板栗成熟胚再生体系的建立与优化

研究了外植体消毒方法、植物生长调节剂组合对胚萌发和生长的影响。以迁西板栗主栽品种‘燕山早丰’成熟胚为试验材料,采用L₉(3⁴)试验设计对增殖培养基进行筛选。结果表明,二次消毒处理可以有效抑制污染,污染率最低为16.67%。胚萌发和生长最佳基本培养基为WPM+6-BA 1.0 mg·L^-1,萌发率最高达到95.00%,胚萌发苗最高为59.65 mm。不定芽诱导的最适培养基为:MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1。芽诱导率最高为92.50%。最适增殖培养基为GD+ZT 2.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,增殖系数最大为3.91。     

2001杨组培再生体系建立

以2001杨的春季新发嫩枝茎段、叶柄、叶片为外植体,尝试在MS和WPM基本培养基中添加多种组合激素,探索不定芽诱导、丛生芽伸长和生根最优条件,建立组织培养与植株再生系统。结果表明:MS培养基的诱导分化效果比WPM好;在MS+TDZ 0.025 mg·L^-1+6-BA 0.05 mg·L^-1+NAA 0.05 mg·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1的培养基上,不定芽诱导分化效果最好,茎段和叶柄诱导分化率可达90%,叶片诱导分化率 60%;丛生芽转入MS+KT 0.25 mg·L^-1+GA3 1.00 mg·L^-1+果糖30.00 g·L^-1的培养基中茎伸长效果最佳;每个叶片外植体诱导茎伸长的芽平均达6.4个,芽数量最多;不定芽在1/2MS+IAA 0.02 mg·L^-1+IBA 0.02 mg·L^-1+AC 3.00 g·L^-1+蔗糖30.00 g·L^-1培养基上形成的根条数多,生根率达90%。     

手参愈伤组织培养及植株再生

以手参为对象,研究了外植体和植物生长调节剂对愈伤组织诱导,以及植物生长调节剂对不定芽分化及生根的影响,初步建立了其组织培养再生体系。结果表明,以茎尖外植体愈伤组织诱导率最高,在MS附加0.5 mg·L^-1 NAA的培养基上,诱导率可达60%;愈伤组织在MS附加0.1 mg·L^-1 NAA培养基上增殖效果较好;不定芽分化诱导以MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ最高,可达53.3%,在MS附加0.1 mg·L^-1 TDZ和0.1 mg·L^-1 NAA的培养基更适合芽的增殖和生长;生根诱导以1/2MS培养基附加0.5 mg·L^-1的NAA的诱导率最高,可达30.6%。     

火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。     

‘凤丹’牡丹组织培养研究

以‘凤丹’牡丹芽为材料,对其外植体消毒、褐化防治、组培苗扩繁和生根技术进行研究。结果表明:用75% 酒精消毒30 s,0.1% 升汞消毒8 min消毒效果最佳,外植体的污染率和成活率分别为32.31%和64.32%;其最适初代诱导和继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1和MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+PIC (毒莠定,Picloram) 1.0 mg·L^-1,增殖系数为4.84;生根培养基为1/2MS+CaCl₂ 220 mg·L^-1+IBA 3.0 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,生根率为74.30%;低温结合3 mg·L^-1硝酸银培养可使褐化率降至29.15%。     

唐古特瑞香愈伤组织培养与再生体系建立

以唐古特瑞香幼嫩叶片为材料,进行愈伤组织诱导与植株再生试验,以期建立唐古特瑞香再生体系,为其无性系的快速繁殖奠定基础。将幼嫩叶片进行表面灭菌后接种于初代培养基中,初代培养时,存在褐化现象,愈伤诱导前需进行除褐培养,除褐后的外植体经愈伤诱导、不定芽分化、增殖培养、生根培养和幼苗出瓶移栽的试验过程,筛选出了最佳培养方案。除褐培养基以MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+PVP 200 mg·L^-1效果较好,在此培养基上连续转移3次后褐变消失。愈伤诱导培养基为MS+6-BA 3.0 mg·L^-1+2,4-D 2.0 mgL^-1,诱导率95.5%;芽苗分化培养基为MS+ZT 2.0 mg·L^-1+TDZ 0.1 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1,分化率93.2%,平均芽数为8.66条;不定芽增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+IBA 0.3 mg·L^-1,增殖倍数为12.21,平均苗高4.81 cm;生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg·L^-1,生根数平均为3.83条,生根率为88.72%以上;组培苗移栽于珍珠岩中生长良好,成活率达90%以上。本研究初步建立了唐古特瑞香再生体系,为其无性繁殖奠定了理论基础。     

兔眼蓝莓快繁技术研究

以兔眼蓝莓品种‘园蓝’、‘杰兔’、‘灿烂’茎段为材料,进行组织培养试验,成功建立起高效的组织培养技术体系。结果表明:不同植物生长调节剂对兔眼蓝莓不定芽的增殖影响不同,其中ZT在不定芽增殖中是主导因子,ZT浓度2.0 mg/L,最适宜兔眼蓝莓不定芽的诱导增殖;NAA对苗高有明显的影响,NAA浓度高于0.005 mg/L时,随着NAA浓度的升高,苗高会出现显著的降低;品种差异对不定芽诱导没有明显的影响。兔眼蓝莓不定芽增殖的最优条件为WPM+2.0 mg/L ZT+0.010 mg/L NAA,增殖系数高,达到了4.12,不定芽长势较好。最佳生根培养基为1/2WPM+2.0 mg/L IBA,生根率达到了92.10%,生根数多,根的长势良好。     

白花悬钩子的叶片组培快繁与植株再生研究

为获得一套完整高效的白花悬钩子(Rubus leucanthus Hance)组培快繁技术体系,以叶片为外植体,系统研究了外植体不同灭菌时间、不同植物激素配比及浓度对愈伤组织诱导及丛生芽分化、增殖和生根的影响,并进行了组培苗移栽。结果表明：最佳的外植体灭菌方式为2%NaClO溶液2 min+0.1%HgCl₂溶液5 min,实现了污染率最低(23.33%)、存活率最高(73.33%);最佳的丛生芽分化诱导培养基为MS+3.0 mg·L^-1 6-BA+0.5 mg·L^-1 KT+0.5 mg·L^-1 NAA,愈伤组织诱导率为100%,芽诱导率为93.33%;6-BA与KT对增殖系数有显著影响,最佳的继代增殖培养基为MS+2.5 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 KT+0.4 mg·L^-1 NAA,培养20 d的增殖系数达7.84;最适的生根培养基为1/2MS+1.0 mg·L^-1 IBA,生根率为10...     

美洲黑杨杂交良种‘鲁林9号杨’离体再生体系的建立

以‘鲁林9号杨’无菌叶片与叶柄作为外植体,建立‘鲁林9号杨’的离体再生体系。结果表明,叶片诱导不定芽的最佳培养基为1/2 MS+0.3 mg·L^-16-BA+0.15 mg·L^-1NAA,诱导出芽率为100%,平均出芽数为10.83个;叶柄诱导不定芽的最佳培养基为1/2 MS+0.5 mg·L^-16-BA+0.1 mg·L^-1NAA,诱导出芽率为94%,平均出芽数为5.67个;不定芽生根的最佳培养基为1/2MS+0.15 mg·L^-1IBA+0.03 mg·L^-1NAA,其生根率为95.2%,平均每株生根5条。组培苗炼苗移栽成活率达95%。该研究旨在建立‘鲁林9号杨’的离体再生体系,为‘鲁林9号杨’品种遗传改良和分子生物学研究等提供试验基础,为培育高品质、速生、高抗的杨树新品种奠定理论基础。     

山桐子离体培养植株再生

以种子和叶片为外植体,研究了离体条件下外植体类型及植物生长调节剂对山桐子器官发生和植株再生的影响。结果表明:种子为诱导愈伤组织的适宜外植体; 在MS+1.0 mg·L^-16-BA +1.0 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上,愈伤诱导率达96.8%; 继代培养在MS+0.08 mg·L^-1 TDZ + 1.5 mg·L^-16-BA +0.05 mg·L^-1 NAA 培养基上能成功的诱导芽的分化,诱导率达48.3%以上; 芽增殖的适宜培养基为1/2MS +0.03 mg·L^-1 TDZ +2.0 mg·L^-16-BA +0.1 mg·L^-1 NAA +3%蔗糖+0.6%琼脂,增殖系数为4.83; 在1/2MS+ 0.5 mg·L^-1 IBA +2%蔗糖+0.6%琼脂培养基上,无根苗生根率达88%。     

火焰南天竹茎段离体培养再生体系的优化

  目的  进行离体培养关键因子优化，以满足火焰南天竹Nandina domestica ‘Firepower’的规模化生产。  方法  以火焰南天竹茎段为外植体，通过对影响不定芽诱导、增殖生长和生根的基本培养基、6-苄基腺嘌呤（6-BA）和萘乙酸（NAA）不同质量浓度配比、白砂糖质量浓度及pH值等关键因子的研究，优化火焰南天竹茎段离体培养再生体系。  结果  WPM+0.50 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为火焰南天竹不定芽诱导的理想培养基，不定芽诱导率为93.8%，且生长健壮；WPM+0.75 mg·L-1 6-BA+0.10 mg·L-1 NAA为不定芽增殖培养基，增殖倍数3.3，新芽鲜绿色、生长良好；1/2WPM+0.50 mg·L-1 NAA+白砂糖30.0 g·L-1（pH 6.0）为生根培养基，生根率达95.0%。  结论  本研究建立的火焰南天竹的离体培养再生体系可为其大规模生产提供技术支撑。     

何鲁牵牛的组培快繁研究

[目的]建立何鲁牵牛的组培快繁体系,为其规模化生产提供理论依据。[方法]以何鲁牵牛茎段为外植体,研究何鲁牵牛不定芽增殖和生根的最适培养基。[结果]何鲁牵牛在WPM+0.3 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA+0.1 g/L活性炭的启动培养基上成功诱导腋芽抽出,将腋芽转接到WPM+0.3 mg/L 6-BA+0.1 g/L活性炭培养基上进行不定芽的增殖,增殖率达4.30;在WPM+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L NAA+0.1 g/L活性炭培养基上生根率较高,可达90%。[结论]该研究建立了何鲁牵牛的组培快繁体系,有利于何鲁牵牛种质资源保护和工厂化生产。     

侧柏茎段培养快速繁殖技术研究和黄帝手植柏克隆

以3个不同年龄段的侧柏茎段为外植体,探讨基本培养基、植物生长调节剂、大量元素对侧柏茎段培养快繁的影响,研究侧柏茎段培养快速繁殖技术,并分析年龄对培养各阶段的影响,进而建立了黄帝手植柏克隆繁殖技术体系。结果表明,在试验范围内,各年龄段的侧柏茎段消毒效果均随消毒时间延长而提升,黄帝手植柏最佳升汞消毒时间为8 min;各年龄段的侧柏外植体在不同培养基上启动率均大于90%,选择MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.1 mg·L^-1 6-BA作为黄帝手植柏适宜启动培养基,启动率可达100%;50 a侧柏适宜在较高激素浓度的增殖培养基上培养,800、3 000 a侧柏适宜在中等激素水平的培养基上培养,黄帝手植柏适宜增殖培养基为MS+0.1 mg·L^-1 NAA+0.2 mg·L^-1 6-BA,30 d增殖系数为2.52;随着侧柏年龄增大,茎段生根更加困难,800、3 000 a侧柏在培养基MS+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA上有较好的生根效果,黄帝手植柏适宜生根培养基为MS+0.1 mg·L^-1 IBA+0.1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA。本研究初步建立了黄帝手植柏茎段培养技术体系,为黄帝手植柏的克隆和种质资源保存奠定了技术基础。     

樱花组培快繁体系建立及优化的研究

通过研究不同灭菌时间对3种樱花外植体成活率的影响、不同6-BA和NAA浓度对樱花芽诱导和增殖的影响、IBA和活性炭对樱花生根的影响,以及不同移栽基质对樱花组培苗成活率的影响,建立樱花组培快繁体系。结果表明,3种樱花外植体用10% NaClO表面消毒10 min、以MS为基本培养基、诱导和增殖培养添加6-BA 1.0 mg·L^-1和NAA 0.2 mg·L^-1为最优外源激素浓度;增殖培养基中添加活性炭1 g·L^-1,可显著提高樱花增殖系数;生根培养基用1/2MS+IBA 1.0 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1+3%蔗糖+0.7%琼脂(pH值5.8),生根率最高达到93%,在移栽基质(泥炭土:蛭石:珍珠岩3:1:1)中樱花组培苗成活率最高可达84%。     

天津野生山樱花组织培养与再生体系的建立

本试验以天津发现的野生山樱花（Cerasus serrulate L.）幼嫩茎段为试材,设置不同的激素配比、培养基支撑物和移栽基质,筛选适宜不定芽分化增殖、诱导生根和移栽炼苗的最优条件,建立野生山樱花高效组培再生体系。结果表明：丛生芽增殖的最佳培养基为MS+0.50 mg·L^-1 TDZ+1.00 mg·L^-1 GA₃+0.1 mg·L^-1 NAA,增殖系数可达3.96,玻璃化率最低（6%）且玻璃化程度轻,叶片嫩绿明显增大,芽苗生长健壮。最佳生根诱导培养基为以水苔为支撑物的1/2MS+0.10 mg·L^-1 IBA+0.10 mg·L^-1 NAA,生根率最高,可达94.59%,单株不定根数为3条,单株侧根数高达10条。最佳移栽基质为蛭石+珍珠岩+草炭（体积比2∶1∶1）,移栽成活率最高为98.21%。最适宜的炼苗时间为水苔支撑生根闭瓶炼苗5 d。本研究建立了天津野生山樱花组织培养与植株再生体系,为北方山樱花野生资源在妥善保护的基础上开发应用提供了依据。     

紫萼组织培养技术

试验以紫萼(Hosta ventricosa)的幼嫩花序为起始材料,研究其组织培养方法。结果表明:2%次氯酸钠溶液灭菌14 min为最佳灭菌方式;最适合的诱导培养基为MS+6-BA 4 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1。将诱导的健康芽转至6-BA 4 mg·L^-1、NAA 0.5 mg·L^-1和2,4-D 0.25 mg·L^-1的增殖培养基中,伸长倍率为3.5,增殖倍率为3.9。将健康不定芽转至生根培养基,以1/2 MS+ABT 0.5 mg·L^-1为佳,在此培养基上可形成粗壮健康的白色根,长度2~9 cm,数量4~6根。将完整植株转移至园土∶泥炭∶珍珠岩体积比为1∶3∶1的基质中炼苗2个月,成活率达97%以上,可地栽。     

康乃馨‘白雪公主’叶片培养植株再生

为建立一套快速、有效的康乃馨白色品种的再生体系,以康乃馨‘白雪公主’的幼叶为外植体,对其愈伤组织和不定芽诱导、不定芽伸长和不定根诱导各阶段所需的植物激素、植物材料的影响进行了探讨。结果表明,当叶片外植体的长度为5 mm时,在TDZ 0.5 mg·L^-1、NAA 0.5 mg·L^-1的MS培养基上,愈伤组织和不定芽的诱导效果最为理想;从愈伤组织切下不定芽,移植于单独添加NAA为0.5 mg·L^-1的培养基能有效地促进不定芽的伸长;不定芽伸长至3~4 cm后,在添加NAA 0.1 mg·L^-1的培养基上,不定根分化的数量最多;再生植株经移栽和炼苗后生长状态良好。     

重瓣空心泡组织培养快繁体系的建立

重瓣空心泡(Rubus rosifolius var.coronarius)为悬钩子属植物,自然状态下以根蘖繁殖,繁殖周期长。本研究以重瓣空心泡的带节茎段为外植体建立无菌培养体系,并探究不同细胞分裂素种类和浓度对其诱导和增殖的影响,以及基本培养基和生长素组合在生根诱导中的作用和褐化的控制,以优化组织培养快繁体系。结果表明,重瓣空心泡茎段可被有效诱导腋芽再生,6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)促进增殖的效果优于激动素(KT),但浓度过高会引起玻璃化。因此,其最佳诱导和增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1,增殖系数可达9.67,且生长健壮。减少培养基营养可促进生根,添加活性炭(AC)可有效减轻植株基部褐化,最佳生根培养基为1/4 MS+IBA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+活性炭1.0 g·L^-1。重瓣空心泡组织培养快繁体系的建立可缩短繁育周期,保持优良性状,促进其产业发展。     

梵净山石斛无菌播种及快繁技术

以梵净山石斛成熟的蒴果为外植体,研究不同培养基、激素浓度处理对梵净山石斛种子萌发、原球茎增殖、不定芽分化与生根的影响。结果表明,梵净山石斛无菌播种最佳的培养基为KN+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.5 mg·L^-1+10%CM+AC 1.0 g·L^-1,萌发率达到95.5%;原球茎增殖最优培养基为B5+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+AC 0.5 g·L^-1;筛选出不定芽分化最适培养基为1/2MS+6-BA 0.5 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1,不定芽增殖最适培养基为1/2MS+6-BA 2.0 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1;小苗生根适宜的培养基为1/2MS+NAA 0.5 mg·L^-1+10%土豆泥+AC 2.0 g·L^-1。     

‘阿里山’蝴蝶兰组织培养及其驯化移栽技术

以蝴蝶兰新品种‘阿里山’为试材进行组培快繁研究,包括花梗腋芽不定芽的诱导、丛生芽增殖、生根培养以及组培苗炼苗移栽技术。结果表明,1/4MS+4 mg·L-1BA+0.3 mg·L-1NAA最适合不定芽诱导,诱导率可达82.5%;利用1/2MS+7 mg·L-1BA+0.8 mg·L-1NAA培养基进行培养时,丛生芽增殖系数达到3;利用改良1/2KC+1 mg·L-1NAA+100 g·L-1香蕉泥培养基培养时,生根率高达100%;组培苗驯化28 d,移栽成活率达93.3%。