番茄生长素应答因子ARF1基因RNA干涉载体的构建及其对番茄的转化

将番茄生长素应答因子家族成员之一ARF1中的500bp左右的特异片段导入到植物载体pBI121中,构建成RNAi表达载体(pBI121-ARF1),通过根癌农杆菌介导转入番茄子叶,经组织培养和抗性筛选获得再生植株.PCR检测再生植株,初步鉴定为阳性植株,为后续进一步鉴定该基因功能奠定了基础.     

烟草根特异性启动子植物表达载体的构建及其对番茄的转化

利用PCR技术从烟草中克隆获得了893bp的根特异性表达基因TobRB7的启动子,命名为NT1.以pBI121为原始植物表达载体,用NT1启动子和番茄广谱抗病基因Pto分别取代CaMV 35S启动子和GUS基因,获得了烟草根特异启动子驱动抗病基因的表达载体,命名为pBI-NT1::Pto.采用冻融法将pBI-NT1::Pto导入根癌农杆菌EHA105中,以番茄子叶为外植体进行了侵染转化.PCR检测NPT II基因的结果表明已获得转基因番茄植株.     

蚯蚓纤溶酶基因番茄表达载体的构建

为研究蚯蚓纤溶酶的番茄表达,构建EFE基因的番茄表达载体pF和pEF,并导入农杆菌。采用PCR法在EFE基因DNA序列上添加了表达调控元件和酶切位点后,得到新EFE基因片段,将该片段与切去GUS基因的pBI121载体相连,以构建CaMV35S驱动的EFE组成型表达载体pF;用PCR克隆得到的E8启动子片段替换pF上的35S启动子,以构建番茄成熟果实特异性表达载体pEF;最后,采用三亲交配法用重组质粒转化根癌农杆菌EHA105;结果表明:经过酶切、PCR和测序鉴定,EFE基因、E8启动子序列已重组到表达载体上,植物表达载体构建正确,并且已经转化进农杆菌EHA105中。     

拟南芥CBF1基因植物表达载体构建及其对野生蕉的遗传转化

从拟南芥中克隆CBF1基因,转入到植物表达载体pBI121的XbaI和SacI位点,得到中间重组质粒pBI121-CBF1,用EcoRI和HindⅢ将35S启动子与CBF1基因从pBI121-CBF1切下,转入到植物表达载体pCAMBIA1301中,构建植物表达载体p1301-CBF1.将构建的植物表达载体转入农杆菌E...     

番茄HsfA3基因功能验证中相关植物表达载体的构建

以pBI121质粒为基本载体,分别构建了由35S启动子驱动的用于番茄HsfA3基因亚细胞定位(Subcellular location)和遗传转化的植物表达载体pBI-sl-A3、pBI-A3。将pBI121质粒上的35S启动子进行改造,分别构建了植物表达载体pBI-mini35S、pBI-HSE-mini35S,用于研究热激转录因子HsfA3与热激元件(Heat shockelements,HSEs)的互作。通过冻融法将以上4种重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404中,用于后续试验,为进一步研究HsfA3基因在耐热中的功能和分子生物学机制奠定了基础。     

无花果ACS1基因RNAi植物表达载体构建

通过构建无花果ACS1基因的RNA干扰植物表达载体,为研究ACS基因的功能及采用生物技术方法培育无花果耐贮新品种奠定基础。本试验根据已克隆的无花果ACS1基因序列及植物表达载体pBI221、pBI121的酶切位点,设计2对带相应酶位点的特异性引物,以测序质粒为模板,进行PCR扩增,获得正、反向扩增片段,分别正、反向插入到pBI221载体中的CaMV35S启动子和gusA基因之间,构建成无花果ACS1基因的RNAi中间表达载体。再将中间载体中的正、反向片段和gusA基因以双酶切方式连接到表达载体pBI121上,构建成pBI121-RNAi-ACS1植物表达载体。通过各种限制性内切酶的酶切鉴定,成功构建了无花果ACS1基因的RNA干扰植物表达载体。     

霍乱肠毒素B亚单位在转基因番茄果实中特异性表达及其免疫原性的研究

 利用番茄果实特异性启动子-E8启动子,将霍乱肠毒素B亚单位基因(ctb)用根癌农杆菌浸润法转入番茄植株,并使其在果实中特异表达,然后对试验小鼠进行口服免疫,研究转基因番茄果实的免疫原性。结果表明,ctb基因在14株番茄植物基因组中被证实有整合,并在其中2株的番茄果实中有特异性表达,最高表达量分别为455和385 ng·g-1FW,口服免疫后的小鼠血液和肠道粘膜中均检测到抗CTB抗体。表明获得了在番茄果实中特异、高效表达霍乱肠毒素B亚单位基因(ctb)的植物口服疫苗候选植株。     

猕猴桃果实特异表达异戊烯基转移酶基因植物表达载体的构建

以pBI121质粒为载体,将猕猴桃素基因启动子与ipt编码基因连接,构建猕猴桃果实特异表达ipt嵌合基因。     

拟南芥抑芽基因SPS的克隆及植物表达载体的构建

通过PCR方法从拟南芥基因组DNA中克隆了SPS基因,序列分析表明,与Genebank公布的序列完全一致。然后,将该基因亚克隆到植物表达载体pBI121上,并将载体pBI121上的CaMV35S启动子替换为烟草伤诱导启动子POD,构建成植物表达载体pBISPSPOD。     

草莓乙烯受体FaEtr2基因的克隆及其反义表达载体的构建

为了构建草莓乙烯受体FaEtr2基因的反义表达载体,在已报道的FaEtr2基因序列的基础上,设计特异引物,克隆草莓乙烯受体FaEtr2基因部分特异序列,将该片段反向插入植物表达载体pBI121的CaMV 35S启动子和NOS终止子之间,构建了反义表达载体pBI121Etr2。通过双酶切鉴定后,导入农杆菌EHA105中,酶切和PCR鉴定表明质粒已导入到农杆菌中。本研究为后期该反义基因转化草莓品种以改良草莓果实耐贮运性打下基础。     

根浸提液和腐解液对番茄生长发育的影响

用番茄和茄子根浸提液处理番茄种子,研究根浸提液对番茄幼苗生长的影响。结果表明:5 m g.mL-1根粉浸提液对番茄胚根生长的抑制率分别为32.59%和31.85%;当含量提高至25 m g.mL-1时,番茄胚根生长基本停止。茄子和番茄根腐解液用蒸馏水稀释后处理番茄种子,腐解液稀释50倍时,对番茄胚根生长影响不大,而当浓度较高(茄根腐解液稀释10倍,番茄根腐解液稀释1倍)时对番茄种子胚根生长抑制率达36%以上。在营养液栽培条件下,番茄根浸提液和腐解液对番茄幼苗的生长具有抑制作用。此外,在土中拌入番茄根后栽植番茄苗,番茄根茬对番茄前期生长的抑制相当明显,对番茄鲜重抑制超过50%。     

不同营养液配方与浓度对番茄幼苗生长的影响

为了探索适合山西温室番茄无土栽培的营养液配方,研究了不同营养液配方与浓度的营养液对番茄幼苗生长的影响。结果表明,施用荷兰番茄配方的营养液植株生长发育较好,其次是山东农业大学番茄营养液配方和华南农业大学番茄营养液配方,最后是山崎番茄营养液配方。在所有的处理中,标准浓度的营养液对植株株高、茎粗、鲜重、干重和叶面积的增长方面效果最好,其次1/2倍的,最后是1/4倍的,3个浓度的处理间差异极显著。施用荷兰番茄营养液配方标准浓度的营养液与施用其它配方的营养液相比,番茄幼苗的生长期为73 d,比其它配方处理缩短了8 d。     

栽培方式对越夏番茄生理特性的影响

越夏番茄生长过程中,根系活力及叶片叶绿素含量逐渐增加,但生长前期露地栽培的根系活力低于遮荫栽培和间作栽培,而结果期则显著高于间作栽培,叶绿素含量则始终以露地栽培为高。夏季高温季节叶片的膜脂过氧化较为严重,中午前后的MDA含量较高,但遮荫栽培和间作栽培可显著降低膜脂过氧化程度;番茄叶片的SOD活性在上午逐渐增强,下午维持较高水平。高温季节番茄叶片的光合速率因不同栽培方式而异,上午以露地栽培为高,但午休较为严重,中午后以遮荫栽培显著高于露地栽培和间作栽培;遮荫栽培番茄叶片的光化学效率中午下降的幅度显著低于露地栽培,说明其光抑制程度较小。     

番茄玉米间作对番茄叶片光合特性的影响

[目的]探讨番茄(Lycopersicon esculentum)玉米(Zea mays L.)间作条件下的番茄叶片光合特性。[方法]以6629、金矮红、豫星3浓度,与单作相比,差异均达到了极显著水平。不同番茄品种变化幅度不同,其中6629受影响较小,金矮红和豫星受影响较大。[结论]个番茄品种和甜糯八号、田蜜二号2个玉米品种为试验材料,将番茄与玉米进行间作,利用Li-6400便携式光合仪在自然光照条件下,测定番茄叶片的净光合速率、气孔导度等参数。[结果]番茄玉米间作降低了番茄叶片的净光合速率和气孔导度,增大了其叶片胞间CO2该研究可为番茄栽培管理提供理论依据。     

三种樱桃番茄果实品质比较

以3个果实形态和果色差异显著的樱桃番茄为试验材料,测定比较分析其果实的形态和品质差异,以期为后续番茄新品种的创制奠定理论基础。本次研究测定了3个不同果色的樱桃番茄果实的形态指标(横径、纵径、果型指数、单果重)和品质指标(硬度、糖度、有机酸、番茄红素),并进行了比较分析。结果表明:不同果色樱桃番茄之间形态指标和品质之间均存在显著差异,其中橙黄色番茄品种3号品种的横径、纵径和单果重最大,均显著高于1号品种和2号品种,而这三个樱桃番茄品种的果实硬度无显著差异;果色为黄色的1号樱桃番茄品种果型指数、糖度和有机酸含量最高,均显著高于另外两个品种;而果色为红色的2号樱桃番茄品种的番茄红素含量最高,显著高于1号和3号品种。通过本试验,初步了解了这三种不同果色樱桃番茄的形态和营养品质情况,为下一步番茄品种的利用提供了参考依据。     

基于参数L-系统的温室番茄植株的三维重建

研究利用参数L-系统对温室番茄植株的生长过程进行快速高效的三维可视化仿真的方法。首先根据番茄植株的生长特点从图像中提取植株骨架,分析其拓扑结构,总结出番茄植株生长的参数L-系统公式集,然后利用图像与计算机图形学相结合的方法,对公式集进行图形符号解释,模拟再现番茄植株的生长过程。为了保证真实性,重建的虚拟番茄植株的茎干骨架利用来自Kinect数字化结果的真实番茄植株的茎干样本进行绘制;叶片采用了基于图像与图形相结合的方法重建,花和果实用纯图形学方法进行模拟。在VC++平台上,结合OpenGL图形库实现了可视化仿真过程。研究中所提出的方法能够较好地模拟温室番茄植株动态生长的过程,同时具备快速性与真实性。     

精甲霜灵在西红柿上的降解残留研究

采用气相色谱法(氮磷检测器)测定精甲霜灵在西红柿果实上的残留量。结果表明,精甲霜灵在西红柿植株上施用以后降解较快;在西红柿果实上的消解遵循指数型降解规律,半衰期为1.74d;残留量与精甲霜灵施药量相关,残留浓度随着施药量增多而增高;施药4次处理与施药5次处理间无显著差异。以2倍试验农药厂家在西红柿上的推荐使用剂量(2248g/hm2)作施药处理,施药次数为5次,于最后1次施药2d后,精甲霜灵在西红柿果肉中的残留量为0.074mg/kg的分析结果表明,试验农药厂家推荐精甲霜灵在西红柿上施用的安全间隔期为3d是合适的。     

钾素对番茄青枯病抗性的影响及机理研究

[目的]探究钾素对番茄青枯病抗性的影响。[方法]通过水培试验研究4个不同浓度钾素对番茄生长和养分吸收的影响,并在接种青枯菌后,统计不同处理青枯病的发病情况,分析番茄叶片H_2O_2浓度、过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性变化。[结果]提高钾营养浓度能够减轻番茄青枯病发病情况,钾素能够促进番茄的生长及对钾的吸收利用,在接种青枯菌后,钾素还能促进番茄叶片H_2O_2的合成,并提高叶片POD和PPO活性。[结论]钾素营养能够降低番茄青枯病的发生,钾素营养通过促进番茄的生长、钾素的吸收及生理抗性酶活性进而增强了对番茄青枯病的抗性。     

不同砧木嫁接对番茄生长及抗青枯病的影响研究

以亲和番茄、亲家番茄、本地野生刺茄作砧木,以达尔文番茄、绿樱1号樱桃番茄为接穗,探讨不同砧木嫁接对番茄生长发育及抗青枯病的影响.结果表明,嫁接可显著提高番茄抗青枯病的能力;在生长发育方面,以本地野生刺茄做砧木与两个接穗的亲和力明显不如亲和、亲家两个番茄砧木,随着生长,本地野生刺茄与两个接穗的不亲和现象越明显,表现在嫁接部位砧木的茎粗显著小于接穗,植株矮化、生理性早衰,果实变小;在产量方面,用亲和、亲家番茄做砧木嫁接,能延长番茄采收期,增加番茄的结果数,提高番茄的单果重,使总产量增加15％以上.     

椰糠、有机肥与沙子不同配比基质对番茄穴盘苗生长的影响

【目的】筛选培育番茄优质壮苗的最佳基质配比,为新疆和田地区番茄穴盘育苗提供参考。【方法】以番茄品种欧官为材料,以椰糠、有机肥以及沙漠中的沙子为主要原料,按照不同比例进行配制,采用穴盘育苗的方式,以不同的育苗基质配比设置5个不同的处理和1个对照,在其他条件一致的情况下,测定番茄幼苗的株高、茎粗、最大叶面积、鲜重、干重、根长、根体积、可溶性糖、可溶性蛋白、叶绿素等指标,比较不同基质配比对番茄幼苗生长指标和生理生化指标的影响。【结果】各处理都对番茄幼苗的生长产生了影响,通过测定番茄幼苗的生长指标和生理生化指标,T3处理(椰糠∶沙子∶有机肥=20v∶1v∶1v)的配比对番茄苗的效果最好。【结论】椰糠∶沙子∶有机肥=20v∶1v∶1v的配比对番茄穴盘苗的生长有利,可作为新疆和田地区番茄穴盘育苗的基质配方。