半夏疏松愈伤组织诱导条件的优化研究

[目的]建立半夏细胞悬浮培养体系。[方法]以半夏叶柄为外植体,采用正交试验设计研究了2,4-D、NAA、毒莠定和KT 4种植物生长物质及其配比对疏松愈伤组织形成的影响。[结果]2,4-D和毒莠定对半夏叶柄愈伤组织诱导效果最显著,KT和NAA次之。诱导半夏叶柄形成疏松愈伤组织的适宜培养基为MS＋0.5 mg/L 2,4-D＋1.0 mg/L NAA＋1.0 mg/L毒莠定＋1.5 mg/L KT。[结论]为通过半夏细胞悬浮提取有效成分和生产人工种子奠定了基础。     

适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织诱导及增殖技术

用半夏叶片或叶柄作外植体,通过调节植物生长调节物质的种类、浓度及培养条件,以获得适于悬浮培养的半夏疏松愈伤组织。结果表明,添加2,4-D较NAA诱导的愈伤组织疏松,将叶片接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.5 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L或叶柄接种于MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L上诱导出的愈伤组织长势较好且疏松,诱导率分别达到100%和95.6%,愈伤组织鲜重分别为0.932 g和0.622 g。将上述愈伤组织以MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6 g/L培养基连续继代3次,便获得适于建立细胞悬浮培养体系的疏松愈伤组织,从而为半夏人工种子生产必须的同步化高质量人工种胚的培养提供可靠材料。     

山东丹参细胞悬浮培养体系及生长模型的建立

【目的】建立和了解山东丹参疏松愈伤组织和悬浮细胞生长规律。【方法】以叶片为外植体研究疏松愈伤组织诱导增重以及细胞悬浮培养体系,并对疏松愈伤组织和悬浮细胞进行生长模型的拟合。【结果】疏松愈伤组织最佳诱导和增殖培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+KT 1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6g/L+酸水解酪蛋白1g/L,细胞悬浮培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+KT 1.5mg/L+6-BA 3.0mg/L+NAA 1.0mg/L+蔗糖30g/L+酸水解酪蛋白1g/L。【结论】山东丹参疏松愈伤组织和悬浮细胞生长曲线为"S"型,Richards方程模型能够很好地描述疏松愈伤组织和悬浮细胞生长曲线变化。     

魔芋愈伤诱导的多因子正交试验

研究花魔芋(Amorphophallus albus)愈伤组织诱导的最佳激素组合培养条件。以魔芋叶柄为外植体,采用4因素3水平正交试验研究2,4-D、NAA、6-BA与KT 4种激素对魔芋愈伤组织诱导的影响。结果表明,2,4-D、NAA、6-BA与KT对魔芋叶柄外植体膨大与愈伤组织形成具有显著效应。利于外植体膨大的最优激素组合为MS+3.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+0.1 mg/L KT;利于愈伤组织积累的最优激素组合为MS+1.0 mg/L 2,4-D+3.0 mg/L NAA+0.3 mg/L 6-BA+1.0 mg/L KT。试验优化的激素组合条件下魔芋外植体膨大与愈伤诱导有较佳的表现,可用于花魔芋的培养。     

半夏再生体系的建立

【目的】优化半夏再生条件,以获得优质半夏种苗.【方法】筛选出适宜的外植体后,使用3种激素2,4-D,KT,IAA利用正交设计法设置9个处理组对半夏愈伤组织进行诱导.选取长势良好,大小均一的半夏愈伤组织接于4种培养基中进行愈伤组织增殖.选取半夏叶柄诱导出的愈伤组织将其接于5种培养基中进行愈伤组织分化,观察不同培养基对半夏愈伤组织生根和出芽的影响,最后进行炼苗与移栽.【结果】在叶柄、叶片及块茎3种外植体中,叶柄是半夏愈伤组织诱导的最佳外植体;最有利于半夏愈伤组织诱导的培养基为MS+0.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT+1.0 mg/L IAA;在暗培养条件下,将半夏愈伤组织继代于MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L KT+1.0 mg/L IAA中生长最快;MS+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA培养基最有利于半夏愈伤组织的生根和出芽.     

药用植物草麻黄细胞的悬浮培养

[目的]对草麻黄的子叶诱导出的愈伤组织,进行悬浮培养。[方法]采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导、愈伤组织继代和悬浮培养研究。[结果]MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA为诱导子叶形成愈伤组织的理想培养基;MS+1.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L6-BA是愈伤组织的适宜继代培养基;2.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+300 mg/L水解酪蛋白(CH)是愈伤组织悬浮培养的适宜培养基,愈伤组织干重增加量为0.80 g。[结论]初步选择出草麻黄愈伤组织细胞的悬浮培养条件,为麻黄细胞扩大培养及有效成分提取奠定基础。     

旱半夏组织培养技术的优化研究

以旱半夏无菌苗的叶片、叶柄和块茎为外植体,在不同温度及激素组合的条件下,进行了愈伤组织诱导、芽分化和生根的研究。结果表明:愈伤组织诱导的最适温度为25℃;MS+KT 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L对块茎的愈伤诱导效果最好,诱导率达96.7%。温度对芽分化的影响不明显;最佳的芽分化培养基为MS+KT 3.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L。MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L对单芽增殖效果明显。MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最有利于生根。     

植物激素对大蒜愈伤组织诱导及继代培养的影响

[目的]研究不同的植物生长素和细胞分裂素配比对大蒜愈伤组织的诱导和继代培养的影响。[方法]以韭菜种子胚根和鳞茎尖为外植体,在附加不同激素的培养基上诱导愈伤组织并继代培养。[结果]MS+2,4-D2.0mg/L+NAA0.5mg/L+6-BA2.0mg/L适宜胚根诱导愈伤组织,而MS+2,4-D2.0mg/L+NAA2.0mg/L+6-BA1.0mg/L适合茎尖诱导愈伤组织,而MS+2,4-D1.0mg/L+NAA2.0mg/L+6-BA0.5mg/L适合愈伤组织的继代培养。[结论]生长素和细胞分裂素合理搭配有利于大蒜愈伤组织的诱导和继代培养。     

半夏叶柄愈伤组织诱导与分化最适培养基筛选

以半夏(Pinellia ternata(Thunb.)Breit)叶柄为外植体,研究不同培养基配方对诱导脱分化、愈伤组织增殖及分化的影响。结果表明,适合半夏叶柄诱导脱分化的最佳培养基是MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA;最适愈伤组织增殖培养基是MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA;最适分化培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。     

不同激素配比对大豆子叶愈伤组织诱导的影响

[目的]研究不同激素配比对大豆子叶形成愈伤组织的影响。[方法]以高蛋白大豆东农42号子叶为供试外植体,以6-BA2.0mg/L＋NAA0.2 mg/L和2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L的激素对其进行诱导,研究不同激素对大豆子叶愈伤组织的诱导效果。[结果]以添加6-BA2.0 mg/L＋NAA0.2 mg/L培养基培养的材料诱导率为71.4%;以添加2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L培养基培养的材料诱导率为78.6%,诱导产生的愈伤组织大部分呈绿色、质密;未添加激素组诱导率为85.7%,但无生长迹象。所加激素均能诱导大豆子叶形成愈伤组织,但不同激素种类诱导愈伤组织能力有差异,以添加2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L的效果最好。[结论]不同种类的外源激素对外植体的诱导作用不同,大豆子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D2.0 mg/L＋KT1.0 mg/L。     

碳源和植物生长调节剂对辣椒花药培养效率的影响（摘要）

[目的]为进一步提高辣椒花药培养效率。[方法]采用MS培养基,以博辣娇红为试材,研究碳源种类与浓度对花药愈伤组织诱导的影响;以佳玉为试材,按L16（4^5）正交试验设计,研究植物生长调节剂种类与浓度对辣椒花药培养效率的影响。[结果]愈伤组织和胚状体诱导率各浓度处理的均值麦芽糖虽略高于蔗糖,但未达差异显著水平;麦芽糖或蔗糖作碳源,3%～6%的浓度有利于提高愈伤组织与胚状体的诱导频率,超过6%以后,愈伤组织和胚状体诱导率随糖浓度的增加而极显著下降。生长调节剂对愈伤组织诱导率的影响为2,4-D﹥ZT﹥NAA﹥KT﹥6-BA;对胚状体诱导率的影响为2,4-D﹥NAA﹥ZT﹥KT﹥6-BA;2,4-D、ZT、NAA和KT对愈伤组织与胚状体诱导率均有显著或极显著影响;生长调节剂的使用浓度,2,4-D和ZT以1.0mg/L、NAA和KT对0.5mg/L的效果最好,ZT对提高愈伤组织和胚状体诱导率的效果比KT和6-BA都好;2,4-D1.0mg/L﹢ZT1.0mg/L﹢KT0.5mg/L﹢6-BA0.5mg/L是佳玉花药愈伤组织和胚状体诱导培养适宜的生长调节剂组合。[结论]该研究为辣椒花药培养研究提供了依据。     

3个烟草品种愈伤组织诱导的比较

[目的]研究不同品种烟草在不同培养基上愈伤组织的诱导情况。[方法]以烟草HY-9-7、云烟97和K326的幼嫩叶片为材料,分别在MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.2 mg/L和MS＋NAA 2.0 mg/L＋6-BA 2.0 mg/L培养基上诱导愈伤组织,选出愈伤组织诱导率最高的烟草品种和最优培养基。[结果]MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋KT 0.2 mg/L是诱导烟草愈伤组织的理想培养基;K326在最优培养基上诱导率最高,愈伤组织生长状态最好。[结论]为烟草基因工程的研究和种质资源的创新提供理论支撑。     

不同激素组合对草麻黄愈伤组织诱导的影响

［目的］研究不同激素组合对草麻黄愈伤组织诱导的影响。［方法］以草麻黄子叶为外植体,在附加不同浓度和比例2,4-D、NAA、6-BA、KT的MS培养基中,比较不同激素组合对愈伤组织诱导的影响,并绘制出草麻黄愈伤组织的生长曲线。［结果］结果表明,最适合草麻黄愈伤组织诱导的培养基为MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L,诱导率最高为77.5%。草麻黄愈伤组织生长曲线呈S形,在第8天左右进入快速增长期,最佳继代时间在24 d左右。［结论］2,4-D与6-BA配合使用更有利于草麻黄愈伤组织的诱导。     

黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖

【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。     

红掌组织培养再生体系的建立研究

[目的]建立红掌的组织培养再生体系。[方法]以红掌幼嫩叶柄为材料,筛选红掌愈伤组织诱导、不定芽分化、生根时的最佳激素配比。[结果]红掌叶柄愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D,此时愈伤组织诱导率可达80.0%;不定芽分化的最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L KT,此时分化率可达96.7%;生根的最佳培养基为MS+1.0mg/L IBA,此时生根率可达86.7%。[结论]为红掌的快速繁殖提供了技术依据。     

安祖花愈伤组织诱导和植株再生的研究

为建立适合安祖花遗传转化的受体体系,分别选取安祖花组培苗带叶柄的叶片和带叶柄的茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导和植株再生试验。结果表明:以带叶柄的茎段为外植体对愈伤诱导效果好于带叶柄的叶片。使用带叶柄茎段为外植体,以1/2MS BA 1.0 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L为基本培养基进行愈伤组织诱导和继代培养,愈伤组织诱导率最高为89.65%;使用3%蔗糖作为碳源的1/2MS添加0.1 mg/L KT能显著提高诱导率;添加NAA 0.5 mg/L或2,4-D 0.5 mg/L有助于生根。