定时输精对后备母猪繁殖性能的影响

为了研究定时输精对后备母猪繁殖性能的影响,将后备母猪40头分成两组,每组20头。所有后备母猪连续饲喂四烯雌酮(15mg·d~(-1))14d,第15天开始查情。试验组后备母猪肌注血清促性腺素(PMSG)和促性腺激素释放激素(GnRH),肌注GnRH24h后开始2次的定时输精;对照组后备母猪停止饲喂四烯雌酮后有发情就配种。结果表明,试验组的后备母猪的妊娠率和分娩率低于对照组(P0.05),而窝产仔数低于对照组(P0.05),试验组后备母猪有隐性发情现象。通过饲喂四烯雌酮,伴随肌注PMSG和GnRH可减少隐形发情后备母猪的漏配率,提高后备母猪的妊娠率和分娩数,但不能提高后备母猪的产仔率。     

定时输精对断奶母猪繁殖性能的影响

为了研究定时输精对断奶母猪繁殖性能的影响,将80头断奶母猪分成两组,每组40头,断奶第2天开始查情。试验组断奶母猪断奶24 h后肌注促性腺激素(PMSG),再过72 h肌注促性腺激素释放激素(Gn RH),肌注Gn RH 24 h进行输精1次,过24 h再输精1次;对照组断奶母猪发情就开始输精,过24 h再输精1次(如还发情,第2次输精过24 h后再输精1次);精液剂量都为80 m L(2×10~9个精子细胞)。结果表明,试验组的断奶母猪的发情率、妊娠率、分娩率均高于对照组,试验组断奶母猪的窝产仔数、窝产活仔数与对照组无差异;试验组断奶母猪的发情静立时间与对照组无差异;试验组断奶母猪有3头无发情迹象,但是经过定时输精后有1头成功受精并分娩,产仔数为11头。通过肌注PMSG+Gn RH可提高断奶母猪的发情数、妊娠率和分娩率,但不能提高断奶母猪的窝产仔数、窝产活仔数,减少对隐性发情断奶母猪的漏配率,不影响断奶母猪的静立反应时间。     

不同输精持续时间对母猪受胎率及产仔数的影响

为探讨不同输精持续时间对长白后备母猪受胎率和产仔数的影响,选择大白后备母猪75头,根据发情时间的不同分为A组、B组、C组、D组和E组,每组15头。每组母猪的输精持续时间分别为2³、33、3⁴、44、4⁵、55、5⁶、66、6⁷ min,每头母猪输精3次。配种后统一管理,统计每组母猪的受胎率和产仔数。结果显示,输精持续时间在47 min,每头母猪输精3次。配种后统一管理,统计每组母猪的受胎率和产仔数。结果显示,输精持续时间在4⁵ min以上(含45 min以上(含4⁵ min),长白后备母猪C组、D组和E组3组之间的受胎率和产仔数均差异不明显,并且C组、D组、E组之间的受胎率和产仔数明显高于输精持续时间低于45 min),长白后备母猪C组、D组和E组3组之间的受胎率和产仔数均差异不明显,并且C组、D组、E组之间的受胎率和产仔数明显高于输精持续时间低于4⁵ min的A组和B组。试验表明,输精持续时间控制在45 min的A组和B组。试验表明,输精持续时间控制在4⁵ min时,后备母猪能够获得较高的受胎率和产仔率,为最佳的输精持续时间。     

四烯雌酮对初产母猪分娩率、产仔数和仔猪初生重的影响

为研究四烯雌酮对初产母猪分娩率、产仔数和仔猪初生重的影响。选取已配种的后备母猪8头作为对照组(母猪不饲喂四烯雌酮);另选取已配种的后备母猪13头作为试验组(饲喂四烯雌酮15 mg·d-1·头-1,连续饲喂14 d)。结果表明,对照组和试验组母猪的分娩率分别为87.5%和76.92%,产仔数分别为7.83头和9.20头,仔猪体重分别为1.20和1.06 kg。对照组母猪产仔数和仔猪初生重与试验组相比,差异均不显著(P0.05)。但对照组母猪分娩率和仔猪初生重均高于试验组,而产仔数低于试验组。说明四烯雌酮能提高母猪的产仔数,但不能提高母猪的分娩率及仔猪的初生重。     

四烯雌酮对后备母猪同期发情的影响

为研究四烯雌酮对后备母猪同期发情的影响,将120头后备母猪分成3组,每组40头,后备母猪日龄≥210 d。第1组在定位栏饲养,第2组在大栏饲养,第3组日龄较第1、2组大30 d以上,也在定位栏饲养。每头后备母猪饲喂四烯雌酮15 mg·d-1,连续饲喂14 d。结果显示,第1、2、3组后备母猪的发情率分别为60.0%、92.5%、75.0%,发情高峰期是在停喂四烯雌酮后第7~9天,后备母猪的有效饲养面积和日龄对后备母猪的发情率影响显著。     

日粮中添加不同比例棉秆对后备种公羊生产性能、血清激素和睾丸组织的影响

【目的】研究日粮中添加不同比例棉秆对后备种公羊生产性能、血清激素和睾丸组织的影响。【方法】采用单因素完全随机试验设计,将体重相近的60只小尾寒羊后备种公羊随机分为6组,每组10只。设计2个对照组,即饲粮中对照1组(CK₁组)不含棉源饲料,对照2组(CK₂组)含棉籽粕、不含棉秆。在CK₂组饲粮基础上,试验组饲粮分别添加20%(A组)、30%(B组)、40%(C组)和50%(D组)棉秆。全期70 d,其中预试期10 d,正试期60 d。【结果】CK₁组与CK₂组干物质采食量、日增重和料肉比差异不显著(P>0.05);D组干物质采食量极显著高于CK₂组17.80%(P<0.01),极显著高于A组和C组18.42%(P<0.01)和16.58%(P<0.01),显著高于B组4.65%(P<0.05);A、B、C、D组与CK₂组日增重和料肉比差异也不显著(P>0.05);对照组与及试验组血清睾酮、血清胰岛素和棉酚含量差异均不显著(P>0.05);对照组及试验组绵羊睾丸生长发育正常,未出现病理性伤害。【结论】日粮中添加20%~50%棉秆不影响后备种公羊生产性能、血清中相关激素和睾丸生长发育,添加20%棉秆时生长性能指标效果最好。     

花椒窄吉丁对寄主果实挥发物的触角电位及行为反应

使用触角电位仪测定花椒窄吉丁两性成虫对10种寄主果实挥发物的触角电位（EAG）反应，使用Y型嗅觉计测定其对8种强烈EAG反应的挥发物的行为反应。结果表明:1）寄主果实的10种挥发物均可引起花椒窄吉丁不同程度的EAG反应，100 μg·μL^-1时胡椒酮和正葵醛分别引起雌虫和雄虫最大的EAG反应绝对值，d-柠檬烯、月桂烯在100 μg·μL^-1时引起雄虫最大的EAG反应绝对值；然而在10 μg·μL^-1时引起雌虫的EAG反应绝对值最大。10种挥发物中，花椒窄吉丁对（±）-α-乙酸松油酯和罗勒烯的EAG反应相对较弱。2）配对T检验发现仅反式-2-己烯醛对两性成虫的EAG反应存在极显著的性别差异(P＜0.01)，而所测的其他挥发物对两性成虫的EAG反应不存在性别差异(P＞0.05)。3）1~100 μg·μL^-1的芳樟醇对雄虫驱避显著，10~100 μg·μL^-1的正葵醛对两性成虫均驱避显著，1~10 μg·μL^-1的胡椒酮、10~100 μg·μL^-1的γ-松油烯对雌虫驱避显著(P＜0.05)，10~100 μg·μL^-1的月桂烯、0.1~1 μg·μL^-1的d-柠檬烯对雄虫引诱显著。雄虫对1~100 μg·μL^-1的反式-2-己烯醛驱避反应显著；雌虫仅对10 μg·μL^-1的反式-2-己烯醛驱避反应显著，反式-2-己烯-1-醇在0.1~1 μg·μL^-1时对雌虫驱避显著；但在10~100 μg·μL^-1时对雌虫引诱显著。说明一定浓度的月桂烯、d-柠檬烯、反式-2-己烯-1-醇对花椒窄吉丁具有引诱作用，一定浓度的芳樟醇、正葵醛、胡椒酮、γ-松油烯、反式-2-己烯醛、反式-2-己烯-1-醇对花椒窄吉丁具有驱避作用，可作为引诱剂或驱虫剂成分进一步开发利用。     

四烯雌酮对乏情母猪同期发情的影响

为研究四烯雌酮对乏情母猪同期发情的影响,将乏情母猪60头分为两组,每组30头,均在定位栏饲养。第1组为乏情后备母猪,日龄为210~270 d;第2组为超过一个情期没有发情的经产母猪。每头母猪饲喂四烯雌酮15 mg·d-1,连续饲喂14 d。结果显示,第1组、第2组母猪的发情率分别为56.7%、83.3%,发情高峰期分别在停喂四烯雌酮后第6~8天、第5~7天。结果表明,四烯雌酮抑制母猪的发情可能受到了母猪日龄大小的影响。     

糖蜜对人工培养银叶真藓生长发育的影响

为促进藓结皮人工扩繁,以世界广布种银叶真藓(Bryum argenteum)为对象,通过室内试验研究了不同浓度(3、6、10、20g·L^-1和30g·L^-1)糖蜜溶液对银叶真藓生长发育的影响。结果表明,添加糖蜜溶液会降低银叶真藓萌发数量,其中添加10g·L^-1和20g·L^-1糖蜜溶液时银叶真藓萌发数量与对照组差异显著,分别为对照组的38%和29%。添加糖蜜溶液会影响银叶真藓生长速率,其中添加3g·L^-1糖蜜溶液可显著增加银叶真藓生长速率,盖度每周可增加11.56%,密度每周可增加6.67株·cm^-2,而添加30g·L^-1糖蜜溶液时银叶真藓生长速率显著低于对照组。添加10、20g·L^-1和30g·L^-1糖蜜溶液能在培养末期维持银叶真藓的盖度和密度,而添加3g·L^-1和6g·L^-1糖蜜溶液在培养末期时密度会下降,降幅分别为最大密度的19%和15%。培养初期使用3g·L^-1糖蜜溶液而培养末期增大浓度到10g·L^-1,可显著增加银叶真藓的盖度、密度,在培养末期可维持72.83%的盖度和41.25株·cm^-2的密度。糖蜜溶液作为葡萄糖的替代物能促进银叶真藓的生长发育,在大面积培养人工藓结皮时可推广使用。     

硒含量对妊娠期糖尿病孕妇胎儿生长发育的影响

目的 探讨孕妇体内硒元素水平对妊娠期糖尿病孕妇胎儿生长发育的影响。方法 选取2020-01—2021-12月滁州市第一人民医院收治的51例妊娠期糖尿病患者为观察组,同期到院产检的51例正常妊娠期女性为对照组,观察2组孕妇不同阶段硒元素水平及不良妊娠结局、新生儿不良结局。结果 观察组孕早期、孕中期、孕晚期硒元素水平[(6.11±0.28)μmol·L^-1、(5.41±0.25)μmol·L^-1、(5.01±0.19)μmol·L^-1]明显低于同期对照组[(6.98±0.32)μmol·L^-1、(6.43±0.44)μmol·L^-1、(6.32±0.26)μmol·L^-1](P均<0.05);妊娠不良结局发生率(13.72%)明显高于对照组(1.96%)(P<0.05);新生儿不良结局发生率(15.69%)明显高于对照组(3.92%)(P<0.05)。结论 妊娠期糖尿病疾病孕妇血清硒元素水平降低,不良妊娠结局、新生儿不良结局发生率升高,可能与...     

厚朴凋落叶分解对湖北贝母生长与生理特性的影响

为探究厚朴凋落叶分解的化感效应,采用盆栽试验,以不添加凋落叶为对照组(CK),设置4个凋落叶添加水平,研究厚朴凋落叶在土壤中分解对湖北贝母生长和生理特性的影响。结果表明,与对照组相比,苗期,湖北贝母的株高、叶长、叶宽、叶面积、鳞茎长、鳞茎宽、鳞茎鲜重和叶绿素含量表现为低剂量处理无显著差异(P>0.05),高剂量处理显著抑制(P<0.05);花期和始枯期,湖北贝母的株高、叶长、叶宽、叶面积和叶绿素含量则呈明显的“低促高抑”规律。而湖北贝母的抗氧化酶活性、丙二醛含量和超氧阴离子自由基含量在不同发育时期变化规律不同。随着厚朴凋落叶剂量的增加,综合效应值先增大后减小,具体排序为:T2(10.50 g·kg^-1) (1.16)>T1 (5.25 g·kg^-1) (0.44)>T3 (15.75 g·kg^-1) (0.02)>T4(21.00 g·kg^-1) (-0.99)。主成分分析表明,苗期,叶绿素和丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性是影响湖北贝母生长的主要指标;花期,叶长、叶宽、叶面积和株高等地上性状可作为表征湖北贝母生长的主要指标;而始枯期,超氧阴离子自由基含量、过氧化物酶活性则成为影响湖北贝母生长的主要指标,鳞茎长、鳞茎宽、鳞茎鲜重等地下性状可作为湖北贝母生长的主要研究指标。综上所述,低剂量厚朴凋落叶处理显著促进湖北贝母的生长,而高剂量的厚朴凋落叶则显著抑制湖北贝母的生长,且当厚朴凋落叶剂量为10.50 g·kg^-1时,湖北贝母生长状况最佳。     

镉胁迫下黑曲霉TL-F2的促生特征及其对黑麦草种子萌发、幼苗生长和镉含量的影响

以黑曲霉(Aspergillus niger)TL-F2为供试菌株,黑麦草为供试植物,研究Cd胁迫下A. niger TL-F2的促生特性,以及对黑麦草种子萌发、幼苗生长和Cd含量的影响。结果表明:与不加Cd的对照组相比,低浓度Cd(5 mg·L^-1)胁迫下,A. niger TL-F2产吲哚乙酸(IAA)和溶磷的能力无显著变化,但产铁载体的能力显著(P<0.05)降低48.18%;中(20 mg·L^-1)、高(50 mg·L^-1)浓度Cd胁迫下,A. niger TL-F2产IAA的能力分别显著(P<0.05)降低55.76%和65.69%,溶磷量分别显著(P<0.05)降低50.07%和78.19%,产铁载体的能力分别显著(P<0.05)降低69.71%和80.08%。接种高浓度(1×10⁸ mL^-1)A. niger TL-F2有助于促进Cd胁迫下黑麦草种子的萌发和生长,高浓度Cd胁迫下,黑麦草地上部Cd含量较不接菌的显著(P<0.05)增加,增幅为17.95%;接种低浓度(1×10⁶ mL^-1)A. niger TL-F2对黑麦草种子萌发、Cd含量无明显促进作用。综合来看,接种适当量的A. niger TL-F2有助于促进Cd胁迫下黑麦草种子的萌发和生长,增加黑麦草地上部Cd含量,可作为黑麦草修复Cd污染水体和土壤的强化措施。     

糖浓度变化对牛肺泡巨噬细胞促炎细胞因子释放的影响

探讨葡萄糖浓度变化能否上调牛肺泡巨噬细胞(BAMs)RAGE-TLR4-MyD88-NF-κB信号通路,引起BAMs释放促炎细胞因子IL-1β、IL-6及TNF-α.Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别用5.5、15.5、25.5 mmol·L-1葡萄糖以及葡萄糖(5.5 mmol·L-1)+甘露醇(20 mmol·L-1)作用BAM...     

纳米银胁迫下黄曲霉(Aspergillus flavus)TL-F3的氧化应激响应及其吸附能力

为研究纳米银(AgNPs)胁迫下黄曲霉(Aspergillus flavus TL-F3)的氧化应激变化及其对AgNPs的吸附能力,通过序批式试验,探究不同浓度AgNPs对A.flavus TL-F3生长、细胞形态、胞外聚合物(EPS)分泌、抗氧化系统和吸附能力的影响。研究发现,AgNPs可抑制A.flavus TL-F3生长,且抑制效果与浓度正相关。AgNPs可致A.flavus TL-F3菌丝发育不完全,表面破损。与不加AgNPs的对照组相比,当AgNPs的质量浓度为80 mg·L^-1时,胞外聚合物含量升至237.55 mg·g^-1,丙二醛含量、超氧化物歧化酶活性、还原性谷胱甘肽含量均显著(P<0.05)提高,而Na⁺K⁺-ATP酶活性显著(P<0.05)降低了50.37%。A.flavus TL-F3对AgNPs有一定的吸附能力,当AgNPs的质量浓度为1、30、50、80 mg·L^-1时,A.flavus TL-F3对AgNPs的吸附率可达68.54%以上。...     

姜黄素通过SIRT1/FOXO1通路缓解玉米赤霉烯酮诱导的猪肾上皮细胞氧化损伤

【目的】探究姜黄素(Cur)对玉米赤霉烯酮(ZEA)诱导猪肾上皮细胞(PK-15)氧化损伤的保护作用，并基于SIRT1/FOXO1信号通路阐明其作用机制，为姜黄素的兽医临床应用提供依据。【方法】试验分为5组：对照组、ZEA组(36.55μg·mL^-1 ZEA)、Cur 6.25组(36.55μg·mL^-1 ZEA+6.25μmol·L^-1 Cur)、Cur 12.5组(36.55μg·mL^-1 ZEA+12.5μmol·L^-1 Cur)、Cur 25组(36.55μg·mL^-1 ZEA+25μmol·L^-1 Cur)；通过MTT法测定ZEA的半数抑制浓度和Cur对PK-15细胞的最大安全浓度；使用倒置显微镜观察PK-15细胞的形态变化；采用试剂盒检测细胞内活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)以及丙二醛(MDA)的水平；qRT-PCR检测细胞SIRT1、FOXO1、CAT、Mn-SOD的mRNA水平；West...     

姜黄素通过Nrf2信号通路对H2O2诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化应激的缓解

【目的】验证姜黄素是否能够通过转录因子E2相关因子2（Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）信号通路减轻H₂O₂诱导的奶牛乳腺上皮细胞的氧化应激,为防治围产期奶牛代谢紊乱导致的氧化损伤提供理论依据。【方法】培养奶牛乳腺上皮细胞（MAC-T）,用500 μmol·L^-1H₂O₂处理MAC-T细胞24 h后加入不同浓度的姜黄素（0、5、15或30 μmol·L^-1）处理3 h;MAC-T细胞转染Nrf2 siRNA 48 h后,用500 μmol·L ^-1 H₂O₂处理奶牛乳腺上皮细胞系MAC-T细胞24 h后加入不同浓度的姜黄素（0、5、15或30 μmol·L^-1）处理3 h。采用实时定量PCR（Quantitative real-time PCR,qPCR）、蛋白免疫印迹（Western blot,WB）和试剂盒等方法,检测Nrf2的蛋白表达量及下游靶基因NAD（P）H醌氧化还原酶1（NAD(P)H quinone oxidoreductase 1,NQO1）和血红素加氧酶1（Heme oxygenase 1,HO-1）的mRNA及蛋白表达量和超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroxidase,GSH-Px）、过氧化氢酶（Catalase,CAT）和丙二醛（Malondialdehyde,MDA）等氧化应激相关指标的活性及含量。【结果】（1）H₂O₂处理组MAC-T细胞中MDA含量显著高于对照组（P<0.01）,而CAT、SOD和GSH-Px的活性显著低于对照组（P<0.01）。15 μmol·L^-1姜黄素+H₂O₂共同处理组和30 μmol·L^-1姜黄素+H₂O₂共同处理组MAC-T细胞中MDA的含量显著低于H₂O₂处理组（P<0.01）,而CAT、SOD和GSH-Px的活性显著高于H₂O₂处理组（P<0.05,P<0.01）。（2）H₂O₂处理组总Nrf2蛋白水平显著低于对照组（P<0.01）,H₂O₂处理组Nrf2下游基因HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达量也显著低于对照组（P<0.01）。姜黄素处理组总Nrf2蛋白表达水平显著高于对照组（P<0.01）,姜黄素处理组HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达量也显著高于对照组（P<0.01）。姜黄素+H₂O₂处理组总Nrf2蛋白表达水平显著高于H₂O₂处理组（P<0.01）,姜黄素+H₂O₂处理组HO-1和NQO1的mRNA及蛋白表达量也显著高于H₂O₂处理组（P<0.01）。（3）si-Nrf2组与对照组相比,Nrf2的mRNA表达水平显著降低（P<0.01）。si-Control+H₂O₂+姜黄素组与si-Control+H₂O₂组相比,MDA的含量显著降低（P<0.01）,而CAT、SOD和GSH-Px的活性显著升高（P<0.01）。si-Nrf2+H₂O₂+姜黄素处理组与si-Control+H₂O₂+姜黄素组相比,MDA的含量显著升高（P<0.01）,而CAT、SOD和GSH-Px活性显著降低（P<0.01）。【结论】姜黄素可以通过增加Nrf2的表达,诱导下游抗氧化分子的转录从而缓解H₂O₂诱导奶牛乳腺上皮细胞的氧化应激。本研究为防治围产期奶牛代谢紊乱导致的奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤提供理论依据。     

野生葡萄枝条多酚粗提物抑菌活性研究

以连山葡萄、毛葡萄和山葡萄冬剪枝条为研究对象,以栽培品种赤霞珠为对照,采用牛津杯法测定其多酚粗提取物抑菌能力和连续稀释法测定其最小抑菌浓度。对4种细菌的抑制作用试验结果表明,3种野生葡萄枝条多酚粗提取物对枯草芽胞杆菌都有较好的抑制效果,其中连山葡萄最小抑菌浓度(MIC)216 mg·L^-1为最小。山葡萄对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、破伤风杆菌的抑菌能力比其他野生葡萄强,抑菌平均值(MIC)分别为934、584、1 210 mg·L^-1。对2种真菌试验表明,山葡萄枝条多酚粗提取物对黄曲霉和青霉的抑制能力均为最强,对这2种真菌的最小抑菌浓度分别为383 mg·L^-1和766 mg·L^-1; 4种葡萄枝条多酚粗提取物对黄曲霉抑制效果都较好。表明中国野生葡萄枝条多酚粗提取物有较强的抑菌能力,尤其以山葡萄枝条多酚抑菌能力最好。     

基于响应面法的粘质沙雷氏菌BRC-CXG2发酵培养基优化

为了将粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）应用在松墨天牛（Monochamus alternatus）防治上,对粘质沙雷氏菌的培养基配方进行了优化。通过单因素试验筛选粘质沙雷氏菌发酵培养基的碳源、氮源和无机盐,利用Plackett-Burman试验设计确定3个主要影响因素,通过最陡爬坡试验,结合Box-Behnken Design试验设计及响应面分析法优化培养基组成成分,获得培养基最佳配方与发酵条件：葡萄糖23.27 g·L^-1、蚕蛹粉22.37 g·L^-1、酵母粉10 g·L^-1、硫酸镁2 g·L^-1、磷酸氢二钠3 g·L^-1,氯化钠2 g·L^-1;在28 ℃、150 r·min^-1条件下发酵36 h,装液量体积分数为50 mL/250 mL,接种量4.73 %,pH 7.1~7.3。最后,根据最优培养条件验证发现优化后培养基中生长的菌落数为6.0×10⁹ cfu·mL^-1,是初始培养基的9.42倍,与模型预测值相符。研究结果为粘质沙雷氏菌的发酵生产提供了理论基础,为松材线虫病（pine wilt disease）的防治提供了新的途径。     

硒对S. aureus诱导的奶牛乳腺上皮细胞Nod2/MAPK/mTORs信号通路关键蛋白表达的影响

【目的】硒（Se）能否通过Nod2/MAPK/mTOR途径调控金黄色葡萄球菌诱导的奶牛乳腺上皮细胞炎性损伤,有待于进一步研究。因此本研究将探究硒对金黄色葡萄球菌（S. aureus）感染的奶牛乳腺上皮细胞（bMECs）Nod2/MAPK/mTORs信号通路中关键蛋白表达的影响,从而为阐明硒的免疫调控机制提供理论依据。【方法】首先将bMECs以10 ⁶细胞/孔接种于6孔板中,当细胞超过80%的汇合度时,用含2、4和8 μmol·L ^-1浓度硒的培养基替换原来的培养基,继续孵育12 h,然后用PBS洗涤每孔3次,将S. aureus按MOI=1:1的比例加入6孔板中,继续培养0.5 h,然后收集bMECs细胞进行相关蛋白的检测。本试验共分3大组,即对照（Con）组（bMECs）、模型（Mod）组（bMECs+S. aureus）和试验组。其中试验组又分3个亚剂量组,即Low组（bMECs+2 μmol·L ^-1 Se+S. aureus）、Mid组（bMECs+4 μmol·L ^-1 Se+S. aureus）和Hig组（bMECs+8 μmol·L ^-1 Se+S. aureus）,每组设3个重复。利用BCA蛋白测定试剂盒对收集的bMECs细胞进行总蛋白提取。应用Western blotting技术检测bMECs中Nod2和RIP2蛋白表达水平及JNK,AKT和mTOR蛋白磷酸化水平。将蛋白样品加到10%的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中,上样量为20 μg/孔,之后将蛋白转移到聚偏氟乙烯（PVDF）膜上。将PVDF膜用5 mL 5%脱脂乳阻断2 h,脱脂乳脱脂后用TBST清洗后,分别用5 mL的 Nod2、RIP2、JNK、AKT、mTOR和β-actin的一抗孵育过夜,回收一抗。之后在PVDF膜中分别加入5 mL上述蛋白的二抗,室温孵育2 h,回收二抗。PVDF用TBST洗涤5次,最后在暗室条件下进行化学显影。 【结果】S. aureus能显著提高bMECs中Nod2和RIP2蛋白表达水平及JNK,AKT和mTOR蛋白磷酸化水平（P<0.01）。S. aureus感染0.5 h后,Nod2蛋白水平显著升高（P<0.01）。在培养基里添加2 μmol·L ^-1 的硒可极显著抑制Nod2蛋白的表达（P<0.01）,在培养基里添加8 μmol·L ^-1 的硒可显著抑制Nod2的表达（P<0.05）; S . aureus感染0.5 h后,RIP2蛋白水平显著升高（P<0.05）,而在培养基里添加8 μmol·L ^-1 硒可显著抑制RIP2蛋白的表达（P<0.05）;S. aureus感染0.5 h后,与对照组相比,模型组JNK蛋白磷酸化水平显著升高（P<0.01）。在培养基里添加4 μmol·L ^-1 的硒能显著抑制JNK蛋白的磷酸化水平（P<0.05）,在培养基里添加8 μmol·L ^-1 的硒能显著抑制JNK蛋白的磷酸化水平（P<0.01）; S. aureus感染0.5 h后,与对照组相比,模型组AKT蛋白磷酸化水平显著升高（P<0.01）。在培养基里添加4 μmol·L ^-1 硒可极显著抑制JNK蛋白的磷酸化水平（P<0.01）,在培养基里添加8 μmol·L ^-1 硒可显著抑制AKT蛋白的磷酸化水平（P<0.05）;S. aureus感染0.5 h后,模型组mTOR蛋白磷酸化水平显著升高（P<0.01）。在培养基里分别添加4 μmol·L ^-1 和8 μmol·L ^-1 硒均能显著抑制mTOR蛋白磷酸化水平（P<0.05）。 【结论】硒可通过抑制bMECs Nod2/MAPK/mTORs信号通路中关键因子蛋白的表达而减轻S. aureus诱导的bMECs炎症反应。     

ALA对设施灵武长枣光合作用与坐果的影响

采用0.5、1.0 mg·L^1-与2.0 mg·L^-1的5-氨基乙酰丙酸(ALA)喷施处理设施栽培的灵武长枣,研究ALA对设施灵武长枣光合作用与坐果的影响。结果表明: 1.0 mg·L^-1ALA处理下其净光合速率比对照增高了1.07 μmol·m^-2·s^-1; 2.0 mg·L^-1ALA处理下叶绿素含量SPAD比对照增加了4.6,果实含糖量提高了2.575%; 对设施枣的水分利用效率、坐果率以及产量的影响不显著。可见,在设施栽培条件下,喷施外源ALA有利于提高灵武长枣光合作用、叶绿素含量以及果实含糖量。