猪卵巢卵母细胞的收集和体外成熟培养

对猪卵母细胞的采集和体外成熟培养(IVM)以及培养液进行了研究.结果表明,在卵母细胞的采集过程中,机械破碎法平均每个卵巢所获得的A、B级细胞数(分别为7.00、20.50)显著多于抽吸法(分别为1.48、 2.73)(P＜0.05).但抽吸法中平均每个卵巢所用的时间(1.05min)却显著少于机械破碎法(15.6min)(P＜0.05).NCSU-23与TCM-199两种培养液对卵母细胞体外成熟率无显著差异(P＞0.05).添加10μg/L rpGH比20μg/L rpGH更有利于卵母细胞的成熟(分别为71.5%、45.5%),两者差异显著(P＜0.05).     

牛卵巢的保存与卵巢内卵母细胞采集的研究

利用屠宰牛的卵巢,研究了卵巢内(Interior Ovary,IO)卵母细胞的回收方法与影响IO卵母细胞回收数量的因素,以及卵巢保存方法对卵母细胞体外受精后卵裂率与体外发育能力的影响.结果表明抽吸采取表面卵泡卵母细胞以后,用间隔1.6 mm的4个刀片平行排列构成的切割刀,纵横切割秦川牛卵泡期卵巢,其卵母细胞回收数量最高.两次回收平均每个卵巢可获得26.45个A、B级可用卵,较单纯抽吸采卵(5.15个)提高了约4倍.刀距增宽或缩小都会降低卵母细胞的回收数量.牛品种不同对IO卵母细胞的回收数量有显著影响,以中国荷斯坦牛最多(34.25个/卵巢),秦川牛次之(21.75个/卵巢),山丹牛最少(8.25个/卵巢).牛繁殖状态不同对IO卵母细胞的回收数量有显著影响,以卵泡期最多(21.75个/卵巢),黄体期和妊娠期次之(分别为11.75、10.75个/卵巢),老龄退化期最少(4.25个/卵巢).回收的IO卵母细胞直径和透明带外径分别达(126.9±9.98) μm和(151.85±10.39) μm,均较表面卵母细胞(分别为136.05±6.09 μm和160.80 μm±4.23 μm)要小的多(P＜0.01).卵巢保存温度25～29℃与30～37℃对IO卵母细胞体外受精后卵裂率与6～8细胞胚发育率无显著影响(P＞0.05),但保存时间则有显著影响,超过6 h会显著降低卵裂率和6～8细胞胚发育率(P＜0.05).     

分离方法及卵巢状况对猪次级卵泡采集数量的影响

【目的】探讨影响猪腔前卵泡分离的因素,建立有效分离猪腔前卵泡的方法。【方法】以猪次级卵泡为对象,比较4种分离方法和11种卵巢状况对猪次级卵泡采集数量的影响。【结果】针刮法分离猪次级卵泡的数量((14.37±2.29)枚)极显著高于剪碎法((5.62±2.67)枚)、显微分离法((8.28±2.53)枚)和酶消化-机械分离法((8.86±1.91)枚),而且针刮法的处理时间((15.29±1.82)min)较其他3种方法短((20.51±1.99)min(、59.24±4.59)min(、40.59±2.67)min),分离得到的次级卵泡体外培养3 d后,存活率在针刮法(53.29%)、剪碎法(51.08%)、显微分离法(49.87%)之间无明显差异,但均极显著高于酶消化-机械分离法(28.31%)。从不同质量卵巢中采集的次级卵泡数量有较大差异,质量为3.0~≤8.0 g((15.36±2.32)枚)的卵巢得到的次级卵泡数量较≤3.0g((6.31±2.19)枚)和8.0 g((7.83±2.71)枚)多。卵巢有无黄体与次级卵泡的采集数量无明显关系;卵巢上不同大小的可见卵泡数量和分布与腔前卵泡的采集数量相关,卵巢上可见卵泡均衡分布,中、小卵泡较多而无大卵泡,无论黄体存在与否,均可获得较多次级卵泡。【结论】针刮法是分离猪次级卵泡的一种有效方法;在分离卵泡时,要选择质量在3.0~8.0 g,且有可见中、小卵泡均衡分布而无大卵泡的卵巢。     

卵巢质量及培养条件对郏县红牛卵泡卵母细胞体外成熟的影响

利用屠宰场采集的郏县红牛卵巢,研究卵巢质量及培养条件对卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:A类卵巢平均获得的卵母细胞数(2.0枚)明显低于B类卵巢获得的卵母细胞数(5.4枚),从A类卵巢上获得的卵母细胞成熟率(55.00%)、卵裂率(37.50%)显著或极显著低于B类卵巢上获得的卵母细胞成熟率(80.00%)(p<0.05)、卵裂率(60.17%)(p<0.01);将随机分成三组的卵母细胞分别培养20h(Ⅰ组)、24h(Ⅱ组)、28h(Ⅲ组),三组成熟率(77.77%、78.57%、74.43%)之间无显著差异(p>0.05),但卵裂率Ⅰ组、Ⅱ组(51.79%、58.16%)明显高于Ⅲ组(36.98%)(p<0.05),Ⅰ组、Ⅱ组差异不显著(p>0.05);以M-199为基础液,比较单独添加ECS和FCS与激素配合的情况下,两种血清种类对卵母细胞成熟的影响,结果表明卵母细胞成熟率(73.33%、75.00%)、卵裂率(52.21%、54.35%)均无显著差异(p>0.05)。     

猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活效率影响因素分析

 研究了月龄和卵巢采集后的保存条件对猪卵母细胞体外成熟和孤雌激活效率的影响 ,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。试验包括 :(1)卵巢保存的生理盐水温度 (2 2、30、37、38.5、4 0℃ )对猪卵母细胞体外成熟和发育潜力的影响。 (2 )卵巢保存时间对猪卵母细胞体外成熟和后期发育的影响。 (3)初情期前后母猪卵母细胞对体外成熟和发育潜力的影响。结果表明 ,(1) 38.5℃保存的卵巢卵母细胞激活后的卵裂率 (79.6 4 % )和囊胚率(18.11% ) ,37℃的卵裂率 (76 .18% )和囊胚     

猪卵母细胞体外成熟的影响因素

通过采集屠宰场废弃猪卵巢,体外分离和培养猪卵母细胞,探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响.结果表明:改良TCMl99(mTCMl99)较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高(P<0.05);基础培养基中添加PMSG、hCG和pFF,卵母细胞体外成熟率(80.63%)显著高于仅...     

合作猪生殖器官生长发育的研究

对不同日龄合作猪生殖器官(卵巢、输卵管、子宫、阴道、睾丸)进行了解剖测量,并对卵巢和睾丸进行了组织切片观察.结果表明:合作猪母猪60~180日龄卵巢重量在0.0185~1.575 g,卵巢指数随日龄的增加逐渐增大,合作猪母猪生殖器官生长发育强度的峰值在90~115日龄,卵巢组织切片表明90日龄前合作母猪有排卵发生,初情期在60~90日龄之间;合作猪公猪睾丸的重量范围在3.2~112.9 g,睾丸指数在8.4×10-4~3.7×10-3,115日龄前后增重加快,合作猪睾丸组织切片观察可见合作公猪的初情期出现在140日龄前.     

牛卵巢卵母细胞体外成熟的研究

研究了卵巢采卵方法以及卵巢保存温度和时间、性周期阶段、激素和培养基对牛卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:从屠宰场获取的卵巢,先切剖或抽吸卵泡再切割卵巢,可显著提高可用卵母细胞数。卵巢保存时间在 2 h 以内最好,最长不超过 6 h。30~39 ℃的生理盐水保存卵巢,卵母细胞的成熟率(63.9 %)和卵裂率(34.4 %)均显著高于 2~8 ℃(16.7 %、0 %)和 20~29 ℃(54.1 %、31.7 %)保存的。采集卵母细胞时卵巢所处性周期阶段(卵泡期、黄体期)对卵母细胞体外成熟的影响不大(成熟率分别为 69.2 %、64.3 %)。M199 是牛卵母细胞体外成熟理想的培养基,M199 + 50 IU/mL LH+ 100 IU/mL FSH + 1μg/mL 17?-E2和 M199 + 50 IU/mL GnRH+1μg/mL 17?-E2都是牛卵母细胞体外成熟理想的培养系统(成熟率分别为 69.4 %、67.5 %,卵裂率分别为 35.4 %、42.7 %)。     

二花脸猪卵巢卵泡形成和早期发育过程中雌二醇和孕酮含量变化及其受体定位

为了研究雌二醇(E_2)和孕酮(P_4)在猪卵巢卵泡形成和早期发育过程中可能的作用,本试验以胎70日龄、90日龄和新生1日龄3个阶段的母猪为试验动物,通过免疫组织化学方法对胎猪和新生仔猪卵巢组织中的雌二醇受体(ER)和孕激素受体(PR)进行定位分析。通过放射免疫测定法对胎猪和新生仔猪的卵巢组织和血清中E_2及P_4含量进行测定,并分析E_2和P_4水平与猪的卵泡形成的相关性。结果显示:在猪早期阶段卵巢中ER主要在卵巢表皮细胞,卵母细胞巢中的卵原细胞和卵母细胞,以及原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡的卵母细胞和颗粒细胞的核中表达,PR主要在卵巢表皮细胞,卵母细胞胞核,原始卵泡和初级卵泡的颗粒细胞的核中表达;随着胎龄的增加,卵巢中的E_2和P_4水平下降,并且与卵泡的形成和发育呈负相关。说明出生前猪卵巢组织中的E_2和P_4含量变化可能影响猪卵巢卵泡的形成和早期发育。     

采用真空泵法快速获取猪卵母细胞

试验比较了真空泵法与传统的手动抽吸法对猪卵母细胞成熟效果的影响,结果表明,真空泵法在平均使用时间、卵母细胞的收集效率及A、B级卵母细胞所占的比例方面均优于手动抽吸法,在卵母细胞的成熟率方面稍低于手动抽吸法。表明真空泵法是一种有效的猪卵母细胞采集方法。     

论从犯原因力的判断

从犯的原因力是指成立从犯所必需的因行为人的行为与其他人的犯罪行为之间产生的内在的必然联系。从犯是否成立,要经过一般性判断、具体性判断和排除性判断三个环节。一般性判断主要考虑是否具有成立从犯所要求的主观要件和客观要件,具体性判断涉及事前判断与事后判断、主观判断和客观判断、应然判断与实然判断,排除性判断主要考虑刑法分则的特殊规定和刑法总则中的但书。     

护国运动胜利因素探析

率先发生在云南的护国运动历尽艰难取得了胜利，这已是史学界公认的结论。但是护国运动胜利的因素有哪些？其历史作用怎样体现？观点不一。实际上护国运动是多种因素合力作用的结果。特别需要关注的是：在半殖民地半封建社会的中国，外国势力的客观作用应予充分重视。     

坚持依法治国与以德治国相结合的原因探析

依法治国与以德治国都是我国治国的基本方略,将二者结合运用是中国特色社会主义 法治道路鲜明的特征。法治与德治是治理国家的两个重要机制,二者相辅相成、相互渗透,德治 与法治不仅是对中国传统文化的继承发展,更是中国法治建设的必然要求。只有坚持二者有效 结合,国家才能走上良性循环发展的轨道。     

加强农业基础地位确保国家粮食安全

中国的粮食安全问题具有特殊的地位和作用.随着农业与农村经济的发展,主要农产品实现了供求基本平衡,丰年相对过剩.但是,必须清楚地认识到农业生产还将面临新的困难与新的挑战.因此,必须加强农业的基础地位,确保国家粮食安全.     

从政治权力的合法性看执政能力建设

政治权力的合法性是执政的前提和基础,是执政能力建设的先决条件。而执政的合法性在新的时代背景下需要有新的证明。提高执政能力,增加执政绩效,增强人民的认同感,稳固合法性,其核心是保障人民根本利益的实现。     

试卷标准评估体系构建研究

考试是教学工作中的一个极其重要的环节。为了加强对考试环节的监督,更好的发挥考试的指导作用、反馈作用,必须制定科学合理的试卷标准评估体系。通过对试卷标准评估体系的指标构建、实施过程进行分析,找出在考试过程中存在的问题及薄弱环节,使教师在教学过程中有针对性的进行改进,促进教学质量不断提高。     

论新闻自由与隐私权的平衡

新闻自由与隐私权都是宪法保护的基本权利，对现代法治社会有着极为重要的意义，但二者的冲突从来没有停止过而且也永远也不可能停止。为了对这两种基本权利进行保护，让他们能够在法律的范围内得到充分的行使，就要在二者之间达致平衡。首要的任务是确定新闻侵 犯隐私权的构成要件，其次是为新闻自由设立抗辩事由，包括新闻价值、公众人物、当事人同意、公开场合和使不可辨认。     

教学学术型大学教师特征论

教学学术型大学教师的特征是指具有教学学术或教学学术水平高的大学教师区别于教学学术水平低或毫无教学学术的大学教师的独特差异或不同点,体现在教学行为和教学成就两方面,前者主要表现为富有教育知识、充满问题意识、展现教学机智和进行有效交往,后者主要表现为产生重要影响。     

论虚假诉讼的刑法规制

近年来,在司法实践中出现了许多虚假诉讼的情况,行为人为了达到某些不正当的目 的,采取捏造的虚假事实和证据向法院提起诉讼,以骗取法院的裁判文书。虚假诉讼具有极大 的社会危害性,它不仅侵犯他人的合法权益,更严重的扰乱了司法秩序,长此以往,使得人们对 司法公正失去信心,从而极大的损害司法公信力。为了规制日益增多的虚假诉讼,2015 年《刑法 修正案（九）》中增设了虚假诉讼罪,并对该罪的犯罪构成、量刑幅度、单位犯罪以及同时构成他 罪和司法工作人员触犯该罪做了明确的规定。这是我国刑法首次对虚假诉讼行为进行明确的 刑法规制,使得惩处虚假诉讼行为有了确切的依据。     

民国时期农业税率辨析

长期以来,学界主流观点一直认为民国时期的农业税率极高,农民负担极重,但同时也存在与之相反的看法。各地赋税占土地收益和农户支出比例,有高有低,据之难以判断农业税率之轻重。在考察民国时期农业税率时,应注意名义赋税与实际赋税、不同阶层农民的不同赋税、不同地区的不同赋税、不同时段的不同赋税、不同考察者眼中的不同赋税等问题。总体看来,农业税率占土地收益比例因时段、地域、农户阶层不同而存在差异,它既不是低税率,也不是奇高无比,但是不可否认的是,赋税的确是农民生产和生活的一个沉重负担。