白芨多糖的抑菌作用研究

以水提醇沉法提取白芨多糖,应用滤纸片法研究白芨多糖对大肠杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的生长抑制作用,并测定大肠杆菌菌液的电导率、碱性磷酸酶含量和蛋白质含量探讨白芨多糖的抑菌机理。结果表明,白芨多糖对4种菌的生长均有抑制作用,20mg/m L的白芨多糖抑菌效果较好,白芨多糖可导致大肠杆菌细胞壁和细胞膜的通透性增大,引起细胞内容物外泄而起到抑菌作用。     

意大利蜜蜂陈年巢脾水提和醇提液抗菌活性的比较

分别采用滤纸扩散法和试管二倍稀释法测定了意大利蜜蜂陈年巢脾(已使用3年)水提液和醇提液对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、乙型溶血性链球菌、肺炎链球菌的抑制作用和抑菌效果。结果表明,意大利蜜蜂陈年巢脾水提液和醇提液均对试验菌株有良好的抑制效果,且醇提液抑菌效果优于水提液。     

鲍氏层孔菌发酵产物抑菌活性的研究

 为研究鲍氏层孔菌发酵产物对植物病原菌的抑菌活性,采用菌丝生长速率法以鲍氏层 孔菌发酵产物的不同溶剂萃取物为研究对象,测定其对7种植物病原菌的抑制作用。将鲍氏层 孔菌的发酵产物进行不同的处理,分级纯化抑菌活性多糖,比较其抑菌活性。结果表明:鲍氏 层孔菌发酵产物对7种病原菌均有抑制作用;鲍氏层孔菌发酵时间为20 d时,发酵产物对杨树 烂皮病菌的抑制率最高;鲍氏层孔菌发酵产物的主要抑菌活性物质存在于发酵上清液醇提物 中;醇沉体积分数为50％醇提物中的多糖对病原菌的抑制率为供试醇沉级别中最高。鲍氏层 孔菌含有抑制病原菌的有效成分,具有成为新型生物农药的潜力。     

不同提取方法对中草药抑菌效果的影响

采用水煎法、半仿生法、乙醇回流法、超声-微波协同萃取法、微波萃取法、水提醇沉法6种方法制备五倍子、多梅、生地榆、生黄芪、大黄等6种中草药原液,以9种畜禽肠道病原菌为试验菌株进行体外抑菌试验.结果表明:6种中草药的提取液对供试菌株均有不同程度的抑菌活性;不同提取方法对不同中草药抑菌作用的影响不同,其中,五倍子、诃子以乙醇回流提取法制备的提取液的抑菌效果最好(P<0.01),水提醇沉法次之(P<0.05);乌梅以乙醇回流提取法制备的提取液的抑菌效果最好(P<0.01),超声-微波协同萃取法及微波萃取法次之(P<0.05);黄芩、大黄各提取液抑菌效果差异不显著(P>0.05),6种方法无明显的区别;地榆各提取液抑菌效果差异显著(P<0.05),其中,微波萃取法、超声-微波协同萃取法、水提醇沉法和乙醇回流法等方法制备的提取液的抑菌效果优于水煎法和半仿生法.说明乙醇回流法对6种中草药抗菌成分的提取效果最佳.     

12种中草药抑菌作用研究

筛选了乌梅、金银花、蒲公英、紫草、牡丹皮等12种可用于食品的中草药,采用水提或醇提法制备中药提取液,以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、枯草芽孢杆菌这4种常见食源性致病菌为供试菌,采用牛津杯法进行体外抑菌实验。结果表明：艾叶、牡丹皮以及乌梅对4种供试菌均有较强的抑制作用,采用正交试验对上述3种中草药进行复配,分析得出最佳配比为乌梅∶艾叶∶牡丹皮=8∶1∶1,在最佳配比条件下,复配抑菌剂对4种受试菌的最低抑菌浓度分别为7.81 mg/mL、3.91 mg/mL、15.62 mg/mL、7.81 mg/mL。扫描电镜的结果表明：中草药复配抑菌剂能够破坏大肠埃希氏菌细胞结构,导致细胞内容物外泄,细胞死亡。     

中药不同提取方法对两种病原菌的抑制研究

为检测金黄色葡萄球菌及沙门氏菌的耐药性。通过制备黄连、黄芩、金银花、牡丹皮及柴胡不同提取方式及浓度的制剂,采用纸片扩散法对分离的两株细菌进行抑菌效果测定。结果显示:黄连的水提及酯提液在多数浓度下对金葡菌有中度抑菌效果;黄芩的酯提液、牡丹皮的水提液及金银花1.00 g·m L~(-1)、0.75 g·m L~(-1)时的水提液对金葡菌有中度抑制作用。对沙门氏菌,黄芩的水提液在1.00 g·m L~(-1)时对其抑制效果最好,为中度抑菌;其他几种中药则效果偏低甚至无效果。提示此株沙门氏菌的耐药性很强,表明几种中药对金葡菌的效果相对较好。     

马尾松针叶提取物的抑菌活性研究

采用2种溶剂对马尾松针叶进行提取,得到马尾松针叶水提取液和醇提取液。以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、黄曲霉、黑曲霉、青霉、根霉、白色念珠菌和啤酒酵母为供试菌,研究马尾松针叶水提取液和醇提取液对上述9种微生物的最低抑制浓度和抑菌圈大小。结果表明:马尾松针叶的水提液和醇提液对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和啤酒酵母有一定的抑制作用,但抑制作用存在差异,水提液的效果均比醇提液的效果明显,而对黄曲霉、黑曲霉、青霉、根霉以及白色念珠菌抑制作用不明显。     

不同剂型中草药抑菌水平的分析

为观察中草药提取物的体外抑菌效果,按常规法制备中草药复方A(黄芩、连翘、大黄、蒲公英)和复方B(白头翁、黄连、黄柏、秦皮)的水提取物、醇提取物,利用管碟法和试管2倍稀释法测定中草药提取物抑菌圈的大小和对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明,2种中草药复方对大肠杆菌均有一定的抑制作用,并且醇提物的抑菌效果均优于其水煮提取物(P<0.05)。其中复方A的醇提取物和水煮提取物的MIC分别是15.625mg/mL和31.25mg/mL;复方B的醇提取物和水煮提取物的MIC分别是31.25mg/mL和62.5mg/mL。     

狗脊蕨等10种植物提取物抑菌活性的初步研究

以小麦纹枯病菌、番茄灰霉病菌为供试菌,对狗脊蕨等10种植物提取物的抑菌活性进行测定。结果表明,供试质量浓度为1 mg/ml时,乙酸乙酯相萃取物狗脊蕨的抑菌效果最好,对小麦纹枯病菌和番茄灰霉病菌抑制率分别为88.8%和100%;海金沙抑菌效果次之,对两种病原菌抑制率分别为73.0%和76.8%。单从对一种病原菌的抑制作用看,截叶铁扫帚对小麦纹枯病菌抑菌率为100%。10种供试植物的石油醚相和水相萃取物对两种病原菌的抑制效果均不强,说明植物抑菌活性成分主要存在于乙酸乙酯萃取部分;狗脊蕨、海金沙和截叶铁扫帚的提取物作为植物源杀菌剂值得进一步研究。     

核桃饼粕酶解物抑菌性的研究

以核桃饼粕为对象,利用胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶及其复配物酶解核桃饼粕,测定其对大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌的抑制效果。结果表明:核桃饼粕的4种单酶酶解物对三种菌均有一定的抑制作用;复配酶酶解物对3种菌的抑制作用明显均高于单酶酶解物,且复配酶酶解物对金黄色葡萄球菌(胃蛋白酶和中性蛋白酶)、枯草杆菌(中性蛋白酶和碱性蛋白酶)大肠杆菌(胃蛋白酶和中性蛋白酶)的抑菌圈直径分别为25 mm、22.3 mm、21 mm;对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌的抑菌性与0.8%的乳酸链球菌素的抑菌效果相当,比0.8%的山梨酸钾效果好,对大肠杆菌的抑菌性均优于山梨酸钾和乳酸链球菌素。     

河南省周口地区几种常见野生中草药的单方抑菌效果

[目的]研究6种中草药对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的单方抑菌效果。[方法]采用水煎剂法提取6种中草药有效成分,采用滤纸片扩散法检测抑菌效果。[结果]6种中草药对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑菌作用,并且随浓度增加抑菌效果增强。6中草药对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最佳抑菌浓度均为1.000 0 g/ml（个别除外）,但相同浓度下,抑菌效果也不同。[结论]野菊花、蛇莓、地黄、泽漆、紫苏和荔枝草6种中草药有效成分对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抑菌作用。     

中西药联用体外抗菌活性的研究

采用试管二倍稀释法分别测定了7种中药和9种西药对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和沙门氏菌的MIC值。再采用微量棋盘稀释法进行了中西药联用体外抗菌试验,计算出FIC指数,并判定药物联用的性质。实验结果表明：黄连、连翘分别与头孢拉定、甲氧苄啶联用,以及蒲公英、金银花与庆大霉素联用抗金黄色葡萄球菌呈现协同作用;黄连、金银花与乙酰甲喹联用,黄连、连翘与甲氧苄啶联用抗大肠杆菌呈现协同作用;黄连与甲氧苄啶联用抗沙门氏菌为协同作用;其他中西药联用多呈现无关或拮抗作用。     

金钮扣提取物体外抑菌活性的初步研究

[目的]研究金钮扣提取物的体外抑菌活性。[方法]采用药敏纸片扩散法及2倍稀释法测定金钮扣提取物对金黄色葡萄球菌等10种细菌的抑菌效果。[结果]①对金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、微球菌、枯草芽孢杆菌、痢疾杆菌、白色葡萄球菌6种供试菌有抑制作用。②及③对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌、微球菌、枯草芽孢杆菌、痢疾杆菌6种供试菌有较强的抑制作用。②及④对白色葡萄球菌有较弱的抑菌作用。[结论]金钮扣不同提取物对供试菌抑菌效果不同;②的抑菌效果优于①;而③及④是主要活性成分,具有抑菌作用。     

生姜提取物对常见食品污染菌的抑菌作用研究

为研究生姜提取物对常见食品污染菌的抑菌作用,采用滤纸片法测定了生姜提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌的抑菌活性,探讨了不同温度和不同pH生姜提取物对3种细菌抑菌活性的影响。结果表明:生姜提取物对3种供试细菌有明显抑制作用。对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑制浓度为0.125%、对大肠杆菌的最小抑制浓度为0.250%。且生姜提取物的热稳定性较好,对供试细菌最佳抑菌pH范围为6.0~9.0。     

32种中草药抑菌活性的比较研究

[目的]研究连翘（FRUCTUS FORSYTHIAE）、黄连（RHIZOMA COPTIDIS）和刺五加（RADIX ET RHIZOMA SEU CAULIS ACAN-THOPANACTS SENTICOSI）等32味中草药提取物的抑菌作用。[方法]利用95%乙醇提取药物的有效成分,以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,采用牛津杯法测定中草药提取物的抑菌作用。[结果]32种中草药中,虎杖等26种中草药提取物对金黄色葡萄球菌具有抑制作用;连翘等23种中草药提取物对大肠杆菌具有抑制作用,且抑菌效果在一定浓度范围内随药液浓度的增大而增强。其中,连翘和黄连对大肠杆菌的最低抑菌浓度分别是4和10 mg/ml,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别是6和8 mg/ml。[结论]虎杖和连翘分别对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有较好的抑制效果。     

新疆紫草毛状根提取物的抑菌活性研究

为了研究新疆紫草毛状根的抑菌活性与新疆紫草根的抑菌活性是否相似,以甜瓜叶斑病、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、棉花枯萎病菌和棉花黄萎病菌5种菌为供试菌,采用滤纸片法和菌丝生长速率法,对新疆紫草毛状根紫草素粗提物及多糖进行抑菌活性研究。结果表明:乙醇提取物对3种细菌均具有抑制作用,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强。丙酮提取物仅对甜瓜叶斑病菌有抑制作用,其抑制作用较乙醇提取物高26.5%。乙酸乙酯和石油醚提取物对3种细菌均无抑制作用;4种溶剂提取物对2种真菌均有抑制作用,且对棉花黄萎病菌的抑制率均高于枯萎病菌;乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、丙酮提取物对甜瓜叶斑病菌的MIC均为0.1 mg/mL,乙醇提取物对大肠杆菌的MIC为6.25 mg/mL;毛状根多糖对2种真菌均具有抑制作用,且对棉花黄萎病的抑制作用较棉花枯萎病高26.14%,而对3种细菌均无抑制作用。     

大蒜液抗菌活性的研究

为评价大蒜液的抗菌活性,以2×105cfu/mL的芽孢杆菌、金黄色葡葡球菌和大肠杆菌为受试菌,进行体外抑菌试验,测定大蒜液的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC).结果表明:大蒜液对3种细菌都有较强的抑制作用,并且抑制的效果随着大蒜液体积分数降低而逐渐降低,其中大蒜液对芽孢杆菌抑制作用最强,金黄色葡萄球菌次之,...     

4种食源性致病菌多重PCR检测技术的研究及应用

为建立一种利用多重PCR技术检测和鉴定沙门氏菌(Salmonellla spp)、单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)的方法,根据沙门氏菌侵袭力蛋白A基因(invA gene)、单核细胞增生李斯特菌蛋白转录调控基因(prfA gene)、金黄色葡萄球菌自溶素基因(alt gene)、蜡样芽孢杆菌的促旋酶B亚单位基因(gyrB gene)设计引物,进行多重PCR扩增,并对多重PCR反应体系进行优化。在此基础上建立了4种致病菌的多重PCR检测体系,同时以国标法进行对比验证。结果表明,本研究建立的多重PCR检测方法简单、快速、灵敏度高,具有很好的应用前景。     

中草药对奶牛乳房炎6种致病菌的抑菌效果观察

用8味中草药煎剂及一个中草药复方制剂对奶牛乳房炎的6种致病菌进行抑菌实验,并测定了最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果显示:金黄色葡萄球菌对连翘、复方、蒲公英中敏;牛棒状杆菌对连翘中敏,嗜热链球菌对瓜蒌极敏,对连翘、白附子、复方、木鳖子、天花粉中敏;产气荚膜梭菌对金银花、瓜蒌高敏,对复方、白附子、紫花地丁、天花粉中敏;乳房链球菌对瓜蒌、复方、金银花中敏;乳杆菌对所用药都低敏;瓜蒌、金银花、连翘对致病菌的MIC和MBC较低。进一步提取瓜蒌、金银花有效成分并与水煎剂对比,瓜蒌、金银花有效成分对6种致病菌均呈现良好的抑菌效果。     

RT-PCR检测金黄色葡萄球菌肠毒素A基因

金黄色葡萄球菌是引起细菌性食物中毒的重要病源菌之一,尤其是肠毒素。国内外由金黄色葡萄球菌肠毒素引发的食物中毒屡屡发生。目前,国内检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素仍采用传统的方法,其操作繁琐、检测时间较长,通常需要3~5 d才能完成,且灵敏度较低。本研究缩短食品中金黄色葡萄球菌肠毒素的检测时间,针对PCR检测的灵敏性、特异性,建立了检测金黄色葡萄球菌肠毒素的方法,为检测食品中金黄色葡萄球菌肠毒素提供了技术支持。分别采用TRIZol法和热酚法提取金黄色葡萄球菌总RNA并进行比较研究,在此基础上反转录获得cDNA,用特异引物对sea基因进行扩增,并优化PCR反应条件,获得理想的sea基因阳性扩增条带。结果表明,热酚法在总RNA提取方面优于TRIZol法,改进PCR反应时间和循环次数,最终初步建立RT-PCR检测金黄色葡萄球菌A基因的方法。