家蚕Y,Nl基因和Z染色体的RAPD分子标记研究

利用ＲＡＰＤ技术，对转座黄血（Ｗ＾Ｙ）系统Ｙ０１０，Ｘ射线诱发染色缺失的第１无半月纹Ｍｌ系统，伴性赤蚁油蚕（Ｚ＾ｓｃｈｏｄＺ＾ｓｃｈｏｄ）与７８２（Ｚ＾＋＋Ｗ）的Ｐ１，Ｐ２及Ｆ１，ＲＦ２进行了多态性分析，结果表明，通过６０、１２０和２０５个随引物的扩增，获得了与Ｗ＾Ｙ连锁的ＯＰＧ－０３６５０与Ｎｌ＾ｌ连锁的ＯＰＡ－０８４８０和Ｚ＾＋＋连锁的３个ＲＡＰＤ标记，初步讨论了ＲＡＰＤ技术在家蚕分子标记寻找     

家蚕Y，Nl~1基因和Z染色体的RAPD分子标记研究

利用ＲＡＰＤ技术，对转座黄血（Ｗ~Ｙ）系统Ｙ０１０、Ｘ射线诱发染色体缺失的第１无半月纹Ｎｌ~１系统，伴性赤蚁油蚕（Ｚ~（ｓｃｈｏｄ）Ｚ~（ｓｃｈｏｄ））与７８２（Ｚ~（＋＋）Ｗ）的Ｐ_１、Ｐ_２及Ｆ_１、ＲＦ_２进行了多态性分析。结果表明，通过６０、１２０和２０５个随机引物的扩增，获得了与Ｗ~Ｙ连锁的ＯＰＧ－０３_（６５０）与Ｎｌ~１连锁的ＯＰＡ－０８_（４８０）和与Ｚ￣（＋＋）连锁的３个ＲＡＰＤ标记，初步讨论了ＲＡＰＤ技术在家蚕分子标记寻找研究上的可行性和应用前景。     

30种作物根结线虫病的病原鉴定

从广东省和海南省的１３个县市的３０种作物上，采集了根结线虫病标本５２个，对其病原采用形态特征观察，鉴别寄主反应，电镜扫描和染色体数目等方法进行分类鉴定。其中，柑桔、花生、甘蔗（湛江）、节瓜（新兴）的根结线虫病的病原属于花生根结线虫１号小种（ＭｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅａｒｅｎａｒｉａＲａｃｅ１）；大蕉、香蕉、茄、茶、胡椒，大红花根结线虫病的病原为爪哇根结线虫（Ｍ．ｊａ－ｖａｎｉｃａ）；葡萄、番石榴、木瓜、丝瓜、南瓜、黄瓜、番茄、辣椒、菜豆、蕹莱、橡胶、益智、甘薯和木棉等根结线虫病的病原为南方根结线虫（Ｍ．ｉｎｃｏｇｎｉｔａ）。在广东以南方根结线虫为优势种。南方根结线虫中优势小种为２号小种。调查中未发现北方根结线虫（Ｍ．ｈａｐｌａ）。     

RAPD-PCR技术在根结线虫分类鉴定中的应用

 采用Operon公司A组的9个引物对3种根结线虫:南方根结线虫1号小种(Meloidogyne incognitarace 1),爪哇根结线虫(M.javanica),北方根结线虫(M.hapla)的基因组DNA进行随机扩增,扩增产物显示了明显的多态性,其中引物OPA-01、OPA-03、OPA-04、OPA-05能区分3种根结线虫,其它5个引物仅能区分1个或2个种.     

松材线虫和拟松材线虫种间及种下群体的RAPD指纹分析

利用ＲＡＰＤ技术对松材线虫（Ｂｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓ）和拟松材线虫（Ｂ．ｍｕｃｒｏｎａ－ｔｕｓ）的分离物基因组ＤＮＡ进行了ＤＮＡ片段的随机扩增,以确定种间及种内群体的亲缘关系和筛选具有种鉴定特征的分子标记．通过对４０个１０聚体随机引物的筛选,应用８个引物对两种线虫种间及种内分离物扩增片段的遗传分析显示：两种间群体ＲＡＰＤ扩增片段的共享度为４０％～５６％,而在松材线虫的不同分离物之间的共享度为６０％～８４％;其中有一个引物（Ｐ２５３）可在松材线虫和拟松材线虫种间产生具有种鉴定特征的特异性ＲＡＰＤ片段,在松材线虫的不同分离物中均可产生一约７００ｂｐ的特异性片段,而在拟松材线虫中产生了两个分别约为１３００ｂｐ和１９００ｂｐ的特异性片段．     

四川主栽小麦品种RAPD标记遗传差异研究

采用随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ） 标记,对四川近５０ 年来年推广面积６－６７ 万ｈｍ２（１００万亩）以上的４０ 个小麦主栽品种遗传差异进行了初步探讨。结果表明,５５ 个随机引物中,有３２个引物（ 占５８－２％ ） 扩增产物具有多态性。３２ 个引物共扩增出１８５ 条带,其中９３ 条带（ 占５０％ ）具有多态性,每个引物可扩增出１ ～１１ 条多态性带,平均２－９ 条。４０ 个品种ＲＡＰＤ 标记遗传距离（ＧＤ） 变异为０－０１９ ～０－４７５ ,平均ＧＤ 值为０－２２１。聚类分析表明,在ＧＤ 值０－２３ 水平上,４０ 个品种可聚为５ 类。一些随机引物对有些品种能进行特异性扩增。引物ＯＰＮ１４ 对小麦１ＢＳ 扩增能产生特异性ＤＮＡ 片段,能完全鉴定出４０ 个供试品种中的９ 个１ＢＬ／１ＲＳ小麦－ 黑麦易位系品种。据此认为,ＲＡＰＤ标记可以作为小麦品种鉴定的指纹图谱。     

松材线虫和拟松线虫种间及种下群体的RAPD指纹分析

利用ＲＡＰＤ技术对松材线虫（Ｂｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓ ｘｙｌｌｐｈｉｌｕｓ）和拟松材线虫（Ｂ．ｍｕｃｒｏｎａｔｕｓ）的分离物基因组ＤＮＡ进行了ＤＮＡ片段的随机扩增,以确定种间及种内群体的亲缘关系和筛选具有种鉴定特征的分子标记。通过对４０个１０聚体随机引物的筛选,应用８个引物对两种线虫种间种内分离物扩增片段的遗传分析显示：两种间群体ＲＡＰＤ扩增片段的共享度为４０％￣５６％,百在松材线虫的不同分     

3种园林植物根结线虫胚胎发育研究

详细描述了３种园林植物根结线虫胚胎发育各时期的过程和形态变化在２８０℃时红背桂南方根结线虫（Ｍｅｌｏｉｄｏｇｙｎｅｉｎｃｏｇｎｉｔａ）、马缨丹花生根结线虫（Ｍ．ａｒｅｎａｒｉａ）和洋紫苏爪哇根结线虫（Ｍ．ｊａｖａｎｉｃａ）完成胚胎发育所需时间分别为１２７、１１４和８５ｄ试验表明,温度和孵育液对根结线虫胚胎发育均有一定的影响     

RAPD分析应用于厚皮甜瓜若干品种或品系间的比较

用１４种１２个碱基的随机引物对厚皮甜瓜４个品种及１３个品系进行随机扩增多态性ＤＮＡ（ＰＡＰＤ）分析。结果表明,可用其中６种引物将４个品种（Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｑｕｅｅｎ、Ｅａｒｌ’ｓ Ｆａｖｏｕｒｉｔｅ、Ｃｒｅｎｓｈａｗ、Ｐａｋｉｓｔａｎ－９８１）及Ｅａｒｌ’ｓ Ｆａｖｏｕｒｉｔｅ的３个品系（春系３号、磐田２号、夏系７－２）加以鉴别。在不同引物所扩增的特有或缺少的特异性条带（Ａ０９－１６００、Ａ０９－     

印楝叶组织培养繁殖研究

印楝叶组织培养繁殖研究黄光斗１曾鑫年２钱辉３余标３赵善欢２（１华南热带农业大学，儋州，５７１７３７；２华南农业大学昆虫毒理研究室；３广东东莞德星公司）ＰＲＯＰＡＧＡＴＩＯＮＯＦＮＥＥＭ（Ａｚａｄｉｒａｃｈｔａｉｎｄｉｃａ）ＶＩＡＬＥＡＦＴＩＳＳＵＥＣ...     

与大豆疫霉根腐病抗性基因Rps1-c连锁的分子标记研究

以大豆疫霉根腐病近等基因系Williams和Williams79为材料,对它们的基因组DNA进行RAPD分析,160个10-nt随机引物中,只有引物OPQ-04在Williams79中扩增出特异条带,在Williams中未扩增出,且3次重复均获得一致结果。经进一步检测在其它抗病材料中也出现该特异条带,推测该特异条带与大豆抗疫霉根腐病抗性基因Rps1-c连锁,得到显性RAPD标记OPQ-04700。     

应用TaqMan MGB探针检测美澳型核果褐腐病菌

以美澳型核果褐腐病菌的6个菌株以及核果褐腐病菌一个和欧洲种仁果褐腐病菌这两种近似种为研究对象,通过对ITS区序列的比对分析,设计了美澳型核果褐腐病菌的TaqMan MGB实时荧光PCR引物和探针,建立了美澳型核果褐腐病菌的TaqMan MGB实时荧光PCR检测方法.设计了这3种近似种的通用引物和探针,用于检测过程中进行质量控制.     

Discrimination of Wild Tea Germplasm Resources (Camellia sp.) Using RAPD Markers

Discrimination of 24 wild tea germplasm resources ( Camellia sp. ) using RAPD markers was conducted. The result showed that RAPD markers were very effective tool and method in wild tea germplasm discrimination. There were 3 independent ways to discriminate tea germplasms, a) unique RAPD markers, b)specific band patterns and c) a combination of the band patterns or DNA fingerprinting provided by different primers. The presence of 16 unique RAPD markers and the absence of 3 unique markers obtained from 12 primers made it possible to discriminate 14 germplasms. Using the unique band patterns of primer OPO-13 could discriminate 10 tea germplasms. It was of much importance using minimum primers to obtain maximum discrimination capacity. All the 24 wild tea germplasms could be discriminated easily and entirely by the band patterns combination or DNA fingerprinting obtained from OPO-13, OPO-18, OPG-12 and OPA-13, including two wild tea trees of very similar morphological characteristics and chemical components.     

甘蓝型油菜核不育基因的PCR标记初报

用Ｏｐｅｒｏｎ公司ＯＰＡ－０１－ＯＰＪ－２０ ２００个１０个碱基对随机序列引物对甘蓝型油菜隐性核不育涪优ＡＢ,显性核不育３７ＡＢ,广恢系９８－８０２６,９８－３７４９及Ｆ１材料基因组ＤＮＡ进行ＲＡＰＤ扩增的结果,共获得１３３４条扩增带,平均每引物扩增带约６．７条扩增带表明油菜存在较为丰富的遗传多样性。引物ＯＰＡ－０５,ＯＰＡ－１２,ＯＰＡ－１３,ＯＰＡ－２０等分别扩增出了大小不同的多态性带,初步认     

3种黄鳝遗传多样性分析

为更好地保护和开发利用黄鳝资源,从40个随机引物中选取30个重复性好、扩增稳定的随机引物,应用RAPD技术对黄鳝属中产自缅甸的山黄鳝、印度尼西亚的穴黄鳝、中国黄鳝的DNA进行遗传多样性分析。共检测到315个位点,3种黄鳝种群间的多态位点比例为85．08％,遗传多样性指数为0．1575．DPS2003种群遗传分析软件包分析显示,3种黄鳝种群间的遗传距离为0．7103,相似度系数为0．2897,表明3种黄鳝都具有较高的遗传变异．     

三种礁膜属藻类的分子遗传多样性和亲缘关系的RAPD分析

用RAPD技术对礁膜、袋礁膜和宽礁膜进行了DNA多样性分析,这3种礁膜的基因组DNA分子量均约23Kb。在使用的88个随机引物中,有43个引物在所有样品中都能重复性较好地扩增出条带清晰的多态性片段,多态引物比例为48.86%,袋礁膜、宽礁膜和礁膜多态位点比例分别为55.93%、65.28%和53.14%。礁膜与宽礁膜、宽礁膜与袋礁膜以及礁膜与袋礁膜种间遗传距离分别为0.4118,0.4148,0.4375。通过对遗传距离分析,结果表明采自3个不同海区的样本为同一礁膜属的3个种,与传统分类鉴定结果相吻合。UPGMA和NJ法构建的种间分子系统树一致,结果是宽礁膜和礁膜之间的亲缘关系最近,宽礁膜与袋礁膜之间的亲缘关系较远,礁膜与袋礁膜之间的亲缘关系最远,这与宽礁膜与礁膜共有形态特征较多,袋礁膜与宽礁膜、礁膜共有形态特征少相验证。     

三种礁膜属藻类的分子遗传多样性和亲缘关系的RAPD分析

用RAPD技术对礁膜、袋礁膜和宽礁膜进行了DNA多样性分析,这3种礁膜的基因组DNA分子量均约23Kb。在使用的88个随机引物中,有43个引物在所有样品中都能重复性较好地扩增出条带清晰的多态性片段,多态引物比例为48.86%,袋礁膜、宽礁膜和礁膜多态位点比例分别为55.93%、65.28%和53.14%。礁膜与宽礁膜、宽礁膜与袋礁膜以及礁膜与袋礁膜种间遗传距离分别为0.4118,0.4148,0.4375。通过对遗传距离分析,结果表明采自3个不同海区的样本为同一礁膜属的3个种,与传统分类鉴定结果相吻合。UPGMA和NJ法构建的种间分子系统树一致,结果是宽礁膜和礁膜之间的亲缘关系最近,宽礁膜与袋礁膜之间的亲缘关系较远,礁膜与袋礁膜之间的亲缘关系最远,这与宽礁膜与礁膜共有形态特征较多,袋礁膜与宽礁膜、礁膜共有形态特征少相验证。     

水稻AFLP指纹图谱的引物选择研究

 通过对适合制作水稻品种AFLP指纹图谱的引物进行研究 ,初步建立了一套快速有效地制作AFLP指纹的引物选择法 :第 1步 ,选择亲缘关系相近的 3组以上材料 ,保证组内材料遗传差异较小 ,组间有一定差异 ;第 2步 ,利用两端相同的 16对 2 +2引物组合选择扩增 ,初步选出具有一定多态性的引物 ;第 3步 ,对具有一定多态性的引物重新组合 ,构成两端不同的 2 +2引物组合 ,选出多态性较高的引物组合 ;第 4步 ,将多态性较高的 2 +2引物的一端增加 1个选择碱基 ,构成 2 +3或 3+2引物组合 ,筛选多态性更强、谱带较多、质量较好的引物组合 ;第 5步 ,随机选择部分品种验证所选引物的有效性。选出了M2 1P87和M73 P17等多态性高、谱带多、带纹清晰的引物组合 ,为水稻品种AFLP指纹图谱制作奠定了基础     

Studies on the Primers Screening for AFLP Fingerprints of Rice Cultivars

AFLP(amplified fragment length polymorphism) is a very powerful fingerprinting technology.The key of making variety fingerprints is to select specific powerful primers for each crop. A quick and effective procedure for selecting AFLP primers for rice variety fingerprinting was established as the following: (1)Choose 3 or more group materials that have close genetic relations. (2) Select potential polymorphic primers from primer pairs that are 2 + 2 primer crosses and same at two ends. (3) Recombine the selected potential polymorphic primers and choosing more polymorphic primers. (4) Add one selecting base at one end to become 2 + 3 or 3 + 2primers and further selecting more polymorphic primers. Some primers were selected with this procedure, such as M21Ps7 and M73P17, with which the fingerprints had more polymorphism and high quality.