植物形态学及SSR标记在药用植物遗传分析中的应用

植物形态学在遗传多样性分析中具有直接性与简便性,直接反映遗传的变异系数;而SSR是建立在PCR基础上的1种新型DNA分子标记,具有含量丰富、多态性高、共显性和检测方法简单等优点,在药用植物遗传分析上具有广泛的应用前景。作者对遗传多样性的定义和研究方法,以及植物形态学和SSR分子标记在药用植物遗传多样分析中的应用进行了简要概述。     

广西莪术SSR-PCR反应体系优化和引物筛选研究

以广西莪术(Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F.Liang)嫩叶为材料,采用单因素和正交试验设计建立和优化SSR-PCR反应体系和反应程序,对最适宜退火温度(Tm)进行筛选优化,对17对已公布的姜黄属通用性引物进行扩增试验,筛选出多态性好、条带清晰的引物。结果表明,建立了适合广西莪术SSR分析的反应体系和扩增程序,即在15μL体系中,DNA模板为30 ng/μL,3μL,Mix(包含DNTP、Mg2+、1×buffer、Taq酶)为5μL,dd H2O为6μL,引物为各0.5μL时,分析效果较好,扩增程序为94℃预变性5min;94℃变性30 s,根据不同引物的退火温度复性30 s,72℃延伸1.5 min,共35个循环;最后72℃延伸5 min;反应结束后,4℃保存。同时筛选出在试验材料中能产生较清晰主带的引物共12对,初步验证了应用SSR分子标记分析在广西莪术遗传多样性的可行性。