新疆紫草愈伤组织诱导及植株再生研究

以新疆紫草根、下胚轴、子叶、真叶为外植体,MS附加各种激素进行愈伤组织诱导及其分化、植株再生研究。研究结果表明:①根、胚轴、子叶、真叶的平均出愈率差异不大,但出愈速度差异明显;子叶出愈快,愈伤生长量最大;不定芽分化率依次为下胚轴>根>真叶>子叶。②诱导脱分化的效应KT优于6-BA;降低2,4-D浓度有利于愈伤组织的增殖。激素与外植体有互作效应。③真叶在MS NAA0.5 mg/L KT0.4 mg/L的培养基上能直接形成丛生芽。④不定芽在MS IAA0.5 mg/L KT1.0 mg/L培养基中生根率为83.3%;由此建立了新疆紫草再生体系。⑤不同外植体均可诱导出红色愈伤,颜色深浅依次为真叶>子叶>胚轴>根,且激素可以调控不同外植体愈伤红色的程度;同时红色愈伤能分化产生红色不定根。利用进一步优化的体系可进行快繁并提取愈伤组织中的紫草素。     

山东丹参细胞悬浮培养体系及生长模型的建立

【目的】建立和了解山东丹参疏松愈伤组织和悬浮细胞生长规律。【方法】以叶片为外植体研究疏松愈伤组织诱导增重以及细胞悬浮培养体系,并对疏松愈伤组织和悬浮细胞进行生长模型的拟合。【结果】疏松愈伤组织最佳诱导和增殖培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+KT 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+酸水解酪蛋白1g/L,细胞悬浮培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+KT 1.5mg/L+6-BA 3.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+酸水解酪蛋白1g/L。【结论】山东丹参疏松愈伤组织和悬浮细胞生长曲线为"S"型,Richards方程模型能够很好地描述疏松愈伤组织和悬浮细胞生长曲线变化。     

盐生植物盐穗木悬浮细胞系的建立

[目的]组织和细胞培养能够为研究盐穗木的耐盐机制提供实验材料,建立盐穗木悬浮细胞系,从细胞水平上揭示盐生植物盐穗木的耐盐机制.[方法]以成熟胚为外植体,探讨不同培养基和激素配比对愈伤组织诱导以及悬浮细胞系培养条件的优化,并以酚藏花红染色和固体培养基培养法检测悬浮细胞的细胞活性.[结果]以葡萄糖替换蔗糖作为培养基碳源,在0.5 mg/L6-BA、1.0 mg/L KT下盐穗木诱导愈伤组织最适宜悬浮细胞的培养;而在液体基础培养基中添加1.0 mg/L 6-BA、1.0 mg/L KT,则最有利于盐穗木悬浮细胞系的稳定.所获得的盐穗木悬浮细胞具有一定的细胞活性.[结论]采用成熟胚为外植体诱导愈伤组织能够获得盐穗木悬浮细胞系,为在细胞层面上深入开展盐穗木耐盐机制奠定基础.     

半夏疏松愈伤组织诱导条件的优化研究(英文)

[目的]建立半夏细胞悬浮培养体系。[方法]以半夏叶柄为外植体,采用正交试验设计研究了2,4-D、NAA、毒莠定和KT4种植物生长物质及其配比对疏松愈伤组织形成的影响。[结果]2,4-D和毒莠定对半夏叶柄愈伤组织诱导效果最显著,KT和NAA次之。诱导半夏叶柄形成疏松愈伤组织的适宜培养基为MS+0.5mg/L2,4-D+1.0mg/LNAA+1.0mg/L毒莠定+1.5mg/LKT。[结论]为通过半夏细胞悬浮提取有效成分和生产人工种子奠定了基础。     

黄秋葵再生体系的建立及毛状根的诱导

[目的]建立黄秋葵的再生体系并诱导其毛状根.[方法]以黄秋葵无菌苗的叶片和茎段为外植体,建立黄秋葵的体细胞再生体系,并利用发根农杆菌A4侵染黄秋葵叶片,诱导毛状根.[结果]愈伤组织的最佳诱导培养基为MS＋ 1.0 mg/L 6-BA ＋0.5 mg/L NAA时;最佳体细胞胚发生培养基为MS ＋0.5 mg/L NAA;毛状根最佳诱导条件为叶片预培养48h,侵染时间6min.[结论]该研究为成功构建黄秋葵遗传转化体系和研究黄秋葵中的次生代谢产物奠定了基础.     

除虫菊愈伤组织诱导研究

以除虫菊种子获得的无菌苗的不同器官为外植体,研究几种基本培养基及NAA、2,4-D或其与BA、KT的组合对愈伤组织的诱导效果,结果表明：不同类型基本培养基中MS有利于子叶、真叶和下胚轴,White有利于根愈伤组织的诱导和生长。不论除虫菊的哪一部分作为外植体,培养基pH值均为5.8较为合适。不同器官外植体诱导愈伤组织的最适植物生长调节剂组合不同,子叶为1.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT,真叶为1.0-2.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/LKT,根为0.5 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA或KT,而下胚轴在1.0-2.0mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA,0.5-1.0 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT,1.0 mg/L NAA＋0.5 mg/L BA,0.5mg/L NAA＋0.5 mg/L KT,0.5 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L BA或KT均可100%诱导愈伤组织。     

一品红叶片愈伤组织诱导及腋芽的增殖

以一品红叶片和腋芽为外植体进行了愈伤组织诱导和腋芽增殖的研究,结果表明,叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+KT 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L;腋芽增殖的较佳培养基为MS+TDZ 0.5 mg/L+KT 0 mg/L+NAA 0 mg/L;试管苗生根的最佳培养基为MS+NAA 1.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L。     

轮叶党参叶片的组织培养研究

以轮叶党参叶片为外植体,研究了培养基及不同激素组合对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,叶片作为外植体可以比较容易地诱导出愈伤组织,最佳诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 1.0mg/L+KT 0.5mg/L,最高出愈率为94.2%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,最高诱导率可达69.2%;根诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,生根率达85.9%,建立了较为完善的轮叶党参再生体系。     

半夏疏松愈伤组织诱导条件的优化研究

[目的]建立半夏细胞悬浮培养体系。[方法]以半夏叶柄为外植体,采用正交试验设计研究了2,4-D、NAA、毒莠定和KT 4种植物生长物质及其配比对疏松愈伤组织形成的影响。[结果]2,4-D和毒莠定对半夏叶柄愈伤组织诱导效果最显著,KT和NAA次之。诱导半夏叶柄形成疏松愈伤组织的适宜培养基为MS＋0.5 mg/L 2,4-D＋1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L毒莠定＋1.5 mg/L KT。[结论]为通过半夏细胞悬浮提取有效成分和生产人工种子奠定了基础。     

防风愈伤组织诱导及植株再生体系研究

以防风为材料,研究不同外植体、激素组合、培养基对愈伤组织诱导及植株再生的影响。结果表明,茎段是防风组织培养较为理想的外植体材料。诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1.0 mg/L 6-BA,最高出愈率为96.7%;诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA,最高诱导率为75%;诱导根的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA,生根率达65%;组培苗的移栽成活率达80%。     

花魔芋组织培养初步研究

以花魔芋球茎切块作外植体,接种在MS附加6-BA、NAA和KT的培养基上诱导愈伤组织的形成.各种培养基均能诱导外植体产生愈伤组织,但不同激素浓度组合其诱导率不一样.其中以MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 1.0 mg/L的诱导率最高,达84.62%.愈伤组织芽分化最适培养基是MS 6-BA 1.0 mg/L NAA 0.5 mg/L KT2.0 mg/L,分化率为73.81%.芽在MS NAA 0.5 mg/L和1/2MS NAA 0.5 mg/L培养基上的生根率均在78%以上.     

冬枣花药愈伤组织的诱导及原生质体分离

[研究目的]研究冬枣花药愈伤组织的诱导,悬浮系的建立和培养及愈伤悬浮系原生质体的分离.[方法]以冬枣花药为试材,通过选择愈伤诱导培养基和原生质体分离所用酶的浓度找到最佳诱导和分离条件.[结论]使用1/2MS基本培养基附加TDZ 0.2 mg/L、NAA 0.5 mg/L和PVP 2.0 g/L,对诱导冬枣花药愈伤组织有较好效果;愈伤组织增殖采用培养基1/2MS+TDZ 0.4mg/L+NAA0.2mg/L;悬浮细胞系培养采用1/2MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA0.2 mg/L液体培养基;冬枣花药愈伤组织悬浮系原生质体分离时以0.6M甘露醇+0.1%MES+20～25 g/L纤维素酶.酶解时间为16h时得到的原生质体产量和活力较高.     

紫花苜蓿SANDITI愈伤组织诱导和分化的研究

利用紫花苜蓿SANDITI无菌苗的下胚轴、茎和叶3种外植体,研究了在附加不同激素浓度的MS培养基上诱导愈伤组织的效果.结果表明:SANDIT最佳外植体为下胚轴,最佳下胚轴愈伤组织诱导培养基为MS 2,4-D2.0mg/L 6-BA0.5mg/L.15d继代1次,或适当降低2,4-D浓度、提高6-BA或KT浓度,可以降低愈伤组织的褐化率.用源于下胚轴的愈伤组织在SH 2,4-D1.0mg/L 6-BA0.5mg/L CH2000mg/L培养基中进行悬浮培养,每5d继代1次,1个月可以建立良好的胚性悬浮系,并伴有体细胞胚胎的发生.愈伤组织在6-BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L、GA31.0mg/L、YE250mg/L、CH250mg/L的MS培养基上,可获得较高的分化率.     

小麦“5389”悬浮细胞系建立的条件摸索

以小麦"5389"的幼胚为外植体诱导愈伤组织,研究了培养基中2,4-D、KT、ABA及其配比对愈伤组织诱导和愈伤组织继代培养的影响。结果表明:以MS+2,4-D 3.0 mg/L培养基的诱导效果最好,出愈率最高达93.42%;在MS+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.1 mg/L培养基上进行继代培养获得松脆型愈伤组织,以MS+2,4-D1.0 mg/L+KT 0.1 mg/L培养基进行液体培养建立了状态良好的悬浮培养细胞。     

黄秋葵再生体系的建立及毛状根的诱导

[目的]建立黄秋葵的再生体系并诱导其毛状根。[方法]以黄秋葵无菌苗的叶片和茎段为外植体,建立黄秋葵的体细胞再生体系,并利用发根农杆菌A4侵染黄秋葵叶片,诱导毛状根。[结果]愈伤组织的最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA时;最佳体细胞胚发生培养基为MS+0.5 mg/L NAA;毛状根最佳诱导条件为叶片预培养48 h,侵染时间6 min。[结论]该研究为成功构建黄秋葵遗传转化体系和研究黄秋葵中的次生代谢产物奠定了基础。     

苜蓿愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以改良SH为基本培养基,研究了不同激素配比和不同外植体对苜蓿愈伤组织诱导的影响,筛选出诱导愈伤组织的最佳外植体是下胚轴、最佳培养基为SH+2,4-D 2mg/L+KT 0.2mg/L;继代增殖后对愈伤组织进行分化再生培养,研究了附加不同浓度外源激素的MS和改良SH培养基对愈伤组织分化的影响,确定最佳分化培养基为改良SH+NAA0.1mg/L+KT 0.5mg/L。     

芦荟叶片的取材处理对愈伤组织诱导的影响

以中华芦荟叶片为外植体,研究不同取材方式和不同激素配比对愈伤组织诱导的影响。实验结果表明,叶片中上部外植体优于叶基部外植体,叶片中上部外植体的3种取材方式中,带有少量叶肉细胞的表皮细胞层是愈伤组织诱导的最佳外植体;MS+BA 3.5mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 0.2 mg/L+KT 0.5 mg/L是最适的愈伤组织诱导培养基,其愈伤组织诱导率达91.7%,且愈伤组织生长良好。     

均匀设计在柑橘砧木离体培养再生体系建立中的应用

[目的]建立枳壳离体培养再生体系。[方法]采用均匀设计研究了不同时期枳壳茎尖、茎段、芽的愈伤组织诱导、增殖、分化、及生根情况。[结果]愈伤组织诱导率及生长量由高到低为春梢夏梢秋梢冬梢;不同时期外植体诱导愈伤组织所需生长调节物质种类、浓度、配比不同,春梢茎段外植体诱导愈伤组织以NAA 0.2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最好,夏梢茎段外植体诱导愈伤组织以NAA 0.2 mg/L+2,4-D 4.5 mg/L+KT 0.2 mg/L+IBA 0.1 mg/L为最好。愈伤组织增殖的最优配方是MT+6-BA 0.25 mg/L+NAA 0.2 mg/L。在MT+6-BA 0.25 mg/L+IBA 0.3 mg/L培养基上不定芽分化效果好,不定根发生率、根数、根的质量均在1/2MT+NAA 4 mg/L培养条件下最佳。[结论]为枳壳快速繁殖、脱毒技术和相关细胞工程的研究奠定基础。     

甘薯的组织培养

以甘薯的叶片为外植体进行组织培养,结果表明:适合甘薯愈伤组织诱导的培养基是MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L和MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,适宜愈伤组织分化出根的分化培养基是MS+KT 0.5 mg/L或MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5mg/L或MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,适宜根分化出试管苗的分化培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基为MS;生根的培养基为1/2 MS.     

植物激素对大蒜愈伤组织诱导及继代培养的影响

[目的]研究不同的植物生长素和细胞分裂素配比对大蒜愈伤组织的诱导和继代培养的影响。[方法]以韭菜种子胚根和鳞茎尖为外植体,在附加不同激素的培养基上诱导愈伤组织并继代培养。[结果]MS+2,4-D2.0mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA2.0mg/L适宜胚根诱导愈伤组织,而MS+2,4-D2.0mg/L+NAA2.0mg/L+6-BA1.0mg/L适合茎尖诱导愈伤组织,而MS+2,4-D1.0mg/L+NAA2.0mg/L+6-BA0.5mg/L适合愈伤组织的继代培养。[结论]生长素和细胞分裂素合理搭配有利于大蒜愈伤组织的诱导和继代培养。