棉花抗黄萎病基因的分子标记辅助选择研究

利用与海岛棉抗黄萎病基因连锁的SSR分子标记BNL3255-208,对海岛棉(Gossypium barbadense L.)品种‘ Pima90-53’与陆地棉(G.hirsutum L.)品种‘中棉所8号’的杂交组合后代进行了分子标记辅助选择.抗性鉴定结果表明:50个F2植株中,初步筛选到带有抗黄萎病基因分子标记的...     

用于谷子分子标记辅助选择的SSR标记筛选

育种材料中多态性分子标记的获得是分子标记辅助选择育种的前提。本研究针对谷子生产中常用的6个育种亲本所组配的15个杂交组合,利用193个谷子SSR标记进行检测,从中筛选出适于各组合育种后代材料鉴定的多态性分子标记,为分子标记辅助选择育种奠定基础。结果表明:有96个标记可用于15个组合的后代材料鉴定,每个组合的多态性标记数为22～72个,表现出极显著差异。其中,春谷品种朝谷12号与其他5个夏谷品种所配组合均表现了很好的多态性,多态性标记数为47～72个;夏谷抗除草剂品种K492与其他育种材料所配组合也表现了较好的多态性,多态性标记47～58个。本研究不仅筛选了1批可用于各组合后代材料鉴定的分子标记,还通过分子标记分析各类型材料间的多态性揭示育种材料的遗传基础,为育种材料的应用提供了指导。     

高粱SSR分子连锁图谱的构建

选用高粱品种B2V4×1383-2杂交组合获得的F2分离群体(共150个个体)为材料,以SSR标记构建高粱的连锁图谱。通过对129对Xtxp型SSR引物组合进行筛选,共得到75对多态性引物,利用筛选出的75对引物进行选择性扩增,得到了75个SSR多态性位点。经Map maker/EXP(version 3.0)软件处理,构建了包含12个连锁群,46个遗传标记的连锁图谱,该图谱覆盖443.9 cM,平均图距为9.6 cM。     

冰糖橙×枸橼杂交后代的胚抢救及杂种鉴定

为获得冰糖橙×枸橼的合子苗,以抗柑橘溃疡病枸橼为父本,以高感病品种冰糖橙为母本进行杂交,利用胚抢救技术获得杂交后代,然后利用筛选出的SSR引物对亲本和子代的基因组DNA进行PCR扩增,分析并鉴定杂交后代中的合子苗。结果表明:在最终获得的359株杂交后代中,利用SSR标记能鉴定出合子苗12株。     

4个棉花品种对不同黄萎病菌的抗性差异比较

采用人工接种方法鉴定了4个棉花品种(泗棉3号、鲁棉研21号、苏棉22号和常抗棉)对江苏不同地区的3个落叶型黄萎病菌菌株(V07DF2、GY-2和V08SY-3-3)和3个非落叶型黄萎病菌菌株(BP2、DF-CQ-2和V08SY-3-2)的抗、感情况.鉴定结果显示,在高浓度病菌接种的情况下泗棉3号的抗病性最差,对6个黄萎病菌株都表现为高感;苏棉22号、常抗棉和鲁棉研21号对不同菌株抗感差异较大,苏棉22号对落叶型菌株GY-2表现为耐病,但是对落叶型菌株V07DF2和V08SY-3-3表现为高感;常抗棉对非落叶型黄萎病菌菌株BP2表现为耐病,但是对非落叶型菌株DF-CQ-2又表现为高感;鲁棉研21号对落叶型黄萎病菌菌株V08SY-3-3表现为耐病,但是对落叶型菌株V07DF2和GY-2表现为高感.这一结果表明同一品种对不同黄萎病菌株的抗性不同,不同品种对同一黄萎病菌株的抗性也存在显著差异.培育广谱多抗黄萎病棉花新品种对解决黄萎病的危害具有重要意义.     

甘蔗与河八王属间杂种的SSR标记鉴定

以甘蔗属优良甘蔗新品种(系)为母本,以收集于广西的河八王属材料为父本进行有性杂交,利用SSR标记对获得的杂种进行真实性鉴定。从70对甘蔗SSR引物中筛选出9对用于对5个甘蔗×河八王组合的57个杂交后代植株进行鉴定,结果表明,其中有14株具有双亲特征带,确定为真杂种。SSR标记可用于甘蔗河八王杂种真实性鉴定,研究结果为甘蔗野生种质河八王属植物的杂交利用及相关基础研究奠定了良好的基础。     

枣树雄性不育种质控制杂交的育性及杂种的SSR分子鉴定

针对枣树花很小、去雄难的问题,以2个稳定雄性不育种质(JMS1、JMS2)为母本,以‘无核丰’和J5(高抗枣疯病种质)2个优异种质为父本,通过双亲罩网放蜂授粉实现控制杂交,组成3个杂交组合(JMS1×无核丰和JMS2×无核丰、JMS2×J5),利用SSR分子标记鉴定杂种。经2年试验共获果实632个,有种子的仅141个,其中JMS2×J5的128个,JMS1×无核丰的12个,JMS2×无核丰的1个。不同年份间和杂交组合间,果实含仁率差异显著。为鉴定JMS2×J5后代中的杂种,从200对SSR引物中筛选出1对双亲互补型引物JSSR244。根据SSR带型的差异,从JMS2×J5的59个杂交后代中鉴定出58个杂种。与JMS2×无核丰、JMS1×无核丰相比,JMS2×J5的杂种容易通过控制杂交方式获得。     

猕猴桃抗溃疡病基因连锁SSR分子标记初步研究

【目的】研究与猕猴桃抗溃疡病基因连锁的SSR分子标记,为猕猴桃抗病育种提供早期分子筛选标记。【方法】以易感病的雌株西选二号和抗病的雄株SX45872杂交F1代的198株群体以及40份猕猴桃材料为试材,利用离体接种法进行抗性鉴定。利用SSR(Simple sequence repeat)技术,结合集群分类分析法(Bulked segregation analysis,BSA)进行猕猴桃抗溃疡病基因(PR)分子标记筛选。【结果】抗性鉴定结果表明,猕猴桃溃疡病抗/感病分离比符合由1对主效基因控制的1∶1分离比例。通过对51对SSR引物的筛选,获得了与抗溃疡病基因连锁的SSR分子标记UDK97-428116;将获得的SSR标记在40份猕猴桃材料中进行验证,分子标记结果与离体枝条接种结果一致率达95.5%,从而验证了该标记的可靠性。【结论】SSR标记UDK97-428116可用于猕猴桃材料溃疡病抗性鉴定和分子标记辅助育种。     

栽培绿豆V2709抗豆象特性遗传及基因初步定位

 【目的】绿豆[Vigna radiata（L.）Wilczek]是豇豆属亚洲亚属（Ceratotropis）中的一个栽培豆种,豆象是危害绿豆的重要害虫,利用分子标记对抗豆象基因进行初步定位,为该材料在绿豆育种中的利用和抗豆象基因的分离奠定基础。【方法】利用原产于印度的抗豆象栽培绿豆V2709与农艺性状优良的感豆象推广品种中绿1号（VC1973A）配制杂交组合,对杂种F2、BC1F1和F3进行遗传分析;采用BSA法,以上述F2代为定位群体,利用抗、感亲本和抗、感池筛选63个RAPD引物和113对SSR/STS引物。【结果】遗传分析结果表明该抗豆象特性由一对显性基因控制;引物筛选结果表明2个引物能在抗、感池间扩增出多态性条带,用Mapmaker EXP3.0b软件作图,将该抗豆象基因初步定位在一个RAPD标记和一个STS标记之间,遗传距离分别为11.0 cM和5.8 cM,并暂定名为Br2。【结论】本研究定位的基因标记可作为绿豆抗豆象育种分子标记辅助选择的一种工具。     

小麦优质亚基和抗白粉病基因聚合体的标记辅助选择研究

本研究采用SDS-PAGE半粒电泳法和SCAR分子标记技术,分别对小麦抗病优质杂交组合(GN2003×龙96-6239)F2所含的优质亚基和抗白粉病基因进行了标记辅助选择.结果表明,在50个F2单株的Glu-D1位点上,有21株含5+10优质亚基,另有1株含有5+12优质亚基;运用与抗白粉病基因相连锁的SCAR140标记初步筛选出具有抗白粉病基因标记的38株,并经田间白粉病抗性鉴定,50个F2单株中有37株表现抗病,其余13株表现感病,仅有1株的田间抗白粉病表现与SCAR标记检测结果不相符.鉴定出同时具有抗白粉病基因标记和5+10优质亚基的聚合体14株,以及1株具有抗白粉病基因标记和5+12亚基,以供小麦优质抗病育种利用.本研究表明采用SDS-PAGE半粒电泳法与SCAR分子标记技术结合可对育种早代的优异单株进行有效鉴定和选择.     

棉花S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因的克隆及表达分析

利用i TRAQ技术从陆地棉(Gossypium hirsutum L.)HM-40中筛选并克隆到S-腺苷甲硫氨酸合成酶Gh SAMS基因。Gh SAMS基因的开放阅读框全长为1 182 bp,编码393个氨基酸,预测Gh SAMS蛋白质含有15个磷酸化位点,推测其功能的行使可能与激酶磷酸化相关,进化分析表明S-腺苷甲硫氨酸合成酶与茶树(Camellia sinensis)的SAMS蛋白质相似性最高。q RT-PCR分析表明,在接种黄萎病菌VD07菌系后,Gh SAMS表达量逐渐增加,随着接种时间的延长,其相对表达量随之增加,推测其在陆地棉抗黄萎病防卫反应中可能起重要作用。在嫁接棉株中,利用VIGS技术成功地沉默Gh SAMS基因,然后对沉默棉株接种黄萎病菌VD07,鉴定其病情指数为62.5,抗性级别为感病;而转化空载体和未接种载体处理的嫁接棉株病情指数分别为30.0和31.2,抗性级别为耐病,表明Gh SAMS基因沉默后嫁接棉对黄萎病的抗性丧失。推测Gh SAMS基因在陆地棉抗黄萎病的过程中可能起重要作用。     

ABA对低温胁迫下水稻幼苗抗氧化酶活性的影响

以耐冷型水稻(Oryza sativa L.)品种东农418和冷敏感型水稻品种松粳9号为材料,在三叶期以脱落酸(ABA)及其合成抑制剂钨酸钠进行喷施处理,通过抗氧化酶活性的响应,探讨低温胁迫下ABA对水稻苗期耐冷性的调节作用。结果表明,低温处理使叶片SOD活性降低,POD活性和MDA含量升高;外施ABA减缓了叶片SOD活性的降低,并可减少POD活性和MDA含量升高的幅度,而钨酸钠处理则加剧了SOD活性降低及POD活性和MDA含量的升高,说明ABA提高了水稻幼苗耐冷性。低温胁迫以及ABA对水稻抗氧化酶活性的影响因品种而异,外施ABA对耐冷型品种的调节作用效果更明显。     

干旱胁迫对草莓苗期叶片光合特性的影响

采用盆栽控水方法研究了干旱胁迫对5个草莓品种苗期叶绿素含量和光合特性的影响。结果表明,在干旱胁迫下,草莓叶片的叶绿素含量(SPAD)、净光合速率、蒸腾速率、气孔导度、胞间CO_2浓度均下降,且甜查理的下降幅度最小,艳丽的下降幅度最大。在轻度干旱胁迫下,5个草莓品种的净光合速率和胞间CO_2浓度均与对照存在显著差异(P0.05);叶绿素含量、蒸腾速率和气孔导度与对照无显著差异(P0.05)。在重度干旱胁迫下,5个草莓品种的净光合速率、蒸腾速率和气孔导度均与对照存在显著差异(P0.05);胞间CO_2浓度与对照无显著差异(P0.05);艳丽和宁丰的叶绿素含量与对照相比显著下降(P0.05)。以上结果表明,在轻度干旱胁迫下,草莓主要是通过降低净光合速率和胞间CO_2浓度响应干旱胁迫,气孔因素影响光合作用;在重度干旱胁迫下,草莓主要是通过降低净光合速率、蒸腾速率和气孔导度响应干旱胁迫,非气孔因素影响光合作用。不同的草莓品种光合作用对干旱的响应能力不同。其中,甜查理具有较强的抗旱性,艳丽的抗旱性较差。     

宜昌地区莲草直胸跳甲繁育技术及实践

为提高空心莲子草(Alternantera philoxeroides(Mart.)Griseb.)生物防治效果,宜昌市从基地建设、空心莲子草栽培、虫源引进繁育三个环节开展探索,集成了莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)越冬保种和春夏季繁育技术,有效控制了全市空心莲子草危害,并为长江中下游地区提供了借鉴。     

不同来源的粗饲料对西门塔尔肉牛生长性能及血清生化指标的影响

选择500 kg左右体重的西门塔尔肉牛9头,随机分为3个处理,每个处理3头牛,每头牛1个重复,粗饲料分别饲喂酒糟和稻草秸秆、青贮高粱、青贮苎麻和玉米秸秆。结果表明,在生长性能方面:青贮苎麻与玉米秸秆组和酒糟组较青贮高粱组末重分别提高了4.67%和4.27%,差异显著(P0.05);平均日增重分别提高了50.00%和52.33%,差异显著(P0.05);在血清生化指标方面:三个处理组总蛋白、白蛋白、碱性磷酸酶差异不显著(P0.05);青贮苎麻与玉米秸秆组较酒糟、稻草秸秆组球蛋白、血糖分别降低了76.31%、25.51%,差异显著(P0.05);较青贮高粱组分别降低了78.37%、27.00%;青贮苎麻与玉米秸秆组较酒糟、稻草秸秆组低密度脂蛋白降低了5.38%,差异显著(P0.05);较青贮高粱组降低了20.90%,差异不显著(P0.05)。在血清尿素氮方面,青贮苎麻与玉米秸秆组较青贮高粱组提高了29.66%,差异不显著(P0.05),但较酒糟、稻草秸秆组降低了22.34%,差异显著(P0.05);在高密度脂蛋白方面:青贮苎麻与玉米秸秆组较青贮高粱组降低了29.84%,差异不显著(P0.05),但较酒糟、稻草秸秆组降低了43.46%,差异显著(P0.05)。     

烟草病虫害综合防治技术田间效果研究

为评价综合防治技术对烟草病虫害的防治效果,开展了天敌昆虫释放、黄板和诱捕器及农药使用对烟蚜、烟青虫、斜纹夜蛾、黑胫病、赤星病及根结线虫病的控制效果调查。结果表明,当地5月下旬,有翅蚜转为无翅蚜定殖为害,大概7月初迁飞至其他作物;斜纹夜蛾在6月中旬达到发生高峰,诱捕器可平均诱捕20.6头/个;释放赤眼蜂和喷施苏云金芽孢杆菌对烟青虫的防效最高可达70.39%,略高于化学对照溴氰菊酯;甲霜·锰锌对当地黑胫病的控制效果较明显,防治效果在74.16%以上;多抗霉素和菌核净对赤星病的药效接近,最高时分别达到64.28%和68.01%,阿维菌素对根结线虫控制效果较为理想,防效均在91%以上。因此,综合防治对烟草病虫害的防治效果接近或略高于常规化学防治,并可显著减少化学农药施用量,利于维护生态环境安全。     

湖北省白皮小麦品种穗发芽抗性鉴定及改良

鉴定了湖北省本省育成和外引的12个白皮小麦(Triticum aestivum L.)品种的穗发芽抗性,比较了室内整穗发芽法和田间自然鉴定法的优劣,分析了系谱法经验选择的效果。结果表明,湖北省本省育成的白皮小麦品种具有一定的穗发芽耐性,而外引品种高感穗发芽;室内整穗发芽法和田间自然鉴定法均可提高穗发芽选择,以室内整穗发芽法效果较好,采用改良系谱法结合室内整穗发芽法鉴定是抗穗发芽育种的一种有效途径。     

稀土对棉花枯萎病的诱抗增产作用研究

本试验对稀土提高棉花抗枯萎病和增产作用进行了研究，结果表明，３００ｍｇ／ｋｇ稀土溶液处理种了，发病率可降低１８．９６％～１１．４５％，病情指数降低２５．６０～１７．４３，相对防效分别为２９．１９％～３９．３％，与多菌灵的防病作用相当，棉株生长和结铃数明量增加，皮棉增产率为１９．３５％～８．２５％。低浓度稀土溶液（５００ｍｇ／ｋｇ，１００ｍｇ／ｋｇ）有一定抗病增产作用，高浓度（５０ｍｇ／ｋｇ，１００     

Development and identification of Verticillium wilt-resistant upland cotton accessions by pyramiding QTL related to resistance

Cotton Verticillium wilt is a serious soil-borne disease that leads to significant losses in fiber yield and quality worldwide. Currently, the most effective way to increase Verticillium wilt resistance is to develop new resistant cotton varieties. Lines 5026 and 60182 are two Verticillium wilt-resistant upland cotton accessions. We previously identified a total of 25 quantitative trait loci(QTLs) related to Verticillium wilt resistance from 5026 and 60182 by assembling segregating populations from hybridization with susceptible parents. In the current study, using 13 microsatellite markers flanking QTLs related to Verticillium wilt resistance, we developed 155 cotton inbred lines by pyramiding different QTLs related to Verticillium wilt resistance from a filial generation produced by crossing 5026 and 60182. By examining each allele's effect and performing multiple comparison analysis, we detected four elite QTLs/alleles(q-5/NAU905-2, q-6/NAU2754-2, q-8/NAU3053-1 and q-13/NAU6598-1) significant for Verticillium wilt resistance, pyramiding these elite alleles increased the disease resistance of inbred lines. Furthermore, we selected 34 elite inbred lines, including five lines simultaneously performing elite fiber quality, high yield and resistance to V. dahliae, 14 lines with elite fiber quality and disease resistance, three lines with high yield and disease resistance, and 12 lines with resistance to V. dahliae. No correlation between Verticillium wilt resistance and fiber quality traits/yield and its components was detected in the 155 developed inbred lines. Our results provide candidate markers for disease resistance for use in marker-assisted breeding(MAS), as well as elite germplasms for improving important agronomic traits via modern cotton breeding.     

广西莪术SSR-PCR反应体系优化和引物筛选研究

以广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)嫩叶为材料,采用单因素和正交试验设计建立和优化SSR-PCR反应体系和反应程序,对最适宜退火温度(Tm)进行筛选优化,对17对已公布的姜黄属通用性引物进行扩增试验,筛选出多态性好、条带清晰的引物。结果表明,建立了适合广西莪术SSR分析的反应体系和扩增程序,即在15μL体系中,DNA模板为30 ng/μL,3μL,Mix(包含DNTP、Mg2+、1×buffer、Taq酶)为5μL,dd H2O为6μL,引物为各0.5μL时,分析效果较好,扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性30 s,根据不同引物的退火温度复性30 s,72℃延伸1.5 min,共35个循环;最后72℃延伸5 min;反应结束后,4℃保存。同时筛选出在试验材料中能产生较清晰主带的引物共12对,初步验证了应用SSR分子标记分析在广西莪术遗传多样性的可行性。