得半胚仔鼠6只,其中2对为同卵双生。     

安哥拉山羊胚胎徒手分割和移植试验

生产条件下，徒手二分割安哥拉山羊晚期桑椹胚和囊胚。用手术方法将裸半胚移植于受体羊子宫角。产羔受体率为２９．４％（１０／３４），共产羔１１只，其中１对为同卵双生，半胚成羔率为２０．Ｏ％（１１／５５）。早期囊胚、囊胚和扩张囊胚的半胚，移植后半胚成羔率分别为２８．６％（２／７）、３３．３％（７／２１）和９．５％（２／２１）。于受体羊黄体侧子宫角移植２枚半胚或两侧各移植１枚半胚时，半胚成羔率分别为３３．３％（８／２４）和１６．７％（３／１８）。     

小鼠胚胎分割方法及同卵双生试验

选择小鼠晚期桑椹胚和早期囊胚,采用下列方法进行分割:A、显微手术刀直接分割;B、酶消化透明带后分割;C、显微玻璃针去带分割;D 酶——机械去带分割。共分割277枚胚胎,分割成功264枚(95.3%)。将其中480枚半胚作体外培养,A,B,C,D 各组半胚发育到囊胚的发育率分别为65.7%(92/140)、54.2%(65/120)、63(63/100)、64.2%(77/120)。将用 A法分割的48枚半胚移植于12只受体鼠,结果有4只怀孕,共产11只半胚鼠,其中4对有同卵双生仔鼠。     

安哥拉山羊胚胎徒手分割和移植试验

生产条件下，徒手二分割安哥拉山羊晚期桑椹胚和囊胚。用手术方法将裸半胚移植于受体羊子宫角。产羔受体率为２９．４％，共产羔１１只，其中１对为同卵双生，半胚成羔率为２０．０％（１１／５５）。早期囊胚、囊胚和扩张囊胚的半胚，移植后半胚成羔率分别为２８．６％（２／７）、３３．３％（７／２１）和９．５％（２／２１）。     

小鼠胚胎直接投入液氮冷冻保存试验

室温下,将292枚小鼠胚胎在含128.9g/L甘油PBSS(含20％犊牛血清的磷酸盐缓冲液)和含193.2g/L甘油+85.6g/L蔗糖PBSS内分别孵育片刻,装管后直接投入液氮冷冻保存。冻胚快速解冻后,用含342.3g/L蔗糖PBSS脱去甘油,用PBSS清洗后镜下观察评定,胚胎回收率为86.9％(254/292),胚胎形态正常率为77.1％(196/254)。其中部分桑椹胚经体外培养,囊胚发育率为71.4％(20/28)。将110枚冻胚移植给7只受体,3只妊娠,产仔12只(5,7),妊娠率为43％(3/7),产仔率为10.9％(12/110),其中囊胚移植1只受体妊娠产仔3只,产仔率为25％(3/12)。     

山羊胚胎体外培养和移植的研究

用FSH、LH、PMSG、HCG对40只山羊进行超数排卵处理，平均每只排卵21．5枚，回收11．5枚胚胎。超数排卵和卵子回收数，FSH分别为24和14枚，PMSG为19和9枚。将正常的30枚1细胞，12枚2细胞和45枚4细胞胚胎在TCM──199培养液，5％CO2和38．5℃环境中培养60－78小时，65．23％的胚胎可发育至囊胚，移植6只受体羊。妊娠检查已孕3只。     

安哥拉山羊胚胎的手术回收和移植

对３５只安哥拉山羊超排处理，配种后第３天放置阴道海绵栓，第６日由子宫手术回收胚胎。３１只发情配种的供体，共回收胚胎２０４枚，平均每只供体获可用胚４．３±３．９６枚。其中卵巢有功能黄体无大卵泡的６只供体，回收胚胎５１枚，回收率为８７．１５％±１５．９８％，平均每只获可用胚８．１±２．９６枚。卵巢上有大卵泡、或子宫及输卵管有病变者可使回收率和可用胚胎数严重降低。由于配种后放置了阴道栓，８只有黄体退化倾向的供体，平均每只仍获得可用胚４．６枚。移植桑椹胚和囊胚的５１只受体，３６只妊娠，妊娠率为７０．６％．移植４～１６细胞胚胎的对照组，妊娠率为５１．６％．本研究还证明，移植单胚较移植双胚的胚胎成羔率提高２８％以上     

中国荷斯坦牛冷冻胚胎分割移植试验研究

牛胚胎冷冻的成功，使胚胎移植技术不受时间、地域的限制，并且可以做到对受体进行选择，从而可提高移植妊娠率；牛胚胎分割的成功，是增加胚胎数目和生产同卵双犊或多犊、获得更多牛犊的一个有效方法。如果将胚胎冷冻和胚胎分割技术结合起来，那未就可以达到既增加胚胎数目，降低胚胎移植成本，又利于胚胎移植技术在生产中推广应用的双重目的，为此开展此项研究。将用１０％甘油为冷冻剂，８枚７日龄中国荷斯坦奶牛的冷冻胚胎，在３５℃水浴解冻，用１．０ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液脱除抗冻剂，７枚可用胚胎用简单方法分割成１４枚半胚，将裸半胚成对移植于与胚胎日龄同步的７头受体牛。结果３头妊娠，移植妊娠率为４２．９％（３／７），共产５头牛犊，其中２头产同卵双犊，半胚产犊率为３５．７％（５／１４），按整胚计算产犊率为７１．４％（５／７），较同期未分割的冷冻胚胎的产犊率３７．８％（１７／４５）提高３３．６个百分点。     

羊胚胎生物技术研究进展及应用

阐述了胚胎移植、胚胎冷冻、胚胎分割、胚胎性别控制及体外受精等胚胎生物技术在养羊业的研究进展及应用现状。     

胚胎工程技术及其在畜牧业中的应用

胚胎工程技术研究的目的,是对哺乳动物的胚胎在体外进行人为控制操作,让其继续发育,进而获得优良或珍稀动物个体,并应用这类技术进行基础研究和应用开发性研究。文章主要叙述了胚胎移植、胚胎冷冻保存、胚胎分割、体外受精、性别鉴定及控制、转基因动物、细胞核移植、胚胎干细胞和胚胎嵌合等胚胎工程技术及其在畜牧业中的应用前景。     

柑桔杂交的胚胎发育

以雪柑×福桔、雪柑×芦柑、雪柑×(福桔+芦柑)、雪柑×枳壳、芦柑×柚、柚×枳壳等6个组合为实验材料进行胚胎发育的研究.结果表明,授粉后30d.合子处于单细胞状态;授粉后40d,合子开始分裂;授粉后50d,合子形成球形胚,珠心胚尚未侵入胚囊;授粉后55d,合子胚为球形胚或早心形胚,开始有少数珠心胚侵入胚囊;授粉后60d,合子胚为心形胚,珠心胚已大量侵入胚囊;授粉后80d,合子胚为珠心胚所包围,分不清合子胚与珠心胚.不同授粉组合对合子胚、胚珠及果实发育均有一定影响,主要取决于杂交亲本.与种间杂交相比,属间杂交其合子分裂较迟,合子胚发育较慢,珠心胚侵入时期也较迟.     

广西木薯胚发育调查及幼胚离体培养

[目的]调查广西3个木薯品种（系）果实、种子和胚的发育情况,进行幼胚离体培养,为广西木薯杂交育种提供参考.[方法]开花期采用开放式自然杂交进行授粉,11月采集3个木薯品种（系）果实约200粒,对果实、种子和胚等相关性状进行分类和测定,并进行相关性分析;通过对幼胚进行胚成熟培养、成苗培养、增殖培养和生根培养,获得幼胚再生植株,计算胚成熟率、成苗率及移栽存活率.[结果]在木薯果实趋于成熟时采收获处于不同发育时期的果实类型中,根据发育阶段可将种皮颜色分为黑色（A）、棕色（B）、棕黄两色（C）、黄色顶端带黑点（D）、黄色（E）和白色（F）6种;各发育阶段单果平均种子数均小于3粒.当3个木薯品种（系）种皮颜色为A、B、C型时,果实较重、直径较长,胚发育较好,平均胚长分别为6.53～8.40、7.31～8.28、4.50～7.10 mm.除NZ199的A、B型外,3个品种（系）胚长均随种皮颜色加深而变长,表现为：A＞B＞C＞D＞E＞F,胚长变化范围为0～10.66mm.可见胚率总体表现为：NZ199＞SC5＞J393;SC5和NZ199种皮为棕黄色时可见胚率最高,分别为66.7％和94.2％;至棕色时可见胚率分别降低至61.9％和80.6％;至黑色时SC5可见胚率降低至59.9％,NZ199则升高至85.2％;J393在种皮为黄色顶端带黑点时可见胚率为50.1％,至棕黄色、棕色时可见胚率分别降至48.8％和41.0％,以黑色种皮的可见胚率最高,为68.2％.3个木薯品种（系）果实重量与果实直径、可见胚率呈极显著正相关,胚长与果实重量、果实直径呈显著正相关.幼胚离体培养胚成熟率为89.3％,成苗率为62.7％,移栽存活率为71.9％.[结论]3个木薯品种（系）同一果实内或相同发育阶段的不同种子内胚发育不一致;通过木薯果实的重量和直径可初步判断胚的大小;宜选择种皮颜色为棕黄色或黄色顶端带黑点的种子进行幼胚离体培养.     

胚胎冷冻技术及其在转基因小鼠中的应用

随着生物工程技术的发展,出现了许多生物工程小鼠品系,促使胚胎冷冻技术得到了广泛应用。胚胎冷冻技术不仅为转基因动物提供可用胚胎,还使胚胎移植不受时间、地域限制,简化引种过程,防止疾病传播,为建立优良动物的胚胎库提供了条件。综述了几种常用的胚胎冷冻方法及其在转基因小鼠中的应用研究,指出了胚胎冷冻方法存在的主要问题,并展望了其发展前景。     

奶山羊胚胎冷冻和移植试验

家畜胚胎冷冻保存的研究对于优良品种胚胎库的建立及品种推广有重要意义,同时冷冻胚胎便于在生产中应用。哺乳动物胚胎冷冻保存始于实验动物。50年代Ferdow等初次成功地使冷冻家兔受精卵发育成胎儿。Whittingham(1972)冷冻移植小鼠胚胎成功。同一时期Wilmut也成功地进行了小鼠胚胎冷冻试验,1973年又成功地进行了牛冷冻胚胎的移植。此后在绵羊(Willasen et al.1974)、山羊(Bilioan et al.1976) 和马(Ra ma moto,1982)等动物的胚胎冷冻移植相继成功。英、美和西德等国已建立奶牛胚胎移植公司,向国外输送冷冻胚胎。目前国内在奶牛、兔和绵羊方面均有成功的报道,但在奶山羊还未见报道。本试验旨在解决奶山羊胚胎冷冻和解冻的方法问题,为建立我国优良奶山羊品种西农萨能奶山羊胚胎库创造条件。     

四倍体小麦胚大小性状QTL定位与分析

【目的】挖掘小麦胚大小性状相关的数量性状位点，解析胚大小与其他重要农艺性状之间的相关性，为胚相关性状QTL的精细定位及育种利用奠定基础。【方法】以四倍体小麦矮兰麦（Ailanmai）和野生二粒小麦（LM001）构建的121份F8代重组自交系群体（AM群体）作为研究材料，将其分别种植于成都市崇州试验基地（2018、2019和2020年）、成都市温江区试验基地（2020年）和雅安市试验基地（2020年），调查5个环境下的胚长、胚宽、胚长/胚宽、胚长/粒长、胚宽/粒宽以及胚面积6个性状，结合基于小麦55K SNP芯片构建的遗传连锁图谱对上述6个性状进行QTL定位。【结果】胚大小性状呈近似正态分布，符合数量性状的遗传特征。QTL定位共检测到27个胚大小相关性状的QTL，其中，7个分别控制胚长和胚宽的QTL可解释7.75%—21.74%和7.67%—33.29%的表型变异，共检测到5个在多环境稳定表达的主效QTL:QEL.sicau-AM-3B、QEW.sicau-AM-2B、QEW/KW.sicau-AM-2B、QEL/EW.sicau-AM-2B-1和QEA.sicau-AM-2B，其贡献率...     

秦川牛胚胎冷冻保存效果

为探明秦川牛胚胎冷冻保存技术的可行性,将48头秦川牛母牛进行多次超数排卵处理、人工授精,并于授精后第7天非手术法获得胚胎,把获得的A级胚用不同浓度甘油(1.0~5.0 mol/L)和乙二醇(1.0~5.0mol/L)进行处理,并采用常规冷冻法和快速冷冻法进行冷冻,解冻后进行体外培养和不同发育阶段胚胎(桑椹胚、囊胚和扩张囊胚)移植,统计其存活率、孵化率和妊娠率等。结果表明:秦川牛7日龄胚胎能耐受甘油的浓度为2.0~4.0mol/L,乙二醇为1.0~3.0mol/L;常规冷冻法解冻后胚胎的存活率和孵化率显著(P0.05)高于快速冷冻法,胚胎移植妊娠率和产犊率差异不显著(P0.05);常规冷冻桑椹胚的冻后存活率、孵化率极显著(P0.01)低于囊胚和扩张囊胚,移植妊娠率和产犊率显著(P0.05)低于囊胚和扩张囊胚。